摘要
结核病药物测量的质量控制对新药开发和患者护理至关重要http://ow.ly/KxWNc
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结核病仍然是一个主要的全球健康问题。结核病药物暴露不足是导致治疗反应不理想和产生耐药性的主要因素之一,以下研究结果证明了这一点:体外中空纤维模型[1.]; 药物浓度与疗效关系的临床研究[2.–5.];药物发生试验[6.];最近的一项荟萃分析[7.].
更具体地,这些浓度效应评估表明临床医生应规定更高剂量的利福平[2.,5.],乙酰化状态应用于确定异烟肼的剂量[6.,7.],吡嗪酰胺的较高剂量和曝光可能会增加效力[4.,5.].
显然,这些研究还强调了在开发最终将被世界各地临床医生应用的结核病新药期间仔细的浓度效应评估的相关性。
最后,这些研究支持由世界各地选定中心的临床医生和药剂师应用的结核病药物治疗药物监测(TDM)概念[8.–10]. 与对所有患者使用相同的固定剂量相比,TDM通过测量血清(或血浆)药物浓度来寻求药物剂量的个体化。
学术界的药代动力学评估和药物发展方案的使用,以及TDM的使用需要应用分析方法对TB药物。估计(内部)方法验证和估计设备和技术人员资格的验证等程序,应确保这些方法具有足够的准确性,精度和特异性。此外,参与支持性(外部)QC(或能力测试)计划是质量保证的重要组成部分,也为临床医生,研究人员,认可机构和监管机构提供了实验室能力的证据[11].
值得注意的是,(半)自动免疫测定法不能用于结核病药物的测定。结核病药物是通过所谓的色谱分析来测量的,而色谱分析必须在每个实验室开发和验证,有时是基于已发表的分析方法,这也解释了目前结核病药物的TDM可用性有限的原因。显然,“内部”开发的更复杂、劳动密集的测定方法阻碍了药物测量的实验室间可比性,肯定需要参与外部QC计划。
不幸的是,国际实验室间质控计划尚未用于结核病药物。因此,我们启动了这样一个外部质量控制计划,重点关注一线和一些二线结核病药物。
参与第一轮QC程序的TB药物是异烟肼,利福平,吡嗪酰胺,乙胺醇(一线TB药物),莫西沙星和LINEZOLID(二线TB药物)。所有原料药物都具有分析质量,具有高且特定的纯度(> 99%)。使用校准的移液器和体积烧瓶将Tb药物称为单独校准的余量并溶解在甲醇/水中。从区域血库获得无毒的人血清。用Tb药物的溶液掺入空白的血清以获得两个QC样品。两种样品中的每一个都含有低或中间/高浓度的所有六种TB药物(表1)。考虑到一些药物的不稳定性并降低运费,立即冷冻干燥QC样品。我们之前在冷冻干燥后的各种条件下评估了稳定性(未发表的数据)。所有称重的浓度被认为是真实值。
来自两大洲的七个实验室参加了第一轮方案。冷冻干燥的QC样品在室温下运输至这些实验室。实验室被告知样品必须储存在4-8小时oC收到后。他们被要求用1个样品重新组合样品 并尽快对其进行分析。重组样品也可储存在−80oC在稍后的时间点进行分析。要求参与的实验室在调度样本的6周内退回结果。
将所有实验室结果标准化为参考真实值的百分比后,计算描述性统计。通过从这些百分比中减去100%,计算出真实浓度的百分比偏差(不准确度)。真实值周围的20%限值被认为是令人满意的测量的合适阈值,正如我们在其他国际质量控制计划中使用和证明的那样[12,13].所有参与者在报告结果后的2个月内被告知他们的表现。
七个参与实验室中的两个能够测量所有六种TB药物;一个实验室测量了五种药物(所有四种一线TB药物和Moxifloxacin),两个实验室测量了四种药物(所有四种一线TB药物,但不是二线药物Moxifloxacin和Linezolid)和两个剩余的实验室能够测量少于四个一线药物。使用的分析方法是常规的高效液相色谱,超级性能液相色谱,液相色谱,具有质谱检测或气相色谱,具有质谱检测。
总共进行了58次分析,其中48次(83%)的测量结果令人满意(准确)。表格1总结了结核病药物的结果。三个实验室的利福平浓度过低,无论是低浓度还是中/高浓度。此外,该方案显示乙胺丁醇浓度对一个实验室来说过高,一个参与实验室的吡嗪酰胺浓度有升高的趋势,而利福平在另一个实验室的浓度也同样很高。
浓度水平似乎不影响准确性,因为在29次测量中有24次(83%)在低浓度和中/高浓度水平下都能令人满意地完成。
当由执行实验室安排时,七分之三的实验室在20%的误差范围内执行所有测量(即满分为12分,满分为10分,满分为2分)。其他实验室测量了12个实验室中的10个(83%)、6个实验室中的4个(67%)、8个实验室中的5个(63%)和8个实验室中的5个(63%)的浓度在可接受的限度内。
83%的测量值在实际称重浓度的20%范围内,这意味着该QC计划的初步结果表明参与实验室在测量结核病药物方面表现相当好。相比之下,针对抗逆转录病毒药物和抗真菌药物的第一轮类似计划分别在65%和77%的测量中获得了令人满意的结果[12,13]. 六分之一(17%)的结核病药物测量仍然不准确,这些数据与药代动力学研究和TDM相关。在这方面,应该认识到,该计划的第一轮可能选择了表现最好的实验室或那些强调质量保证的实验室。
利福平在第一轮试验中的结果明显比其他药物差。我们考虑了这些结果可能是由于冻干样品的不完全溶解,因为利福平在水溶液中微溶。在下一轮中,我们将再次验证样品的溶解情况。
除了可能的QC程序问题外,许多其他错误来源也可能解释利福平的结果,包括方法(验证)、设备、技术和文书问题,以及无法解释的错误[11].在过去,我们曾通过向实验室发送错误评估表,对其他QC项目中可能出现的错误进行评估;这将在未来几轮结核病规划中加以考虑。
值得注意的是,许多作者在世界各地的人群中报道了低利福平血浆/血清浓度。根据第一轮的结果质量控制计划,它不能被排除,这些发现可能解释不准确测量的利福平,然而这个项目第一轮的结果不应该被外界和随后的结果发应该等待。
许多研究分组目前正在研究较高剂量的利福平的效果,并通过这些剂量在肺和外肺Tb中获得的由此产生的更高的暴露。这强调了对利福平测定的准确测定和该QC程序的有用性的相关性。
除了在一些实验室测量到的利福平浓度较低外,该方案还发现一些实验室在分析乙胺丁醇和吡嗪酰胺方面可能存在不准确或以前未发现的问题。通过参与该计划,这些实验室对这些问题有了警觉,这可能促使它们优化自己的方法和实验室内部QC程序。显然,这就是外部QC控制测试如何实现实验室绩效的改善和实现实验室之间结果的互换[9,11].
对于第一轮计划,我们选择了所有第一线TB药物(TB药物的群体),Moxifloxacin作为Tb药物(氟喹诺酮类药物)的枢轴代表[14]和利奈唑胺,因为它经常用于多重耐药/广泛耐药结核病治疗,尽管它被分配在第五组结核病药物中[10,15].在未来几轮计划中,我们将考虑纳入其他结核病药物(考虑到参与者的要求),并为参与结核病药物TDM的患者提供两例与测量有关的病例。参与者人数的增加可以评估所测药物、浓度水平或分析方法对结果准确性的影响,并将提供对实验室整体表现的更好印象。
总之,考虑到人们对结核病药物的药代动力学的高度兴趣,用于测定血清/血浆中结核病药物的外部QC是至关重要的,无论是开发新的结核病方案还是直接应用于患者护理(TDM)。我们制定了结核病药物的实验室间(外部)质量控制计划或熟练测试计划,并邀请实验室参与这一计划。
脚注
利益冲突:披露可与本文的在线版本一起在www.qdcxjkg.com.
- 收到了2014年9月26日。
- 认可的2015年2月9日。
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