抽象的
鼻咽血液吸气作为一种敏感和特异的替代工具,用于检测不同形式的慢性/复发性低呼吸道疾病的呼吸道病毒http:////wly/cd8s30jcwyu.
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呼吸道病毒是儿童常见的致病原因,是发病率高和住院的原因[1].传染性剂在慢性/复发性低呼吸道疾病(LRTI)中的作用不明确定义,而急性形式众所周知,呼吸疾病的加剧众所周知[2-4.].我们以前证明了高频率的病毒,特别是人类鼻病毒(HRV),受慢性/复发LRTI影响的儿童,其支气管肺泡灌洗(BAL)显示细胞性和炎症细胞因子的变化[5.].BAL是敏感检测下呼吸道感染性病原体的金标准,即使是有创的。鼻咽抽吸剂(NPA)、鼻咽拭子和鼻冲洗已经被研究,以寻找一种更容易和更可靠的病毒诊断技术,但从未对受不同形式的慢性/复发性LRTI影响的儿童进行过研究[6.-8.].我们的研究旨在调查病毒基因组的存在测试NPA的值与受不同形式的慢性/复发LRTI影响的大型儿科人群相比。
我们研究了133名儿童(平均值±sd年龄:77.6±40.2个月,女68例,男65例,于2008年3月至2012年3月因慢性/复发性LRTI (图1)。这些疾病的临床定义是由先前报道的专家小儿脉栓制成的[5.]并报告所有诊断图1.排除标准包括:近期发作,认为是上呼吸道疾病症状和/或在就诊/支气管镜检查前2周检查期间肺功能检查恶化;囊性纤维化,原发性纤毛运动障碍,原发性和继发性免疫缺陷,结核病和支气管畸形的患者。所有患者均行支气管镜下BAL及NPA检查。所有参与的儿童的父母均已书面同意。我们的机构伦理委员会批准了这项研究。
从所有样本中提取DNA/RNA,采用逆转录酶(RT)-聚合酶链反应(PCR)、PCR或巢式PCR检测以下呼吸道病毒基因组:HRV、腺病毒(AV)、巨细胞病毒(CMV)、eb病毒(EBV)、流感病毒A、B、偏肺病毒(MPV)、疱疹病毒(HHV)-6、HHV-7、HHV-8、细小病毒B19、副流感病毒1、3和呼吸道合胞病毒(RSV)。当两种工具中至少有一个病毒基因组存在时,考虑NPA和BAL之间的一致性。所有病毒扩增子的测序如前所述[9.[Mega7软件]和系统发育分析(7.0.14版; Biodesign Institute,Tempe,AZ,USA)用于建立最常见的病毒是否完全相同的BAL和NPA的基因型。对于统计分析,计算了一致性对和不和谐对的比例,并通过McNemar试验进行了配对样品的麦克马尔测试验证了两种样本之间的检测协议。为了量化每种病毒两种样本之间的协议,计算κ系数(95%CI)。为了评估NPA在检测病毒,灵敏度,特异性,阳性预测值(PPV)和负预测值(NPV)的可靠性也针对假设BAL作为金标准进行。
在133个BALS中的76个(57%)中,检测到至少一种病毒基因组;在76个中的32个(46%)中,发现了辛纤维。
在133个NPA中的80(60%)中,检测到至少一个病毒基因组;在80中,在80中,发现了辛纤维。两种工具中最常见的病毒是HRV(图1)。在133名患者的107名(80.5%)中检测到BAL和NPA之间的病毒协调(65℃,42个阴性)。在考虑每种类型的病毒时,全球检测到良好的一致性,主要用于更频繁的病毒基因组。特别地,NPA在HRV调查中的敏感性,最常见的检测到病毒非常高(84%)以及特异性(88%)。此外,PPV为77%,NPV为92%(图1)。NPA在检测EBV和AV中的敏感性较低(分别为58和61%),但特异性始终非常高(94%和97%)以及PPV(76%和79%)和NPV(87%和94%)分别)(图1)。在考虑低频病毒(HHV6和CMV)时,两种工具之间没有一致性。
对BAL和NPA检测到的HRV扩增子进行基因测序和系统发育分析,序列同源性100%,遗传距离极低,证实上、下呼吸道存在同一病毒。在这些患者中,NPA中HRV的检测可以被认为是下气道的一面镜子,这两种工具之间的一致性非常好。
已经完成了许多研究以了解HRV在呼吸系统疾病发病机制中的作用,从普通感冒到降低气道疾病。几个以前体内研究表明HRV在下呼吸道持续存在可导致症状持续或肺部疾病严重进展。然而,文献中记录的大多数病例都与具有显著程度免疫抑制的患者有关。例如,有三名接受肺移植的患者报告称,呼吸道HRV持续存在超过12个月[10].
低伽玛球蛋白血症患者似乎也易于延长HRV脱落,一小群此类患者的PCR阳性持续时间可达55天,而健康个体的PCR阳性持续时间为15天[11].
我们的患者没有显示出任何生物空间的免疫缺陷迹象,并且在支气管镜检查之前没有用全身皮质类固醇治疗。
HRV在慢性/复发性LRTI中的存在,就像我们的病例一样,可能是症状复发和持续的原因,这方面值得通过机制研究进行深入研究。
据我们所知,很少有研究已经调查了NPA作为慢性/复发LRTI诊断方法的替代工具,但它们与我们的研究不同,因为重点是未配对,非同期NPA和BAL样本[12或者,如果配对,只有在一种类型的慢性/复发LRTI [6.].对该研究的限制是没有对照组的存在:儿科的健康对照病例的可用性是有限的,因为具有BAL的支气管镜检查是一种侵入性工具,并且只有在存在特定的病理条件时才可以进行。
总之,NPA是排除下呼吸道中存在病毒感染的优异工具,它可以代表排除慢性/复发性LRTI儿童病毒感染的第一级方法。
通过使用新的分子技术(作为下一代测序的高吞吐量)进一步调查可以提供更精确的病毒亚型和序列变异的表征与参考基因组。
脚注
利益冲突:没有宣布。
- 收到了2017年6月27日。
- 公认2018年3月12日。
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