抽象的
具有Xpert MTB / RIF的粪便简单的加工方法,对幼儿产生可靠的结果,从而为儿童的痛苦诊断提供了最低医疗水平的机会。http:///wly/8cei30nb0he.
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幼儿肺结核(pTB)的诊断通常依赖于临床诊断,因为幼儿通常不能产生痰样本。痰诱导或胃误吸可用于获得微生物诊断样本,但这些方法会引起不适、压力和疼痛,而且不能在最低层次的卫生保健系统中进行,从而限制了对儿童进行pTB诊断的途径。
然而,粪便样本很容易获得,并已证明含有结核分枝杆菌从吞下的痰[1].虽然粪便历史地接受了作为样本来检测PTB的样本的注意力[2]最近的出版物突出了其对儿童细菌学诊断的价值和与艾滋病毒的患者[3.-5.].Genexpert MTB / RIF(XPEPEID)(Cepheid,Maurens-Scopont,法国)在儿童粪便样本中产生了准确的结果,其特异性和敏感性分别超过95%和80%,与呼吸样本上的Xpert相比[6.那7.],这是结核病的主要诊断测试[8.].然而,到目前为止描述的粪便样品加工方法是复杂的并且通常是镜面培养处理,需要用于去污,中和和离心的设备。有些人申请商业缓冲液以增加细菌或浮选的糖,以浓缩玉米菌菌杆菌(5.那6.].最近描述的方法不包括离心仍然使用玻璃珠和过滤[6.那9.].这些方法不能在低收入的高负荷国家的较低实验室水平中轻松实施。
Xpert测试可在较低的医疗保健水平上访问,其中患病儿童最初存在;因此,在粪便上使用它可以大大改善儿童结核病的细菌学诊断。在这里,我们描述了一种简单的加工方法,几乎与Xpert测试的痰液处理一样简单,具有在初级保健水平上使用的潜力。
这项实验室研究于2016年10月1日至2017年5月30日在赫尔辛基宣言(1975年)的道德标准之后,在印度尼西亚·印度尼西亚·印度尼西亚大都市肺病的哈桑·萨德利克·医院(1975年),是肺病的第三级护理医院。根据护理标准,被要求在诊断儿童诊断PTB的每个程序和随后的样本中获知卡雷克斯人。15岁以下的连续儿童收集一个粪便样品,提出PTB。大多数儿童还通过对年龄最多5年或使用雾化器的乳腺诱导来提交预先施用的呼吸样品,其胃吸吸收使用雾化剂为年龄较大的儿童。如前所述加工呼吸样品[10.那11.].
使用简单的粪便加工方法处理凳子样品,该方法接近处理XPERT测试的痰液的步骤:~1g凳子,使用木制涂抹棒从样品中拾取,加入到10ml pH 7.4(Gibco,Schwerte,德国Gbswerte)),通过剧烈摇动并留下≥10分钟的粪便颗粒以倾泻,之后将2ml上清液与XPERT试剂盒中提供的2-4ml的XPERT MTB / RIF样品试剂混合。15分钟后,将2ml将该混合物转移到墨盒中以进行XPERT测试。用剩余的2mL混合物重复次数次数试验。我们计算了比例的二项式确切置信区间。
本研究共有36名儿童,中位年龄为17个月(第5.5-78个月);20(56%)儿童<2和5(14%)为2-5岁。玉米菌菌在六(17%)儿童中检测到一个或两个样本(表格1)。29(81%)儿童也提交了一个呼吸样本;对于20(69%)儿童,这是通过胃吸吸收获得的。对于29名儿童中的27例,粪便和呼吸样品中获得了有效的测试结果,以及24例(89%,95%CI 71-98%),结果是协调的(表格1)。三(8%,95%CI 2-22%)儿童具有不和谐的结果所有测试玉米菌菌阳性凳子,但不是呼吸样本。他们的中位年龄为5个月(相对伴有协调的儿童11年玉米菌菌粪便和呼吸道样本呈阳性)。细菌学证实的肺结核患儿年龄在3个月至13岁之间(中位数3.2岁)。所有被诊断为结核病的儿童都开始接受抗结核治疗。
使用简单的两步处理方法,获得了Xpert测试结果对呼吸样品和粪便的高一致性。我们表明,使用Xpert的测试粪便样本可以增加患有结核病的细菌学确认的儿童的数量,并检测到三种额外的结核病病例。可能是,这些额外的病例具有外肺结核,如粟粒/散发和胃肠结核,并且脱落更多的杆菌通过他们的粪便比呼吸样本。特别是在幼儿中,免疫系统并不完全成熟,这可能导致传递疾病和在多种组织中复制的细菌。血液源性结核促进促进患者在尿脂血红素(LAM)上的患者中发现,这可能是由于菌丝杆菌的患者[12.].尿液阳性检测患者的尿液也是XPERT阳性[13.].患有结核病的幼儿的肠道也可能发生类似的过程。另一种可能是这些孩子的呼吸样本质量较差。Bonnave.等等。[14.]从胃吸汗(60%)中获得较低的诊断产率(60%)(64%)。
粪便样品(40个测试中的六个,15%)的粪便样品的速率较高(六个,其中30分,3%);对于36个粪便样品中的两(6%),重复剩余混合物的测试并未导致解释结果。七种不确定的测试结果中的六种有错误代码(2008,5006或无效),表明固体颗粒阻挡盒。因此,有用于进一步优化处理方法的空间,例如通过在过程中的每一个关键步骤提供清晰的说明,从待挑选的粪便量(按粪便样品类型),与粪便和缓冲液混合,并将上清液转移到Xpert盒中。
这项小型研究有几个限制。首先,它包括一个有限数量的儿童,其中只发现了六个玉米菌菌积极的。其次,它是在一家高级护理医院进行,接受结核病患者患有高度怀疑但尚未诊断的儿童,其中一些人严重生病。第三,由于这是一个实验室研究,我们没有影响哪些儿童被选择用于提交粪便样本,也没有知道额外的儿童是否被诊断为临床理由。此外,我们没有有关抗核使治疗或以前结核集发作的结果的信息。
虽然本研究在第三级护理医院进行,但粪便加工方法可以安全地应用于较低的医疗保健水平,因为不需要生物安全柜或复杂,昂贵或难以获得的设备,尽管在印度尼西亚无处不在PBS。这里呈现的方法的更简单和更安全的变体,KNCV简单的结核检测的一步粪便方法,省略PBS步骤,因为直接添加到样品试剂中。该方法将在更多的健康设施中进行测试,以证明常规实施的可行性和可接受性。我们预计这么简单,无创的方法可以从根本上改善对结核病的细菌学诊断的访问,特别是在非常幼儿中。
致谢
Heda Melinda Nataprawira(儿童健康部门,Hasan Sadikin总医院和医学院,Universitas Padjadjaran,Bandung,Indonedia)感谢招聘儿童和Ida Parwati(临床病理学,Hasan Sadikin综合医院和教师作者:王莹,帕迪亚)医学
脚注
利益冲突:B. Andriyoko没有什么可披露的。
利益冲突:H. Janiar没有什么可披露的。
利益冲突:R. Kusumadewi没有什么可披露的。
兴趣冲突:E. Klinkenberg无需披露。
利益冲突:P. de Haas没有披露。
利益冲突:E. Tiemersma没有什么可透露的。
支持声明:通过挑战TB根据协议号援助援助援助援助委员会AAA-14-00029,这项工作部分由美国国际发展机构(USAID)提供资金。内容是作者的责任,不一定反映美国国防军或美国政府的观点。本文的资金信息已存入CrossRef Resder注册表。
- 已收到2018年10月5日。
- 公认2018年11月24日。
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