文摘
肥胖是一种常见的合并症为肺动脉高血压(PAH)。此外,雌激素及其代谢物PAH的发展的危险因素。内脏脂肪组织(增值税)是一个主要的雌激素的生产;然而,obesity-induced雌激素的合成和代谢变化的影响多环芳烃的发展尚不清楚。为了解决这个问题,我们调查的影响,抑制雌激素的合成和代谢对肺动脉高压的发展在男性和女性的肥胖老鼠。
我们减少内源性雌激素leptin-deficient (ob/ob)小鼠雌激素抑制剂阿那曲唑(ANA)和肺动脉高压的发展,确定了影响血浆雌二醇和尿16α-hydroxyestrone(16αohe1)。雌激素代谢通过细胞色素P450 1 b1 (CYP1B1)抑制了2,2′,4,6′-tetramethoxystilbene (TMS)。
ob/ob小鼠自发发展肺动脉高压、肺血管重塑和肺活性氧产量增加;这些影响被安娜减毒。在肥胖雄性老鼠雌二醇水平下降;然而,增值税CYP1B1和16αohe1水平增加。经颅磁刺激在男性也减毒肺动脉高压ob/ob老鼠。Intra-thoracic脂肪从ob/ob老鼠和增值税条件媒体产生16αohe1可以导致氧化应激,减毒安娜和经颅磁刺激的影响。
肥胖会引起肺动脉高压和雌激素代谢改变,导致增加生产16αohe1从增值税,导致氧化应激。现在雌激素抑制剂在临床试验中多环芳烃。这个研究转化的后果,因为它表明雌激素抑制剂治疗肥胖患者多环芳烃可能尤其有益。
文摘
肥胖是PAH患者的危险因素。这项研究表明,这是由于脂肪组织的雌激素代谢发生改变。抑制雌激素的生产或代谢可能肥胖PAH患者受益。http://ow.ly/2zW830of1fG
介绍
肥胖是一种常见独立的心血管风险因素和是肺动脉高血压的发病率(PAH) [1]。揭示(注册表来评估疾病早期和长期PAH管理)注册中心,32%的PAH患者分为肥胖在招生2]。这个注册表报告更高的个体超重和肥胖的患病率与多环芳烃的特发性形式(1]。肥胖引起的肺动脉高压发生的肺换气不足和缺氧由于多余的脂肪(机械负荷的增加3]。然而,代谢和炎症在肥胖发生的骚乱可能在多环芳烃的发展发挥作用。
脂肪组织表达高水平的oestrogen-synthesising芳香化酶的酶和肥胖可以成为生产雌激素的主要来源(4]。有趣的是,脂肪组织表达高水平的细胞色素P450 1 b1 (CYP1B1),参与雌激素代谢酶(5]。CYP1B1扮演了一个角色在临床多环芳烃,CYP1B1 PAH患者的肺动脉病变中高度表达(6- - - - - -8]。此外,CYP1B1单核苷酸多态性已确定有重要的协会与右心室射血分数和雌激素代谢(9]。这些是紧密连锁不平衡的单核苷酸多态性与肺动脉高压和肿瘤形成9]。
雌激素代谢物16α-hydroxyestrone(16αohe1)组成通过CYP1B1并与多环芳烃。16αohe1是一个强有力的肺动脉平滑肌细胞分裂素(PASMCs),代理在活性氧(ROS)与小端依赖的方式影响体循环的平滑肌细胞(10]。此外,当管理的老鼠,16αohe1导致肺动脉高压的发展表型(8]。
越来越多的证据表明,内生雌激素及其代谢物在PAH的发展中发挥作用。高雌二醇(E2)和低dehydroepiandrosterone-sulfate(硫酸脱氢表雄酮(dhea - s)水平已确定的风险因素多环芳烃在男性。最近,高E2和低硫酸脱氢表雄酮(dhea - s水平也与多环芳烃在绝经后女性的风险和严重程度11]。临床显示,E2与多环芳烃的6分钟步行试验的距离和反向关联在男性和绝经后的女性12]。此外,阿那曲唑6分钟步行试验的距离(ANA)改善了小规模临床试验的绝经后女性和男性PAH患者(13]。
我们的假设是,肥胖可能引起雌激素代谢的变化,而这可以扮演一个角色在肺动脉高压的发展肥胖的男性和女性。描述肥胖对内源性雌激素的影响,及其对多环芳烃的贡献,芳香化酶抑制剂的影响,安娜和CYP1B1抑制剂,2,2′,4,6′-tetramethoxystilbene (TMS),在肥胖的老鼠进行了研究。我们专注于leptin-deficientob/ob鼠标也验证观察老鼠用高脂肪饮食喂养(HFD)。
材料和方法
详细描述中提供补充材料。
ob/ob老鼠
B6.V-Lepob/地蜡ob/ OlaHsd (ob/ob)小鼠年龄在6 - 10周,精益的同胞(B6.V -(精益)/ OlaHsd)获得Envigo(英国亨廷顿)。
HFD老鼠
C57BL / 6小鼠jolahsd年龄在6 - 8周大(Envigo)保持正常饮食或HFD(卡路里来自脂肪42%,蛋白质15%,碳水化合物43%;特殊的饮食服务,英国Witham) 20周。HFD老鼠上涨40%的体重比正常饮食控制(补充图S1)。
慢性缺氧研究
肺动脉高压的发展ob/ob和HFD老鼠达到14天缺氧如前所述[14]。老鼠服用芳香化酶抑制剂的安娜·(3毫克公斤−1·天−114天)或车辆(1%羧甲基纤维素)每日(腹腔)。老鼠住在常氧条件控制进行了研究。
药物抑制CYP1B1在男性ob/ob老鼠
男性ob/ob老鼠和精益的同胞被注射了经颅磁刺激,CYP1B1抑制剂3毫克公斤−1·天−1或车辆(4%乙醇),每天一次14天(i.p。)。
血液动力学的测量右心室
右心室收缩压(RVSP)和系统性动脉压测量使用pvr - 1045米勒pressure-conductance导管(米勒仪器,休斯顿,德克萨斯州,美国)。右心室肥大(RVH)评估如前所述[14]。
测量E2、硫酸脱氢表雄酮(dhea - s、睾酮和16αohe1
E2、硫酸脱氢表雄酮(dhea - s、睾酮和16αohe1水平ELISA测定中所描述的补充材料。
隔离和鼠标PASMCs文化
鼠标PASMCs (mPASMCs)从三阶肺动脉的男性精益和孤立ob/ob老鼠,通道2和5之间使用。
内脏脂肪组织的制备条件的媒体
与内脏脂肪组织细胞培养基培养(增值税;100 mg·毫升−1媒体)是从男性ob/ob小鼠在24小时37°C在安娜的存在与否或经颅磁刺激。增值税的媒体(VAT-CM)之前稀释使用。
评估细胞增殖
扩散是由女伯爵二世FL细胞计数器(生命技术、拉夫堡、英国)中所描述的补充材料。
免疫印迹
蛋白质免疫印迹的利益进行评估整个肺或mPASMC溶解产物中描述补充材料。
定量反向transcriptase-PCR
mRNA表达的定量评估反向transcriptase-PCR中描述补充材料。
Amplex红试验
过氧化氢(H2O2)评估mPASMC溶解产物使用Amplex红过氧化氢/过氧化物酶测定工具包(热费希尔科学、拉夫堡、英国)根据制造商的指示。
蛋白质酪氨酸磷酸酶氧化评估
短暂的、不可逆的氧化蛋白酪氨酸磷酸酶(中)进行免疫印迹使用氧化PTP抗体识别磺酸的半胱氨酸残基。
通过免疫荧光活性氧测定肺部分
ROS的免疫组织化学标记8-hydroxyguanosine (8-OHG)决定在整个肺部分如前所述10]。
数据分析
所有数据与平均数标准误差表示为的意思。数据分析使用单向或双向方差分析事后分析或未配对t检验(在适当和示图传说)使用棱镜版本5(美国GraphPad拉霍亚,CA)。被认为具有统计显著性p值< 0.05。
结果
肺动脉高压的抑制芳香化酶变弱参数在男性和女性的肥胖老鼠
增加RVSP在男性ob/ob老鼠在常氧条件下,而RVH保持不变(图2一个和b)。这增加RVSP颠倒了安娜(图2一个)。肺血管重塑的增加也在常氧观察到男性ob/ob老鼠,这是影响安娜治疗(图2 c和d)。安娜对低氧诱导RVSP变化没有影响,RVH精益雄性老鼠和肺血管重塑,但减毒诱导增加RVSP和血管重塑是男性ob/ob老鼠(图2一个- d)。
类似的结果在常氧观察女性ob/ob老鼠与男性相比。然而,与男性相比,安娜RVH的减少和肺血管重塑女性瘦老鼠,并有效地衰减RVSP, RVH和肺血管重塑的女性ob/ob老鼠(图2 e- h)。
没有显著的变化意味着系统性动脉压、左室舒张末压(LVEDP)或左心室重量+鼻中隔(LV + S)观察各组在雄性或雌性(补充图S3)。
进一步评估右心室功能、基因表达分析标记的心力衰竭和纤维化进行车辆,ANA-treatedob/ob老鼠。纤连蛋白、结缔组织生长因子、心房利钠肽和脑利钠肽表达水平进行了评估。右心室重塑的变化也由Picrosirius红染色。没有明显的右心室重塑和基因表达的变化观察(补充图S4)。
HFD 20周后,雄性老鼠显示无显著增加RVSP或肺血管重塑,虽然观察RVH的增加(补充图S5a-d)。在缺氧条件下,男性HFD老鼠发达更比正常饮食(肺血管重塑补充图S5d)。安娜衰减低氧诱导增加RVSP RVH总局和肺血管重塑男性HFD老鼠(补充图S5a-d)。同样,雌性老鼠显示无显著变化RVSP或HFD后肺血管重塑;然而,RVH显著增加。安娜减少RVSP女性(补充图S5e-h)。在平均系统性动脉压力没有差异,LV + S重量或LVEDP (补充图S6观察各组在雄性或雌性。
这两个ob/ob和HFD老鼠体重增加与精益控制。安娜在缺氧男性治疗减少体重ob/ob老鼠和女性常氧ob/ob只老鼠(补充图S7)。
在ob/ob女性,没有观察到等离子体E2的变化之间的组(图3 b)。同样,等离子体在HFD E2降低男性与精益控制和E2水平受缺氧影响单独或安娜治疗(补充图S8a)。HFD和缺氧对等离子体E2水平女性有任何影响。然而,在女性HFD缺氧小鼠,安娜治疗减少了循环E2水平(补充图S8b)。
子宫重量的瘦老鼠和E2水平建议他们在发情,和E2浓度观察比较与先前发现雌性老鼠(0.3∼-10 pg·毫升−1)[15,16]。此外,ob/ob女性不孕和子宫重量明显降低了(补充图S9a)。HFD子宫重量是不受影响,但减少了安娜(补充图S9b)。
睾丸激素水平也评估男性ob/ob和HFD老鼠。睾酮之间的观察没有显著差异ob/ob和HFD学习小组(补充图S9c和d)。
我们无法检测血浆样本中硫酸脱氢表雄酮(dhea - s的老鼠研究(数据没有显示)。
CYP1B1和16αohe1增加肥胖雄性老鼠
CYP1B1表达升高增值税从男性和女性ob/ob老鼠与精益控制(图3 c和d)。按照这个观察,尿16αohe1男性常氧含量升高ob/ob老鼠(图4一)。男性学习小组,缺氧导致尿增加16αohe1瘦的动物被安娜治疗的影响。然而,安娜并增加尿16αohe1缺氧ob/ob男性(图4一)。没有观测到16αohe1女性ob/ob在常氧条件下动物。女性研究缺氧组,缺氧导致增加16αohe1安娜治疗这是减毒的瘦老鼠,而安娜16αohe1增强ob/ob老鼠(图4 b)。
从男性HFD CYP1B1表达增加增值税;然而,没有类似的增加是明显HFD雌性老鼠(补充图S10a和b)。类似于常氧ob/ob男性,HFD导致尿增加16αohe1水平。在HFD研究的情况下,只有精益雄性动物显示缺氧16αohe1水平的增加。低氧诱导增加16αohe1减毒在男性HFD动物和安娜治疗没有影响(补充图S10c)。16日没有缺氧或安娜治疗效果观察αohe1女手臂的HFD研究(补充图S10d)。
16αohe1通常被称为2 ohe1 16αohe1的比率。然而,2 ohe1往往非常低的水平在小鼠血浆和我们不能一直使用ELISA方法检测到它的存在。因此,结果表示为16αohe1浓度。
药物抑制CYP1B1变弱的肺动脉高压表型男性ob/ob老鼠
鉴于CYP1B1显著增加,其产品16αohe1在肥胖雄性老鼠,我们评估了经颅磁刺激的影响,选择性CYP1B1抑制剂,在肺动脉高压表型观察到男性ob/ob老鼠。经颅磁刺激治疗显著减毒RVSP升高和肺血管重塑中观察到男性ob/ob老鼠(图4 c和d)。
大量的intra-thoracic脂肪被观察到ob/ob老鼠的研究,但这是在精益动物不太明显。从男性Intra-thoracic脂肪ob/ob老鼠被发现含有0.94±0.19 ng·毫升−116αohe1 (n = 5)。
VAT-CM mPASMC扩散和氧化应激的影响
调查CYP1B1在男性的角色ob/ob进一步小鼠,细胞培养基与增值税从雄性孵化ob/ob老鼠。分析VAT-CM透露它包含的E2水平明显降低与控制媒体(图5一个)。安娜预处理没有影响,但经颅磁刺激导致显著增加E2水平(图5一个)。相反,VAT-CM包含的水平明显高于16αohe1相比,控制媒体,这是减毒安娜和经颅磁刺激(图5 b)。的刺激mPASMCs VAT-CM增加增殖细胞核抗原(PCNA)表达(图5 c),导致细胞增殖。的增殖效应VAT-CM准备在安娜面前或经颅磁刺激水平显著降低(图5 d)。
VAT-CM诱导扩散相似程度上16αohe1这是由活性氧清除剂减毒,4-hydroxy-TEMPO (图6)。此外,VAT-CM诱导H2O2生产和不可逆氧化改性中,氧化应激的标记(图6 b和c)。mPASMCs独立于男性ob/ob老鼠显示PCNA水平上升比mPASMCs瘦老鼠(更增生性图7和b)。
安娜在小鼠肺obesity-induced氧化损伤的影响
ROS的免疫荧光标记8-OHG决心在整个肺的男性ob/ob老鼠。在常氧增加8-OHG免疫荧光观察男性ob/ob老鼠和这是减毒的安娜(图8)。低氧诱导增加8-OHG染色被安娜瘦老鼠不受影响。在缺氧的男性ob/ob老鼠,8-OHG染色增加与精益缺氧男性和这是由安娜治疗(减毒图8)。也观察到类似的结果常氧ob/ob女性,但没有差异缺氧雌性老鼠有或没有安娜测定(图8 b)。
抗氧化酶的变化也被评估在肺部ob/ob老鼠和超氧化物歧化酶1中无显著差异(SOD1)或过氧化氢酶观察两组之间在雄性动物(补充图S11a和b)。NADPH氧化酶4,产生细胞内超氧化物,显著增加男性的肺组织缺氧ob/ob老鼠与常氧,这是减毒安娜(补充图S11c)。在女性肺癌、安娜治疗导致增加SOD1在常氧条件下和过氧化氢酶表达在缺氧条件下(补充图S11d和e)。抗氧化酶在增值税也评估;SOD1被发现在下降ob/ob老鼠和这是不变的安娜(补充图S12a)。过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶表达水平持平ob/ob增值税和不受安娜(补充图S12b和c)
讨论
脂肪组织代谢活跃,表达高水平的芳香化酶在其基质分数,和是一个已知的雌激素来源生产(4]。鉴于32%的PAH患者可能是肥胖,据透露注册表(1),目前的临床前研究旨在评估肥胖的潜在影响雌激素代谢的变化和实验性肺动脉高压的发病机制在男性和女性。
我们的研究结果提供了新颖的机械的见解流行病学观察连接肺动脉高血压和肥胖。我们研究了许多变量在活的有机体内,结果是复杂的。总之,然而,主要的研究结果,在常氧女性ob/ob老鼠,E2-dependent RVSP增加。芳香化酶表达在增值税4-5-fold精益女性高于男性与肥胖,不进一步增加。等离子体的E2水平还高出三倍比男性和女性受到肥胖的影响。尽管增值税CYP1B1这并没有导致任何损耗的E2升高血浆水平或尿16αohe1的变化。这表明CYP1B1活动不得开车obesity-induced RVSP在女性的变化。这是总结图9。在缺氧也有E2-dependent RVSP和血管重塑。
ob/ob雄性老鼠证明E2-dependent RVSP海拔,这是伴随着增加脂肪组织芳香化酶表达。然而,循环E2下降。因为CYP1B1表达增加增值税这表明可能有增加新陈代谢的E2和一致的增加有一个尿16αohe1。经颅磁刺激抑制CYP1B1也扭转了obesity-induced RVSP增加男性。这是总结图9。在缺氧也有E2-dependent RVSP和血管重塑。
在雄性老鼠肥胖可能是唯一由CYP1B1-induced E2新陈代谢我们关注ob/ob男性进一步研究这个问题。总之,我们表明,增值税从男性ob/ob老鼠将E2 16αohe1通过CYP1B1。这16个αohe1产生足够数量导致CYP1B1-dependent PASMCs扩散。这种扩散是最大的ob/ob老鼠和依赖ROS。在活的有机体内在男性,ROS肺生产ob/ob老鼠是依赖于内源性E2,低氧诱导活性氧。这是总结图9。
男性和女性ob/ob小鼠自发发展肺动脉高压,一个可以通过抑制芳香化酶减毒的效果,表明内源性雌激素的作用在这两个男性和女性的肥胖老鼠。这是符合人类的观察,身体质量指数上升时,死亡率也增加肺动脉收缩压在雄性和雌性17]。我们之前已经证明安娜只治疗是治疗女性缺氧啮齿动物和不是男性18]。这是由于女性PASMCs,独特的表型,内源性雌激素产生的芳香化酶在这些细胞容易使女性PASMCs扩散和肺动脉高压的发展18,19]。因此,安娜的能力减弱在雄性老鼠肥胖缺氧肺动脉高压,但没有观察到当前的研究表明,精益内源性雌激素参与肺动脉高压的发展在肥胖男性。这可能是由于obesity-mediated雌激素代谢的变化。男性,∼60%的循环直接来源于睾丸分泌雌二醇或睾丸雄激素转换和其余来自外围肾上腺雄激素转换(20.]。有人建议,芳香化酶不抑制睾丸相比脂肪和肌肉组织的第三代芳香化酶抑制剂如安娜(21]。因此,增加周边生产雌激素和代谢物在肥胖小鼠的治疗效果可能占芳香化酶抑制肥胖但不是苗条小鼠在这项研究中观察到。
之前的研究使用ob/ob老鼠关于肺动脉高压的发展产生冲突的结果。的ob/ob基因型被报道减弱诱导肺动脉高压是抑制癌细胞增殖PASMCs [22),而另一项研究表明,它概括的肺动脉高压的组织学特性(23]。因此我们选择进一步研究使用食源性肥胖对肺动脉高压的影响模型的肥胖老鼠HFD维护。之前报道,HFD本身并不引起肺动脉高压(24]。因此,我们研究的影响HFD在缺氧条件下对肺动脉高压的发展。在这种情况下,肥胖的男性和女性发展明显比瘦的男性肺血管重塑。安娜肺动脉高压的衰减参数在雄性和雌性,但似乎更有利于男性,肺动脉高压的指数衰减。在女性,安娜只减少RVSP,没有影响RVH和肺血管重塑。我们还证实,男性HFD肥胖老鼠有等离子E2下降16αohe1尿增加,增值税增加芳香化酶表达和CYP1B1 (补充图向)。这些发现支持两性异形的假说肺动脉高压的机制可能在肥胖强调由于男性雌激素代谢中观察到的明显变化。
作者承认的表型观察小鼠模型在这项研究中的应用是不像在其他严重缺氧模型。然而,与其他转基因小鼠模型,没有接触到缺氧,如泽特+老鼠(6),Smad-1+ /−老鼠(19)和骨形态形成蛋白受体2型(BMPR2) R899X老鼠25]。肺动脉高压的表型观察左侧不是由于心脏衰竭作为LV + S体重没有变化,LVEDP精益和之间或系统性动脉压力检测ob/ob老鼠。的确,它之前已经记录ob/ob维持正常小鼠系统性血压尽管显示严重肥胖(26]。此外,右心室重塑的标记没有显著差异观察性别或安娜治疗组之间。此外,安娜的能力减弱肺高血压肥胖雄性老鼠但不是精益表明抑制芳香化酶可能会影响obesity-induced海拔肺动脉压力,从而修改机制肺动脉高压的发展。安娜在常氧治疗导致的减少体重ob/ob女性和缺氧ob/ob男性,也可能导致减少RVSP在这些团体协会的身体质量指数与肺动脉收缩压。
增加增值税的芳香化酶水平之间的差距,减少循环E2水平表明雌激素可能在增值税而不是排泄新陈代谢。因此,我们评估oestrogen-metabolising酶的表达CYP1B1增值税从肥胖模型研究。CYP1B1曾被报道是增值税及其表达式中高度表达的增加在脂肪生成(27]。在这里,我们表明,CYP1B1调节增值税从肥胖ob/ob和HFD雄性老鼠,这与尿增加16αohe1水平。低硫酸脱氢表雄酮(dhea - s被确认为是多环芳烃在男性患者的危险因素;然而,硫酸脱氢表雄酮(dhea - s的循环水平下的老鼠研究使用的检测分析的局限性。其他人也报道,硫酸脱氢表雄酮(dhea - s水平低或者检测不出来在老鼠15]。睾丸激素的变化也被评估和小鼠的治疗组之间没有显著差异观察研究。这表明变化具体CYP1B1雌激素和新陈代谢,而不是他们的上游介质,发生在肥胖模型研究。CYP1B1的致病作用和16αohe1肥胖老鼠的有益效果证实了CYP1B1抑制剂经颅磁刺激在这项研究中观察到。雌激素代谢变化在PAH曾被观察到。CYP1B1高度调节在PAH患者的肺动脉病变和药物抑制CYP1B1可以减弱实验性肺动脉高压的发展。这些研究也证明了增加肺动脉的表达CYP1B1缺氧小鼠的肺(男性和女性)和Sugen /缺氧小鼠模型(男性和女性)8,28]。雌激素代谢是可遗传的多环芳烃外显率的重要因素。导致优惠雌激素代谢多态性在CYP1B1 16αohe1导致多环芳烃在女性的发展,而女性优先代谢雌激素为2或4个ohe1 ohe1不(29日,30.]。雌激素代谢可以推动多环芳烃外显率在男性,而不是女性一样的学位(31日]。
增值税的增加CYP1B1表达式和随后增加尿16αohe1水平观察到男性ob/ob和HFD老鼠可能直接导致肺动脉高压表型观察到这些动物,鉴于CYP1B1的有利影响抑制肺动脉高压中观察到ob/ob老鼠。Intra-thoracic脂肪存在于男性ob/ob老鼠包含16αohe1。这个增值税两心脏和肺组织直接接触可能对这些组织有重大的影响,导致肺动脉高压的发展。进一步促进这一假设是发现VAT-CM E2水平明显降低,高水平的16αohe1比控制媒体,CYP1B1可以减毒的抑制作用产生影响。这表明增值税可以代谢E2通过CYP1B1,导致16αohe1的分泌。安娜是有效降低指标缺氧肺动脉高压的男性ob/ob和缺氧HFD雄性老鼠,而不是有效的男性精益缺氧小鼠。这表明在缺氧,内源性雌激素增加作用在肺动脉高压的发展男性肥胖的老鼠。肺动脉高压的发展之间的关系,CYP1B1和有效性的安娜,不过,不太清楚雄性小鼠缺氧。缺氧本身增加尿16αohe1精益男性,但在ob/ob雄性老鼠这不是任何进一步的增加。在雄性老鼠HFD实际上减少了高架尿16αohe1缺氧。这表明缺氧本身影响雌激素代谢和内源雌激素发挥致病作用独立于CYP1B1活动缺氧肥胖男性。缺氧和雌激素减少BMPR2信号(32,33]。事实上,男性和女性BMPR2信号降低缺氧小鼠肺(18]。在雄性小鼠缺氧,缺氧令16αohe1,这已被证明与BMPR2把缺陷和发现肺动脉高压BMPR2-deficient转基因小鼠的表型。这肺动脉高压BMPR2-deficient小鼠表型逆转了安娜(34]。我们知道雌激素合成发生通过芳香化酶在缺氧小鼠肺(18]。因此,内生雌激素和增加16αohe1 BMPR2下降可能会把肥胖小鼠缺氧肺动脉高压表型作出贡献。矛盾的是,安娜增加尿16αohe1雄性和雌性老鼠在维持血浆雌激素的水平。这表明,安娜在扭转的有效性在这些小鼠缺氧肺动脉高压密切相关肺缺氧对雌激素合成的影响通过芳香化酶的直接影响内源性雌激素对肺部病理学和BMPR2信号。这些影响可能是更有影响力的雌激素代谢特异表达的影响。
结果表明,然而,脂肪组织CYP1B1表达式之间的密切关系,肺动脉高压的发展和安娜在常氧的有效性ob/ob雄性老鼠。事实上,孵化的PASMCs VAT-CM导致活性氧生成,氧化损伤和激活细胞的生存途径,导致他们的扩散redox-sensitive方式类似于观察16αohe1孤单。这些影响是由芳香化酶和减毒CYP1B1抑制。根据这一发现,增加8-OHG染色,观察ROS生产的一个标志,在整个肺组织ob/ob老鼠。安娜治疗显著减弱这种现象在normoxia雄性和雌性老鼠,但只有有效的雄性小鼠缺氧,再次强调两性异形的机制支撑肺动脉高压的发展。没有明显的抗氧化酶的变化SOD1或过氧化氢酶在小鼠的肺组织研究;然而,NADPH氧化酶4是调节男性ob/ob小鼠在缺氧,这是安娜减毒的。这些发现表明活性氧产量增加而不是减少抗氧化剂的水平是安娜发生在肥胖和抗氧化特性。
我们以前全面展示机制PASMCs 16αohe1-induced扩散和氧化还原信号,所以并没有在当前的研究中解决了这个问题。16αohe1 NADPH氧化酶1表达和活性氧产量增加,导致不可逆的氧化中,减少活动核转录因子erythroid-related因子2 (Nrf2)和细胞增殖增加人类PASMCs [10]。特有的信号通路刺激16αohe1肺循环的16αohe1未能诱导活性氧的生产或体循环血管平滑肌细胞的增殖(10]。尽管16αohe1 ROS生产的影响似乎是特定于肺循环,增加活性氧产量曾被观察到在全球肥胖(35]。事实上,水平的抗氧化酶SOD1减少增值税从男性ob/ob老鼠。活性氧的生产也有一定的增加在各种各样的组织缺氧(36),这很有可能肥胖模型研究和推动其他的系统性影响雌激素的变化响应能力和新陈代谢,占的一些差异在16个αohe1观察缺氧动物。缺氧的影响雌激素代谢研究最广泛的癌细胞,它是改变反应雌激素及其代谢(37]。因此安娜的有益效应观察可能由于一般减少ROS以及减少16αohe1-mediated ROS生产。
16αohe1也是促进胰岛素抵抗和其他代谢紊乱,和ob/ob老鼠用于这项研究确实是葡萄糖不能容忍。因此,它是可能的表型观察到胰岛素抵抗中发挥作用,但这不是专门研究进行评估。的注意,安娜曾被证明能降低代谢缺陷小鼠模型的多环芳烃34]。代谢缺陷日益与多环芳烃临床相关。这个机制仍不清楚,尽管ROS牵连(38]。二甲双胍是一种行之有效的药物用于2型糖尿病和也被建议作为治疗多环芳烃。我们先前已经显示二甲双胍可以抑制芳香化酶表达和活性降低雌激素及其代谢实验肺动脉高压(7]。
总的来说,这些发现表明,代谢变化在男性肥胖导致合成和分泌的增加16αohe1从增值税可以PASMCs内分泌的方式行动,导致活性氧生成,氧化损伤,增加扩散,从而导致肺血管重塑和肺动脉高压动物模型中观察到的表型研究(补充图向)。intra-thoracic脂肪的能力产生16αohe1借进一步重量这一假设给定其直接接触心脏和肺组织。安娜,一个第三代,高度选择性非甾体类、芳香化酶抑制剂,临床上广泛应用和已被证明是安全的在一个小PAH患者的临床试验(13),男性和女性肥胖小鼠的治疗效果。女性倾向发展多环芳烃是良好的1),介导雌激素的致病作用的部分肺循环(18,19]。我们已经表明,内生雌激素可以扮演一个角色在肺动脉高压雄性修改肥胖等因素的存在。肥胖可能尤其使雄性PAH的发展由于obesity-mediated增值税功能障碍导致改变雌激素的产生和代谢。
补充材料
脚注
可以从本文的补充材料www.qdcxjkg.com
支持声明:这项研究是由英国心脏基金会的资助(RG / 16/2/32153)。资金信息,本文已沉积的Crossref资助者注册表。
利益冲突:K.M.其余的没有披露。
利益冲突:K.Y.哈维没有披露。
利益冲突:公元亨利没有披露。
利益冲突:D.Z. Hillyard没有披露。
利益冲突:美国流行没有披露。
利益冲突:核磁共振MacLean没有披露。
- 收到了2018年8月10日。
- 接受2019年3月21日。
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