抽象的
香烟烟雾已经与肺部流体积累和急性呼吸窘迫综合征的风险增加有关。假设enacα-亚基在肺部流体吸收中发挥关键作用,受香烟烟雾的影响。
香烟烟雾冷凝物(CSC)用于治疗人肺上皮细胞系。使用免疫印迹,定量PCR和启动子报告分析测量ENACα-亚基表达。
目前的作者发现,CSC在不影响细胞存活的情况下,在转录水平上以剂量和时间依赖的方式抑制α-亚基表达。这种抑制既与尼古丁无关,也与csc处理细胞中过氧化氢水平的增加无关。CSC还抑制α-亚基核心启动子活性。地塞米松激活了核心启动子,可以减弱CSC的抑制作用。然而,在CSC存在的情况下,地塞米松无法诱导α-亚基表达的全面激活。停用CSC可部分逆转地塞米松的抑制作用。
本研究结果表明香烟烟雾冷凝物通过其启动子在转录水平抑制ENaC α-亚基的表达。地塞米松可逆转这种抑制作用。结果还表明,吸烟者肺中α-亚单位的激活可能需要更大剂量的地塞米松,而非吸烟者肺中α-亚单位的激活可能需要更大剂量的地塞米松,戒烟可能会提高地塞米松的疗效。
急性肺损伤(ALI)及其更严重的形式,急性呼吸窘迫综合征(ARDS)是与非狭窄性肺水肿和炎症相关的综合征1.ALI/ARDS是急性呼吸衰竭的主要原因2.Ali的高死亡率是由于缺乏有效的治疗方法,这反映了对疾病机制的知识缺乏。
肺水肿是ALI/ARDS的重要病理组成部分之一。肺液转运异常的原因多种多样,影响肺水肿的形成和消除。越来越多的证据表明,ENaC,一个阿米洛利敏感的上皮钠通道,在肺液清除中起关键作用3..ENAC信道由三个亚基组成:α,β和γ4..在肺中,α-亚基似乎是流体运输中必需的。具有灭活α-亚基的动物,但活性β和γ亚基,在出生后不久死于填充液体的肺部5..α-亚基表达降低易使动物发生肺水肿6..在人类中,假醛固酮增多症患者经常发生肺部感染和气道液体积聚增多,这是一种由非活性ENaC突变引起的遗传疾病7.那8..
吸烟会影响一般肺部健康,因为它与炎症性肺病和肺泡上皮损伤有关9..一项为期15年的队列研究证实,吸烟与ARDS易感性之间存在关联10..香烟烟雾引起的肺部液体积累可能是这种关联的潜在机制11..然而,吸烟对肺上皮细胞ENaC表达的影响尚未研究。
目前的作者选择测试香烟烟雾冷凝物(CSC)降低肺上皮细胞中ENaC α-亚单位表达的假设,因为香烟烟雾会导致肺上皮细胞损伤,而α-亚单位是参与肺上皮细胞中液体运输的少数关键分子之一。类固醇已被用于治疗一些ALI患者,已知可激活ENaC α-亚基表达并上调肺泡上皮液清除12.-14..因此,检查了CSC和地塞米松之间的可能相互作用。本研究的结果表明,在人肺上皮细胞中,CSC抑制转录水平的α-ENAC表达通过其核心启动子的抑制。虽然地塞米松可以减弱CSC诱导的α-亚基表达抑制,但地塞米松诱导的α-ENaC活化在CSC存在时明显受到抑制。这些结果概述了病理生理机制,解释如下:1)吸烟者可能易患肺水肿;2)肺水肿伴ALI吸烟者恢复时间较长,预后较差;3)与以前的吸烟者和非吸烟者相比,现在的吸烟者对类固醇治疗的反应可能更弱。
材料和方法
细胞培养及试剂
HAE是取自44岁女性肺泡细胞癌的细胞系(美国型培养收集(ATCC)编号:CRL-2170),在添加10%胎牛血清的L-15培养基中培养。BEAS-2B细胞系来源于正常人支气管上皮(ATCC编号:CRL-9609)。BEAS-2B细胞在LHC-9无血清培养基(Invitrogen公司,Carlsbad, CA, USA)中培养。
化学品和抗体
CSC由Murty Pharmaceuticals(Lexington,Ky,USA)提供。它是由肯塔基州的1R3F标准研究香烟的吸烟大学在烟机上制作。在过滤器上收集烟雾颗粒,并在40mg·mL下溶解在二甲基亚硫氧化物(DMSO)中-1.地塞米松、2′、7′-二氯荧光素二乙酸酯(DCFDA)、曲乐、放线菌素D、碘化丙啶(PI)、吖啶橙和台班蓝购自Sigma (St Louis, MO, USA)。α-ENaC抗体购自Santa Cruz Biotechnology (Santa Cruz, CA, USA)。
用CSC治疗人肺上皮细胞
Hae细胞的培养物生长至70-80%的汇合。用CSC处理,终浓度为100μg·mL-1在0.25%DMSO中,在Leibovitz的L-15培养基中在37℃下进行6-24小时,以便在CSC中确认适当的条件。用相同浓度的DMSO处理控制细胞,没有CSC。对于CSC剂量 - 反应实验,将细胞在37℃下孵育24小时,CSC浓度范围为25-100μg·mL-1在0.25%DMSO中。
RNA和cDNA的制备
按照制造商的协议,使用SV总RNA分离系统(Promega, Madison, WI, USA)从培养的单层细胞中制备总RNA。采用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度法检测总RNA的质量和数量。利用Moloney小鼠白血病病毒逆转录酶(Invitrogen公司,San Diego, CA, USA)从总RNA中制备cDNA。后续PCR扩增,每20 μ l反应以40 ng为模板。
常规RT-PCR
采用GoTaq Green Master Mix (Promega)在Perkin Elmer DNA热循环仪480 (Perkin Elmer, Inc., Waltham, MA, USA)上进行PCR实验。PCR所用引物如表1所示⇓.在每个循环中,反应在94℃变性1 min,在62℃退火40 s,在72℃延伸40 s。PCR产物用2%琼脂糖凝胶进行分析。电泳后,凝胶图像由Aida图像分析仪(Raytest Isotopenmeßgeräte GmbH, Straubenhardt, Germany)分析。实验重复了三次。
定量RT-PCR
使用Sybr Green在ABI 7500快速实时PCR系统(应用生物系统,福斯特城,USA,USA)上使用Sybr Green进行实时PCR。最终反应混合物含有40ng cDNA,每个引物的200nm,10μl2×SYBR绿色PCR主混合物(施用的生物系统)和不含20μL体积的RNase-水。所有反应一式三份进行。用热开始变性步骤在95℃下进行10分钟进行PCR,然后在95℃下进行40次循环,使15s和60℃下进行1分钟。在反应过程中读取荧光,允许连续监测PCR产物的水平。将数据标准化为内部对照甘油醛-3-磷酸脱氢酶mRNA。实时PCR中使用的引物序列如表1所示⇑.
细胞活力测试
用CSC处理后的细胞活力由台盼蓝染料排除试验和吖啶橙/ PI测定法测定。在后一种测定中,通过加入100μl1mg·ml制备染色溶液-1PI(Sigma)和100μl1mg·ml-1吖啶橙(Sigma)加入10ml PBS。细胞悬液与染色液在微离心管中1:1混合。在Olympus荧光显微镜下用血球计计数染色细胞(Olympus America, Center Valley, PA, USA)。pi排除细胞计数为活细胞,pi染色细胞计数为死细胞。实验重复了三到四次。
细胞内产生过氧化氢
荧光底物DCFDA是一种可渗透细胞的染料,可被过氧化氢氧化为2 ',7 ' -二氯荧光素,因此可用于监测细胞内过氧化氢的生成。用含10 μM DCFDA的PBS溶液替代HAE培养基,孵育30分钟。用荧光显微镜(485-530 nm)测定过氧化氢的生成。
mRNA稳定性测定
用100 μg·mL的CSC处理HAE细胞-1或24小时的车辆。然后加入10μg·mL的放射菌蛋白D.-1对于0,6,12,18和24小时。在使用SV总RNA分离系统(PRomega)的处理结束时分离总RNA。进行实时PCR以定量α-ENAC转录物。
α-enac启动子 - 报告基因质粒的构建
启动子荧光素酶基因通过PCR克隆和随后克隆到pGL3Basic (Promega)中获得。插入物经DNA测序确认。α-ENaC的四种结构,IE。PGLA1931,PGLA791,PGLA332和PGLA100用于本研究(图1⇓).
荧光素酶测定
使用Fugene HD(Roche Applie Science,Indianapolis,USA)用α-enac启动子 - 萤火虫荧光素基因构建体转染〜80%汇合的Hae细胞。将每个启动子质粒与Renilla Luciferase表达载体PRL-TK(Promega)配制,以校准转染效率。根据Fugene HD的方案,选择4:2的Fugene HD(μl)与DNA(μg)的比率。转染后,将细胞孵育2天。双Glo荧光素酶测定系统(Promega)用于根据制造商的方案测量萤火虫和雷尼林葡萄糖酶。读数被记录在顶部NXT微孔板发光柜台(Packard,Meriden,CT,USA)上。相对荧光素酶活性被计算为萤火虫荧光素酶活性/雷农荧光素酶活性。实验重复三到五次。
西方墨点法
如前所述进行蛋白质印迹15..简单地说,蛋白在10% SDS-PAGE凝胶中分离,并转印迹到聚偏二氟乙烯膜(Bio-Rad, Hercules, CA, USA)上。1小时孵化后屏蔽解决方案包含20毫米Tris-Cl, pH值7.5,0.5 M氯化钠和5%的脱脂奶粉,细胞膜是孵化第一次在4°C在抗体与抗体缓冲区包含20毫米Tris-Cl, pH值7.5,0.5 M氯化钠,脱脂奶粉0.1%渐变20到0.2%。二抗室温孵育1 h。每次抗体反应后,在洗涤液(20 mM Tris-Cl, pH 7.5, 0.5 M氯化钠和0.1%吐温20)中进行3次10分钟的清洗。山羊抗α- enac多克隆抗体购自Santa Cruz Biotechnology。使用ECL试剂盒(Amersham, Piscataway, NJ, USA)显像。
结果
CSC抑制在转录水平的HAACα-亚基的表达
增加浓度的CSC处理HAE细胞24小时。然后通过常规RT-PCR和实时定量RT-PCR检测细胞的α-ENaC表达(图2a)⇓b).在25 μg·mL的剂量下,CSC可以抑制α-ENaC的表达-1.在100μg·ml-1浓度,α-ENAC mRNA水平仅通过实时RT-PCR确定的对照的〜23%。为了进一步支持这种观察,当前作者用100μg·ml处理了Hae细胞-1不同时间段的CSC。如图2D所示⇓,CSC抑制α-ENAC表达随着治疗时间的增加。×24小时,α-ENAC mRNA水平降至对照细胞的〜19%。这些数据证实CSC以剂量和时间依赖的方式抑制HAE细胞中的α-ENAC表达。在蛋白质水平上,使用各种剂量的CSC免疫印迹中看到相同的趋势(图2C⇓).与mRNA水平的调节相比,α-ENAC蛋白质水平似乎更加恒定。这可能是由于MRNA水平的调节的时间延迟到蛋白质水平所示的变化。此外,α-亚基蛋白的半衰期可能比其mRNA长。为了确认CSC对α-enac的抑制作用不仅存在于Hae细胞中,而且在其他人肺上皮细胞中存在,在BEA-2B细胞中重复定量RT-PCR实验。BEA-2B细胞衍生自非癌性正常人支气管上皮。与HAE细胞相比,发现BEA-2B细胞中的α-ENAC mRNA水平被CSC以剂量依赖的方式抑制(图2E⇓),表明CSC对α-ENAC表达的抑制作用不是细胞系特异性。
尼古丁是香烟烟雾中已知的细胞毒性组分。尼古丁是否是CSC中有效的α-ENAC抑制剂未知。因此,目前作者在α-ENAC表达中测试了尼古丁的可能作用。使用实时定量PCR,发现尼古丁,高达1μm浓度,在24-H周期(未显示的数据)上没有对α-enac表达的任何影响,表明CSC的抑制作用α-ENAC表达来自CSC中的非尼古丁组分。
α-enac表达的变化与细胞死亡无关
研究了是否仅在染色细胞中发生α-enac的抑制。为了回答这个问题,本作者检查了CSC是否在所使用的浓度范围内诱导细胞死亡。HAE细胞暴露于增加CSC的浓度24小时。Trypan蓝和吖啶橙/ pi都用于测试细胞活力。在吖啶橙/ pi测定中,细胞数几乎恒定高达200μg·ml-1CSC。CSC浓度达200 μg·mL时,细胞活力无明显变化-1并且略微下降300μg·ml-1(图。3A⇓).细胞数下降300μg·ml-1CSC可能是细胞死亡或延迟细胞增殖增加的结果。在CSC处理的细胞中可能存在两个条件。然而,由于细胞活力的趋势越稳定,延迟细胞增长更可能。延长治疗100μg·mL-1在细胞数量和活力上都没有任何显著的变化(图3b)⇓).台盼蓝排除测定显示出类似的结果(数据未显示)。这些结果表明,在200μg·mL存在下,大多数Hae细胞在24小时内保持可行-1CSC和72小时在100μg·mL的情况下-1α-ENaC表达的降低与细胞死亡无关。
CSC诱导的氧化应激块不会改变其对α-enac的抑制作用
众所周知,香烟烟雾会引起肺部的氧化应激16..用100 μg·mL处理HAE细胞-1通过DCFDA检测,CSC处理24 h后,过氧化氢产量增加(图4)⇓).因此,目前作者怀疑氧化应激是介导CSC诱导的α-ENAC表达抑制的下游信号。然而,当在抗氧化滴油的存在下用CSC处理Hae细胞(100μm·ml-1),CSC对α-ENAC表达的抑制作用不会改变。此外,将HAE细胞直接用过氧化氢,浓度高达1.0mm 24小时并未导致α-enac mRNA的变化(数据未显示)。这些结果暗示氧化应激不参与CSC诱导的α-ENAC表达的抑制。
CSC抑制α-ENAC表达,通过启动子中的232bp序列,但不是mRNA稳定性
α-ENaC在转录水平上的表达变化可能是转录起始调控、转录稳定性调控或两者兼有的结果。利用转录抑制剂放线菌素D检测HAE细胞中α-ENaC转录本的周转率。放线菌素D孵育后各时间点收集细胞,采用实时RT-PCR对α-ENaC mRNA进行定量。结果显示,在CSC-和载体处理的细胞之间,转录本降解率非常相似,在24小时的培养结束时,保留了约40%的α-ENaC转录本(图5)⇓).该发现支持CSC抑制α-ENAC转录启动的可能性。
目前的作者随后检测了CSC对α-ENaC启动子活性的可能影响。构建了一组α-ENaC启动子荧光素酶载体(图1)⇑).用启动子 - 荧光素酶载体转染HAE细胞并用CSC处理。结果表明,在用CSC处理的细胞中降低了几种启动子构建体的荧光素酶活性(图6A⇓).启动子活性在332-碱基对(bp)结构中下降最显著,而在100-bp结构中没有变化。这一差异表明一个232-bp序列(在100-bp结构中缺失)对CSC治疗最敏感。其他包含此232-bp序列的启动子片段均表现出csc诱导的抑制作用。232-bp序列似乎包括核心启动子,因为它显示最高的基线活性。这个序列还包含一个糖皮质激素反应元件(GRE)。因此,我们用地塞米松检测糖皮质激素对同一套α-ENaC启动子载体的影响。与CSC处理相比,无论调控方向如何,在整个启动子载体上调控的相对规模都与CSC的调控紧密匹配(图6b)⇓),提示232-bp序列对CSC和地塞米松的重要性。
地塞米松可减弱CSC对α-ENaC表达的抑制作用
作为CSC和地塞米松的调节α-ENAC表达通过232-BP核心启动子,当前作者测试了地塞米松是否会衰减CSC的抑制作用。在本研究中,Hae细胞用100μg·mL处理24小时-1CSC在存在和没有地塞米松的情况下。使用实时定量RT-PCR定量α-ENAC mRNA表达。如预期的,在1nM浓度下,地塞米松几乎完全逆转了CSC诱导的抑制。用100nm地塞米松的加奇替补导致α-enac mRNA的净增加(图7A⇓),表明地塞米松能够逆转CSC诱导的α-ENAC表达抑制。促进剂 - 报告者测定以测试地塞米松的效果也进行。与定量PCR结果一致,地塞米松能够衰减CSC对α-ENAC启动子的抑制作用(图7B⇓).然而,与实时定量RT-PCR结果相比,需要更高浓度的地塞米松,以完全逆转CSC抑制作用。这可能表明地塞米松增加了α-ENAC mRNA水平,而不仅仅是通过其启动子的调节,而且增加了其他非脯氨酸机制。这也可能是由于α-enac mRNA和萤火虫荧光素酶蛋白之间的生产或稳定性的差异。在蛋白质水平,免疫印迹显示出在mRNA水平的类似趋势(图7C⇓).
CSC抑制了地塞米松诱导的α-enac表达
正如许多其他研究表明,吸烟者对类固醇治疗的反应不如非吸烟者17.-19.,目前的作者怀疑CSC可能对地塞米松诱导的激活有负面影响。在类似的实时定量RT-PCR实验中,100 nM地塞米松使α-ENaC mRNA水平升高40倍。然而,在100 μg·mL的存在下-1CSC,地塞米松仅诱导α-ENAC mRNA的四倍增加(图8A⇓).使用最活跃的332-BPα-ENAC启动子片段在报道基因测定中看到了相同的趋势。单独的地塞米松增加了四倍的启动子活性,而在100μg·ml的情况下-1CSC,地塞米松诱导的活化几乎完全被废除(图8B⇓).为了模拟吸烟者的肺,在用地塞米松治疗之前将CSC加入到Hae细胞中。在用CSC预处理的细胞中,地塞米松增加α-ENAC mRNA五倍。有趣的是,当CSC被撤回时,地塞米松能够增加α-ENAC mRNA 15倍(图8C⇓).这些结果表明,CSC在地塞米松相关α-ENaC表达的激活中起负作用。此外,csc对α-ENaC的抑制在一定程度上是可逆的。因为CSC在这个浓度下不会导致细胞死亡(图3b)⇑),可以在CSC取出后完成α-ENAC表达的完全恢复。
讨论
非狭义肺水肿可能是由各种病理刺激产生的,例如炎症,气体吸入,药物反应和高海拔缺氧。由于Aetiology的不同性质,难以确定肺水肿形成所涉及的确切机制。然而,认识到肺部微血管循环的损伤导致毛细血管内皮的渗透性增加,导致血管内液体过滤增加进入周围血管间隙。如果上皮层也损坏,则流体将进一步穿过上皮层进入空气空间12..空体中的液体吸收依赖于na+吸收,由顶端NA介导+衬里上皮细胞中的通道和基底横向离子泵。因此,这些传输分子的功能在肺水肿的回收过程中是重要的。enac na.+频道是近年来肺部液体清除作用的运输分子之一20..
在没有其他因素的情况下,enac或缺乏enac功能本身可能导致肺液在空气中积聚。这一发现在动物和系统性假醛固酮增多症患者中已被报道6.那7..此外,在形成缺氧相关的肺水肿中,缺乏enac作为辅助因子报告为辅助因子21.那22..与大多数肺水肿病例不同的是,肺水肿是由于微循环流出液增多而引起的,肺上皮处肺液进入途径的堵塞可能导致肺液积聚,而无症状或症状轻微。因此,肺液体吸收受损可能使患者易于发生ALI,当存在其他损害时。
香烟烟雾导致肺上皮损伤。它诱导肺水肿的能力已被动物研究支持11..与烧伤患者中的烟雾吸入损伤相比,由于缺乏并发症,如一氧化碳中毒和上呼吸道中的缺氧和热伤口,卷烟诱导的肺损伤的临床表现并不像急性和深度。然而,香烟烟雾诱导的肺损伤可能形成组织学或生化基础,在此额外的侮辱可以更快地带出临床表现。与吸烟者倾向于肺损伤和肺水肿的理论一致,一个15年的队列研究发现香烟吸烟和Ali / Ards风险之间的关联10..由于ENAC在肺部流体清除中的重要作用以及其α-亚基的突出功能5.那23.本研究结果表明,CSC抑制肺上皮细胞α-ENaC的表达,从分子水平上解释了吸烟与ALI之间的关系。结果表明吸烟者比非吸烟者更容易发生肺水肿和ALI的机制,并解释了为什么吸烟者肺水肿的结果比非吸烟者更糟糕。
在本研究中,使用人肺上皮细胞系,并用从DMSO的研究卷烟产生的香烟烟雾冷凝物处理。细胞系的结果并不总是展示在活的有机体内事件和CSC的治疗并不完全复制在活的有机体内对烟雾曝光的反应。但是,在精心设计时,这些设置允许我们预测可能与之相关的机制在活的有机体内情况。为了增加这一机会,当前作者在HAE细胞中测试了表面活性剂蛋白A和ClC-2氯化物通道蛋白表达,发现两者都表达(数据未显示)。还使用衍生自正常个体的BEA-2B肺上皮细胞系。使用的CSC剂量范围虽然难以与吸烟者的人类气道中的难以比较,但类似于先前报道的那些(0-500μg·ml-1)24.那25..为了证明特异性,检查剂量依赖性和时间依赖。因此,目前的作者认为,本研究中的观察结果表明了吸烟者肺部的趋势。
香烟烟雾在转录水平调节基因表达。稳定状态的mRNA库依赖于mRNA的产生和降解。卷烟烟雾可能通过改变启动子活性和转录稳定来调控mRNA的产生和降解26..然而,本结果表明,CSC处理细胞中的α-ENAC转录稳定性与对照细胞中的α-ENAC转录稳定性非常相似,支持改变的启动子活性的作用。后者在启动子研究中证实,其中232-BP核心启动子序列的活性似乎最显着抑制。232-BP核心促进剂含有胶凝域,其介导糖皮质激素诱导的活化。目前作者认为,该启动子中的GRE结构域还通过其他Nonglucococorcoid机制支持启动子活性。这是因为,即使在没有糖皮质激素和血清的情况下,GRE序列的突变也显着降低基线启动子活性(数据未显示)。
与地塞米松通过糖皮质激素受体(GR)结合作用于GRE结构域不同,CSC和核心启动子之间的确切相互作用尚不清楚,可能是复杂的。部分CSC组分可能与地塞米松、GR或其复合物相互作用,调控α-ENaC启动子。虽然不能排除糖皮质激素/GR/GRE通路在这一调控中的作用,特别是在地塞米松存在的情况下,但可以得出结论,其他非糖皮质激素通路也参与了调控。这是因为CSC显著抑制无血清培养基培养的细胞α-ENaC启动子活性,在无糖皮质激素和GR未激活的培养基中培养。
CSC中不同化合物可能通过不同途径调控基因表达。吸烟者肺部的氧化应激增加,并可调节基因表达。虽然CSC处理增加了HAE细胞中过氧化氢的产生,但本研究的其他结果并不支持过氧化氢在CSC诱导的α-ENaC抑制中发挥作用。尼古丁是香烟烟雾中众所周知的有毒成分,在转录水平上具有基因调控作用27..然而,在1μm下用尼古丁治疗Hae细胞并未导致由CSC引起的α-ENAC的类似抑制。除尼古丁外,香烟烟中的许多其他化合物可能在细胞中具有调节功能。其中一个实施例是二恶英,以及芳基烃受体(AHR)的其它激动剂。AHR是一种转录因素,即在配体激活后,与促进剂中的异黄响应元件结合并激活基因表达28..香烟烟雾也可能引起促进剂中CpG岛的甲基化,导致基因表达的抑制作用29.那30..这些报告的机制表明CSC的α-ENAC表达的调节可能非常复杂,并且可能涉及多种调节途径。
类固醇用于一些肺水肿患者,它们显着上调了动物的肺泡液间隙12.那14..虽然类固醇在肺水肿中的确切治疗作用尚不清楚,但尚有很好的记录,即类固醇显着激活α-enac的表达13.那31.那32..α-enac,除了类固醇可能具有的其他治疗益处,可能促进肺水肿流体的间隙,并且在动物研究中显示了其在阿里的益处33.那34..与非闻人相比,吸烟者通常对类固醇治疗的反应较少18..虽然这种差异的原因可能是复杂的,但目前的结果表明香烟烟雾可能在相当程度地防止类固醇激活enac表达,从而限制其促进肺水肿流体吸收的能力。结果还表明,香烟烟雾对类固醇的抑制作用是可逆的,因为从细胞中撤离CSC导致地塞米松诱导的ENAC活化的恢复。然而,本研究基于培养的肺上皮细胞,并且在所用的CSC剂量下没有检测到其他细胞毒性效应。吸烟者肺的可逆性将更加复杂,至少取决于卷烟烟雾的剂量和对肺上皮的损害程度。
总之,本研究揭示了一种解释香烟烟雾冷凝物和α-ENaC表达之间关联的机制,这可能是吸烟者肺部液体运动变化的原因。结果还表明吸烟者和非吸烟者对类固醇治疗的反应不同。这些分子水平上的发现为今后研究肺水肿、急性肺损伤和吸烟者肺部的类固醇治疗提供了新的线索。
- 已收到2007年2月5日。
- 公认2007年5月9日。
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