文摘
识别潜在感染者对消除结核病(TB)是至关重要的。我们首次评估性能的新型interferon-γ释放试验,QuantiFERON-TB + (QFT-Plus),其中包括一个额外的抗原管(TB2), CD4刺激+和CD8+结核病患者的t细胞在接触。
接触者筛查潜伏结核感染结核菌素皮肤试验,QFT-Plus QuantiFERON-TB贵如金管(QFT-GIT)。
119年结核病接触,整个协议QFT-Plus QFT-GIT高,科恩的κ0.8。不和谐的结果被发现在12个科目与负面QFT-GIT和积极QFT-Plus结果。标记的结核病接触分析和测试结果,平均时间的指示病例是最大的风险因素在这些测试中积极性。interferon-γ生产两个抗原管之间的差异(TB2−TB1)被用作CD8的估计+TB2所提供的刺激。TB2−TB1值> 0.6 IU·毫升−1是接近指数显著相关案例和欧洲的起源。
QFT-Plus的替代措施的结核病接触比成人QFT-GIT潜伏结核感染筛查。Interferon-γ反应在新的抗原管使用特定CD8的间接估计+响应与增加结核分枝杆菌曝光,建议在确定个人近期感染可能的作用。
文摘
QuantiFERON-TB +改进潜伏结核感染的诊断准确性的设置筛选联系http://ow.ly/2Az0300SDg3
介绍
尽管最近取得的进步在结核病控制在全球层面,结核发病率的下降远远低于需要实现到2050年消灭结核病(1]。识别和治疗无症状的人真正的潜伏性感染结核分枝杆菌是实现这一目标的关键(2,3]。当前全球负担的潜伏性感染是不确定的,尽管它已经表明,三分之一的世界人口可能潜伏性感染结核分枝杆菌(4]。
虽然没有迹象表明他们的疾病,患有潜伏结核感染(LTBI)复活的风险,其中10%可发展为活动性疾病在他们的一生中5]。这种风险是最高的第一次感染后2年。最近预防性治疗的感染者减少这6]。然而,异烟肼预防性治疗并不适合大规模的实施计划,和当前LTBI诊断测试(结核菌素皮肤试验(TST)和干扰素(IFN) -γ释放化验(干扰素释放))有很大的局限性。结核菌可能产生假阳性结果由于环保分枝杆菌敏化作用和疫苗接种卡介苗(BCG)7]。近几十年来干扰素释放测量IFN-γ浓度在体外遗传与肽RD-1地区的刺激结核分枝杆菌基因组已经开发提高诊断的特异性(8]。干扰素释放是一个有用的指标结核分枝杆菌曝光,作为他们的特异性很高(97%)(9]。然而,像结核菌素一样,他们对个人的职业和孩子失去敏感性10,11),他们确定近期和过去的感染和贫穷预测LTBI受试者患疾病的风险更高(阳性预测值IGRA 2.7%, TST 1.5%) (12]。结果,当目前诊断测试是用于指导管理的预防性治疗,治疗所需的数量防止1例结核太高允许大规模的预防计划。在文献中描述了不同的方法来帮助区分那些活动性结核病的风险更大的发展。使用IFN-γ响应延迟抗原heparin-binding-haemoagglutinin [13,14],immunoprofiling [15,16),基因表达模式(即。interleukin-13和自体免疫调节器(问卷调查))(17,18和外周血单核细胞比例19]研究了尽可能早期结核病生物标志物。然而,所有这些方法仍局限于研究领域,目前病人管理的影响最小。
QuantiFERON-TB + (QFT-Plus;试剂盒、希尔登,德国)是新一代的QTF-Gold管(QFT-GIT) [5),包括一个额外的抗原管(TB2)。TB1管包含ESAT-6——CFP-10-derived肽(QFT-GIT结核病- 7.7,目前,已被删除),旨在引起CD4细胞介导的免疫反应+辅助淋巴细胞。TB2包含新的肽能够刺激IFN-γCD4的生产+和CD8+t细胞(20.]。
证据支持CD8的重要贡献+t细胞在宿主防御结核分枝杆菌细胞因子的分泌和细胞毒性活动(21]。首先,具体CD8之间的正相关关系+t细胞在外周血和分枝杆菌增加负载被发现体外(22]。D唉等。报道称,> 60%的结核病患者痰检阳性检测CD8+t细胞反应,而涂阴和LTBI个人的38%和20%,分别。与这种模式一致,患病率越高结核分枝杆菌特殊技能CD8+在痰检阳性t细胞已报告与涂阴病人相比,肺结核和肺外结核(23]。此外,CD8之间的正相关关系+对结核抗原t细胞反应和最近的接触结核分枝杆菌被发现。最近联系人的活动性结核病患者,独立应对QTF, CD8更大+t细胞的反应比其他学习小组(活动性结核病患者、卫生保健工作者和总量作为分母健康这控制)(24]。这是在协议与发现观察牛模型CD8的地方+感染的t细胞反应存在的(25]。
当前使用的IFN-γ释放化验主要引起CD4+反应,但新兴特定CD8测量数据提供一个好的理由+t细胞的反应,特别是进一步探讨CD8之间的联系+t细胞和疾病进展的风险。
在目前的研究中,我们评估的性能特征新QFT-Plus测定TST-positive接触最近接触证实活动性结核病患者,评估使用QFT-Plus与前面的QFT-GIT针锋相对。此外,我们首次研究CD8的意义和可能的使用+IFN-γ反应提供的第二,新添加的抗原管。
材料和方法
研究设置和参与者
我们进行了一项横断面研究在维拉Marelli-Niguarda医院(意大利米兰)。在米兰的结核发病率是16.6每100新病例000人年(2011年)26),高于意大利国家平均水平的三倍。从2014年11月到2015年6月我们前瞻性地招募TST-positive (TST≥5毫米)联系人发送的通知活动性结核病病例由当地公共卫生服务LTBI筛查。
接触被排除在外,如果年龄< 18年,前一个积极的测试记录,预防结核病治疗结核病规定或过去的历史报告。通知书面同意从每项研究课题。联系人报告轻微或严重免疫抑制(糖尿病、慢性肾脏疾病、艾滋病、恶性肿瘤或免疫抑制药物)都包括在内。
伦理委员会批准的这项研究是圣拉斐尔的科学研究所(意大利米兰)。
接触筛查策略是基于国家健康研究所和护理指南2011年卓越结核病(27)和意大利的指导方针建议重新测试那些积极的测试结果证实试验使用干扰素释放。在接触的第一次访问通过临床检查健康状况成立和胸部x线摄影。进一步的信息在出生的国家,移民身份,自然的接触源情况下,接种卡介苗状态(如果不清楚细节,检查BCG接种疤痕是由训练有素的医疗助理)和临床历史是通过个人访谈。当临床怀疑坚持,胸部电脑断层扫描和痰液样本分析要求。
建议所有患者还进行了测试与常规筛查作为联系调查的一部分。因此,TST-positive接触那些测试呈阴性反应的第一个QFT-GIT分析测试使用QFT-GIT 10 - 12周后排除延迟转换。
QFT-GIT均获得血液样本,QFT-Plus和艾滋病毒检测受试者提供知情同意。QFT-GIT目前使用在临床实践中进行Niguarda微生物学服务(意大利米兰),虽然QFT-Plus测试执行新兴细菌病原体在圣拉斐尔医院实验室。QFT-Plus和QFT-GIT测试被执行根据制造商的指示。同时外周血样本的两个测试是获得直接进入QFT管和加工在4 h。执行测试解释QFT-Plus和QFT-GIT根据制造商的说明书。QFT-GIT结果记录积极如果抗原的反应> 0.35 IU·毫升−1以上负控制响应。积极性(抗原反应> 0.35 IU·毫升−1高于单一抗原的负控制响应)管(TB1或TB2)足以得分QFT-Plus测试是积极的。
确定的接触
我们评估了不同因素的替代标记结核分枝杆菌曝光。的总曝光时间接触之前各自的源案例的诊断建立了记录的程度联系在一个典型的一周。结核病接触者讲根据接近指数情况下(28]:我们认为他们是“高接触”如果接触和患者经常分享相同的卧室和更低的距离如果接触和病人睡在不同的卧室在同一个房子或在一个不同的房子。痰涂片阳性指数的情况下这些台词也被评为结核病风险因素。
统计分析
QFT-GIT之间的协议和QFT-Plus被评估计算的总百分比一致的结果和科恩的κ系数为95%的置信区间。
单变量逻辑回归和向后逐步多元逻辑回归模型被用来确定积极的测试结果的相关因素。中考虑的变量分析性别、出生地是否;一个结核病流行地区,无论是在欧洲,BCG接种疫苗,免疫功能不全的状态,涂片状态索引的情况下,平均每周时间索引病例和睡觉的地方对指数的情况。同样的分析变量表示之间的差异是否QFT-Plus TB2和QFT-Plus TB1大于截止0.6 IU·毫升−1(如结果部分所述)。意义的水平被认为是5%。所有统计分析使用R统计软件(版本3.2.3;www.r-project.org)。
结果
119年结核分枝杆菌暴露个人积极的结核菌素(≥5毫米)。其中39是涂阴培养阳性结核病例的接触,和69年是痰检阳性培养阳性指数情况下的联系人。参与者的年龄中位数(四分位范围)38(30 - 79)年,一半以上non-European-born (n = 61, 51.26%), 82年(78.85%)BCG接种疫苗和11(9.24%)免疫功能不全的受试者。人口特征的劳动者所示表1。
QFT-Plus和QFT-GIT之间的协议
68人(57.1%)的119个联系人QFT-Plus是积极的。64名受试者在抗原阳性管,两人正TB1只有和两个积极TB2。56 119 TST-positive QFT-GIT联系人是积极的。两者之间的整个协议干扰素释放很高,科恩的κ为0.8 (95% CI 0.69 - -0.91)。107年的两个测试给了整合的结果(89.9%)科目(表2)。不和谐的结果被发现在12个主题:他们都得分负向QFT-Plus QFT-GIT测试和积极的测试。两者之间不和谐的结果干扰素释放包括四个联系单管QFT-Plus积极性。此外,接触IGRA-discordant结果总体低IFN-γ响应,但不会低被认为是边缘的结果(中位数TB1-nil 0.83 IU·毫升−1和TB2-nil 0.73 IU·毫升−1)。学科的特点与不和谐的结果所示表3。只有一个的12个接触QFT-Plus正面和负面QFT-GIT结果有结核菌素反应< 10毫米(7毫米)。在全球范围内,中位数TB1 QFT-Plus抗原IFN-γ水平(TB1-Nil) 0.74 IU·毫升−1,而中位数TB2 QFT-Plus抗原IFN-γ水平(TB2-Nil) 0.67 IU·毫升−1报道,表2。
按照意大利的指导方针,联系人的结核病例最初那些测试呈阴性反应的第一个QFT-GIT结核菌素阳性结果分析测试与QFT-GIT 10 - 12周。接触后随访,两个接触转化为QFT-GIT积极的结果。他们都是最初的12个联系人显示一部分QFT-Plus积极/ QFT-GIT消极不和谐的结果(表2)。其中一个有强烈QFT-GIT积极性(> 10 IU·毫升−1在10周接触后随访),而第二种情况报道QFT-GIT 0.5 IU·毫升−1异烟肼预防性治疗6个月后(决定治疗是基于强大的TST积极性和接触的距离指数)。在这两种情况下,TB2 IFN-γ响应大于TB1中找到。
QFT-Plus和QFT-GIT积极性的独立预测指标
QFT-GIT和QFT-Plus测试呈阳性的单变量优势比增加接触的不同可能的替代标记结核分枝杆菌介绍了表4。联系人报告说,他们每天花了> 12 h指数的情况下更容易QFT-GIT和QFT-Plus积极,相比联系人每天消费1 - 4 h指数的情况。对于一个主题的曝光时间> 12小时每天,正面测试的几率高出六倍由QFT-Plus QFT-GIT和14倍。测试结果都明显更可能是积极的更接近病人睡觉的受试者(相同的房子与不同的房子)。的可能性是QFT-GIT阳性受试者睡在同样的房子的指示病例大约四倍(3.98 3.79不同的房间,同一房间)比那些睡在一个不同的房子,而他们QFT-Plus阳性的几率大约6倍(同一房间不同的房间5.78,5.65)。向后逐步多元逻辑回归分析的结果提出了表5。只有变量指示是否接触每天平均花> 12 h指数的情况下仍然以积极QFT-GIT结果显著相关(或4.63,95%可信区间2.05 - -10.47)和积极QFT-Plus结果(或6.98,95%可信区间2.86 - -17.02)。
CD8的预测+t细胞刺激
评估CD8的具体贡献+t细胞,管我们的定量值减去第一个抗原表达IU·毫升−1CD4 (TB1)刺激+人口从所提供的价值,第二个抗原管(TB2)中CD4结合起来+和CD8+t细胞刺激发生。我们使用的差异0.6 IU·毫升−1定义积极的结果以减少偏见的内在变异性测试(30.]。18 119 (15.13%)TB2联系人有区别和TB1 > 0.6 IU·毫升−1。单变量逻辑回归是用来确定TB2差异的相关因素和TB1 > 0.6 IU·毫升−1(表4)。相比该方法确定睡在同一个房间里睡在不同的房子(或4.34,95%可信区间1.37 - -13.81)和欧洲的起源(-9.75或3.24,95% CI 1.07)是与更TB2响应显著正相关。这些协会坚持多变量分析,所示表6。
讨论
我们提供的第一评价QFT-Plus化验与先前版本QFT-GIT TST-positive联系人的群组的活动性结核病病例。
积极的结果从QFT-Plus与代理相关标记增加最近接触结核分枝杆菌。成对比较QFT-GIT和QFT-Plus之间显示了一个总体不错,但不完整,协议。此外,在大多数情况下,整个IFN-γ反应QFT-Plus积极/ QFT-GIT消极交往的不确定性区域为测试解释(30.),这表明之间的差异不是由于测试的变化。值得注意的是,两次测试之间的分歧方向相同,共有12 TST-positive联系人QFT-GIT与新QFT-Plus积极和消极。LTBI指没有黄金标准,很难评估是否不整合接触中发现筛查结果归因于QFT-Plus测试的灵敏度就越高。如果结核菌素作为参考测试LTBI,这将意味着TST-positive联系人确认由干扰素释放试验的比例增加了17%,当使用QFT-Plus QFT-GIT相比。错误的积极性与结核菌素主要是由于接种卡介苗疫苗(敏化作用7]。QFT-Plus特异性总量作为分母人口这尚未调查;然而,我们发现QFT-Plus不是与BCG疫苗接种在单变量和多变量分析。此外,只有其中一个12接触QFT-Plus积极和QFT-GIT阴性结果有结核菌素反应< 10毫米,而另一个显示了强烈的TST积极性,这是不太可能的结果之前接种疫苗(7]。
最近的研究结果表明,干扰素释放之间的不整合和测试在最近暴露个人可能与延迟转换干扰素释放相对于结核菌素(31日,32]。在这项研究中我们发现,大多数的不和谐的情况下(QFT-GIT负面/ QFT-Plus积极)显示强烈的TST积极性;此外,我们报道一个较短时间内转换QFT-Plus QFT-GIT相比,至少在我们组的两个人。这些结果表明,QFT-Plus可能更敏感的检测新的或最近的感染结核分枝杆菌QFT-GIT。
我们的数据表明,风险因素对干扰素释放试验积极性是相同的。QFT-Plus联想到最近曝光的替代测量显示强于QFT-GIT单变量和多变量分析的平均时间每天测试最严重的指示病例与积极性。
我们首次研究了IFN-γ生产两个QFT-Plus管之间的差异和代理标记增加曝光。TB2−TB1微分值被用作特定CD8的间接估计+新添加的抗原刺激。截止值被设定为0.6 IU·毫升−1为了排除小变化由于已经变化30.]。积极TB2−TB1差异(> 0.6 IU·毫升−1)睡接近指数显著相关情况的优势比可比分析QFT-GIT和QFT-Plus获得之一(睡在同一个房间里比睡在不同的房子或4.34,95% CI 1.37 - -13.81)。此外,欧洲血统(-9.75或3.24,95% CI 1.07)显著相关TB2−TB1 > 0.6 IU·毫升−1,但没有统计学意义QFT-GIT和QFT-Plus结果。
作为个体从欧洲国家的风险很低结核分枝杆菌曝光,这些发现与假设一致响应TB2和TB1管之间的差异可以作为代理近期暴露的标志(链接到特定的指示病例暴露),而不是之前的累积结核分枝杆菌曝光。流式细胞术最近的一项研究报告CD8之间的正相关关系+对QFT-GIT抗原t细胞反应和最近的接触结核分枝杆菌联系人的活动性结核病患者相比,控件(活动性结核病患者、卫生保健工作者和总量作为分母健康这控制)(24]。
测试目前用于结核分枝杆菌不能反映CD8感染诊断+t细胞细胞因子的生产(33];然而,在以前的流式细胞术研究结果报告和我们的发现提供了一个强有力的理由的测量结核分枝杆菌特殊技能CD8+t细胞的反应。如果验证,这可能证明是一个代理最近感染的标记,而已经发展为活动性结核病的风险最高,可以使QFT-Plus区分近期感染和持久的反应性,因此允许更好的有针对性的预防治疗。
结核分枝杆菌特殊技能CD8+t细胞在活动性结核病患者更频繁地检测与LTBI相比,与增加抗原负担(21- - - - - -23,34,35),这表明CD8的存在+潜伏性感染的t细胞在一小部分人可以预测的结核分枝杆菌活跃的复制和更有可能疾病进展(22]。与这些结果一致,在之前的研究中我们发现,积极QFT-Plus管之间的差异反应可能与增加抗原负载在活动性结核病患者中,因为它是更常见的痰检阳性与涂阴活动性结核病患者(36]。在目前的研究中,我们观察到一个更大的TB2抗原反应(TB2−TB1差异> 0.6 IU·毫升−1)在18(15.13%)人,所有QFT-Plus积极。我们推测,潜伏性感染的小群接触TB2−TB1差异> 0.6 IU·毫升−1有较高的抗原的负担。然而,到目前为止,我们没有直接评估的工具结核分枝杆菌抗原的负担,因为当前LTBI测试依赖(间接)测量特定的免疫反应。
我们的研究有一定的局限性。这其中最重要的是样本容量,这是119例。此外,由于缺乏标准性测试LTBI,我们未能充分解决QFT-GIT和QFT-Plus之间的不和谐。此外,TST-negative联系人没有招募了在我们的样例和全面评估测试将受益于他们的存在。最后,测试的阳性预测值和新参数,两者的区别抗原管,需要正确地评估纵向队列。然而,这将要求后续的有一大群人结核病是一个不寻常的事件(事件),只能在组织执行那些不合格的化学预防。
据我们所知,我们的研究是第一个评估QFT-Plus最近联系人的结核病例分析。虽然小样本量的限制,我们的数据表明,QFT-Plus接触筛查QFT-GIT相比有一个改进的性能,并建议一个角色两管之间的差值作为代表近期感染。需要更大的前瞻性研究来评估测试的阳性预测值之间的差值和可能的作用两个抗原管作为最近感染的标志。
总之,两者的区别抗原管,用作特定CD8的间接估计+激活,与因素表明增加结核分枝杆菌曝光,表明这可能确定个人发展为活动性结核病的风险更大。
QFT-Plus显示的代理措施的暴露而QFT-GIT因此似乎至少一样准确QFT-GIT筛选设置的联系。
确认
作者感谢慷慨的研究对象参与和医疗助理和地区肺结核参考中心的全体员工,别墅公司Niguarda医院(意大利米兰)为他们的勤奋工作和宝贵支持。
脚注
支持声明:试剂盒(希尔登,德国)QuantiFERON-Plus工具包提供了免费的。
利益冲突:没有宣布。
- 收到了2016年3月10日。
- 接受5月23日,2016年。
- 版权©2016人队