文摘
背景遗传形式的肺动脉高血压(多环芳烃)和肺静脉阻塞疾病/肺毛细管haemangiomatosis (PVOD / PCH)偏离了肺组织病理学病变,临床和para-clinical表示,他们负责任的基因,和传播方式。自识别BMPR2基因在家庭中受到多环芳烃的影响,在几个其他基因突变被发现两种形式。这些新基因的变异格局还没有广为人知。
方法我们建立了新一代sequencing-based目标基因测序面板允许已知PAH基因和PVOD / PCH同时分析。基因分析是263年前瞻性地进行多环芳烃和PVOD / PCH病人(成人和儿科病例)。
结果致病性突变被发现在19.5%的零星的PAH患者(n = 180), 54.5%的家庭PAH患者和13.3%的PVOD / PCH病人。BMPR2是最常见的突变基因,紧随其后的是吗TBX4在儿科和成人的多环芳烃。BMP9突变被发现在1.2%的成年PAH的病例。EIF2AK4biallelic突变被限制PVOD / PCH。删除突变和预测功能丧失变体也确定了BMP10在两个严重影响零星PAH女性患者。
结论我们的研究结果证实,突变基因中发现BMPR2在遗传PAH,强调的作用TBX4和BMP9,指定BMP10作为一种新的PAH基因。
文摘
基因小组测序张专辑肺动脉高压的遗传结构在成人和儿科病例,强调的重要性BMPR2,EIF2AK4,BMP9和TBX4突变,并建议BMP10作为一种新型的基因疾病http://ow.ly/Oxes30mXnrI
介绍
肺动脉高压(PAH)是一种罕见的和严重的疾病的小肺动脉的特点是一个进步的肺血管阻力增加导致右心室衰竭最终死亡没有治疗或移植。诊断为特发性肺动脉高压(IPAH)当没有已知的危险因素或疾病相关认证(1]。除了特发性形式,遗传疾病的形式代表∼30%的PAH病例(遗传多环芳烃(HPAH)),这其中包括家族形式(家族多环芳烃(FPAH)),有或没有发现突变,带有一种突变和零星的形式(1]。HPAH是一种遗传异质性的疾病传播不完全外显率的常染色体显性遗传疾病。主要参与HPAH基因的突变BMPR2(骨形态形成蛋白受体2型),一个基因编码一个BMP 2型受体的信号通路(2]。BMPR2突变被发现在∼15% > 80%的FPAH和零星的多环芳烃的3,4]。BMPR2突变携带者将开发这种疾病在男性和∼∼14%的女性的42%,尽管这个比例差别很大从家庭5]。基因突变在其他相同的路径,ACVRL1(激活素受体1型),在极少数情况下英格(endoglin),可能导致多环芳烃与遗传性出血性毛细血管扩张(HHT) [6,7]。突变的SMAD9、编码转录因子Smad8 BMP信号的一个重要下游中介,在BMP9(别名GDF2(2)的生长和分化因子),编码的配体ACVRL1在多环芳烃(均有描述8,9]。在其他基因突变,而不是与BMP信号通路,也被确认。突变KCNK3(钾通道二端口域亚K成员3;别名TASK1(TWIK-related acid-sensitive K+通道1)),编码一个电压特异性钾通道,被发现在一些家庭与多环芳烃和识别的功能后果错义突变在体外(10]。一个纯合子KCNK3功能丧失(LOF)变体随后被描述在儿科的情况严重的多环芳烃在血缘家庭(11]。只有三个突变CAV1基因编码caveolin-1已确定到目前为止:一分之一大家庭与多个PAH的情况下,另一个是一个新创突变在一个年轻的孩子,第三与先天性普遍脂肪代谢障碍(12,13]。
TBX4(T-box 4)突变已经承认在多环芳烃的来源,通过重叠的染色体缺失包括TBX4儿童和诱导PAH,连同骨骼异常,这促使研究人员寻找突变TBX4儿科PAH的基因在其他情况下(14]。TBX4杂合的灭活突变负责小髌骨综合征(也称为coxopodopatellar综合症),将髌骨骨异常,骨盆,脚和股骨可变度。这是以前报道,病人携带的比例TBX4突变是在儿科病例和高于成人,表明一个特定基因的突变的影响在孩子15,16]。
肺部静脉阻塞疾病(PVOD)和肺毛细血管haemangiomatosis (PCH)都是特点是弥漫性改造的小静脉和隔静脉内膜的纤维化与片状毛细管核扩散和不同程度的动脉病变。Biallelic突变的EIF2AK4(真核翻译起始因子2α激酶4)已被证明负责PVOD和PCH的遗传形式传播作为一个隐性疾病(17,18]。遗传形式的PVOD和PCH(进一步将这里称为PVOD)有相同的临床表现与预后不良,并视为同一实体即使组织学肺部病变可能不同(主要是通过毛细管扩散的重要性)。
本研究的目的是描述突变可以在一系列前瞻性收集的零星的患者或者FPAH PVOD,并推断出各自的地方每个已知的基因在成人和儿科负责形式的肺动脉高压。我们报告一个大的基因型和表现型特征一系列PAH患者或PVOD探索通过基因测序面板允许检测单核苷酸变异(SNVs)和拷贝数变异基因拷贝数异变。
患者和方法
病人
这项研究包括263例后在法国肺动脉高压研究中心,其中包括法国转诊中心肺动脉高压(医院Bicetre,大学,因为-比塞特尔勒,法国)和相关专家中心。所有病例的临床诊断零星或FPAH药物toxin-induced PAH,或零星PVOD专家中心建立。pre-capillary肺动脉高压的诊断是由血液动力学的测量在所有患者右心catheterisation包括在这项研究中,根据先前描述的协议(19]。散在病例的PAH患者进一步称为IPAH临床后,生物和遗传调查排除所有已知的原因(20.]。例视为FPAH当至少报告了两例家庭扩展到三度的亲戚。病人诊断为相关PAH医院调查后(特别是结缔组织疾病和艾滋病病毒感染)并不包括在内。
诊断年龄< 18年定义儿科病例。
证实的诊断或高度可能PVOD成立根据先前描述的标准(17,21),由于重叠的包容,几个PVOD患者包括在以前的出版物(22]。本研究所有PVOD病人散在病例。
临床特征在多环芳烃诊断存储在注册中心的法国肺动脉高压的包括在内。这与法国生物伦理法律注册成立于协议(委员会国家de l 'Informatique et des自由)和病人给他们的同意被包括23]。超过90%的患者包括欧洲血统的白人。所有患者纳入本研究进行遗传咨询和签署书面知情同意。
所有情况下都包含在这个研究是前瞻性收集事件指数从2014年到2017年例肺动脉高压和DNA测序分析诊断的时期内包容,除了八之前消极的患者BMPR2和ACVRL1这被称为新创分析基因的面板。
捕捉设计
我们设计了一个自定义面板通过针对所有外显子基因,包括50个基点的侧翼intronic序列和1 kb地区每个感兴趣的基因的上游和下游。这个小组包括九个基因分析的分子诊断肺动脉高压(BMPR2,TBX4,EIF2AK4,CAV1,KCNK3,SMAD9,ACVRL1,英格和BMP9)。的BMP10基因,BMP9paralogue,也包括在捕捉设计。这个下一代测序(上天)面板还包括额外的基因相关肺动脉高压和其他遗传性血管疾病(遗传性出血性毛细血管扩张症、毛细管和动静脉畸形)与临床诊断和研究的目标,并占总额的79%目标序列。
目标捕获测序方法
图书馆是准备使用1根据KAPAμg基因组DNA样品制备协议(KAPA生物系统公司,马威尔明顿,美国)。适当的质量控制后,图书馆是汇集(12样品池)和捕获使用SeqCap EZ选择库(美国罗氏/罗氏,麦迪逊,WI)后,制造商的协议。两个池的捕获库(24个样本)测序产生2×150个基点paired-end读取使用MiSeq系统(Illumina公司、圣地亚哥、钙、美国)。
数据分析
质量控制,加工和检测变体被GenoDiag作为服务条款执行(法国巴黎)。短暂,FASTQ序列文件映射到人类参考基因组(hg19) BWA版本7.12 (http://bio-bwa.sourceforge.net)和转换为与SAMtools BAM文件版本1.1 (www.htslib.org)。SNV和插入/删除(indel)调用执行GATK版本3.5 (https://software.broadinstitute.org/gatk)。基因拷贝数异变在检测到GenoDiag专有的脚本。检测是基于每个外显子的报道。应用正常化,从而消除偏见报道根据样本之间的差异。正常化覆盖用于计算z分数。两个额外的参数计算,即。覆盖色散和覆盖率,测量测序质量和删除或重复的意义。这三个值是用来过滤假阳性结果和设置事件的信心水平。每个基地都必须由至少40读取验证。这种方法验证样本窝藏SNVs 23日的主要基因或基因拷贝数异变在测试(BMPR2,EIF2AK4和ACVRL1)。
错义的假定的功能影响变异进行评估在网上与筛选、PolyPhen-2结合注释依赖损耗(CADD) phr分数和等位基因频率在基因组数据库gnomAD聚合(24- - - - - -26]。所有数据库和软件查询通过特2.7.1版(www.interactive-biosoftware.com/alamut-visual)除了CADD phr得分,得到变异效应预测工具的运用网站(http://grch37.ensembl.org/Homo_sapiens/Tools/VEP?db=core)。每个变体的分类根据美国大学医学遗传学和基因组学(ACMG)标准(27]。任何潜在的致病变种被Sanger测序证实为点突变和多路复用ligation-dependent探测器放大(MLPA)时可用(MRC-Holland,阿姆斯特丹,荷兰)或定量PCR (qPCR)分析大重组。
统计分析
数据平均值与标准偏差。由于数据不服从正态分布,比较使用非参数Mann-Whitney进行测试或Fisher精确分析在适当的时候使用XLStat 2014 (www.xlstat.com)。意义阈值(p < 0.05)修正了多个测试使用Benjamini-Hochberg修正。
为了评估协会BMP10变异与PAH,我们比较的频率BMP10错义突变可能与PolyPhen-2预测的破坏性影响,有害的影响,通过筛选和CADD分数> 20 (n = 32),和LOF变体在gnomAD (n = 3)报告的频率BMP10变体具有类似特征的发现在我们组(n = 2)。使用卡方统计进行了比较分析。
结果
序列分析和质量控制
捕捉小组旨在丰富目标DNA,由150年的071个基点覆盖289个目标捕获的地区。我们的设计和测序协议被筛选验证一群23病人以前分析Sanger测序和MLPA。所有之前确定突变(n = 16) (SNVs和indels)和基因拷贝数异变(n = 4)被门店分析检测。相反地,没有突变的检测确认三个病人。
共有29个不同的测序运行在本研究进行分析。均值±sdQ30质量分数为91.5±3.8%运行。平均覆盖率为1106±353倍对所有样品进行了分析。95.6±3.4%的读取映射感兴趣的地区,2.6±2.2%的读取映射区域以外的兴趣和1.8±1.6%没有映射到人类基因组。
基因突变检测肺动脉高压
谱系分析和临床检查后,180名患者最初分为零星PAH, 11作为FPAH(包括只有索引的情况下),13药物——toxin-induced PAH, 59零星PVOD (图1)。突变被发现在263年49岁的患者进行了分析。识别biallelicEIF2AK4最初怀疑PAH突变情况下让我们重新分类PVOD这个病人。因此,35突变被发现在零星的PAH患者(19.5%的零星的多环芳烃)、六FPAH患者FPAH(54.5%)和八个PVOD患者(13.3%的PVOD) (表1)。
31日BMPR2(25零星的PAH突变和六个FPAH), 5TBX4突变(5零星的PAH),两个ACVRL1(两个零星的PAH),两个BMP9(两个零星IPAH),一个SMAD9(一个零星的多环芳烃)和8个biallelicEIF2AK4突变(八PVOD)被确定(表1)。大部分的BMPR2突变是删除突变,即。停止密码子(n = 11)或indels (n = 1)干扰的功能基因(补充表S1)。确定了三种不同的错义突变:两个以前描述的第三个(p.A373V)是新的。这种突变位于BMPR2的激酶结构域,改变一个守恒的残留物和预测是有害的在网上工具(参见数据分析)。根据ACMG标准(27),这种突变被列为可能致病。三个接头突变被发现:两个影响共识拼接站点和一个位于位置c。968 - 12在基因内区7,预计影响剪接在网上分析。逆转录PCR实验利用RNA从血液中提取细胞的突变载体证实,信使RNA剪接缺陷,导致一个intronic序列添加到成熟的mRNA和创建一个转移(补充图S1)。
剩下的六个BMPR2变异基因拷贝数异变探测到门店和经MLPA。其他两个基因拷贝数异变也发现:一个SMAD9,另一个在TBX4。两人都证实了qPCR分析。所有EIF2AK4在纯合突变确定biallelic:五状态和三个复合杂合的。
只有删除突变中确定TBX4和BMP9(终止密码子n = 2, indel n = 4和CNV n = 1),而之前描述两个错义突变被确定ACVRL1。遗传性出血性毛细血管扩张症症状出现在成人的ACVRL1突变携带者,而儿科病例没有遗传性出血性毛细血管扩张症的迹象在诊断和实验室都被看作是零星的多环芳烃。
的BMP10基因还包括在面板中,后的描述BMP9PAH突变,由于近两个基因之间的相似性(65%蛋白质水平序列的身份)。删除突变(c。370C>T, p.Arg124*) located upstream of the region encoding the mature BMP10 peptide was found in a young female patient who was diagnosed with sporadic PAH at 11 years with severe evolution (表2,病人1)。这个年轻的病人有一个小心房中隔缺损和一个小限制性心室中隔缺损,自发地收于2岁。一个预测BMP10LOF变异(c。1057C>T, p.Arg353Cys) was identified in another patient who was diagnosed with sporadic PAH at age 28 years in a severe clinical condition and transplanted at age 35 years (表2,病人2)精氨酸353位于生长因子BMP10的片段,是物种之间高度保守的(补充表S2)和整个在网上这变种是一致的有害影响的分析(表4)。LOF不能容忍的概率计算BMP10被发现是0.72,一个值接近0.9的不耐受阈值的LOF突变可能是有害的,而0.09的价值BMP9(24]。高度显著差异被发现之间的频率可能有害的变异根据结合生物信息学预测工具(见数据分析)和删除突变的BMP10gnomAD中列出数据库和频率的LOF肺动脉高压组(35不同变体40 246 000等位基因的等位基因与两个LOF变异在536测试等位基因;p < 0.0001)。
在诊断病人面对不同年龄,从婴儿到老年人(> 80岁)。为了得到一个准确洞察突变的遗传景观在成人和儿科病例,发现一个单独的分析在18岁及以上的患者(表3)。35儿科和168例成人PAH病例进行分析。没有观察到显著差异在成人和儿科多环芳烃之间的突变速率情况下(分别为19%和26%)。BMPR2突变是最常见的在两个年龄组(75%和77%确定突变的成人和儿科组,分别)。TBX4突变检测到相同频率的成人和儿科病例(每组确定突变的12.5%和11%,分别)。
在一个案例中,临床上称为新生儿PAH, biallelic突变EIF2AK4被发现,导致未确认PVOD重新分类。相比之下,没有发现突变的其他三个儿科病例最初诊断为PVOD。在成人PVOD病人,只有biallelicEIF2AK4确定突变(12.5%的病例阳性)。
变异识别不确定的意义
根据ACMG标准(27),14个变量不确定的意义(VUS开头)被发现在基因研究。在网上执行分析的vu提供表4。没有发现致病突变KCNK3和CAV1执行,但两个的vu被确定在这些基因。的错义变体KCNK3被发现位于细胞外领域的通道,类似于前面所显示的错义突变的位置改变通道的功能在第一项研究涉及这在PAH基因。一个在坐标系删除单个氨基酸被发现CAV1和执行也应视为的vu。
两个BMPR2子变异,而不是描述的gnomAD数据库,确定。两个错义EIF2AK4变量被确定在同一个人,但他们的位置在两个不同的等位基因不能决定。
临床状态的诊断
比较的临床表现诊断之间的突变载体和noncarrier团体所示表5成人多环芳烃情况下,儿科多环芳烃、成人PVOD案件。年龄在突变携带者诊断明显低于非成人多环芳烃和PVOD,但不是在儿科多环芳烃。观察到的性别分布在成人多环芳烃(2 - 3重更多女性)类似于先前描述的各种人群分析(5,28]。类似的趋势在PAH儿科病例。男性的性别分布显示了一个无意义的优势noncarrier PVOD情况下,结果对比与多环芳烃(p < 0.0001;表3),没有区别EIF2AK4突变携带者(表3和5)。
突变携带者的血液动力学的参数往往更糟,即使只在成年PAH平均肺动脉压力达到统计学意义。
急性血管舒张反应者的比例往往是高非成人和儿科PAH情况下即使没有达到统计学意义(表5)。
讨论
大规模并行测序(即。门店)已经彻底改变了分子遗传学的遗传疾病,允许新的致病基因被识别并允许大量增加临床分子诊断效率(29日]。目标总会在一个面板上的认可的基因疾病是一种有效的方法,允许一个广泛的,在经济上可以接受的,调查的潜在基因负责。
在这个前瞻性研究事件的情况下,我们使用捷面板的方法在病人多环芳烃或PVOD参考实验室。基因的面板包括建立基于生理基因通过以前的出版物和研究基因功能和以前的数据。使用这个门店目标捕获方法,不同类型的突变(SNVs,基因拷贝数异变和indels)可以检测到一个单一的技术允许节省成本和时间。
BMPR2是主要的基因在成人(家族和零星的)在儿科形式的多环芳烃。在FPAH情况下,只有突变BMPR2被发现,可能因为它的主要频率,但更具体的原因可能涉及与外显率和临床演进相关突变基因。这些结果按照以前公布的结果(30.,31日]。
在目前的研究中,TBX4突变后的第二个最常见的突变被发现BMPR2在成人和儿科PAH的病例。我们以前观察到的频繁发生TBX4在儿科PAH突变(15),结果最近证实了由另一个基因研究[16]。的重要的频率TBX4突变成人病例中发现在这项研究中,对比与之前报道的结果(16),可能是由于随机差异以及差异模式的患者收集(病人普遍并存档与事故情况下)。
其他基因突变的BMP信号通路被确定(BMP9和SMAD9)在少数情况下,允许这些基因的影响多环芳烃得到证实,因为只有极少数情况下被描述在文献中。事实上,最初的描述BMP9突变与一种特定的遗传性出血性毛细血管扩张症,紧随其后的是一个描述的情况严重的多环芳烃与biallelic LOF (32,33]。罕见的杂合的BMP9突变最近被一大群中描述患者的全基因组测序(9]。在我们的研究中,BMP9是第三个最常见的突变基因在成人PAH病例(PAH病例的1.2%,6.3%的突变),认为这在PAH基因有很大的相关性。一只老鼠用杂合的基因模型BMPR2LOF显示了改善低氧诱导PAH BMP9输液,结果进一步支持,虽然间接,但这种基因参与多环芳烃(34]。在研究“奋进号”的设置,我们调查BMP10的亲密paralogueBMP9编码一个激活配体为ALK1 (ACVRL1),显示一个等价的作用是BMP9血管生成的实验模型,因为它可以代替BMP9BMP9基因敲除小鼠(35,36]。也是最近表明BMP9-BMP10异质二聚体在人血浆循环的主要生物receptor-activating复杂,尽管这种异质二聚体不确定的额外功能(37]。我们找到了一个BMP10杂合的删除突变和一个在网上预测LOF错义变体在两例严重的多环芳烃在年轻的女性患者。其中一个病人出现一个小心房从左到右分流器和一个小高度限制性心室中隔缺损没有肺溢流自发地关闭在2岁之前,而多环芳烃在11岁被诊断出。这个临床表现不允许这种情况列为重合或术后案件根据2013多环芳烃与先天性心脏病相关分类1),但提出的问题之间的关系BMP10杂合的LOF、心脏发展和多环芳烃Bmp10有缺陷的小鼠胚胎早期死亡,胚胎天9.5和10.5之间,主要缺陷在心脏和血管的发展38,39]。确定两个LOF变异BMP10在这个前瞻性群组在PAH患者强烈暗示的责任,因为这个基因的生理作用,其得分的概率被LOF不能容忍,LOF变异频率的高度显著差异之间的病人和一个未经选择的人口。BMP10PAH相关倾向似乎兼容不完全外显率的常染色体显性传播,但也可能成为诱发因素与其他因素相结合。事实上,一些错义BMP10变异,可能致病生物信息学预测工具,被发现在极低频gnomAD数据库,作为其他PAH基因也观察到。进一步的研究将允许的角色BMP10突变定义。没有致病性突变CAV1在这项研究中,发现与之前的报道相一致和大型系列的患者(9,30.完全,这些结果支持非常有限的参与这个基因在PAH倾向。
biallelic率EIF2AK4LOF突变在成人发现零星PVOD病例(12.5%)是符合我们散发病例(以前公布的结果22),但低于系列报道(39]。这种差异可能是由于随机变化的数量有限的情况下,病人特异性集合。唯一biallelicEIF2AK4突变在儿科PVOD形式是在一个新生儿病例最初被称为多环芳烃分子诊断早期提出的心肺衰竭(22]。这种情况下强调的重要性EIF2AK4测试在所有假定的情况下为了建立诊断,因为临床征象可以误导,最好和调查,可以允许区分多环芳烃和PVOD(高分辨率计算机断层扫描和肺一氧化碳)的扩散能力可能不明显歧视或失踪,甚至禁忌(肺活组织检查)22,30.,31日]。EIF2AK4突变鉴定临床基因检测尤为重要,对于高外显率和疾病严重程度的世袭PVOD肺部水肿的风险应对治疗PAH批准,因为它允许遗传咨询和适应后续包括肺移植的及时转诊。EIF2AK4突变通常是简单的解释,但在一个案例中,两个错义EIF2AK4突变被发现与PVOD病人,同时考虑在网上为良性,发现显著频率gnomAD数据库。可以推测的是携带两个错义变体,如果位置在反式可能会导致疾病,但是这种假设需要进一步调查。
发病年龄和性别差异在不同的病人类别称为遗传分析的后果是遗传形式的混合(外显率的主要因素确定这些参数)和nonheritable形式(主要的环境因素)。性别比例中观察到多环芳烃在协议与以前的价值发现在各军团,在突变携带者和非(5]。在成年人的EIF2AK4突变航母战斗群,性别比率分析是有限的对象的数量,但似乎平衡。的确,一个强有力的外显率EIF2AK4两性的突变可能解释了平衡性别比例,如预期在常染色体隐性疾病。
诊断年龄也年轻突变载体多环芳烃组,如前所报道BMPR2突变携带者(28]。成人PVOD集团,有一种强烈的不同时代的突变携带者和非之间发作,已经报道的观察我们组(17,22]。之前指定的环境因素有被记录在nonheritable PVOD和可能解释遗传之间的大发病的年龄不同形式和其他形式(34.4与61.2年;p < 0.0001)。
我们的数据报告描述的一整套基因的序列分析到目前为止仍然留下一个高比例的未解决的情况下,尤其是儿科和家庭情况。识别和解释功能已知的负责任的基因变异的影响,包括非编码区域,仍然是一项重大的实际挑战,需要进一步的努力和知识,但这将阐明大量的情况下(29日]。例如,在我们的研究中,我们发现了一个位于nonconsensus剪接变体网站(intronic位置−12)互补分析,我们证明了它改变信使rna剪接。我们还发现了两个VUS开头的BMPR2子,和功能的研究是必要的评估这些变异基因调控的病理效应。
缺少参数的功能数据的患者数量限制的影响本研究genotype-phenotype关系而言,虽然这方面超出了研究的范围。
额外的基因的突变可以被whole-exome测序和全基因组测序发现的大型系列无关的情况下或在家庭中多个例肺动脉高压。事实上,从没被罕见变异基因被确定最近的全基因组测序的方法在一个大系列PAH情况下(9),搜索whole-exome测序新创突变在儿科情况下(16]。这些新发现的基因可以很容易地添加到目标板进行进一步的评估和临床分子诊断。有几个原因、经济和技术、目标捕获面板的方法是目前最有效的临床分子诊断的诊断的第一步。
一个重大挑战将阐明各种基因是否使多环芳烃或PVOD开发通过一个共同的机制,可以提出了基因属于BMP信号通路,或通过不同的机制。作为一个例子,BMP途径是很重要的在胚胎中胚层间充质细胞发展,作为TBX4也是如此,驱动器在开发过程中肺间质祖入侵(40]。BMP4也是诱发TBX4表现在培养人类肺成纤维细胞(41]。监管EIF2AK4和BMP信号通路之间的联系最近中描述果蝇增加,但观察到BMP信号激活后Eif2ak4果蝇orthologue失活不符合预期的影响BMPR2不足(42]。
我们已知数据的总体分析肺动脉高压基因似乎证实所有主要基因的参与不仅前所述如果LOF还错义突变基因变异被发现在各种考虑。事实上,将多环芳烃的致病作用的杂合突变等主要基因是毫无疑问的BMPR2和TBX4对其他基因,但是可能更困难,更少的数据多环芳烃。我们的利益刺激的分析数据BMP9和BMP10基因在临床分子诊断的多环芳烃,允许几个中心或大型多中心研究的结果在未来共享。
补充材料
确认
我们感谢安妮勒罗伊和玛丽- Waill(医院部门de Genetique - salpetriere, AP-HP,巴黎,法国)的专家技术支持。我们感谢病人、他们的家属和医疗服务提供者从法国肺动脉高压网络同意合作,和病人协会HTAP法国。
脚注
可以从本文的补充材料www.qdcxjkg.com
利益冲突:m .巢窝报告个人费用来自罗氏诊断法国,在进行这项研究的。
利益冲突:d . Montani报告个人费用从Actelion股价,葛兰素史克,默沙东公司和辉瑞公司在提交工作。
利益冲突:美国Nadaud没有披露。
利益冲突:b Girerd没有披露。
利益冲突:m .征收没有披露。
利益冲突:a .布报告拨款,个人费用从葛兰素史克和非金融支持,资助,个人费用来说,顾问委员会工作,和非金融支持从阿斯利康和勃林格殷格翰的发言,个人费用来说,顾问委员会工作,从诺华和非金融支持,从MSD赠款,资助和个人费用从Actelion股价,和个人费用和基耶西非金融支持Farmaceuticals发表讲话,在提交工作。
利益冲突:r . Tresorier没有披露。
利益冲突:a . Chaouat没有披露。
利益冲突:诉Cottin报告个人费用咨询、讲座和旅行医学会议从Actelion股价和罗氏公司,个人费用发展教育演讲、咨询、讲座和旅行医学会议从勃林格殷格翰的发言,个人费用从拜耳咨询,个人费用从基列审判委员会工作,个人费用咨询和旅游从MSD医学会议,个人费用咨询和讲座从诺华公司和赛诺菲安万特,机构拨款从勃林格殷格翰集团和罗氏公司,个人费用数据和安全监测委员会从Promedior Celgene公司,工作和个人费用咨询和数据和安全监测委员会从加拉帕戈斯群岛,在提交工作。
利益冲突:c . Sanfiorenzo没有披露。
利益冲突:g . Prevot没有披露。
利益冲突:m . Reynaud-Gaubert没有披露。
利益冲突:c .飞机场没有披露。
利益冲突:a . Houeijeh没有披露。
利益冲突:阮没有披露。
利益冲突:f . Coulet没有披露。
利益冲突:d阀盖个人费用咨询委员会工作报告从Actelion股价制药、拜耳医疗保健和诺华公司在提交工作。
利益冲突:m·亨伯特报告个人费用从Actelion股价,拜耳,葛兰素史克公司,强生公司,默克和联合疗法,外提交的工作。
利益冲突:f . Soubrier没有披露。
支持声明:这个工作支持的腿Poix(巴黎Chancellerie des的大学)。资金信息,本文已沉积的Crossref资助者注册表。
- 收到了2018年4月25日。
- 接受2018年11月23日。
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