文摘gydF4y2Ba
特发性肺纤维化(IPF)的病理变化通常开始于胸膜下肺区域,这个功能目前无法解释。IPF以及bleomycin-induced肺纤维化,在吸烟者更常见。我们假定的碳颗粒,这是香烟烟雾的主要组件运往肺泡和胸膜表面,可能参与胸膜下纤维化的发展与胸膜间皮的细胞通过交互。gydF4y2Ba
让老鼠服用碳颗粒结合博来霉素通过气管内的和/或使用histomorphometry胸膜腔内注入和纤维化评估。gydF4y2Ba
碳管理严重引起的胸腔胸膜纤维化在博来霉素的存在,而博来霉素单独没有纤维发生的影响。与进步的纤维化相关的胸膜反应是在胸膜下地区,与人类IPF相似。通过mesothelial-fibroblastoid变换矩阵积累在这个领域发展,间皮的细胞获得myofibroblast特征。相比之下,碳没有夸大bleomycin-induced后肺纤维化合并气管内的管理。gydF4y2Ba
这代表了一种新颖的方式引起胸膜纤维化的健壮的实验模型。它还表明,碳粒子可能涉及的代数余子式启动和/或胸膜下肺和胸膜纤维化的进展。间皮的细胞似乎是关键贡献者这纤维化的过程。gydF4y2Ba
- 药物引起的肺炎gydF4y2Ba
- epithelial-to-mesenchymal过渡gydF4y2Ba
- 特发性肺纤维化gydF4y2Ba
- myofibroblastgydF4y2Ba
- 胸膜gydF4y2Ba
- 改变增长factor-βgydF4y2Ba
纤维化是慢性疾病的公分母,包括肺部疾病如哮喘、肺纤维化、肺动脉高压和胸膜纤维化。胸膜和肺纤维化有许多共同的特征。最明显的特点是,疾病的特点是细胞外基质过度沉积和导致限制性肺功能的损害。胸膜纤维化疾病作为一个实体不被认为是肺纤维化,但尽管如此,它可以引起严重的功能障碍,显著降低生活质量。胸膜纤维化的初始的事件往往是可识别的,包括药物、辐射、石棉、血胸,开胸冠状动脉旁路手术,最常见的传染病gydF4y2Ba1gydF4y2Ba。这强烈的对比特发性肺纤维化(IPF),它没有根本原因。然而,在某些情况下,甚至胸膜纤维化是特发性,这些案件通常是进步并导致死亡gydF4y2Ba2gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba4gydF4y2Ba。与IPF相似,没有有效的疗法反向建立胸膜纤维化。其负面影响疾病相比,胸膜纤维化可能成为理想的治疗方法来治疗难治性胸腔积液的积累。因此,研究胸膜纤维化的机制和有效的pleurodesing代理是高度相关的,激动人心的发散角gydF4y2Ba5gydF4y2Ba,gydF4y2Ba6gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
IPF通常快速发展多年,总是妥协肺功能。这种疾病的特点是myofibroblast增殖和积累成纤维细胞的焦点,而随着进步的胶原蛋白沉积破坏肺架构。最近的证据表明,IPF是异常的治疗反应的结果重复的微观损伤肺。有趣的是,IPF的特点之一是,不仅早期异常,而且先进的纤维化主要是位于胸膜下区gydF4y2Ba7gydF4y2Ba。这个特征和原因不明的IPF的特性的一个理由在我们的研究中,描述的实验以及胸膜纤维化本身的调查。我们最近报道,纤维化细胞因子过度表达的转化生长因子(TGF) -β1胸膜空间不仅诱发进步胸膜纤维化,但也伴随着异常的胶原蛋白沉积在胸膜下肺实质。我们还表明,间皮的细胞胸膜纤维化中发挥关键作用,我们提出,他们可能参与IPF的胸膜下启动gydF4y2Ba8gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
博来霉素是众所周知的诱发不良反应导致肺纤维化gydF4y2Ba9gydF4y2Ba,gydF4y2Ba10gydF4y2Ba。博来霉素也是一个高效和广泛使用的化合物的诱导实验动物肺纤维化。相比之下,很难产生胸膜纤维化使用博来霉素在小型啮齿动物,尽管它是一个有效的肋膜选择治疗gydF4y2Ba11gydF4y2Ba。吸烟是一个风险因素对IPF的发展gydF4y2Ba12gydF4y2Ba和bleomycin-induced肺纤维化的病人gydF4y2Ba13gydF4y2Ba,它可以在啮齿动物夸大实验性肝纤维化gydF4y2Ba14gydF4y2Ba。目前还不清楚如果一个特定的化合物在香烟纤维化过程增强了,或者如果这是由于额外的肺泡损伤。烟草烟雾是一个复杂的混合物> 4000种化学物质,像其他燃烧副产品,含有相当数量的超细颗粒gydF4y2Ba15gydF4y2Ba。碳颗粒被发现在香烟烟雾和污染,而炭黑也广泛用于工业。一旦吸入,这些粒子可以达到肺泡腔和走向胸膜表面gydF4y2Ba16gydF4y2Ba。很可能存在的微观肺泡损伤提出了IPF是由几个有害的侮辱,我们提出,香烟烟雾组件,特别是碳粒子,可能涉及的代数余子式的启动和/或胸膜下肺和胸膜纤维化的进展。gydF4y2Ba
我们检查了碳的影响bleomycin-induced胸膜纤维化疾病和肺。我们发现碳颗粒没有恶化bleomycin-induced在肺组织纤维化,但关键的感应胸膜,博来霉素的胸膜腔内给药后胸膜下间质纤维化。我们提供证据表明间皮的细胞在这一过程中发挥着重要的作用。gydF4y2Ba
方法gydF4y2Ba
动物的过程gydF4y2Ba
女性瑞士CD1小鼠(查尔斯河,圣Germain-sur-l 'Arbresle,法国)被安置在无菌条件。啮齿动物提供了食物和水gydF4y2Ba随意gydF4y2Ba。动物治疗根据指南的Ministere de la矫揉造作的et de la Technologie(法国巴黎)。所有的实验都是批准的拉西'Ethique de因为学校德勃艮地(法国勃艮地)。程序执行与异氟烷吸入麻醉(TEM、Lormont、法国)。在气管内的滴注法、动物收到50μL氯化钠0.9%,碳0.1 mg·鼠标gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba(炭黑101、90 nm直径;德固赛,法兰克福,德国),博来霉素0.07 U·鼠标gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba(blenoxane;百时美施贵宝公司,QC,加拿大蒙特利尔)或博来霉素+碳gydF4y2Ba通过gydF4y2Ba22 g气管内导管引入没有手术。博来霉素和碳在生理盐水稀释0.9%。胸膜腔内注射,胸膜腔内给药动物收到一封(100μL)氯化钠0.9%,碳(0.1 mg·鼠标gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba),博来霉素(0.07 U·鼠标gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba或0.48 U·鼠标gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba)或博来霉素+碳,如前所述gydF4y2Ba8gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
胸膜灌洗液(PLF)、支气管肺泡灌洗液(BALF)和肺收获如前所述gydF4y2Ba8gydF4y2Ba。短暂,腹主动脉后出血及小切口穿过隔膜,PLF执行1.2毫升的0.9%生理盐水注入胸腔的空间。导管置于气管,肺被移除和支气管肺泡灌洗与1毫升的氯化钠0.9%执行。肺膨胀和放置在福尔马林24 h。PLF和BALF离心机和上层清液储存在-80°C。Cytospins颗粒的计算(吉姆沙染色剂)。gydF4y2Ba
肋膜得分gydF4y2Ba
肋膜宏观分级如下gydF4y2Ba17gydF4y2Ba:0:正常胸膜;1:不到三粘连;2:三个以上的粘连,但局部的;3:普遍分散粘连;4:完全闭塞的胸膜空间。gydF4y2Ba
TGF-β1水平gydF4y2Ba
总人力TGF-β1决心从PLF或文化上层清液使用ELISA(研发系统、里尔、法国),根据制造商的建议执行。这个试验的敏感性7 pg·毫升gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
组织学gydF4y2Ba
横截面是石蜡包埋,5-μm切割,沾染了Masson-Trichrome Picrosirius红色。热休克蛋白(HSP) 47免疫组织化学和免疫荧光双重染色α-smooth肌肉肌动蛋白(α-SMA)和细胞角蛋白抗体进行如前所述gydF4y2Ba8gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
胸膜厚度是由histomorphometric测量部分沾Masson-Trichrome如前所述gydF4y2Ba8gydF4y2Ba:20个随机测量每节动物获得(Eclipse E600显微镜;尼康,Champigny-sur-Marne、法国)。图像(彩色CCD相机3;索尼,尼康,Champigny-sur-Marne)分析使用一个分析系统(Archimed仪器,埃夫里市,法国)。gydF4y2Ba
分析了胶原蛋白在部分沾Picrosirius红如前所述gydF4y2Ba8gydF4y2Ba:20随机领域/动物偏振光下数字化。排放的比例量化(Histolab,维视仪器,埃夫里市)反映胶原蛋白含量。胶原蛋白层强度是衡量在一个矩形(常数100μm的长度,宽度取决于胸膜厚度)。胶原蛋白含量的百分数表示发射乘以每个矩形的表面。胶原蛋白在胸膜下区测量使用圆圈(直径65μm)随机放置在一个恒定的胸膜表面的距离。圈内胶原蛋白含量是发射的百分数表示。gydF4y2Ba
ZymographygydF4y2Ba
基质金属蛋白酶(MMP)的gelatinolytic活动2和MMP-9 PLF或细胞培养上清液被zymography测量gydF4y2Ba8gydF4y2Ba。样本10% dodecylsulfate-polyacrylamide钠凝胶电泳分离含0.1%明胶(σ,圣昆汀Fallavier,法国)。后电泳,凝胶2.5% Triton x - 100年孵化(σ)30分钟,然后被放置在激活缓冲区(50毫米Tris-HCl pH值8日CaCl 10毫米gydF4y2Ba2gydF4y2Ba5μM ZnSOgydF4y2Ba4gydF4y2Ba,150毫米氯化钠;σ)一夜之间在37°C。凝胶是沾0.1%考马斯亮蓝- 250解决方案(σ),为30分钟37°C。然后使退色了凝胶40%甲醇和7%醋酸的几个变化。区域的酶活性明显清楚乐队在一个蓝色的背景下。参考标准是MMP-2和MMP-9 (Chemicon国际(法国巴黎)。gydF4y2Ba
间皮的细胞培养gydF4y2Ba
主要的文化间皮的细胞从女性的雄性sd大鼠中执行(Charles River)。老鼠被腹主动脉血实施安乐死。通过隔膜后切口,10毫升胰蛋白酶-0.4% EDTA注入到胸膜腔。30分钟后,液吸气,放入15毫升胎牛血清(FCS)和离心机340×gydF4y2BaggydF4y2Ba为5分钟。颗粒在杜尔贝科re-suspended修改鹰的介质(DMEM)为1%gydF4y2BalgydF4y2Ba谷氨酰胺,FCS penicillin-streptomycin 1%和15%。细胞在37°C和5%孵化有限公司gydF4y2Ba2gydF4y2Ba。确认间皮的细胞表型,我们进行免疫荧光染色,calretinin(圣克鲁斯、TebuBio Le Peray雷诺,法国)。简而言之,培养间皮的4%多聚甲醛固定细胞和渗透性由特里同x - 100(σ),与calretinin孵化(1:10 0)在一夜之间,然后用二次抗体(1:20 00,生物素化的山羊anti-mouse /兔免疫球蛋白(Ig);Dakocytomation、暗色岩、法国)。gydF4y2Ba
4/4RM4间皮的细胞培养在火腿F10的1%gydF4y2BalgydF4y2Ba谷氨酰胺,FCS penicillin-streptomycin 1%和15%。细胞在37°C和5%孵化有限公司gydF4y2Ba2gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
间皮的细胞(小学和4/4RM4)培养,没有FCS,μg·碳(250毫升gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba),博来霉素(25μ·毫升gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba)或博来霉素+碳48 h。碳被超声悬浮在培养基。gydF4y2Ba
免疫荧光gydF4y2Ba
与钙粘蛋白抗体染色(BD系统,Le Pont-de-Claix法国)和α-SMA (DakoCytomation)进行使用荧光标记的抗体。短暂,4/4RM4间皮的细胞(ECACC,费舍尔鼠肺胸膜间皮)是固定的4% para-formaldehyde和渗透性由特里同x - 100(σ),孵化与初级抗体(1:10 0)在一夜之间,然后用二次抗体(1:20 00,生物素化的山羊anti-mouse /兔子搞笑;DakoCytomation)。gydF4y2Ba
统计分析gydF4y2Ba
对比组由Mann-Whitney执行测试和比较在同一组动物Wilcoxon测试。gydF4y2Ba
结果gydF4y2Ba
气管内的管理炭黑不恶化bleomycin-induced肺纤维化gydF4y2Ba
气管内的生理盐水或碳不引起炎症或纤维化反应白天21。正如所料,气管内的博来霉素引起肺纤维化白天21持续性炎症(图。1gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba)。碳合并施打没有改变bleomycin-induced炎症或纤维化。胶原蛋白均明显高于博来霉素组与生理盐水和碳相比,相同的博来霉素和博来霉素+碳组(无花果。1模拟gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba)。类似的观察炎症在博来霉素和博来霉素+碳组(无花果。1模拟gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba)。BALF中细胞总数也增加了从博来霉素、博来霉素+碳组与生理盐水和碳(p < 0.01;数据未显示)。没有区别组织微分细胞计数。gydF4y2Ba
总TGF-β1(图1 egydF4y2Ba⇑gydF4y2Ba)是BALF中显著增加博来霉素和博来霉素+碳动物(96±41和109±55 pg·毫升gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba分别)。总TGF-β1没有可检测BALF中动物用生理盐水或碳。gydF4y2Ba
胸膜腔内合并施打博来霉素和碳诱发严重的和进步的胸膜和胸膜下间质纤维化gydF4y2Ba
老鼠收到氯化钠,碳和博来霉素胸膜腔内没有出现胸膜纤维化。有一些碳点在胸膜表面碳组的第七天,白天消失21(图2所示模拟gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba)。显微镜下,胸膜薄单层没有胶原蛋白积累在氯化钠和碳组。博来霉素组,有轻微炎症反应e-l白天7(图。2gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba),解决了21天。总细胞数也增加PLF从碳、博来霉素和博来霉素+碳组与生理盐水相比。中性粒细胞增加博来霉素和博来霉素+碳组(表1所示gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba)。老鼠接受博来霉素+碳发展严重的和进步的胸膜纤维化(图2所示模拟gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba)。胸膜炎症明显的第七天。白天21日逐步增加,肝纤维化是一个主要特点(图2 e-lgydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba)。有丰富的粘连而复杂的肺提取;检索PLF是不可能的。Histomorphometry显示胸膜厚度增加,胶原蛋白积累到21天(图2 mgydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba)。白天21日肋膜分数(表2所示gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba)在胸膜腔内注射博来霉素+碳(3.8±0.3)显著高于其他组(生理盐水0±0,碳0.3±0.3和博来霉素:0.4±0.4)。gydF4y2Ba
有趣的是,博来霉素+ carbon-treated动物的纤维变化并不局限于胸膜,但扩展到肺实质邻近胸膜表面(图2 ngydF4y2Ba⇑gydF4y2Ba)。胶原蛋白被量化在胸膜下区形态测量学和进步积累在肺实质深处被发现(图2 ngydF4y2Ba⇑gydF4y2Ba)。胶原蛋白是最突出的间皮的下面细胞层(圆1)和随距离增加而降低表面(2圈)。gydF4y2Ba
令我们吃惊的是,腹腔内或鼻内博来霉素相伴与胸膜内的碳诱导强烈的纤维化胸膜反应白天21(图。3gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba),类似于合并胸膜内的博来霉素+碳管理。gydF4y2Ba
与细胞外胶原蛋白,胶原蛋白监护人HSP47gydF4y2Ba18gydF4y2Ba在间皮的细胞诱导碳,博来霉素和博来霉素+碳到第七天,相比之下,氯化钠。HSP47被认为在胸膜下区只有在博来霉素+ carbon-treated老鼠与胶原蛋白(图4所示gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba
组织分析的证据mesothelial-fibroblastoid转换,这一过程涉及间皮的细胞和类似于epithelial-to-mesenchymal过渡(EMT)gydF4y2Ba8gydF4y2Ba。Zymography PLF在第七天显示,博来霉素+ MMP-9活动增加碳组(图5gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba)。间皮的层从博来霉素+ carbon-treated动物7天包含大量的细胞为上皮标记阳性细胞角蛋白和myofibroblast标记α-SMA(双重免疫荧光染色)。到了21天,这些dual-labelled细胞持续和无数α-SMA-positive细胞出现在增厚的胸膜(图5 b我gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba),强烈建议myofibroblast表型转换间皮的细胞。bleomycin-treated老鼠有一个小数量的dual-labelled细胞胸膜内7天,天21没有消失的证据增加α-SMA-positive细胞的持久性。生理盐水或碳组在任何时间点都是正常的。TGF-β1被诱导EMT在第七天,显著增加PLF博来霉素和博来霉素+碳组(图5 jgydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba
间皮的细胞活跃在这个过程gydF4y2Ba
主要鼠间皮的细胞在DMEM受到碳暂停。后48 h,团聚体间皮的细胞内的碳被认为,建议积极掩饰的这些粒子(图6gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba和b)。这也是间皮的细胞中观察到的动物模型(图6gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba和b)。明胶zymography文化浮层间皮的细胞证实MMP-9活动增加的碳组(图6 cgydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba),类似于PLF。gydF4y2Ba
4/4RM4间皮的细胞暴露在博来霉素或博来霉素+碳显示α-SMA增加和减少钙粘蛋白表达后48 h(图。6 d-kgydF4y2Ba⇑gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba
讨论gydF4y2Ba
胸膜是一个生物高度活跃的结构。胸膜纤维化的机制没有完全理解,甚至更神秘的胸膜下肺纤维化的机制是,人类IPF的特点之一。我们的研究提供了一个洞察这两种纤维化的发病机制条件和突出了一个潜在的,到目前为止,未开拓的胸膜间皮的作用。我们的研究还描述了一个新颖的啮齿动物模型的胸膜纤维化,可能对未来的研究有很大的影响在肋膜胸膜纤维化和的面积。gydF4y2Ba
纤维化的胸膜下优势是IPF的特征,尤其是在疾病早期阶段gydF4y2Ba19gydF4y2Ba。到目前为止,没有明确的解释。意识到吸烟和IPF的关系,我们提出,吸烟可能不仅参与对肺和胸膜纤维化,但特别是在胸膜下纤维化的发展模式在IPF /通常的间质性肺炎(摘要),可能通过碳颗粒。gydF4y2Ba
有不同的肺纤维化模型,这些都有一定的优势和限制取决于底层的问题gydF4y2Ba20.gydF4y2Ba。然而,这些实验方法真正模型IPF的胸膜下纤维化见过人类gydF4y2Ba21gydF4y2Ba。气管内的注射博来霉素诱导的肺纤维化是最常见的方法在动物。它导致啮齿动物肺部炎症和纤维化,尽管是有限的和部分可逆的变化gydF4y2Ba21gydF4y2Ba。由于行政管理模式,纤维化主要是支气管旁和中央。系统性博来霉素,gydF4y2Ba如。gydF4y2Ba交付gydF4y2Ba通过gydF4y2Ba渗透mini-pumps或通过重复腹腔内注射,使一个更加分散的模式在肺纤维化,但又没有典型的胸膜下病理学的摘要gydF4y2Ba22gydF4y2Ba。实质效应相比,博来霉素灌输在胸膜空间很少引起胸膜纤维化在啮齿动物,虽然它能有肋膜影响人类gydF4y2Ba23gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
大多数相关研究胸膜肋膜疤痕的感应担忧作为治疗慢性积液的治疗方法与扩散至癌症有关。兔子和绵羊模型通常用于这一目的。啮齿动物,尤其是老鼠,喜欢在实验医学,很大程度上是由于转基因菌株的可用性,允许研究人员详细解剖机械的问题。在实验环境中胸膜纤维化有一个戏剧性的啮齿动物模型的不足,除了TGF-β与重组蛋白过度表达gydF4y2Ba24gydF4y2Ba或基因转移gydF4y2Ba8gydF4y2Ba。可以诱导小鼠或大鼠胸膜炎症,但通常解决了随着时间的推移和慢性疤痕和纤维化很少发展。开关的触发一个逐步解决纤维组织反应在胸膜腔尚未确定。在这种背景下,我们的新模型应该是相当大的兴趣。gydF4y2Ba
碳粒子的一个组成部分,香烟烟雾和强大的协会之间的吸烟和IPF /摘要本文前面描述的gydF4y2Ba12gydF4y2Ba。香烟在胸膜纤维化的作用并不明显,但是一些研究表明较高的石棉相关胸膜纤维化吸烟者而其他人没能证实这一发现gydF4y2Ba25gydF4y2Ba。超细或纳米颗粒(< 100 nm大小)可以通过任何暴露面包括进入人体肺、皮肤和消化道gydF4y2Ba26gydF4y2Ba。炭黑纳米粒子被认为是惰性的,无害的肺,尽管他们可以诱发早期和温和,尽管短暂,炎症gydF4y2Ba27gydF4y2Ba。有一个大型数据库的肺颗粒毒理学文献支持重要的各种纳米粒子的毒性作用gydF4y2Ba28gydF4y2Ba。在所有吸入粒子、石棉纤维可能是最出名的有能力从实质到胸膜转移gydF4y2Ba29日gydF4y2Ba。这个粒子迁移可以通过巨噬细胞发生吸收或直接涉及移动车辆。霍尔特gydF4y2Baet al。gydF4y2Ba16gydF4y2Ba证明了在几内亚猪巨噬细胞能够携带碳尘通过实质向胸膜。在我们的研究中,我们一起管理炭黑和博来霉素的胸膜空间到气管或老鼠。我们观察到非常严重的胸膜和胸膜下纤维化小鼠接受联合胸膜腔内博来霉素+碳的变化,而博来霉素和碳独自纤维化引起的。正如预期的那样,气管内的博来霉素导致炎症和纤维化,但这不是夸大的碳。这是类似于亚当森的研究gydF4y2Baet al。gydF4y2Ba30.gydF4y2Ba描述碳纳米颗粒被保留在啮齿动物肺管理博来霉素4天后,但并未导致增加纤维化。有趣的是,我们发现,博来霉素不需要直接注入到胸膜空间:严重胸膜纤维化还开发了在小鼠暴露于胸膜内的碳博来霉素是由鼻内或腹腔内的路线。综上所述,这表明碳可能作为沉淀或博来霉素辅因子,因此,促进胸膜纤维化的发展。更有趣的是这个“双重打击”实验的观察导致胸膜下肺实质纤维化,非常类似于早期纤维化IPF /摘要在人类的变化。gydF4y2Ba
这种现象的详细机制尚不清楚,需要彻底检查。我们曾表明TGF-β1由间皮的细胞过度表达可以诱导胸膜下纤维化一起进步胸膜疤痕,这表明间皮可能参与肺纤维化的发病机制gydF4y2Ba8gydF4y2Ba。在这些实验中,我们提供的证据表明,矩阵中的积累和纤维化胸膜下区进化过程涉及mesothelial-fibroblastoid转换gydF4y2Ba8gydF4y2Ba。这是一种现象,间皮的细胞获得myofibroblast特点、EMT几乎相同gydF4y2Ba31日gydF4y2Ba。间皮的细胞是多才多艺的元素和可以发挥多种生物学功能gydF4y2Ba32gydF4y2Ba。我们的研究证实的结果TGF-β1过度表达实验和显示间皮的细胞表型的变化在博来霉素+ carbon-induced胸膜下纤维化的发展。我们发现增加dual-labelled细胞角蛋白/α-SMA阳性细胞在间皮的层白天7和21。相比之下,小鼠暴露于胸膜内的博来霉素只有这些dual-labelled细胞,直到第七天,肺部出现否则正常。这些结果支持gydF4y2Ba在体外gydF4y2Ba通过展示间皮的细胞治疗博来霉素收购myofibroblast特点和失去间皮的钙粘蛋白标志。这表明,博来霉素能够引起瞬态mesothelial-fibroblastoid胸膜转换,但没有第二个打击(gydF4y2Ba如。gydF4y2Ba通过碳颗粒在我们的研究中)这种细胞转换不持续,不会导致进行性纤维化。最近的一份报告酷gydF4y2Baet al。gydF4y2Ba33gydF4y2Ba人类IPF的成纤维细胞的网,这表明成纤维细胞的病灶组织网络的方式而不是偏远地区的细胞积累,一般是支持我们的假设。然而,一个理想的展示间皮的标记纤维母细胞病灶IPF患者确认这具有挑战性实验发现。gydF4y2Ba
水平的增加TGF-βPLF的老鼠暴露在博来霉素+碳表明内源性诱导这profibrotic细胞因子可能参与了进步的纤维化的表型。MMP-9活动在这些动物的胸膜空间增强,这表明活性基质金属蛋白酶的存在可能是一个关键因素mesothelial-fibroblastoid变换保持或发展,导致“入侵”胸膜纤维化和相邻胸膜下区gydF4y2Ba8gydF4y2Ba。之间没有相关性MMP的活动与炎症反应。刘gydF4y2Baet al。gydF4y2Ba34gydF4y2Ba曾表明,间皮的细胞分泌基质金属蛋白酶小颗粒的吞噬作用,这就能解释为什么MMP-9碳/博来霉素诱导的炭黑和暴露的细胞gydF4y2Ba在体外gydF4y2Ba48 h后(图6 cgydF4y2Ba⇑gydF4y2Ba)。在gydF4y2Ba在活的有机体内gydF4y2Ba系统,MMP-9只是增加组收到了炭黑粒子和博来霉素(图4 dgydF4y2Ba⇑gydF4y2Ba)。我们的假设指出,只有伴随炎症(合并施打博来霉素所致)诱发持续和派生MMP-9间皮的细胞活动,因此,促进外来mesothelial-fibroblastoid转换。gydF4y2Ba
总之,我们的研究表明,胸膜内的炭黑是一个至关重要的代数余子式的发展bleomycin-induced胸膜纤维化小鼠。实验胸膜纤维化是一项非常严重的使用这种方法,特点是主要胶原蛋白积累不仅胸膜内还在相邻胸膜下区。间皮的细胞似乎重要贡献者纤维化的过程,可能通过诱导基质金属蛋白酶和TGF-β。这些细胞必须被视为进一步治疗的目标发展,对胸膜和肺纤维化。gydF4y2Ba
支持声明gydF4y2Ba
研究导致这些结果已收到资金从欧洲共同体第七框架计划(fp7/2007 - 2013)根据授权协议号码健康- f2 - 2007 - 202224 eurIPFnet。支持联合国Decologne法国德Pneumologie de法语语言,Bourguignonne靠le癌症,和协会倒说是关于癌症。g·维特斯坦支持欧盟第七框架计划(2007 - 2013年协议数量的健康- f2 - 2007 - 202224 eurIPFnet。)。m·科尔布有一个新的加拿大卫生研究院的研究员奖。c·加里多联赛是支持由国家靠le癌症及其委员会说,Saone-et-Loire。gydF4y2Ba
感兴趣的语句gydF4y2Ba
没有宣布。gydF4y2Ba
确认gydF4y2Ba
作者要感谢诉San Giorgio(动物季度技术经理)和所有大学的团队从动物季度勃艮第(法国)的无价的和专业的帮助。gydF4y2Ba
- 收到了gydF4y2Ba2008年12月1日。gydF4y2Ba
- 接受gydF4y2Ba2009年6月23日。gydF4y2Ba
- ©人期刊有限公司gydF4y2Ba
引用gydF4y2Ba
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