图1
细胞外基质(ECM)的蛋白质的作用在人类支气管上皮细胞(HBEC)行为。HBECs (5×104)被播种non-adherent组织培养与ECM蛋白质涂塑和依恋决心在30分钟使用CYQUANT GR(英国)赫默尔亨普斯特德镇ThermoFisher科学、背景荧光减去。附件IV型胶原蛋白是大于层粘连(双向方差分析与Holm-Sidak测试多个比较)和vitronectin-coated井。实验重复了三次技术一式三份,包括使用两个独立的供体细胞培养。数据是在对数尺度。b) HBECs孵化在阻塞α2整合蛋白抗体,α3,αv,α5α6 20分钟前细胞(2×104)被播种到non-adherent组织培养塑料井涂以胶原IV,胶原蛋白我或纤连蛋白。荧光背景减去测量使用CYQUANT GR。阻断整合素α2导致胶原HBEC大大减少附件IV-coated井(单向方差分析与Holm-Sidak测试多个比较),但不是胶原蛋白I - (p = 0.141)或fibronectin-coated井(p = 0.881),而控制井。实验重复了三次技术一式三份(在黑色、灰色和白色),包括使用两个独立的供体细胞培养。c) HBEC细胞数量决定使用CYQUANT GR和标准曲线已知的细胞数量在2 h和48 h后播种HBECs (1×104)到non-adherent组织培养与ECM蛋白质涂塑。组之间无统计学差异被发现(单向方差分析与Holm-Sidak测试多个比较;所有比较p > 0.25)。实验重复了三次技术一式三份,包括使用两个独立的供体细胞培养。d)阻止抗体被添加到井2 h后播种HBECs (5×103)到胶原IV -和laminin-coated井。荧光背景减去被记录在48小时使用CYQUANT GR和无抑制性抗体相比,控制好。大大减少观察上皮细胞增殖与控制的整合素β1-blocking抗体(单向方差分析与Holm-Sidak测试多个比较)。实验重复了六次技术一式三份,包括使用两个独立的供体细胞培养。e)整合素抗体阻断被添加到气液界面阿里(ALI)文化的创造和在每一个提要。Trans-epithelial阻力(te)作为衡量上皮完整性被记录在五个时间点后空气升(1 = 0天,2 = 7天,3 = 14天,4 = 21天,5 = 28天)。封锁α1和α3整合蛋白抑制trans-epithelial阻力(双向方差分析与Holm-Sidak测试多个比较)。实验是由做三个重复测量重复井从两个独立的供体细胞培养(即。四个独立的井在每个计算)。数据是在对数尺度。*:p = 0.018;* *:p = 0.002;* * *:p = 0.006;* * * *:p < 0.001。