摘要
新型喹诺酮类药物在胸腔积液中的渗透程度尚未研究。本研究的目的是确定莫西沙星和左氧氟沙星穿透肺脓肿胸膜液的程度。
脓胸创建通过胸腔内注射松节油(1 mL), 24 h后静脉滴注松节油2 mL (1×1010)大肠杆菌细菌(ATCC 35218)进入新西兰大白兔胸膜间隙。经胸水和胸膜液分析证实为脓胸后,莫西沙星和左氧氟沙星(25 mg·kg)-1为,注射。)管理。在12小时以上连续采集的胸膜液和血液中测定抗生素水平。采用高效液相色谱法测定抗生素水平。
每种抗生素都渗透到模糊胸腔液中。抗生素渗透是Moxifloxacin的最大(胸腔液/血液(AUC)下的面积(AUC)PF/ AUC血液)的比值为1.37),左氧氟沙星的比值为1.13。莫西沙星组胸膜液和血液抗生素水平达到平衡的时间(3.9 h)比左氧氟沙星组(4.4 h)快。用莫西沙星,胸膜液的峰值浓度(CMAX,PF)为2.77 g·mL-1并在最大胸膜流体浓度(T.MAX,PF)of 6 h after infusion and decreased thereafter. The peak blood concentration (C马克斯,血)为4.81µg·mL-1给药后1小时。左氧氟沙星作用下,胸水峰值(CMAX,PF=1.39μg·ml-1)发生于6 h (T.MAX,PF=6 h)。C马克斯,血1.88µg·毫升-1给药后1小时。
综上所述,两种喹诺酮类药物对家兔感染胸膜液的渗透程度存在差异。这些差异的临床意义尚不清楚。需要更多的研究来评估人类胸膜腔的药动学参数。
该研究由雅培制药(赫拉斯)和ELPEN SA制药公司的资助。
细菌肺炎在左右的病例中具有相关的肺血压胸腔积液1.这些含水粉末的含量少量的百分比表现出复杂的肺炎术(Parapneuxinon)和脓胸2那3..胸脓胸仍然是一个严重的医学问题。有几种可供选择的治疗方法,治疗的选择通常取决于疾病的严重程度。通常的初始治疗仍然是在胸腔插管的情况下使用非肠道抗生素4.那5..虽然许多抗生素用于治疗肺炎肺炎的肺炎,但胃肠液中肠胃外施用抗生素的药代动力学很少。先进的氟代喹啉代理商为革兰氏阳性和革兰氏阴性杆菌提供了良好的活性。氟喹诺酮类药物可变性地提供较高的抗性肺炎,和/或更大的厌氧覆盖率,提供用于治疗选定患者的优势,当用作单一疗法时。一些医疗系统采用氟喹诺酮作为临床途径的经验治疗,用于治疗社区肺炎6.那7..喹诺酮类是萘啶甲酸的衍生物,具有良好的药动学性质。因此,新的喹诺酮类药物,如左氧氟沙星和莫西沙星显示了治疗各种细菌感染的希望8.那9..
胸膜脓胸中最常见的微生物是厌氧菌,链球菌引起的肺炎组一个β-溶血链球菌和金黄色葡萄球菌10那11.重要的是,一旦胸膜液、痰液和血液样本被采集,就需要开始经验性治疗。可考虑第二代和第三代头孢菌素类、β-内酰胺-β-内酰胺酶抑制剂组合、大环内酯类、氟喹诺酮类、甲硝唑类、克林霉素、亚胺培南、氨基糖苷类或氮曲南12.
除了抗菌剂对致病微生物的特异性外,其在体内的分布也是决定其治疗效果的关键因素。如果抗菌剂没有进入有害微生物所在的部位,细菌仍然会继续生长体外易感性的生物体的药物。在胸膜疾病的治疗中的抗微生物剂的效用取决于足够的药物浓度的感染的胸膜内位点内的实现12.逸岸,具体到胸腔感染的治疗,以获得胸水的抗生素足够的水平是非常重要的。由于各种原因,如增稠的胸膜渗透性限制,后与血清水平相比全身给药可以是不同的获得胸膜液抗生素的水平。然而,一直在血清和胸腔积液抗生素水平之间的关系研究的限制。在人类大多数研究涉及患者比积脓等疾病。生理学很可能是与不同积脓,由于积脓流体是更酸性和胸膜表面是厚13.
胸水和血清抗生素水平之间的相关性还没有被详细研究的动物。蒂西拉等等。14,在使用新的救世马的新兔模型的优雅研究中,确定了胸膜液和血清抗生素水平的甲硝唑,青霉素,克林霉素,头孢菌,万古霉素和庆大霉素之间的关系。药代动力学被研究过注射。管理。发现将这些抗生素渗透到感染的胸腔液中,血清和胸膜液之间的平衡从一个抗生素变化到下一个抗生素。
本研究的目的是测定莫西沙星和左氧氟沙星在家兔脓胸模型的血液和胸膜液中的药动学参数注射。管理。假设莫西沙星和左氧氟沙星都能很好地穿透胸膜液,并在脓胸兔胸膜液中达到治疗水平。
材料和方法
动物
共有10名男性新西兰白兔(4.0-5.0千克)用于研究。这些动物被饲养在单个笼子里并允许食物和水随意.三只兔子用于研究胸腔抗生素水平注射。抗生素莫西沙星和左氧氟沙星的使用。该项目在希腊亚历山德鲁波利斯的色雷斯大学医学院实验外科学系进行,并由该大学的兽医监督。研究方案由希腊亚历山德鲁波利斯兽医管理局医学中心批准。
细菌的准备
这大肠杆菌菌株为ATCC 35218,在McCongi琼脂(Becton Dickinson, Sparks, MD, USA)上35℃培养24 h。在它长大后,1×1010大肠杆菌细菌(2毫升生理盐水溶液)注射至右侧胸膜腔。
积脓症感应
氯胺酮麻醉家兔;50 mg·公斤-1我是。(ketaset; Dodge Laboratories Inc.,Dodge堡,IA,美国);阿托品,0.04 mg·kg-1(Demo SA,希腊雅典);氧嗪,5 mg·kg-1我是。(Rompun;拜耳公司,勒沃库森)。每只兔右胸壁刮毛,用聚维酮碘(碘伏)和酒精擦洗。在加热灯下,将动物平卧于手术台上,用手术刀在右侧前胸内侧至外侧行0.5 cm皮肤切口。一个特别准备的16号管导管(在导管尖端附近有额外的孔)被引入胸腔。置管后,将胸膜腔内的空气吸出并固定导管南卡罗来纳州。在肩胛骨之间15.胸部管附接至一个海姆利希阀与三通阀,在线胸管和海姆利希阀之间。
松节油(1毫升)16(Riedel de Haen; Sigma-Aldrich LableMikalien,GmbH,Seelze Germany)被施入动物的胸腔空间,然后用1.5ml盐溶液冲洗胸管。大肠杆菌(1×1010in a final volume of 2 mL saline) was injected 24 h later through the cannula into the pleural cavity of the animals.
积脓症验证
在细菌注射后,在12,24,48和72小时中除去最多0.5ml胸腔液体进行分析。使用血液机器分析胸腔流体的pH17(GEM总理3000,型号5700;仪表实验室,列克星敦,MA,USA),将葡萄糖和乳酸-d-氢化使用共同的微生物实验室(LDH的在本研究的实验室的上限进行了分析(LDH)的水平是460û·L-1).如果葡萄糖含有葡萄糖,据说脓肿是出现的,如果葡萄糖含有严重感染,则呈现出血糖液<40毫克DL-1并且如果胸水pH为<7.10和LDH为> 1000û·L-115.
抗生素管理
在证实脓胸存在后,3只兔子通过耳缘静脉注射莫西沙星,3只注射左氧氟沙星,时间为3分钟。注射抗生素25 mg·kg-1)为莫西沙星(Octegra; Elpen制药公司有限公司希腊)或左氧氟沙星(Tavanic;安万特制药)。四只动物作为对照和被感染大肠杆菌但没有得到治疗。
胸膜液和血液标本
在抗生素给药后的1,4,6和12小时,血液和模糊胸膜液体样本在抗生素给药后的1,4,6和12小时,以在后来的机会下测量抗生素水平。在收集样品后,立即将血液和胸腔流体样品以850g离心15分钟。然后将上清液在-20℃下冷冻过夜。该标本被运输到毒理学中心和法医学研究,医学院,克里特大学,克里特岛,克里特岛,希腊,第二天早晨,使用带有干冰的制冷凉爽。每种抗生素使用三只兔子。对于所有抗生素,在每个时间点获得血液和胸膜液的重复标本。每个时间点的重复值的手段用于分析。
抗生素水平的测量
化学物质
甲醇和乙腈(HIPER SOLV BDH实验室用品,POOLE,UK),水,正磷酸85%,磷酸二氢钾(E. Merck,Darmstadt,德国)和三乙胺(Fluka Chemie,AG GH-9471; Buchs,Neu-ULM,德国)用于HPLC分析。
标准曲线的制备
将左氧氟沙星和莫西沙星分别置于100µg·mL的水中,配制成两种不同的原液-1储存于0°C。从每一初始原液中分别制备0、0.065、0.125、0.25、0.5、1、2.5、5和10 μ g·mL的左氧氟沙星和莫西沙星稀释溶液-1.两种药物的曲线均呈线性。分别计算标准溶液中左氧氟沙星和莫西沙星在0.065和0.125 μ g·mL浓度下的检出限-1, 分别。
生物提取物定量
来自健康动物的血液样品用作盲样品。从两种药物的标准溶液中制备了八点标准曲线。最终强化标准的浓度为0,0.25,0.5,1,2.5,5,10和25μg·mL-1.曲线对于药物的线性和量化限制,可以在0.250μg·ml时计算精确测量。-1在强化解决方案,左氧氟沙星和莫西沙星。
装置
A reversed-phase HPLC method was carried out using a Kromasil 100, C18, 5-µm, 250 mm×4.6 mm-ID column (Spectra Physics 8800; San Jose, CA, USA). The mobile phase for the determination of levofloxacin consisted of water:methanol:triethylamine (750:250:4)18.将流动相的pH调节至3.2,浓缩正磷酸。通过0.20-μm过滤器(Sarstedt AktiengesellScafr&Co.,Numbrecht,Germany)过滤流动相。洗脱条件是等级,流动相流速设定为1.0ml·min-1.这mobile phase for the determination of moxifloxacin was a mixture of 10 mM acetonitrile and potassium dihyrogenphosphate buffer (200:750 v:v)19那20..用浓磷酸将pH调至3.8,流动相通过0.20µm过滤器过滤。采用紫外/可见检测器(Spectra Physics 8450)在297 nm处进行紫外吸光度检测,检测器范围设置为0.01 AUFS。在此条件下,左氧氟沙星的滞留时间为14.7 min,莫西沙星的滞留时间为13.86 min。
兔子的尸检
兔子被处死通过致命剂量的戊巴比妥注射。通过96小时的边缘耳静脉。在尸检时,胸腔被冠状血管,并检查右侧和左偏瘫。从附着的胸壁和肺部胸膜胸膜胸膜的活组织检查标本被置于福尔马林中进行微观分析。
统计分析
值表示为平均值±sd除非另有指示。血液和胸膜液浓度的最大值(C最大限度)和在血液峰浓度和胸膜液的时间(T.最大限度)直接从相应的曲线中取出。通过梯形规则估计超过12小时(AUC)的时间浓度曲线下的区域。AUC:最小抑制浓度(MIC)比率,定义为抑制浓度曲线下的区域,并通过将AUC除以胸膜流体来计算22通过麦克风脓肿中的常见菌株的麦克风。
结果
所有的兔子松节油的胸腔内注射1×10后开发积脓10大肠杆菌(table 1⇓).胸膜液较厚且明显不透明。胸膜液pH <7.10,胸膜液血糖<40 mg·dL-1LDH为> 1000 U·L-1in all rabbits (table 1⇓).所有家兔胸膜液培养结果均为阳性(表1)⇓).
胸膜液抗生素水平与血液抗生素水平之间的关系因不同的抗生素而不同(图1)⇓).首先,抗生素的渗透度进入胸膜腔,其次,血液和胸水平衡的时间:这些关系在两个方面进行了初步评估。到的不同抗生素渗透到胸膜液的程度通过比较AUC评价PF/ AUC血液ratios of each antibiotic (table 2⇓).莫西沙星(AUC)的抗生素渗透性更强PF/ AUC血液比= 1.37)比左氧氟沙星(比= 1.13)。AUCPF/ AUC血液莫西沙星和左氧氟沙星的比值为>1,因为尽管血药浓度降低,但胸水浓度一直升高到12小时。
![图。1。-](http://www.qdcxjkg.com/content/erj/24/3/466/F1.medium.gif)
a)左旋氧嘧啶和b)血氧氧氧胞苷浓度分布(▪)和胸膜液(▵)之后注射。管理。数据以平均值±表示sd三只兔子。
莫西沙星组胸膜液抗生素水平和血液抗生素水平达到平衡的时间(3.9 h)比左氧氟沙星组(4.4 h)快。用莫西沙星,胸膜液抗生素水平在输注6小时后达到峰值,随后缓慢下降。胸膜液在3.9 h后超过血药浓度,6 h和12 h时比血药浓度高数倍。
With levofloxacin, the peak pleural fluid antibiotic level occurred 6 h after infusion. After the 6-h time point, it decreased slightly until the 12-h time point. The pleural fluid level exceeded the blood level 4.4 h after infusion and was higher than the blood level at 6 and 12 h.
两种不同抗生素的药代动力学数据在表2中进行了比较⇑.左氧氟沙星组胸水峰值与血峰值的比值较高。左氧氟沙星和莫西沙星在胸腔液中出现抗生素峰值的时间相同(6 h)。
病理学研究
处于处死动物时,内脏和椎管胸膜表面增厚,存在多种粘连,从而导致形成许多脓袋。用Haematoxylin-eosin染色的组织学切片显示出突出的急性炎症细胞浸润。
讨论
本研究利用家兔脓胸实验模型表明,莫西沙星和左氧氟沙星对感染胸膜液的渗透程度因抗生素的不同而不同。
除了AUCPF /血比例,抑制曲线下的面积允许具有长半衰期的药剂,如氟喹诺酮类素,彼此比较23那24.对于胸膜脓肿中最常见的微生物,如h .流感那大肠杆菌那克雷伯氏菌。那金黄色葡萄球菌和肺炎链球菌那a MIC of 0.03–0.25 µg·mL-1(莫西沙星)或MIC为0.03-1µg·mL-1(左氧氟沙星)是必需的6., AUC/MIC比值允许对所研究的喹诺酮类药物进行对比。
Strahilevitz等等。22研究莫西沙星对家兔肺炎球菌胸膜脓胸模型的影响。他们报告莫西沙星在脓胸液中超过12小时的AUC为34.3 mg·h-1·L-1而本研究的AUC为22.9µg·h-1·ML.-1.在strahilevitz的研究中等等。22时,血中AUC为29.4 mg·h-1·L-1而本研究为16.7µg·h-1·ML.-1.Strahilevitz的研究中血液中AUC的原因等等。22目前尚不清楚,但血液中AUC的较高值可能是本研究中脓胸液中AUC较低的原因。
AUCPF /血莫西沙星与左氧氟沙星的比值分别为1.37和1.13,莫西沙星与左氧氟沙星的胸膜液抗生素水平和血液抗生素水平达到平衡的时间(3.9 h)比左氧氟沙星(4.4 h)快。在之前的研究中14,AUCPF /血清甲硝唑0.98、青霉素2.31、克林霉素0.74、头孢曲松0.82、万古霉素0.61、庆大霉素0.49。在同一项研究中14,甲硝唑的均衡时间为2小时,对于青霉素,4.5小时,对于CEFTRIAXONE 4小时,4小时,对于庆大霉素为3.5小时。与上述值的比较表明,较新的喹诺酮类以较旧的抗生素可比较的方式穿透模糊胸腔液。
尽管血液抗生素水平随时间递减血液抗生素水平递减,但静脉内氧氟沙辛和左氧氟沙星的显着水平仍然在胸膜空间中仍然在胸膜空间中。在以前的研究中,Strahilevitz等等。22报道了莫西沙星和特谢拉的类似发现等等。14only measured levels up to 6 h. However, they reported that levels of ceftriaxone were undetectable in the pleural fluid after 4 h14.
一些以前的研究表明,抗生素患者渗透水平的抗生素差异很小。泰丽特等等。25研究了16名患者(包括五脓胸),并得出结论认为抗生素浓度通常是血清的同时获得样品中的浓度的≥3/ 4(抗生素报道由Taryle研究等等。25包括青霉素,头孢菌素,牛奶菌素,氨苄青霉素,克林霉素和氨基糖苷)。然而,随后的研究表明,如果存在Empyema,氨基糖苷,特别是庆大霉素进入胸膜液中的渗透性差26.
坂湖等等。27研究肺切除术后静脉注射抗生素从肺向胸膜腔的渗透,结论肺切除术后脓胸患者需要更高剂量的抗生素。
在目前的研究中,莫西沙星和左氧氟沙星胸膜液水平持续升高的发现与特谢拉对青霉素的发现相似等等。14.胸膜液抗生素水平保持在>1µg·mL-1在输注后12小时,同时获得的血药浓度下降到较低水平。原因尚不清楚。也许答案与氟喹诺酮类药物之间的关系有关,炎症时胸膜腔通透性增加,脓胸时胸膜液酸度增加。在脓胸实验模型中,由于喹诺酮类药物在感染胸膜液中长期升高,因此对脓胸患者的易感微生物使用喹诺酮类药物可能是有利的。
血清和胸膜液中抗生素的平衡取决于几个因素。这些因素包括胸腔积液的大小(胸腔积液越大,平衡速度越慢)、胸膜厚度(胸膜越厚,平衡速度越慢)、胸膜炎症程度(由于蛋白质通量的增加,炎症会更快地达到平衡)和抗生素本身。在本研究中,上述因素均保持不变,唯一变量为抗生素。
本研究有一定的局限性。目前还不清楚这些在兔子身上获得的结果是否可以外推到人类身上,因为兔子是一种内脏胸膜很薄的物种,而人类的内脏胸膜很厚28.在胸膜较薄的物种中,抗生素的平衡可能会更快。在3分钟的时间内注射抗生素并不是给人使用这些抗生素的典型方法。这种输注方法也可能导致平衡曲线的变化,如果使用较长的输注时间,平衡曲线会有所不同。在目前的研究中,抗生素治疗在脓胸过程中相对较早开始,在细菌攻毒后24小时。如果脓胸持续了几天,平衡时间可能会更长。在本研究中反复抽吸胸膜液体可能被认为是部分胸膜脓胸引流,有助于恢复。然而,它更接近于目前的临床方法胸膜脓胸。
作者认为,在兔脓胸模型中,两种喹诺酮类药物对感染胸膜液的渗透程度以及血清和胸膜液的平衡时间存在差异。这些差异在人类中的临床意义尚不清楚,因为没有足够的数据表明这些抗菌药物在人类受感染胸膜中的渗透情况。需要更多的研究来评估胸膜腔的药动学参数。
- 收到了2004年3月4日。
- 公认2004年5月24日。
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