文摘
肺动脉平滑肌细胞的过度增殖(PA-SMCs)和血管周的炎症导致肺动脉高血压(PAH)进展,但是他们没有特别的目标当前的疗法。因为瘦素(Ob)及其主要受体ObR-b导致系统性血管细胞增殖和炎症,我们质疑针对Ob / ObR-b轴将是一个有效的抗增殖和抗炎策略对多环芳烃。
在特发性肺动脉高压(iPAH),使用人类肺组织和原代细胞培养(早期段落≤5),我们证明肺动脉内皮细胞(P-ECs)产生Ob, PA-SMCs ObR-b过表达。此外,我们获得的证据表明,人类PA-SMCs Ob增强扩散在体外并增加右心室收缩压Ob-treated小鼠慢性低氧诱导的肺动脉高压(PH)模型。使用人体细胞,我们还表明,Ob导致单核细胞活化和细胞粘附分子表达水平增加P-ECs。我们还发现Ob / ObR-b轴有助于PH敏感性通过ObR-deficient老鼠,这显示那么严重低氧诱导的PH值(肺血液动力学、动脉muscularisation PA-SMC增殖和血管周的炎症)。重要的是,我们将演示两种治疗方法的疗效使用二氯醋酸可溶性Ob缓冲器和低氧诱导的PH值。
我们这里展示Ob / ObR-b轴可能代表anti-proliferative和抗炎PAH的目标。
文摘
针对Ob / ObR-b轴代表的一个重要工具anti-proliferative PH值和抗炎策略http://ow.ly/I00jh
介绍
肺血管重塑的肺动脉高血压(PAH)部分原因是由肺动脉平滑肌细胞过度增殖(PA-SMCs)和血管周围炎性浸润,并代表平均肺动脉压(PAP)的原因增加导致进步的PAH患者功能下降。此外,在渗透肺血管壁的炎症细胞,单核细胞/巨噬细胞系的细胞最近明确确定为关键免疫细胞促进肺血管重塑PAH (1,2]。旁边的这些知识,调解PA-SMC扩散的机制和风险因素和单核细胞/巨噬细胞激活和积累是不完全理解。治疗方法逆转肺血管重塑的多环芳烃,直接寻址机制参与PA-SMC扩散和肺血管周的渗透细胞单核/巨噬细胞系的没有,到目前为止,被确认和转化为临床实践。批准PAH疗法是弱anti-proliferative和抗炎剂,尽管目前可用的医疗进步,中位数生存对患有特发性肺动脉高压(iPAH)后诊断是2.8年,仍不可接受(3]。
最近的调查提供了明确的证据表明,瘦素(Ob),低氧诱导因子(HIF)端依赖基因,及其主要受体ObR-b导致系统性血管重塑,尤其是在心血管疾病,作为系统性血管smc增殖和迁移的因素,作为一个强有力的免疫调制剂对血管壁炎症细胞浸润(4- - - - - -7]。事实上,Ob / ObR-b轴增强和加速动脉粥样硬化通过各种机制,包括刺激血管smc增殖,内层的单核细胞招聘、巨噬细胞向泡沫细胞转化,进一步proatherogenic分泌细胞因子(8]。虽然我们知道iPAH患者循环Ob水平增加,可能在疾病中发挥作用生理病理学(7,9- - - - - -11),Ob / ObR-b轴的平移相关性肺血管增殖和血管周的单核/巨噬细胞系的细胞积累尚不清楚。
因此,我们假定Ob / ObR-b轴可能导致多环芳烃开发和/或发展,我们质疑:1)Ob和ObR-b关键贡献者肺血管重塑和血管周的单核/巨噬细胞系的细胞积累与人类和实验相关肺动脉高压(PH);和2)Ob / ObR-b信号抑制剂将对多环芳烃是一种有效的治疗策略。综上所述,我们的研究结果提供,第一次,一个框架为Ob-based干涉PAH和识别分子与可能的治疗潜在的毁灭性的疾病。
方法
本研究经当地伦理委员会批准(CPP第七巴黎,巴黎,法国)和所有病人签署书面知情同意。动物研究是行政委员会批准的动物保健大学因为(法国巴黎)。
主题
从患者血液样本收集iPAH在通常的随访和对照组(表1)。入选标准> 18岁和PAH诊断证实了右心catheterisation临床和血液动力学的稳定状态在过去3个月。排除标准是一种遗传的多环芳烃,糖尿病和代谢综合征。存储在注册中心的特点在诊断和随访的法国与法国生物伦理学PH值的网络协议的法律(委员会国家de l 'Informatique et des自由)。
为原位和在体外研究肺标本得到肺移植的时候从iPAH患者或从患者获得没有任何证据的肺血管疾病接受了局部的肺癌肺叶或肺切除术与正常组织收集距离肿瘤(玛丽Lannelongue医院,Le Plessis-Robinson法国)(表2)。
分离、培养和治疗人类肺动脉内皮细胞,PA-SMCs和外周血单核细胞
人类肺动脉内皮细胞(P-ECs)和PA-SMCs从远端肺动脉分离和培养如前所述12- - - - - -14]。细胞(早期段落≤5)被放置在无血清培养基24 h和暴露dimethyloxaloylglycine (DMOG, 0.25毫米)(恩佐生命科学、维勒班、法国),二氯醋酸(DCA, 5毫米)(Sigma-Aldrich,里昂,法国),和重组Ob(10和100 ng·毫升−1)(研发系统、里尔、法国)24 h。为在体外Ob治疗,生理剂量(10 ng·毫升−1ng)和十倍(100毫升−1)被使用,基于文献[15- - - - - -17]。扩散是由5-bromo-2-deoxyuridine评估(BrdU)公司12]。
血液撤军后,外周血单核细胞(PBMCs)对照组被标准聚蔗糖梯度离心新鲜孤立。细胞培养在媒体RPMI 1%的胎牛血清和重组Ob(10或100 ng·毫升−1为24小时)。
动物模型和血液动力学的测量
为在活的有机体内研究中,啮齿动物暴露在normoxia或者3周的缺氧(吸入氧气分数10%)。雄性C57BL / 6 j小鼠(5周)(Janvier实验室、圣Berthevin、法国)被分为六组:两个未经治疗的对照组和暴露于normoxia或缺氧;两组每日处理腹腔内注射重组Ob从−2天21天(3μg·g−1最初的体重的18]),暴露于normoxia或缺氧;每天两组处理i.p。注射可溶性重组蛋白质的预算责任办公室(ObR: Fc)(研发系统)从14至21天(100天μg·鼠标−1(19]),暴露于normoxia或慢性缺氧。Sprague-Dawley雄性老鼠(4周)(查尔斯河实验室、Larberesle、法国)分成四组:两个对照组(饮用水中车辆)暴露于normoxia或缺氧;两组治疗DCA从每天14 - 21 (1 g·L−1在饮用水)暴露于normoxia或慢性缺氧。两组男性Zucker糖尿病脂肪(二台)转基因老鼠(ZDF表示/ Lepr fa / fa)(查尔斯河实验室),4周,和2组年龄控制老鼠(ZDF表示/ LeprCrl)(查尔斯河实验室)暴露在normoxia或慢性缺氧。我们还测试了老鼠的野百合碱模型PH值,并没有具体研究Ob / ObR-b轴(图S3)。
动物是anesthetised异氟烷和血液动力学的参数测量如前所述在老鼠(右心室收缩压(RVSP)) (20.)在大鼠(平均行动党和肺血管阻力(PVR)) (12]。然后,血液被PBMC分析和胸腔打开,左肺立即删除并冻结。正确的与缓冲福尔马林固定膨胀状态。右心室肥大(RVH)富尔顿指数和肌层血管的百分比测定如前所述[12]。
定量实时聚合酶链反应
总RNA从冷冻肺孤立使用试剂盒(表达载体、圣奥宾、法国)和RNeasy迷你包(试剂盒、Courtaboeuf、法国)。总RNA(2µg)使用上标reverse-transcribed II(表达载体)制造商的指示。基因表达水平的办公室,Ki67,细胞周期蛋白D1,细胞粘附分子(ICAM) 1,血管细胞粘附分子1 (VCAM)和E-selectin量化使用添加Assays-on-Demand TaqMan底漆/探针集(应用生物系统公司,圣奥宾,法国)和正常使用比较循环阈值18 s核糖体RNA (Ct)方法(2-ΔΔCt) [13,21,22]。
免疫印迹、ELISA和免疫染色
细胞/组织在PBS单一化和用含有蛋白酶和磷酸酶抑制剂和30µg蛋白质被用来检测ObR-b(研发系统和圣克鲁斯生物技术(Le Perray-en-Yvelines、法国)人类和啮齿动物,分别)和β-actin (Sigma-Aldrich)如前所述21]。浓度在条件Ob媒体P-ECs评价Quantikine(研发系统)根据制造商的指示。免疫组织化学和immunocytofluorescent染色α-smooth肌细胞肌动蛋白抗体(α-SMA)和增殖细胞核抗原(PCNA) (Dako, Les乌里,法国),Ob,平滑肌(SM) 22日Tie2、CD68、F4/80和CD206(圣克鲁斯生物技术),ObR-b(研发系统),或凝集素蛋白(Sigma-Aldrich)进行如前所述[21]。图片使用LSM700共焦显微镜拍摄然后禅宗软件(蔡司、Marly-le-Roi、法国)。
流式细胞术分析
PBMCs iPAH病人控制和啮齿动物,被荧光标记抗体fluorophore-conjugated单克隆anti-CD14后,anti-CD25和anti-CD11b(正、Rungis快递、法国),anti-CD4 (MiltenyiBiotec,巴黎,法国),和anti-ObR-b(研发系统),如前所述[7]。流式细胞仪门是如前所述[7]。流式细胞仪数据获得流式细胞分析仪(MACSQuant Miltenyi研究)和分析FlowJo软件程序(树星公司亚什兰,美国)。
统计分析
结果表示为±手段扫描电镜。p < 0.05水平的统计学意义是用于分析。使用非参数统计显著性检验与Bonferroni Mann-Whitney测试或双向方差分析事后测试。所有统计程序进行了使用GraphPad Prism 5.0版本(GraphPad软件公司。圣地亚哥、钙、美国)。
结果
Upregulation Ob / ObR-b轴iPAH肺血管的病人
确定Ob / ObR-b轴局部调节iPAH肺血管的病人,我们co-immunostained人类肺组织从10 iPAH患者和10控制抗体Ob或者ObR-b,连同α-SMC-specific表面标记SM22和血管内皮细胞的凝集素染色。
一方面,我们的共焦显微镜分析显示一个强烈Ob染色在远端肺动脉内皮iPAH患者相比控制标本(图1a)。有趣的是,这些原位观察被复制在体外在人类刚P-ECs孤立。主要通道(≤5)早期文化的P-ECs iPAH (n = 5例)表现出显著增加Ob生产相比,控制细胞(n = 5科目)以ELISA法,增加了四倍的Ob内容在媒体P-EC条件(图1b)。值得注意的是,我们还可以排除PA-SMCs作为另一个当地的Ob iPAH的来源原位和在体外分析(图S1A)。
另一方面,通过共焦显微分析和双标签ObR-b SM22,我们发现一个强大的原位ObR-b染色在PA-SMCs iPAH患者,而弱在控制PA-SMCs染色(图1c),我们也确认了原位的观察,在体外早期研究主要通道(≤5)文化的PA-SMCs iPAH和控制;我们发现增加ObR-b表达PA-SMCs iPAH患者控制PA-SMCs相比,信使rna和蛋白质水平(图1d)。这些发现也被复制在活的有机体内,老鼠开发PH值显示ObR-b蛋白水平增加肺控件(相比图1e)。值得注意的是,我们发现ObR-b P-ECs弱表达,与没有区别ObR-b P-ECs之间表达iPAH病人和控制(图印地)。
因为我们的原位和在体外数据显示,P-ECs代表异常肺iPAH Ob的来源,我们后续执行在体外研究,以测试是否Ob可以通过缺氧诱导条件。事实上,缺氧是一种强烈的诱导物Ob表达由于缺氧反应元素的存在Ob基因启动子,可以招募HIF-1α[23,24]。因此,我们首先治疗早期人类新的段落(≤5)文化的孤立P-ECs DMOG对照组,细胞渗透性prolyl-4-hydroxylase抑制剂HIF-1α移植低氧诱导稳定在体外通过抑制prolyl hydroxylase-dependent HIF-1α退化(图1 f)[25]。DMOG-treated P-ECs产生高水平的Ob和未经处理的细胞相比,确认可以诱导Ob HIF-1αP-ECs (图1g)。因为新兴证据表明,激活线粒体信号可以影响HIF-1α稳定,我们测试了丙酮酸脱氢酶激酶抑制剂的功效DCA [26,27)(图1f) endothelial-derived Ob生产正常化使用人类P-ECs主要来源于控制肺标本。我们测试了HIF-1α蛋白表达在体外,对控制P-ECs DMOG和DCA。我们发现DMOG-treated HIF-1α增加细胞和正常当DCA添加(图1g),一致,我们发现DMOG-induced Ob内容增加P-EC条件媒体被DCA完全抑制在体外(图1h)。此外,我们发现DCA治疗废除Ob内容在媒体条件iPAH P-ECs (图1我)。这些结果是按照之前的数据显示,有一个异常内皮激活HIF-1αiPAH肺,控制细胞相比,在常氧和缺氧条件下(28]。此外,它已被证明,HIF-1α-deficient老鼠和HIF-2α-deficient老鼠都是防止慢性缺氧的PH值,表明HIF-1αHIF-2α可能发挥关键的致病作用在PH值(29日- - - - - -31日]。
iPAH,总之,我们的数据强调Ob是功能失调的P-ECs产生的异常,这可以部分解释为HIF-1α持续稳定。这种现象甚至更重要的是考虑到其受体在iPAH PA-SMCs中ObR-b是过表达的。
Ob / ObR-b轴导致过度PA-SMCs iPAH扩散
转基因小鼠缺乏Ob (ob/obObR)或其受体(db/db)是已知免受neointima形成血管损伤,而外生Ob管理促进实验性损伤形成针对受体的方式(6,8,32,33]。基于这些知识,我们测试了Ob / ObR-b轴是否可以扮演类似的角色在iPAH肺血管重塑。我们第一次调查Ob的增殖能力在体外研究使用的主要人类PA-SMCs隔离肺组织从iPAH获得病人和控制。通过BrdU公司,我们证明了PA-SMCs iPAH患者激增更针对外生Ob相比控制PA-SMCs (图2一个)。
为了进一步研究Ob / ObR-b轴PA-SMC扩散的作用,我们受到老鼠与重组Ob每天注射,在慢性缺氧exposure-induced博士有趣的是,Ki67的低氧诱导超表达(图2 b)和细胞周期蛋白D1 (图2 c在Ob-treated)是更大的老鼠,以存在。我们的在体外和在活的有机体内数据表明,Ob / ObR-b轴诱发PA-SMC增殖,从而促进过度PA-SMC PAH的扩散。
Ob / ObR-b轴有助于iPAH异常激活单核细胞/巨噬细胞
现在最近的证据指出,慢性激活单核/巨噬细胞系的重要免疫细胞作为促进肺血管重塑的根源在PAH (2]。另一方面,众所周知,Ob影响巨噬细胞的行为(34]。因此,我们试图调查的贡献Ob / ObR-b轴这致病性的现象。我们第一次评估iPAH单核/巨噬细胞系的激活,使用新鲜PBMCs撤出iPAH患者和对照组。我们三贴上PBMCs单核细胞表型和激活标记,CD14和CD11b / CD25,分别通过流式细胞术分析它们。我们发现的一个过度激活标记CD11b和CD25 iPAH患者相比,控制,而两组受试者相同数量的CD14显示+单核细胞(图2d)。重要的是,我们发现,激活单核细胞过表达ObR-b iPAH患者与对照组相比,(图2Ob / h),暗示角色ObR-b轴在iPAH单核细胞活化。为了进一步验证这一假设,我们接触新鲜撤回控制PBMCs外生Ob在体外。24小时后我们发现,在体外未经处理的细胞相比,Ob-treated单核细胞激活,在剂量依赖性的方式(图2i (k)。
我们进行后续研究进一步调查的作用通过激活Ob / ObR-b轴在血管周围炎症细胞招聘实验中观察到的和人类的多环芳烃。我们接受主要人类P-ECs隔离肺组织从iPAH获得病人和控制外源性重组Ob 24 h。有趣的是,Ob-treated P-ECs显示增加ICAM-1的表情,VCAM-1 E-selectin,在mRNA水平,与未经处理的细胞(相比图2l-n)。
验证的相关性在体外观察,我们建立一个小鼠模型慢性激活Ob / ObR-b轴每日Ob管理在缺氧暴露3周(图3 gydF4y2Baa)。有趣的是,我们验证Ob-treated小鼠体重下降比未经处理的动物在常氧条件下,这是进一步降低缺氧后(图3 gydF4y2Bab)。通过使用该小鼠模型,我们也能够证明慢性Ob政府恶化严重慢性缺氧小鼠的PH值。的确,Ob-treated老鼠显示高肺血流动力学参数,所反映的增加了对心脏catheterisation (RVSP测量图3 c),而未经处理的小鼠3周后的缺氧。然而,在RVH没有变化,在小muscularisation肺动脉(图3 d- - - - - -f)和壁厚(图S2A)。有趣的是,慢性Ob注射增强PA-SMC扩散(图3 g和h)和血管周的巨噬细胞浸润(无花果3我和j在常氧条件下,S4)。重要的是,Ob注射提高低氧诱导单核细胞/巨噬细胞活化比未经处理的小鼠(图3 k),通过测量表面标记CD206表达式。
完全,我们的数据表明,在激活的Ob / ObR-b轴导致肺血管重塑的PH值,不仅促进PA-SMC扩散,而且血管周的巨噬细胞积累。
Ob / ObR-b轴提高慢性低氧诱导啮齿动物的PH敏感性
我们下一个调查Ob / ObR-b轴是否可以增加PH敏感性使用ZDF转基因老鼠缺乏预算责任办公室(ZDF表示/ Lepr fa / fa),然后把它们暴露于慢性缺氧或normoxia (图4和b)。
有趣的是,经过3周的慢性缺氧暴露,二台老鼠发达不太严重的疾病,与野生型相比,他们的同胞(ZDF表示/ LeprCrl),所反映的下降值的意思是人民行动党,PVR, RVH, muscularisation肺动脉和壁厚(图开通)相比,控制大鼠(图4c g)。此外,ZDF老鼠表现出降低PCNA的数量+细胞(图4h和i)和CD68+细胞(图4j和k),与野生型相比,他们控制。总的来说,这些发现表明,Ob / ObR-b轴有助于慢性低氧诱导PH敏感性。
针对Ob / ObR轴预防慢性低氧诱导PH进展
调查的功效Ob / ObR-b轴抑制作为多环芳烃的潜在的治疗目标治疗,临床前研究使用两种不同的策略对酸碱发展在低氧诱导啮齿动物。
首先,我们的实验是测试策略在体外功效的可溶性重组ObR蛋白质(ObR: Fc)中和Ob / ObR-b轴使用主要的人类细胞。我们暴露控制PA-SMCs的条件媒体iPAH P-ECs, ObR治疗与否:Fc。通过测量BrdU合并,我们发现PA-SMCs暴露在办公室:Fc-treated P-EC条件媒体数量少于PA-SMCs暴露在未经处理的P-EC条件媒体(图5a)。根据这些观测,然后我们长期注射ObR: Fc PH值在我们的慢性低氧诱导小鼠模型(图5b)。与未经处理的小鼠相比,我们有趣的是发现长期注射ObR: Fc在老鼠身上之后,增加RVSP值较低,部分或全部的百分比肌远端血管(图5氟)和壁厚(图S2C)。符合这些数据,我们发现,ObR: Fc治疗显著降低PCNA的数量+细胞在慢性低氧诱导的PH值,与汽车相比治疗(图5g和h)。此外,减少血管周的巨噬细胞积累是衡量原位F4/80染色(无花果。5我和j和S5),比未经处理的老鼠。重要的是,ObR: Fc治疗减少低氧诱导巨噬细胞激活,以CD206表达式(图5k)。
我们的第二个治疗策略是间接调节Ob /使用DCA ObR-b轴。我们首先研究了缺氧是否会触发P-EC-derived Ob合成在活的有机体内和DCA能否抑制这种低氧诱导效应。一直与我们在体外观察(图1g),我们在活的有机体内数据表明,慢性缺氧大鼠暴露于显示更大的Ob P-ECs内容,与常氧大鼠相比,最重要的是,DCA治疗废除了endothelial-derived Ob缺氧引起的生产(图6)。然后,我们因此DCA治疗的效果进行了测试在活的有机体内(图6b),发现DCA-treated老鼠显示不太严重的疾病评估低意味着人民行动党,PVR和RVH (图6汉英)以及低比例的肌远端肺动脉(图6f和g)和壁厚(图S2D),而未经处理的老鼠。此外,DCA治疗也减少了PA-SMC增殖,通过测量PCNA染色(图6h和i)、巨噬细胞和血管周的积累,衡量CD68表达式(图6j和k),而未经处理的老鼠。
完全,我们的数据清楚地展示两种治疗方法的疗效目标Ob / ObR-b轴在慢性低氧诱导的PH值,使用一个Ob缓冲器ObR: Fc和DCA。
讨论
我们在这里展示,第一次异常激活的Ob / ObR-b轴在肺血管壁及其对磁化率的贡献和发展chronic-hypoxia诱导博士结合原位,在体外和在活的有机体内相比,实验中,我们证明在iPAH控制:1)人类和啮齿动物P-ECs产生Ob,这可以部分解释为HIF-sustained稳定;2)人类和啮齿动物PA-SMCs外生Ob ObR-b过表达和增殖过度反应;和3)Ob / ObR-b轴驱动器血管周的单核/巨噬细胞系的细胞积累:激活循环单核细胞,导致血管周的巨噬细胞增加,诱导ICAM-1, VCAM-1, E-selectin P-ECs超表达。符合我们的发现在人类,我们证明长期注射重组Ob会加重PH值严重慢性低氧诱导的小鼠模型博士我们也证明Ob / ObR-b轴PH敏感性增加,使用ObR-deficient老鼠显示不太严重的疾病慢性缺氧暴露后,评估肺血液动力学、心输出量、RVH,肺动脉muscularisation, SMC增殖和血管周的单核/巨噬细胞系的细胞积累。重要的是,我们还证明两种治疗方法的疗效目标Ob / ObR-b轴在PH值:可溶性Ob缓冲器和DCA。我们的研究证明了Ob / ObR-b轴在PH发病机制中的作用。
肺血管的结构改造的原因是增加意味着PAP患者的多环芳烃。而过度增殖PA-SMCs和积累/激活血管周的单核细胞/巨噬细胞是这个过程的主要贡献者,调解这些影响的机制不完全理解(35]。这里,我们显示不正常P-ECs代表异常Ob的当地来源,这反过来,行为在不同的细胞类型通过自分泌和旁分泌作用:P-ECs PA-SMCs和单核/巨噬细胞系的细胞,分别。事实上,人类获得的数据原位和在体外,以及在活的有机体内实验中,我们在这里展示,Ob / ObR-b轴能够诱导PA-SMC增殖,血管周的单核/巨噬细胞系的细胞积累和有助于P-EC炎性表型,这代表着多环芳烃(肺血管重塑的主要贡献者36,37]。与这些研究结果一致,我们表明,慢性Ob注射小鼠的PH值严重恶化。Ob的缺席对血管重塑的影响可能与肺血管反应性的改变,由于内皮功能障碍(9]。
尽管确切的作用增加了多环芳烃的全身和肺血管周的炎症发病机制仍不清楚,越来越多的证据表明,血管周围炎症的程度与疾病严重程度,特别是肺血管壁重塑和厚度(38,39]。慢性低氧诱导的PH值模型,使用新生儿F掉et al。[40]发现肺外膜改造是由于单核/巨噬细胞系的细胞表达的健壮的招聘α-SMA可以产生胶原蛋白。最近,Vergadiet al。[2]提供的证据表明,PH值不仅与慢性低氧诱导肺泡巨噬细胞相关发展在活的有机体内,但缺氧肺泡巨噬细胞还能诱发PA-SMC扩散在体外。相反,PA-SMCs已知释放多种炎性因子包括细胞因子,趋化因子,生长因子在哮喘41和急性肺部炎症42]。总的来说,这些发现表明PA-SMC增殖和血管周的单核/巨噬细胞系的细胞积累可能不能代表两个不同的组件的肺血管重塑,而是两个密切相互依赖的过程。不过,关键问题仍未得到解答关于启动触发这些现象。在此,我们证明针对激活Ob / ObR-b轴代表一个潜在的创新的治疗方法在多环芳烃,表演不仅在平滑肌增生还在血管周的单核/巨噬细胞系的细胞积累。旁边的这些研究结果,还需要进一步的研究来更好的定义的确切机制单核/巨噬细胞系的细胞可以诱导PA-SMC核扩散和PA-SMCs能否有助于血管周的单核/巨噬细胞系的细胞招聘、附着力和渗透。
大量临床研究支持的有利影响DCA对实验PH值,其中包括慢性缺氧,monocrotaline-induced PH值(28,43- - - - - -46]。DCA已知目标细胞糖酵解/葡萄糖氧化率和将细胞代谢从无氧糖酵解氧化磷酸化,通过丙酮酸脱氢酶激酶抑制,导致HIF-1α退化(27]。尽管HIF-1αhypoxia-dependent响应的主监管机构发现,越来越多的证据表明HIF-1α也与炎症密切相关(25,47]。特别是,它已经表明,监管HIF-1α之间存在的交互的主要炎性转录因子之一,核factor-κB [48,49]。使用条件HIF-1α不足的老鼠,它也表明,HIF-1α先天反应的调节中起着积极主动的作用,诱导巨噬细胞生存和/或分化(50,51]。在我们的研究中,我们将演示一个临床相关有益的DCA治疗实验性的PH值的影响,通过作用于PA-SMC增殖和血管周的单核/巨噬细胞系的细胞积累。除了抑制HIF稳定,DCA也有广泛的影响,包括活性氧的生产和细胞凋亡/增殖率的变化没有明显的毒性。因此,DCA的有益作用是多因素疾病。然而,Ob / ObR-b出现明显之间的接口在多环芳烃代谢转移和肺血管重塑。
总之,总之,我们的研究结果证明多环芳烃发病的新机制,即异常激活的Ob / ObR-b轴在肺血管壁,造成PH敏感性和进展。此外,我们表明,抑制Ob / ObR-b轴代表相关的治疗策略逆转肺血管重塑中PAH针对PA-SMC增殖和血管周的单核/巨噬细胞系的细胞积累。
确认
作者感谢Yuichi Tamura (INSERM UMR_S 999年,中心Chirurgical玛丽•Lannelongue LabEx LERMIT, Le Plessis-Robinson将进医学院学习,大学,因为-比塞特尔勒,法国),罗兰乔帆(AP-HP、服务de Pneumologie东华大学胸腔创新,友谊医院Bicetre,比塞特尔勒,法国)和詹妮弗Bordenave (INSERM UMR_S 999年,中心Chirurgical玛丽•Lannelongue LabEx LERMIT, Le Plessis-Robinson将进医学院学习,大学,因为-比塞特尔勒,法国)对他们的帮助。
脚注
可以从本文的补充材料www.qdcxjkg.com
支持声明:本研究支持由法国国家健康和医学研究所(INSERM,法国国家研究机构:格兰特ANR_12_JSV1_0004_01)、葛兰素史克(PAH拨款2013),辉瑞(IIR格兰特WI182054)。为这篇文章一直存放在资助信息FundRef
利益冲突:披露可以找到与本文的在线版本www.qdcxjkg.com
- 收到了2014年10月17日。
- 接受2015年1月19日。
- 版权©2015人队