摘要
诱导痰是一种非侵入性收集气道细胞的方法。痰细胞基因表达分析已被用于了解哮喘或慢性阻塞性肺病(COPD)等气道疾病的潜在机制。到目前为止,还没有确定合适的参考基因使痰标本之间的靶mRNA水平正常化。
本研究评估了14名健康志愿者、12名哮喘患者和12名COPD患者痰标本中9个常见参考基因的表达稳定性。
使用三种不同的算法(geNorm、NormFinder和BestKeeper),我们确定了HPRT1和GNB2L1是最理想的参考基因,可用于对痰细胞的定量逆转录酶(RT) PCR数据进行归一化。HPRT1和GNB2L1的高表达稳定性在9例健康对照、5例COPD和5例哮喘患者中得到了证实。在这一组中,RNA提取和RT-PCR的方法有所不同,这证明这些基因仍然是最可靠的,无论提取RNA、生成互补DNA或扩增它的方法是什么。
最后,一个与嗜酸性粒细胞或中性粒细胞相关的基因表达的相对定量的例子,提供了正常化后的更准确的结果,与最不稳定的参考基因相比,最稳定的参考基因被确定为最稳定的,并证实了我们的发现。
摘要
当从痰细胞中进行逆转录酶qPCR时,最好的参考基因用于正常化http://bit.ly/2knSDXm
脚注
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利益冲突:C.莫尔曼斯没有什么要披露的。
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利益冲突:J. da Silva没有什么要披露的。
利益冲突:R. Louis报告来自GSK和Chiesi的资助,来自诺华的资助和个人费用,来自阿斯利康的个人费用,在提交的作品之外。
支持声明:本项目得到了欧洲联盟(Interreg 5-a Euregio Meuse Rhine)的财政支持。本文的资助信息已存入Crossref资助者注册表。
- 收到了2018年4月5日。
- 接受2019年9月13日。
- 版权©2019人队
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