文摘gydF4y2Ba
脱落的neuregulin (NRG) 1肺上皮细胞导致上皮细胞的激活人类表皮生长因子受体(她)2受体,肺上皮通透性增加和急性肺损伤(ALI)。我们试图确定NRG-1探测和高在支气管肺泡灌洗(BAL)和患者血浆从阿里与控制和确定NRG-1之间存在相关性,在阿里炎症和结果。gydF4y2Ba
匹配BAL和血浆样本来自23个阿里需要插管和机械通气的患者。控制病人(n = 5)包括健康的志愿者。NRG-1和炎症指标测量在矿山和等离子体gydF4y2Ba通过gydF4y2BaELISA。gydF4y2Ba
均值±gydF4y2BasdgydF4y2BaBAL NRG-1 ALI患者的浓度为187.0±21.35 pg·毫升gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba相比之下,85.50±9.2 pg·毫升gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba在控制(p = 0.001)。增加BAL NRG-1与标记相关的炎症,和反向关联ventilator-free天(vfd;r = -0.51, p = 0.015)。等离子体NRG-1在阿里病人与对照组升高(611.7±354.2gydF4y2Ba与gydF4y2Ba25.17±19.33 pg·毫升gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba与vfd, p < 0.001)和负相关(r = -0.51, p = 0.04)。gydF4y2Ba
这些结果证实脱落的NRG-1阿里和表明NRG-1-HER2通路在ALI患者很活跃。gydF4y2Ba
急性肺损伤(ALI)和更严重的表现,急性呼吸窘迫综合征(ARDS)影响多达200000人每年在美国,死亡率高达40% (gydF4y2Ba1gydF4y2Ba]。尽管最近的进步阿里的致病机制的理解,不存在特定的治疗和治疗仍然支持。上皮损伤的病理特征是阿里(gydF4y2Ba2gydF4y2Ba,gydF4y2Ba3gydF4y2Ba),损害肺上皮炎症和炎性细胞因子是阿里的初始步骤发展(gydF4y2Ba4gydF4y2Ba]。整体效果增加paracellular肺泡上皮细胞的渗透性导致肺部水肿和危及生命的低氧血gydF4y2Ba4gydF4y2Ba]。肺肺泡上皮,由I型和II型细胞,是一个关键的参与者在阿里性肺水肿的发病机制的发展,和一个完整的上皮屏障是至关重要的维持正常肺液平衡(gydF4y2Ba5gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba7gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba
人类表皮生长因子受体(她)2,表达的受体酪氨酸激酶(RTK)支气管和肺泡上皮细胞,参与多种生理过程包括细胞增殖、粘附和信息和上皮通透性。她的受体家族由四个1型、膜结合,rtk: HER1或表皮生长因子受体(EGFR),和HER2, 3和4gydF4y2Ba8gydF4y2Ba]。受体信号发生gydF4y2Ba通过gydF4y2Ba配体结合,导致受体人类——或者heterodimerisation,激活的受体激酶结构域,自身磷酸化和下游信号的启动。HER2没有已知的配体,需要与激活的另一个她的家庭成员。HER3而没有内在的信号特性,调节生长因子配体的受体(NRG) 1gydF4y2Ba9gydF4y2Ba),其首选HER2受体。NRG-1表达在支气管和肺泡上皮细胞(gydF4y2Ba10gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba13gydF4y2Ba],脱落的上皮细胞表面的蛋白酶disintegrin和metalloprotease(亚当)17 HER3绑定在一个汽车/旁分泌的方式(gydF4y2Ba10gydF4y2Ba,gydF4y2Ba14gydF4y2Ba]。这导致HER3 HER2 /复杂的形成和HER2受体激活(gydF4y2Ba11gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba
我们之前的研究表明,炎性细胞因子白介素(IL) 1β诱发ADAM17-mediated NRG-1脱落和随后的HER2激活导致肺上皮细胞通透性增加gydF4y2Ba在体外gydF4y2Ba(gydF4y2Ba10gydF4y2Ba]。动物模型的阿里确认激活这个途径gydF4y2Ba在活的有机体内gydF4y2Ba(gydF4y2Ba10gydF4y2Ba,gydF4y2Ba15gydF4y2Ba,gydF4y2Ba16gydF4y2Ba]。设置符合增强上皮NRG-1脱落的肺损伤,NRG-1中检测出肺部水肿液从一小群ALI患者和患者升高而心原性的肺部水肿(gydF4y2Ba10gydF4y2Ba),疾病进一步暗示这个途径的作用。然而,未知是否NRG-1水平与肺部炎症和结果,以及是否NRG-1脱落是肺的区域化。gydF4y2Ba
鉴于阿里NRG-1-HER2通路的作用模型和增加的证据NRG-1脱落在炎症性肺损伤实验模型,我们提出NRG-1水平支气管肺泡灌洗(BAL)样本ALI患者与健康对照组相比升高。我们也试图确定BAL NRG-1 ALI患者的水平将与阿里严重程度和增加肺部炎症。最后,我们研究了NRG-1是否会升高血浆从阿里患者与健康对照组相比,与BAL NRG-1。gydF4y2Ba
材料和方法gydF4y2Ba
病人gydF4y2Ba
本研究综述了由美国国家犹太医疗机构审查委员会(美国科罗拉多州丹佛市)和决心不涉及“人类被试的研究”或“受保护的健康信息”由美国健康和人类服务部门(美国马里兰州贝塞斯达)。所有生物样本和临床数据的获得消除识别信息的方式从一个子集的患者参加临床研究的“一个随机试验的患者gm - csf ALI / ARDS”(ClinicalTrials.gov标识符gydF4y2BaNCT00201409gydF4y2Ba),一个多中心、随机、安慰剂对照第二阶段研究的功效集落刺激因子(gm - csf)gydF4y2Ba与gydF4y2Ba安慰剂治疗ALI (gydF4y2Ba17gydF4y2Ba]。病人在我们的分析中为2004年7月至2009年6月,是≥18岁的年龄,遇到了阿里标准所定义的1994欧美的共识声明gydF4y2Ba18gydF4y2Ba),需要气管插管和机械通气(MV),和接受BAL血液收集后第三天会议阿里标准。病人去世前第三天没有样本收集,因此,并不包括在我们的分析。作为一个目标是确定相关性BAL和等离子NRG-1阿里年初,只有患者BAL和等离子体可在会议后的第三天阿里NRG-1水平的测量标准是(n = 23)。健康的志愿者没有肺部疾病接受落下帷幕gydF4y2Ba通过gydF4y2Ba支气管镜检查并捐赠了等离子体作为对照组。BAL样本无菌纱布过滤去除无细胞的微粒物质和粘液。样本然后离心机(1000×gydF4y2BaggydF4y2Ba5分钟)后收集细胞分离和上层清液。上层清液是整除成小卷(< 10毫升)。血同样离心机分离细胞从等离子体后立即收集和整除。等离子体和BAL上层清液样本存储在-80°C。gydF4y2Ba
临床数据gydF4y2Ba
所有病人临床信息收集作为gm - csf的一部分研究。急性生理和慢性健康评估II (APACHE II)分数,顺序器官衰竭评估(沙发)分数和动脉氧张力(gydF4y2BaPgydF4y2Ba啊,一个gydF4y2Ba2gydF4y2Ba)/吸入氧气分数(gydF4y2BaFgydF4y2Ba阿,我gydF4y2Ba2gydF4y2Ba)在招生比例计算(第一天阿里)。主要结果,ventilator-free天(vfd)被定义为一个病人还活着的天数和自由的MV 28。重症监护室(ICU)和死亡率无天(28天)也被记录下来。gydF4y2Ba
生物指标测量gydF4y2Ba
NRG-1 BAL和等离子体以ELISA(研发系统,Inc .,明尼阿波利斯,美国)。面板的分析物包括表皮生长因子(EGF), IL-1β,il - 6,引发和肿瘤坏死因子(TNF) -α测量落下帷幕,同时在使用人类细胞因子和血浆样本5-plex 96孔分析工具包(美国Billerica的微孔,MA)是根据制造商的说明和测量使用Luminex技术(Bio-plex Bio-Rad、大力神、钙、美国)。所有生物在重复测量分析物。调查人员处理生物样本被蒙蔽的临床资料。gydF4y2Ba
统计分析gydF4y2Ba
总结提出了人口统计的人口统计信息是指±gydF4y2BasdgydF4y2Ba在连续情况或计数(总额的百分比)分类情况。本研究主要结果变量是vfd。次要结果变量ICU-free天以及招生APACHE II评分,沙发分数和gydF4y2BaPgydF4y2Ba啊,一个gydF4y2Ba2gydF4y2Ba/gydF4y2BaFgydF4y2Ba阿,我gydF4y2Ba2gydF4y2Ba比率。首次调查结果变量之间的关系和生物预测使用皮尔逊积差相关。所有生物预测自然对数转换符合模型假设。引导的估计也是为了进一步加强我们的发现。引导是一种非参数技术,用于开发检验统计量的抽样分布,以评估实证标准误差。在所有情况下,引导实证分析正好与传统的参数分析。所有分析使用SAS 9.2 (SAS研究所Inc .,卡里、数控、美国)或R版本2.13.2 (R统计计算的基础,维也纳,奥地利)。所有测试都是双面的,假定值< 0.05被认为是重要的。gydF4y2Ba
结果gydF4y2Ba
BAL NRG-1是阿里的升高gydF4y2Ba
病人特点研究条目所示gydF4y2Ba表1gydF4y2Ba。在研究入口(报名第一天),所有患者遇到了阿里gydF4y2BaPgydF4y2Ba啊,一个gydF4y2Ba2gydF4y2Ba/gydF4y2BaFgydF4y2Ba阿,我gydF4y2Ba2gydF4y2Ba标准(gydF4y2Ba18gydF4y2Ba用均值±)gydF4y2BasdgydF4y2BaPgydF4y2Ba啊,一个gydF4y2Ba2gydF4y2Ba/gydF4y2BaFgydF4y2Ba阿,我gydF4y2Ba2gydF4y2Ba比133±47。平均年龄为47.9岁,39%的病人是女性。均值±gydF4y2BasdgydF4y2Ba招生APACHEⅱ评分为19.2±8.3,沙发得分为6.3±3.8。vfd平均为12.4±8.3,ICU-free天分别为7.9±8.1。三个病人还活着在28天。12名患者接受gm - csf和11则接受安慰剂治疗。NRG-1水平没有区别患者gm - csf和安慰剂之间。gydF4y2Ba
NRG-1落下帷幕的ALI患者中检测到。平均BAL NRG-1 ALI患者的浓度明显高于以控制(187.0±21.35gydF4y2Ba与gydF4y2Ba85.50±9.20 pg·毫升gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba,p = 0.001;gydF4y2Ba图1gydF4y2Ba)。作为IL-1β诱发NRG-1脱落gydF4y2Ba在体外gydF4y2Ba(gydF4y2Ba10gydF4y2Ba),我们试图确定是否会发生ALI患者NRG-1脱落与肺泡炎症。因此我们测量BAL炎症指标包括IL-1β、il - 6、引发和TNF-αNRG-1以确定其相关性(gydF4y2Ba表2gydF4y2Ba)。NRG-1正与il - 6显著相关(p < 0.05)和TNF-α平衡(p < 0.05)。增加BAL NRG-1与增加BAL IL-1β和引发有关,尽管这没有达到统计学意义(p < 0.06和p < 0.08 IL-1β和引发,分别)。这些数据表明NRG-1高架在阿里与对照组相比,NRG-1浓度与标记相关的炎症。gydF4y2Ba
BAL NRG-1并不与EGFgydF4y2Ba
人都有信号gydF4y2Ba通过gydF4y2BaEGF及其受体、表皮生长因子受体在阿里gydF4y2Ba19gydF4y2Ba,gydF4y2Ba20.gydF4y2Ba),我们试图确定EGF在场ALI患者的落下帷幕。虽然我们做了检测低水平的EGF在BAL患者从阿里(平均1.62 pg·毫升gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba),之间没有相关性EGF和NRG-1或vfd (gydF4y2Ba表2gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba
BAL NRG-1阿里与严重性gydF4y2Ba
鉴于总体低死亡率在我们组,我们选择了vfd,常用的结果变量,可能反映了阿里严重程度,以确定任何NRG-1和临床结果之间的相关性分析。我们可以看到gydF4y2Ba表3gydF4y2Ba,更高的BAL NRG-1与更少的vfd (r = -0.51, p = 0.015)。此外,增加BAL NRG-1也负相关的次要结果ICU-free天(r = -0.50, p = 0.015)。之间没有相关性BAL NRG-1和招生gydF4y2BaPgydF4y2Ba啊,一个gydF4y2Ba2gydF4y2Ba/gydF4y2BaFgydF4y2Ba阿,我gydF4y2Ba2gydF4y2Ba比,APACHEⅱ评分或沙发评分(gydF4y2Ba表3gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba
在阿里NRG-1升高血浆gydF4y2Ba
我们评估BAL NRG-1反映从肺上皮细胞脱落。然而,阿里的系统性炎症反应可能导致系统性NRG-1浓度。因此我们化验血浆从主题与阿里NRG-1和比较这些值NRG-1水平落下帷幕。见gydF4y2Ba图2gydF4y2Ba,发现等离子体NRG-1阿里和患者与对照组相比显著升高(611.7±354.2 pg·毫升gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba与gydF4y2Ba25.17±19.33 pg·毫升gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba,p < 0.001)。此外,等离子体NRG-1落下帷幕NRG-1浓度显著相关,相关系数为0.53 (p = 0.05)。符合BAL NRG-1,更高的等离子体NRG-1浓度与长期的MV,等离子NRG-1 VFD之间的相关性为-0.51 (p = 0.04)。BAL NRG-1相比,等离子体NRG-1浓度不与等离子体水平的其他炎症介质或次要结果(数据未显示)。发现EGF在23 ALI患者的血浆从9个,但没有与NRG-1或与任何结果变量(数据没有显示)。gydF4y2Ba
讨论gydF4y2Ba
这项研究表明NRG-1探测BAL和患者血浆从阿里和上升与控制。此外,BAL NRG-1与肺部炎症的标志和结果包括vfd和ICU-free天。我们以前描述的角色NRG-1-HER2信号轴上皮功能障碍gydF4y2Ba在体外gydF4y2Ba和肺损伤gydF4y2Ba在活的有机体内gydF4y2Ba(gydF4y2Ba10gydF4y2Ba,gydF4y2Ba15gydF4y2Ba,gydF4y2Ba16gydF4y2Ba]。我们当前的发现提供了支持证据表明NRG-1脱落发生在ALI患者(gydF4y2Ba10gydF4y2Ba),表明NRG-1 (BAL和/或等离子体)可能作为一种新的生物标志物在阿里提供预后信息。预测结果的生物标志物,反映了疾病病理生理学和现有的治疗将是一个重大的一步在阿里的管理。gydF4y2Ba
NRG-1可能作为一种生物标志物在阿里是逻辑的潜在作用NRG-1-HER2通路阿里病理生理学。肺上皮细胞的刺激NRG-1 IL-1β导致脱落,HER2激活和HER2-dependent paracellular肺上皮通透性的增加(gydF4y2Ba10gydF4y2Ba]。在小鼠模型的阿里,增加肺泄漏与高架BAL NRG-1和增加肺HER2激活。药理和遗传策略表达下调HER2激活减弱阿里,减少肺纤维化和改善生存在博来霉素肺损伤模型(gydF4y2Ba15gydF4y2Ba,gydF4y2Ba16gydF4y2Ba]。同样,抑制ADAM17,蛋白酶裂解NRG-1上皮表面的减毒肺NRG-1脱落、HER2激活和阿里在老鼠身上gydF4y2Ba10gydF4y2Ba]。贡献给阿里病理生理学证据的途径激活患者识别ADAM17, NRG-1在阿里和HER2治疗靶点。药物治疗的阿里是极其有限的。确认ADAM17-NRG-1-HER2通路参与阿里病理生理学立即打开车门的现有药物疗法针对ADAM17, NRG-1和HER2。gydF4y2Ba
我们的数据之间存在显著相关性BAL和等离子NRG-1和vfd。vfd复合终点,包含一个病人还活着的时间和自由的MV在28天内,已经成为一种常用的并接受肺ALI患者的结果(gydF4y2Ba21gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba23gydF4y2Ba]。相对较少的患者研究和低死亡率(13%)不允许我们确定一个28天生存和BAL或等离子NRG-1浓度之间的相关性。然而,一个与vfd提供有用的临床信息。长时间的通风时间一直显示是阿里的长期并发症的危险因素,包括在日常生活活动障碍(gydF4y2Ba24gydF4y2Ba6分钟步行试验的距离),减少(gydF4y2Ba25gydF4y2Ba),post-ALI焦虑和妥协长期肺功能(gydF4y2Ba26gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba
我们发现增加NRG-1 BAL和等离子体,在等离子体和NRG-1水平高于落下帷幕。等离子体的组织来源NRG-1是未知的。虽然有高表达的肺癌、其他器官,如心脏和肝脏,表达NRG-1 [gydF4y2Ba12gydF4y2Ba],可能普遍炎症诱发脱落NRG-1来自其他组织的床。目前尚不清楚为什么等离子NRG-1不与血浆细胞因子,这需要进一步的研究。鉴于炎性细胞因子诱导NRG-1脱落,BAL NRG-1并与肺部炎症表明球NRG-1来自肺部,尽管从血液中不能排除易位。值得注意的是,等离子体NRG-1与BAL NRG-1 vfd,支持阿里作为疾病的普遍炎症和表明等离子体NRG-1可能准确反映NRG-1信号在肺癌和可能对阿里作为一种新的生物标志物。血清生物标志物,尤其是当结合使用,与临床参数,能够预测死亡率(gydF4y2Ba27gydF4y2Ba,gydF4y2Ba28gydF4y2Ba]。除了提供预后信息,生物标志物可能用于选择病人的新疗法的临床试验(gydF4y2Ba29日gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba
在我们的研究是有限制的。虽然NRG-1高架ALI患者与健康的志愿者相比,一个更合适的对照组可能包括气管插管,危重病人没有肺损伤,如心脏衰竭患者。然而,通常识别阿里不是一个诊断挑战要求生化确认。NRG-1可能在其他重病人群可能会升高。通常会有高度的炎性细胞因子在没有肺损伤的危重病人,和细胞因子水平可以与那些来自阿里重叠病人(gydF4y2Ba30.gydF4y2Ba]。此外,即使non-injurious MV激活一个肺部炎性转录概况gydF4y2Ba31日gydF4y2Ba]。然而,我们的数据表明,在病人与已知的阿里,NRG-1水平具有预后价值。gydF4y2Ba
当样本容量落下帷幕(类似于其他研究调查生物标志物水平gydF4y2Ba32gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba34gydF4y2Ba),是动力不足检测NRG-1和死亡率之间的关联。此外,我们的低死亡率可能解释为什么我们没有检测NRG-1之间的关联和APACHE II或沙发分数,因为这些都是用来预测危重患者的死亡率。我们不确定之间的关联NRG-1和氧化;然而,氧化,尤其是在阿里,是一个可怜的预测结果(gydF4y2Ba29日gydF4y2Ba]。然而,样本容量足够确定BAL和等离子NRG-1和vfd之间的意义。vfd是复合结果时间通风机和死亡率,因此观察到的差异的vfd可以反映出不同的死亡率和不通风时间的差异gydF4y2Ba35gydF4y2Ba]。我们组的死亡率低表明NRG-1之间的相关性和vfd是真实的,而不是受到死亡率(gydF4y2Ba29日gydF4y2Ba]。样品收集多个跨度为从一个庞大而多样化的人口的肺损伤患者(gydF4y2Ba如。gydF4y2Ba脓毒症、创伤,gydF4y2Ba等。gydF4y2Ba)需要明确确定的效用NRG-1作为阿里的诊断和预后的生物标志物。最后,虽然我们观察NRG-1脱落,HER2激活人类并未直接评估。考虑到低离解常数(∼100点)的NRG-1 HER2/3复杂,存在自由NRG-1建议HER2激活是可能的。然而,NRG-1的可能性或HER2抑制剂或不活跃的NRG-1形式是可能的(尽管投机)和需要研究;我们目前发现支持NRG-1脱落阿里的病理生理过程。gydF4y2Ba
阿里是一种常见的和致命的炎症综合征没有药理治疗。能力分层患者的严重程度和预测的结果是有限的,进一步损害照顾这些病人。我们的数据表明,NRG-1-HER2通路被激活患者阿里和表明NRG-1浓度可能用作炎症和疾病严重程度的标志。最后,NRG-1水平升高可能作为指示使用疗法针对sheddase (ADAM17)受体的配体(NRG-1)或(HER2)患者的阿里。gydF4y2Ba
脚注gydF4y2Ba
社论评论看gydF4y2Ba259页gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
支持声明gydF4y2Ba
这项工作是由国立卫生研究院和弗吉尼亚州HL075422绩效奖(授予J.A. Kern),和NIH K08 HL086668(授予J.H.芬尼根说)他是。gydF4y2Ba
感兴趣的语句gydF4y2Ba
没有宣布。gydF4y2Ba
- 收到了gydF4y2Ba2012年1月9日。gydF4y2Ba
- 接受gydF4y2Ba5月4日,2012年。gydF4y2Ba
- ©2013人队gydF4y2Ba
引用gydF4y2Ba
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