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学龄前哮喘影响多达50%的儿童[GydF4y2Ba1GydF4y2Ba那GydF4y2Ba2GydF4y2Ba],其中约有一半人在6岁时不再出现喘息症状[GydF4y2Ba2GydF4y2Ba].大队列研究结果[GydF4y2Ba2GydF4y2Ba那GydF4y2Ba3.GydF4y2Ba提出了几个重要的问题。首先,当面对一个学龄前哮喘患儿时,我们如何预测其自然史并识别出那些在童年中期就将摆脱哮喘的儿童,并将他们与那些患有经典的成人哮喘的儿童区分开来?其次,在缺乏可靠的免疫学标准支持这些决定的情况下,我们如何确定那些可能从吸入皮质类固醇、白三烯受体拮抗剂或两者治疗中受益的儿童?呼吸道炎症是哮喘的一个关键特征,在学龄前儿童中可以检测到[GydF4y2Ba4.GydF4y2Ba].从学龄前儿童获得下气道样品通常涉及一般麻醉下的支气管肺泡灌洗液,因此为有问题严重哮喘的儿童保留,或者诊断有疑问的地方[GydF4y2Ba4.GydF4y2Ba].GydF4y2Ba
另一种从下气道无创取样的方法是痰诱导[GydF4y2Ba5.GydF4y2Ba].在婴儿中使用诱导的痰已受到限制[GydF4y2Ba6.GydF4y2Ba-GydF4y2Ba8.GydF4y2Ba尚未报道炎症细胞谱。mGydF4y2BaussaffiGydF4y2Ba等等。GydF4y2Ba[GydF4y2Ba6.GydF4y2Ba]进行患儿患有囊性纤维化的幼儿的程序,并报告该程序耐受良好,并且在患者中存在高成功率。在142名婴儿中有142名患有9个月的中位数[GydF4y2Ba7.GydF4y2Ba].我们的初步研究的目的是研究通过诱导痰来获得足够用于定量有喘息病史的幼儿细胞类型的下气道样本的可行性。GydF4y2Ba
招募0-2岁的因喘息或喘息发作需要一次或多次住院而转介到儿科呼吸专科诊所的婴儿。患有其他严重疾病的婴儿被排除在外。获得了父母的书面同意。当地研究伦理委员会(莱斯特郡,北安普敦郡和拉特兰郡REC 1,诺丁汉,英国;参考文献编号06/Q2501/18)批准了本研究的所有方面。GydF4y2Ba
一旦患儿脱离呼吸道感染或喘息≥2周,家属就会到我们的婴幼儿肺功能实验室就诊。婴儿由儿科医生(a . Whittaker)检查,如果他们身体健康,并且在室内空气中基线动脉氧饱和度≥95%,就对婴儿进行研究。他们被允许自然入睡;然而,4名非常活跃的儿童给予了温和的镇静剂(水合氯醛,50 mg·kg)GydF4y2Ba-1GydF4y2Ba体重,口服)。安顿好后,给予婴儿吸入沙丁胺醇(200 μg)GydF4y2Ba通过GydF4y2Ba4%高渗盐水雾化吸入诱导痰10分钟前,通过高流量雾化吸入器和面罩吸入2分钟。通过抽吸收集痰标本GydF4y2Ba通过GydF4y2Ba通过鼻咽插入柔软的小孔导管。GydF4y2Ba
如前所述,采集后2小时内在4°C下处理痰液[GydF4y2Ba9.GydF4y2Ba].使用75μl细胞悬浮液在40×中制备胞嘧啶GydF4y2BaGGydF4y2Ba(450 rpm)使用山东III细胞离心机(山东南方仪器公司,Sewickley, PA, USA)进行6分钟。用DiffQuik法(Dade Behring, Düdingen, Switzerland)对两个风干的载片进行染色,计算白细胞差异细胞计数。最初,通过连续计数玻片上代表性切片上的300个细胞来估计样本中鳞状细胞的百分比。随后,通过计数300个非鳞状细胞建立了差异白细胞计数。细胞计数由研究者(A. Tellebati)进行,他对临床患者数据不知情。在不同的放大倍数下进行了详细的回顾(E.A. Gaillard和J. Grigg)。这些切片也由一名儿科血液学家(W. Abd-Elghany, University Hospitals Leicester, Leicester, UK)进行了审查。GydF4y2Ba
在研究期间,我们接触了43个家庭,其中22个最初同意参与。最初的22名婴儿中有6名接受了痰诱导。退出研究的原因有:失去接触(n=8)、退出研究(n=1)、身体状况不佳不能参与研究(n=3)和当天身体不适(n=4)。本研究中儿童(5男1女)的中位年龄为11.5个月(范围6-14个月)。3名婴儿有湿疹和特应性家族史,3名婴儿暴露于环境烟草烟雾。5名婴儿被处方吸入βGydF4y2Ba2GydF4y2Ba-激动剂和三种吸入皮质类固醇。GydF4y2Ba
没有不良事件发生,所有的婴儿都被允许在手术后立即回家。痰诱导前后动脉氧饱和度、中位呼吸频率、中位心率无显著差异(数据未显示)。所有六名受试者均取痰,并从四名婴儿中分离出白细胞。中位上皮细胞百分比为32%(范围8-54%)。在一个样本中仅发现淋巴细胞(占总白细胞的1%),在任何样本中均未发现嗜酸性粒细胞。中性粒细胞百分比中位数为56%(0-82%),巨噬细胞百分比中位数为44%(18-99%)。GydF4y2Ba图1GydF4y2Ba显示从四个婴儿身上获得的细胞旋的代表性切片。GydF4y2Ba
据我们所知,这是第一个在婴儿气喘中诱导痰的报告。我们的初步研究表明,该技术是可行的,安全的,耐受性良好。分离的炎症细胞主要为中性粒细胞、粒细胞和巨噬细胞。在任何痰样本中均未发现嗜酸性粒细胞,这与之前对患有严重喘息的幼儿的研究一致[GydF4y2Ba4.GydF4y2Ba].我们样品中巨噬细胞的存在表明,使用我们诱导的痰技术获得较低气道分泌物。中性粒细胞可能起源于上呼吸道或下呼吸道,尽管所有儿童在研究时临床上没有呼吸道感染。GydF4y2Ba
在四个婴儿中有两种中存在的炎症表型是中性粒细胞(> 60%中性粒细胞),而在其他两个婴儿中,巨噬细胞占主导地位。值得注意的是,患有嗜中性炎症的婴儿也有湿疹和Atacopy的家族史,而患有较少中性粒细胞和主要巨噬细胞的婴儿没有湿疹或特殊的家族史。显然,这项试验研究中的数字太小,无法得出任何牢固的结论,这些发现将在更大的研究中核实,包括健康对照的较大的研究,因为正常的中性粒细胞差异细胞计数在年龄较大的儿童健康的气道中变化很大。成年人。GydF4y2Ba
早期婴儿喘息的病理生理和免疫机制尚未建立,这限制了对学前喘息自然史的理解。痰诱导从下呼吸道获取呼吸样本的技术作为一种相对无创的评估婴儿气道炎症的方法是有吸引力的。现在迫切需要了解在早期阶段支持儿科人群喘息表型的不同免疫病理,这可能对单个家庭有预后价值,并有助于对哮喘的早期起源的研究。这项研究强调了招募和研究喘息婴儿的困难,任何未来的研究都必须招募比最终研究人数更多的受试者。GydF4y2Ba
该试点研究表明,婴儿诱导痰的技术作为从下呼吸道获得炎性细胞的方法,虽然困难,是可行的,并且在婴儿和幼儿中的气道炎症的检测和监测中也可能具有潜在用途囊性纤维化。GydF4y2Ba
致谢GydF4y2Ba
作者感谢W. Abd-Elghany (University Hospitals Leicester, Leicester, UK)对细胞旋片的回顾。GydF4y2Ba
脚注GydF4y2Ba
支持声明GydF4y2Ba
这项研究得到了英国哮喘协会的支持。GydF4y2Ba
感兴趣的语句GydF4y2Ba
对J. Grigg感兴趣的声明可在GydF4y2Bawww.www.qdcxjkg.com/site/misc/statements.xhtmlGydF4y2Ba
- ©2013年GydF4y2Ba
参考文献GydF4y2Ba
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