文摘
与哮喘的吸烟者对糖皮质激素的治疗效果。现在还不知道这是否对糖皮质激素在吸烟者会影响组织的不敏感网站超出了航空公司。
总共有75哮喘受试者(39吸烟者)和78名健康对照组(30吸烟者)招募了一项观察性研究。皮肤和外周血淋巴细胞对糖皮质激素测定的反应。皮肤血管收缩剂应对局部beclometasone测量通过应用不同浓度的beclometasone解决皮肤随机双盲的方式。每个浓度的漂白程度分级后18 h。外周血淋巴细胞对糖皮质激素的敏感性评估通过测量地塞米松对淋巴细胞增殖的抑制作用刺激phytohaemagglutinin (PHA)。
总均值±sd皮肤的血管收缩剂反应分数beclometasone减少与哮喘的吸烟者5.39±3.58与7.26±3.05不与哮喘;和所有吸烟者6.47±3.33与在所有不吸烟者7.86±2.81。对糖皮质激素敏感的PHA刺激淋巴细胞的类似的团体之间。
总之,吸烟与哮喘有受损皮肤的血管收缩剂反应局部皮质激素治疗与不吸烟者相比,哮喘。这一发现表明,糖皮质激素与哮喘影响吸烟者的不敏感组织以外的其他航空公司的网站。
糖皮质激素是目前最有效的抗炎治疗治疗哮喘和推荐的国际指导方针1。子群的哮喘病患者不能获得足够的治疗反应抗糖皮质激素,称为皮质类固醇或麻木不仁2。corticosteroid-insensitive哮喘的原因被认为是多因素疾病,包括遗传和环境两方面的因素2,3包括吸烟4。香烟的吸烟者与不吸烟者相比,患有哮喘吸入不太敏感5,6和口服糖皮质激素7作为评估肺功能的变化和哮喘症状。吸烟与哮喘占> 20%的成年人患有哮喘4并与不吸烟者遭受更严重的哮喘症状8和加速肺功能下降9。
尚不清楚是否吸烟与哮喘对糖皮质激素在组织之外的其他航空公司的网站。局部beclometasone皮肤血管收缩剂的反应10,11和糖皮质激素的抑制外周血淋巴细胞的激活12已经被使用作为一个系统对糖皮质激素敏感的指标。不吸烟者与corticosteroid-insensitive哮喘受损皮肤的血管收缩剂对糖皮质激素的反应13和糖皮质激素对淋巴细胞增殖的抑制作用降低12。目前作者提出,与哮喘的吸烟者减少类固醇敏感网站除了肺部。本研究的目的是比较系统性对糖皮质激素敏感在吸烟者和不吸烟者与非哮喘评估皮肤局部血管收缩剂反应beclometasone和刺激淋巴细胞糖皮质激素的敏感性。
材料和方法
主题
吸烟和从不吸烟对象有无哮喘(白人和非白人人)年龄在18 - 60岁之间的年是从医院门诊诊所和医院招募员工,分别。所有的参与者给书面知情同意和批准这项研究是格拉斯哥从西方获得伦理委员会(英国格拉斯哥)。被诊断为哮喘由美国胸科学会(ATS)标准14和所有哮喘受试者基线的一秒钟用力呼气量(FEV1)≤85%预测和FEV的可逆性1后nebulised舒喘灵≥15%。排除标准是哮喘发作,使用口服皮质类固醇或呼吸道感染在4周的包容。健康的志愿者没有呼吸道疾病史。吸烟者有吸烟≥10 pack-yrs·天目前吸烟≥10支烟1。总共35哮喘受试者(19吸烟者)也采取长效β2受体激动剂;三个哮喘病患者(两个吸烟者)正在白三烯受体拮抗剂。
研究设计
当前作者进行了观察研究皮肤,外周血淋巴细胞和糖皮质激素测定气道反应。收集静脉血淋巴细胞反应、道达尔和特定的血清免疫球蛋白E (Ig)水平和血清可替宁的水平。皮肤的血管收缩剂应对局部beclometasone测量在同一天通过应用beclometasone随机双盲的方式解决皮肤和评估热烫的程度。与哮喘和部分受试者的痰诱导进行呼出一氧化氮(F伊诺在所有科目)和一氧化碳的含量。主题与哮喘收到40毫克口服强的松每天14天。用于评估气道皮质类固醇的端点灵敏度变化在早晚高峰呼气流量(PEF)率,pre-salbutamol FEV1,验证哮喘控制分数,每天早晨和夜晚的症状和减少救援吸入器的使用。
测量
基线测量和记录日记卡
哮喘严重程度得分在基线使用at哮喘障碍得分15和哮喘控制得分每一次访问太阳系时使用验证哮喘控制问卷16。病人保持家庭日记卡进行验证17记录PEF早上和晚上,白天症状(范围0 - 6,增加严重性),晚上醒来(范围0 - 3,增加严重性),使用吸入救援药物和研究平板电脑消费。合规评估通过平板计数。哮喘持续时间决定于病人病历和医院记录时可用。血清总IgE和特定的IgE屋尘螨,草花粉和猫皮屑测定酶联免疫测定(Unicap;法玛西亚公司,米尔顿凯恩斯,英国)。总IgE水平> 120 IU·毫升1和具体的IgE > 0.35 IU·毫升1被认为是升高的。被定义为主题nonatopic当特定的IgE所有常见的过敏原是负面的18。血清可替宁使用酶免疫分析法测定(Cozart生物科学有限公司,阿宾顿,英国)确认吸烟的状态。
局部beclometasone皮肤血管收缩剂反应
皮肤的血管收缩剂应对局部beclometasone测量如前所述10,小的修改。Beclometasone dipropionate (Sigma-Aldrich,吉林厄姆,英国)溶解在95%乙醇浓度的1、3、10、30、100、300和1000年μg·毫升1。95%的乙醇使用的控制解决方案。测试网站列出的非惯用前臂屈肌由应用程序的胶带2厘米直径孔已被切断。解决方案被随机分配一个字母(a),员工没有参与测试的应用程序或阅读和解决方案应用a -。测试并没有选取,直到完成研究。网站与塑料薄膜阻挡beclometasone提高经皮吸收。一个管状绷带(Tubigrip;奥尔德姆斯通医疗集团,英国)应用于减弱任何环境温度的变化。18 h后,录音和电影被移除和漂白程度评估后进一步1 h。测试网站检查标准照明条件和给定一个漂白得分由一个训练有素的观察者。 Blanching at each concentration was graded according to a four-point scale: 0 = no blanching; 1 = faint blanching; 2 = obvious blanching not extending beyond the test site; and 3 = intense blanching extending over the margin of the test site. The addition of individual concentration scores gave a total score. A high score indicates a high degree of corticosteroid sensitivity.
淋巴细胞增殖反应
外周血单核细胞的敏感性(PBMCs)糖皮质激素在功能分析评估如前所述12。使用Lymphoprep PBMCs从全血中分离了出来(Axis-Shield PoC,奥斯陆,挪威)。细胞然后resuspended 1×106淋巴细胞·毫升1RPMI 1640中补充10%胎牛血清,μg·1.25毫升1二性霉素b, 1%l谷氨酰胺,μg·100毫升1青霉素和100 IU·毫升1链霉素。细胞生存能力评估台盼蓝排斥和总是> 95%。PBMCs孵化在一式三份的浓度为1×105细胞·100μL1·好196年,圆底板块(磐微型板块;毕比Sterilin、石头、英国)。早期的有丝分裂原phytohaemagglutinin (PHA;英国生物抑制剂,斯托克波特)添加到培养细胞的浓度0.6μg·1在试点研究(n = 21患者)建立了地塞米松的抑制效果几乎是独立的PHA的用量范围0.054 - -0.6μg·1。地塞米松(Sigma-Aldrich;10-11年-10年4米决赛)添加浓度和盘子培养37°C在湿润的气氛中公司为5%248 h。细胞增殖测定氚化胸苷的吸收。结果表示为计数·分钟1。胸腺嘧啶核苷掺入作为细胞增殖指数比较PHA-stimulated t淋巴球之间有或没有地塞米松。在的最终浓度地塞米松抑制百分比(定义为最大抑制(我马克斯)目前研究)和地塞米松浓度梯度的抑制吸烟者和不吸烟者之间比较有和没有哮喘。
统计分析
基线特征比较使用卡方测试和Wilcoxon测试。哮喘和吸烟的影响在皮肤测试总分由方差分析评估,包括测试两个因素之间的交互作用。口服强的松的吸烟者的反应与不吸烟者患有哮喘被ANCOVA评估模型,调整每个因素的基线测量。对于那些测量取自日记卡、天1和2的意思是基线和11 - 14天的意思是被测量的响应。斯皮尔曼秩相关性被用来评估之间的联系的力量总皮肤测试分数和感兴趣的各种因素。分别为每一个病人,向下的最佳拟合直线的斜率由线性回归计算。淋巴细胞增殖反应数据图形化显示意味着±扫描电镜为清晰。
结果
基线特征
没有明显的差异:年龄;哮喘持续时间;等效剂量吸入beclometasone;% pred基线,预处理和post-bronchodilator FEV1;预处理和post-bronchodilator FEV1/用力肺活量(FVC)比;可逆性吸入舒喘灵(%);ATS哮喘损伤分数;总IgE水平;和诱导痰百分比巨噬细胞,中性粒细胞和淋巴细胞计数在吸烟者和不吸烟者患有哮喘(表1所示⇓和2⇓)。吸烟者与不吸烟者相比,患有哮喘,哮喘包含更少的男性受试者和有以下:绝对基线FEV低1;舒喘灵低绝对可逆性;更高的哮喘控制分数;对特定的IgEs的低比例检测呈阳性;和更低的F伊诺水平(表1⇓和2⇓)。与健康的不吸烟者相比,健康吸烟者年龄,FEV较低1(绝对和% pred)和pre-bronchodilator FEV低1/ FVC比率。吸烟史是长和血清可替宁水平降低哮喘的吸烟者与健康的吸烟者(表1⇓)。
局部beclometasone皮肤血管收缩剂反应
在均值±有显著区别sd皮肤的血管收缩剂反应总分吸烟者(5.39±3.58)和不吸烟者之间(7.26±3.05)与哮喘(p = 0.023;图1⇓);所有吸烟者之间(6.47±3.33)和所有不吸烟者(7.86±2.81;p = 0.006);和所有哮喘患者之间(6.29±3.44)和所有控件(8.13±2.50;p < 0.001)。没有吸烟(7.83±2.42)和从不吸烟的区别(8.33±2.56)控件(p = 0.228;图1⇓)。当调整彼此的影响,哮喘(p < 0.001)和吸烟(p = 0.017)都是独立与皮肤的血管收缩剂的反应有关。平均(95%可信区间(CI))减少哮喘病患者吸烟调整后为-1.70 (-2.66 - -0.73)。同样,意味着吸烟(95% CI)减少哮喘调整后为-1.18 (-2.15 - -0.21)。然而,没有证据表明两个变量之间的协同作用(测试的交互,p = 0.162)。
皮肤血管收缩剂反应局部beclometasone在哮喘受试者根据吸烟状态和健康对照组。░:四分位范围;- - -:中位数;▴:的意思。#:p = 0.091;¶:p = 0.003;+:p = 0.023;§:p = 0.224。
淋巴细胞增殖反应
地塞米松浓度抑制的影响PHA的增生性反应,类似于吸烟者与不吸烟者相比,哮喘和健康对照组(图2所示⇓)。均值±sd我马克斯吸烟者之间的相似与哮喘(50.3±26.5)与不吸烟者相比,哮喘(56±25.9)和健康对照组的吸烟者与不吸烟者相比(60.8±21.1)(50.4±27.4;所有四组比较p = 0.29)。的梯度的抑制浓度地塞米松在四组相似(p = 0.44)。
![图2 -](http://www.qdcxjkg.com/content/erj/29/1/64/F2.medium.gif)
抑制phytohaemagglutinin-induced外周血淋巴细胞的增殖地塞米松(10−11-10年−4米)从)对象与哮喘和b)健康对照组。♦:吸烟者;⋄:不吸烟者。数据意味着±扫描电镜扩散的地塞米松表示为一个百分比的获得没有地塞米松。
气道反应口服强的松
口服大剂量糖皮质激素管理后,意味着有显著改善(95% CI)清晨PEF (26.2 (2.5 -50);p = 0.031),白天症状(-2.3 (4 - -0.4);p = 0.016),哮喘控制得分(-0.9 (-1.4 - -0.4);p = 0.001)和救援药物的使用(-0.8 (-1.5 - -0.1);p = 0.029)和下降F伊诺(3.2 (0.1 - -6.4);p = 0.043)与哮喘与不吸烟者吸烟与哮喘。没有显著差异在两组之间的其他终端的变化(表3所示⇓)。
皮肤的血管收缩剂的反应和基线测量之间的关系
每天吸烟的数量增加有关皮肤试验总得分较低(r = -0.41;p = 0.010),因此增加了抗糖皮质激素。皮肤血管收缩剂反应的哮喘人口与剂量的beclometasone负相关(r = -0.38;p < 0.001)和哮喘控制分数(r = -0.41;p < 0.001),但与年龄无相关性(r = -0.175;p = 0.139),期间哮喘(r = -0.08;p = 0.491),哮喘严重程度评分(r = -0.17;p = 0.154)或总IgE (r = -0.108;p = 0.408)。
讨论
目前的研究表明,局部beclometasone皮肤血管收缩剂的反应是减少吸烟者有哮喘和哮喘和吸烟者与不吸烟者相比,没有哮喘。第一次,这些发现表明,皮质类固醇不敏感与哮喘的吸烟者可能更为普遍,影响组织以外的其他航空公司的网站。
局部beclometasone皮肤血管收缩剂的反应10,11已被用来作为筛选试验来确定相对糖皮质激素的抗炎效果22作为一个系统对糖皮质激素敏感的指标13。更客观的方法检测激素性皮肤漂白已经与视觉评分系统相比,但人类的眼睛被发现是最敏感的工具来测量皮肤漂白11。目前独立作者发现吸烟与哮喘相关的局部beclometasone受损皮肤的血管收缩剂的反应。这些发现表明,吸烟与哮喘以添加剂的方式采取行动,损害皮肤的血管收缩剂反应。原因(s)对哮喘的吸烟者减少皮肤的血管收缩剂反应是不清楚。如果慢性吸烟改变皮肤微脉管系统的结构和功能,那么这可能会影响皮肤的血管收缩剂对糖皮质激素的反应。然而,真皮的厚度和弹性前臂的吸烟者与不吸烟者23是皮肤的血管舒张反应皮内注射组胺24。吸入皮质类固醇的剂量、年龄、哮喘持续时间和严重程度评分类似哮喘的吸烟者和不吸烟者之间与哮喘,尽管前者显示受损的皮肤反应。皮肤的血管收缩剂的反应是由糖皮质激素受体拮抗剂抑制25与糖皮质激素受体的亲和力22;漂白的强度会使当地代谢抑制剂皮质醇26。这些发现表明,皮肤血管收缩剂的反应可能是通过糖皮质激素受体介导的。皮肤血管收缩剂之间的负相关反应,每天抽烟的数量,加强证据表明吸烟会损害对糖皮质激素的反应。目前还不清楚为什么哮喘应该独立与局部beclometasone受损皮肤的血管收缩剂的反应。皮质类固醇使用糖皮质激素受体的差别与对这些相关联27,28正如大多数哮喘患者都在中等剂量的吸入型皮质类固醇激素,这可能是一种解释为什么哮喘似乎是一个独立的危险因素的不良反应。
糖皮质激素引起血管收缩的机制可能涉及吸收的抑制血管收缩剂去甲肾上腺素在皮肤的神经末梢29日。对尼古丁暴露人类皮肤血管强化noradrenaline-induced皮肤血管收缩30.,但香烟的尼古丁或其他成分是否影响血管收缩剂对糖皮质激素的反应尚不清楚。的在活的有机体内对局部布地奈德的健康受试者受糖皮质激素受体多态性的影响31日。糖皮质激素受体α,β系数降低的PBMCs吸烟者32和类似的变化可能会影响糖皮质激素受体在皮肤上。其他可能的香烟烟雾诱发机制皮质类固醇阻力与其他组织4,包括组蛋白脱乙酰酶(HDAC)活动下降33可能与皮肤有关。HDAC活性表明减少患者的哮喘34慢性阻塞性肺疾病(COPD)35而在那些烟雾33。初步报告表明,HDAC活性降低支气管活检从哮喘的吸烟者相比,健康的吸烟者和哮喘不吸烟者36。如果找到类似的HDAC活性的变化在皮肤上,这也许可以解释当前的结果。综上所述,目前的研究结果表明,皮质类固醇不敏感与哮喘不仅影响吸烟者的航空公司,但也是一个系统性的效果,如图所示的减少,皮肤血管收缩剂反应与哮喘的吸烟者。
吸烟已经增加37和减少38淋巴细胞增殖。这个异常已经在一定程度上解决了在动物模型表明急性接触烟草烟雾或政府的尼古丁刺激淋巴细胞增殖,而慢性接触抑制39,40。类似的,大约线性的,对糖皮质激素敏感水平存在剂量依赖的相关性被发现在PHA-stimulated外周血淋巴细胞与哮喘的吸烟者与不吸烟者相比,哮喘。这与受损皮肤的血管收缩剂应对局部beclometasone和降低气道反应强的松在前组,表明组织对糖皮质激素敏感的变化与哮喘的吸烟者。不同组织敏感性的原因(s)在吸烟者是未知的,但缺乏相关性不同组织对糖皮质激素敏感的测试报告之前在健康志愿者41。淋巴细胞增殖试验执行体外,有可能是吸烟对淋巴细胞功能的影响可能不再存在。然而,从吸烟者PBMCs显示HDAC活性降低33和改变细胞因子水平42在体外。
本研究的结果证明降低口服糖皮质激素反应与哮喘的吸烟者与不吸烟者相比,以清晨PEF,救援药物的使用,白天症状和哮喘控制得分,但不是由FEV1。这个结果是类似的,但不是相同的,在之前的研究发现使用吸入fluticasone6或口服强的松7与安慰剂相比。当前的研究设计不同,单臂的治疗,包括吸烟者和不吸烟者肺功能基线比现在更严重的作者的先前的研究。
众所周知,吸烟是慢性阻塞性肺病的主要原因。往往很难区分吸烟者患有哮喘和慢性阻塞性肺病。然而,当前作者相信,吸烟者在当下研究哮喘而不是慢性阻塞性肺病。哮喘的吸烟者实现哮喘的诊断标准,平均年龄为47岁,症状从25岁左右,这将是罕见的慢性阻塞性肺病患者。哮喘的吸烟者有post-salbutamol FEV1的pred > 75%,高于预期在COPD患者症状,有可逆性舒喘灵≥15%。在先前的研究中,发现诱导痰嗜中性粒细胞数量升高与哮喘的吸烟者与不吸烟者相比有轻微哮喘43。在当前的研究中,有一个趋势提出了中性粒细胞计数比不吸烟者吸烟的哮喘患者(p = 0.070),但两组有更严重的疾病。
总之,目前的研究结果表明,吸烟者与哮喘有受损皮肤的血管收缩剂反应局部皮质激素治疗与不吸烟者相比,哮喘。这一发现表明,糖皮质激素与哮喘影响吸烟者的不敏感组织以外的其他航空公司的网站。这不仅影响吸烟者患有哮喘,但在其他corticosteroid-sensitive炎症条件可能也很重要。
确认
作者感谢k . Lattka医疗部门说明,Gartnavel总医院,格拉斯哥,英国的援助。
- 收到了2005年10月15日。
- 接受2006年7月29日。
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