文摘
背景信号通过血小板源生长因子受体(PDGFR)集落刺激因子1受体(CSF1R)和桅杆/干细胞生长因子受体工具包(c - kit)中扮演着一个关键的角色在肺动脉高血压(PAH)。我们检查的临床疗效吸入seralutinib,一个独特的小分子PDGFR / CSF1R PAH / c - kit激酶抑制剂在临床开发,一个概念验证激酶抑制剂相比,伊马替尼。
方法Seralutinib伊马替尼效力和选择性进行了比较。吸入seralutinib药物动力学/药效学研究在健康老鼠。疗效评估在两种大鼠模型的多环芳烃:SU5416 /缺氧(SU5416 / H)和野百合碱全肺切除术(MCTPN)。对炎性细胞因子/信号检测的影响。PDGFR CSF1R和c - kit免疫组织化学在老鼠和人类PAH肺样本和微rna (microRNA) SU5416 / H模型进行分析。
结果Seralutinib强有力地抑制PDGFRα/β,CSF1R和c - kit。吸入seralutinib表现出剂量依赖性抑制肺PDGFR和c - kit信号,增加了骨形态形成蛋白受体2型(BMPR2)。Seralutinib改善心肺血流动力学参数和减少小肺动脉muscularisation和右心室肥大模型。SU5416 / H模型中,seralutinib改善心肺血流动力学参数,恢复肺BMPR2蛋白质含量和减少n端pro-brain利钠肽(中位数水平以上病人),超过伊马替尼。定量免疫组织化学在人类肺癌PAH样本演示PDGFR增加,CSF1R和c - kit。microrna的分析显示候选人可以调解对BMPR2 seralutinib影响。
结论吸入seralutinib是一个有效的治疗严重的多环芳烃在两个动物模型,通过改进心肺血流动力学参数,减少中位数水平以上病人,肺血管病理逆转重塑和改善炎症生物标记。Seralutinib显示更大的功效与伊马替尼在临床前研究中。
文摘
Seralutinib吸入,小分子激酶抑制剂,目标PDGFRα/β,CSF1R和c - kit,和移植BMPR2蛋白表达;这些途径在PAH扮演重要的角色。seralutinib中演示了两个动物模型的疗效的多环芳烃。https://bit.ly/3wObkEN
介绍
肺动脉高压(PAH)的特点是血管周的炎症和肺动脉平滑肌细胞增殖(PASMCs) myofibroblasts和内皮细胞,导致肺动脉血流阻塞(1- - - - - -6]。apoptosis-resistant细胞在肺血管病变的出现导致了癌症范式假说来解释观察到的异常细胞增殖在PAH病变(1,4,5,7,8]。
这类似癌症的上下文中范例,证据从人类PAH肺外植体,细胞分析和临床前模型指出,一个关键的角色的血小板源生长因子(PDGF)信号在多环芳烃发病机理(9- - - - - -14]。PDGF的表达的受体和配体(PDGF受体α和β(PDGFRα/β))是增加小特发性肺动脉高压患者的肺动脉(iPAH)与控制和PDGFB在单细胞基因表达增加iPAH RNA序列研究[11,15]。基因敲除研究表明PDGFRαPDGFRβ调解重叠和明显的效果在PAH-associated途径:两个受体调节细胞增殖,迁移和炎症,而PDGFRβ唯一可能影响血管生成(16]。PDGFR之间的串扰和其他信号级联与多环芳烃,如转化生长因子β(TGF-β),据报道(17,18]。此外,PDGF信号减少骨形态形成蛋白受体2型(BMPR2)在PASMCs表达式通过microrna - 376 b -介导的降解(9]。这些发现强调PDGFR激酶抑制剂的治疗潜力iPAH [19]。
伊马替尼(一种强有力的PDGFR / ABL / c - kit激酶抑制剂)逆转肺动脉高压大鼠野百合碱(MCT)模型,展示了组织学和功能改进12]。在临床试验中,伊马替尼改善肺血管阻力(PVR)和先进的PAH患者的运动能力;然而,严重不良事件和停药是常见,限制其发展作为多环芳烃处理(20.,21]。
鉴于PAH坚实的证据暗示PDGFR信号与系统管理相关的发病机制和限制PDGFR抑制剂(21),seralutinib (N - [3 - ((1) 1 - [[6 - (3 4-dimethoxyphenyl) pyrazin-2-yl]氨基)乙基]苯基]5-methylpyridine-3-carboxamide,以前PK10571也称为GB002)设计和制定的干粉吸入给药。除了有效的抑制PDGFRαPDGFRβ,seralutinib抑制PDGFR-related激酶,集落刺激因子1受体(CSF1R)和桅杆/干细胞生长因子受体工具包(c - kit),这是与多环芳烃发病和进展(22- - - - - -26]。c - kit表达内皮祖细胞和肥大细胞,可能导致血管周的炎症和血管重塑8,23,27]。增加了c - kit的渗透+细胞一直在观察肺动脉丛状的在PAH患者肺部病变(23]。CSF1R表达单核细胞和巨噬细胞(22]。巨噬细胞分泌PDGF配体和促炎细胞因子导致多环芳烃(病理改造24,25,28]。因此,一个令人信服的理由存在目标PDGFR CSF1R和c - kit治疗多环芳烃。Seralutinib这些途径和目标是第一个酪氨酸激酶抑制剂在临床开发专门作为多环芳烃的吸入疗法。鉴于伊马替尼的局限性,seralutinib有意开发口服生物利用度较低和快速间隙特征来减少系统性风险和相关的不良事件。
临床前研究的目的是调查报告在体外力量和选择性seralutinib和描述它的效力与伊马替尼在相关动物模型的多环芳烃。
方法
seralutinib和伊马替尼的效力和选择性测定在体外。药代动力学和药效学的影响吸入seralutinib健康大鼠进行了研究。疗效评估的老鼠SU5416 /缺氧(SU5416 / H)(研究1和3)和MCT肺切除术(MCTPN)(研究2)模型。在研究1中,治疗开始后1天你缺氧暴露;在研究2,治疗开始后25天肺切除术(MCT政府后15天)。在研究3中,seralutinib或伊马替尼开始2周后回到normoxia,之后需要你缺氧。治疗对超声心动图参数,影响心肺血流动力学参数,氨基端pro-brain利钠肽(中位数水平以上病人),BMPR2和炎症标记物检查。PDGFR CSF1R和c - kit免疫组织化学(包含IHC)进行鼠和人类肺多环芳烃和控制样品。microRNA SU5416 / H (microRNA)分析肺(研究3)。详细的方法是可用的补充材料。
结果
在体外seralutinib活动
Seralutinib抑制扩散H1703 (PDGFRα-driven人类肺上皮细胞株),人类肺动脉平滑肌细胞(HPASMCs)(表达类似水平的PDGFRα和PDGFRβ)和人类肺成纤维细胞(HLFs)(表达PDGFRβ超过PDGFRα)和抑制浓度中位数(IC50的32 nM,分别为33海里和29海里(图1,补充表S1)。尽管伊马替尼抑制H1703扩散IC5062海里,其效力是人类PASMC 13-20-fold不到seralutinib和HLF核扩散化验。这两个化合物强有力地抑制PDGF-BB-induced细胞外signal-regulated激酶(ERK)在H1703细胞磷酸化;然而,只有seralutinib抑制ERK的磷酸化HLFs (图1,补充表S1)。此外,seralutinib比伊马替尼对c - kit和CSF1R更强有力的激酶。全身的Seralutinib抑制干细胞因子(SCF) c - kit自身磷酸化在人类肺动脉内皮细胞(HPAECs)和一个集成电路507.8 nM和显示一个集成电路5014.4 nM的巨噬细胞集落刺激因子(csf)全身的磷酸化CSF1R在人类主要分化的巨噬细胞(34倍的比伊马替尼)(补充表S1,图1)。
药代动力学和药效学研究
Seralutinib肺浓度达到峰值后立即2 h被动吸入和稳步下降随着时间的老鼠。大幅降低等离子体接触观察相对于肺曝光图2一个)。四个独立的老鼠药代动力学研究表明平均seralutinib lung-to-plasma比30(范围16 - 80)在24小时内。Seralutinib吸入显著抑制PDGF-BB-induced PDGFRα/β自身磷酸化的肺在所有三个剂量水平测试(图2 b, c)。在另一项实验中,与流行性流感减毒活疫苗气管内的PDGF-BB和自洽场seralutinib抑制c - kit Y719磷酸化43% (图2 d)。Seralutinib PDGFRβ磷酸化的抑制实验时观察到类似于PDGF-BB了孤独。此外,seralutinib演示了一个2 - 2.5倍增加存在剂量依赖的相关性肺BMPR2蛋白表达随时间(图2 e)。
Seralutinib PAH的功效在临床前模型
SU5416 / H模型(研究1)
两个军团,有或没有遥测监控、收到seralutinib 2.5 mg·公斤−1和4.6 mg·公斤−1每天两次,分别为2周(图3一)。在开始治疗之前,肺动脉收缩压升高(PASP)证实在汽车(100.8±5毫米汞柱)和seralutinib遥测(99.1±8 mmHg)组。Seralutinib 2.5毫克公斤−1每天两次PASP减少了43% (p < 0.0001)相对于车辆的治疗(图3 b)。研究结束时,右心室收缩压(RVSP)测量显示剂量依赖性降低seralutinib相比汽车(2.5 mg·公斤−1:49.6±3.1毫米汞柱与64.4±5.4毫米汞柱,p < 0.05;4.6毫克·公斤−1:34.7±2.2毫米汞柱与64.4±5.4毫米汞柱,p < 0.001) (图3 c)。减少房车,观察肥大seralutinib两组(2.5 mg·公斤−1:0.36±0.01,p < 0.0001;4.6毫克·公斤−1:0.40±0.02,p < 0.005)相比,汽车(0.54±0.03)(图3 d)。
肺小动脉阻塞分析(容器直径< 80μm)在肺组织进行车辆和seralutinib 4.6 mg·公斤−1每天两次组。明显降低的数量在2级病变seralutinib-treated组相比,车辆(p < 0.05;图3 ef)。小肺动脉lumen-to-media区域增加seralutinib-treated组相比,车辆(p < 0.05;图3 g)。包含IHC phospho-PDGFRβ显示降低强度的肺seralutinib-treated组相比,车辆(图3 h)。
MCTPN模型(研究2)
在MCTPN模型中,seralutinib 2.5毫克公斤−1每天两次后发起PAH发展,持续了11天(图4一)。PASP seralutinib组中保持稳定,但继续增加汽车集团(图4 b)。天9、10和11 PASP是34%,37%和41%低,分别seralutinib组相比,车辆(p < 0.05)。减少50% RVSP观察seralutinib组相比,车辆(p < 0.001;图4 c)。右心室肥大相比降低了49% seralutinib组车辆(p < 0.0001;图4 d)。Lumen-to-media区域seralutinib-treated组比对照组增加,这表明有利逆转重塑(p < 0.001;图4 ef),更少的1级和2病变(图4 eg)。定性降低血管周的肺纤维化在seralutinib-treated观察车辆(相比补充图S1)。
Seralutinib显著提高潮汐卷(p < 0.005)和呼吸速率下降(p < 0.001)与车辆(补充图S2a, b)。每分通气量和气道阻力相似seralutinib - vehicle-treated动物(补充图S2c, d)。
SU5416 / H模型(研究3):伊马替尼的比较
Seralutinib·kg(12.8毫克−1每天两次),伊马替尼·kg(15.0毫克−1每天一次)或车辆控制管理(每天一次)2周后疾病感应和normoxia两周(图5一个b),伊马替尼剂量的选择在活的有机体内研究显示有效抑制PDGFRβ磷酸化在健康大鼠(补充图S3)。
在治疗开始时,疾病严重程度被超声心动图评估。中风体积指数和心脏指数减少患病的动物相比,健康对照组(图5 c, d)。Vehicle-treated PAH老鼠RVSP升高(85.2±11.0毫米汞柱),平均肺动脉压(肺动脉平均)(50.9±5.0毫米汞柱),与健康对照组相比(RVSP 19.5±1.0毫米汞柱;肺动脉平均12.6±0.6毫米汞柱;两个p < 0.001;图5 e, f)。Seralutinib改善血流动力学参数,减少45%的RVSP(46.7±3.9毫米汞柱),肺动脉平均为37% (31.9±2.6 mmHg)相比,车辆(p < 0.001;图5 f e)。肺动脉平均下降和心脏指数的改善导致PVR指数提高了60% (PVRI) seralutinib组(p < 0.0001;图5克)。伊马替尼RVSP减少了28%(61.1±7.4毫米汞柱),肺动脉平均27%(37.4±3.9毫米汞柱)(p < 0.05)与车辆;图5 e, f)。伊马替尼相比,seralutinib影响要大得多冲程容积指数和心脏指数(图5 c, d)。伊马替尼治疗的减少PVRI∼37%。疾病感应中位数水平以上病人增加了9倍。Seralutinib中位数水平以上病人减少了55%与车辆控制(p < 0.05),而与伊马替尼没有观察到显著的影响(图5 h)。虽然seralutinib对这些参数的影响在统计学上的影响大于伊马替尼与车辆相比,之间没有统计上的显著差异seralutinib和伊马替尼对肺动脉平均RVSP, PVRI或中位数水平以上病人。
血液动力学的改善是伴随着小肺血管muscularisation(减少图5 i, j)。苏木精和eosin-stained肺部分分析和α-smooth肌肉actin-stained部分演示了一个减少小肺动脉muscularisation seralutinib组相比,车辆和imatinib-treated组(图5 i, j,补充图S4)。Seralutinib BMPR2明显增加,而没有显著影响BMPR2观察与伊马替尼(图5 k)。增加SMAD1/5磷酸化seralutinib-treated动物的观察,表明激活信号通过BMPR2 (补充图S5)。
对炎症的生物标志物的影响
Seralutinib循环水平降低血浆肿瘤坏死因子α(TNF-α)(p < 0.001)和白介素(IL) -10相比,车辆增加(p < 0.05;图6,b)。伊马替尼并没有显著改变TNF-α或il - 10的水平。下降的趋势观察PDGF-BB seralutinib-treated组(图6 c)。Seralutinib也减少了肺信使rna和蛋白质水平的单核细胞化学引诱物蛋白1 (MCP-1),促炎细胞因子,调节巨噬细胞招聘和有助于MCT-induced肺动脉高压(29日](SU5416 / H模型:p < 0.05相比,车辆;补充图S6b, c)。伊马替尼没有调节MCP-1。Seralutinib减少MCP-1 CSF1R分泌剂量依赖性的方式+人类巨噬细胞(补充图S6a)。
seralutinib microrna在肺的效果
六个microrna预测抑制人类和老鼠BMPR2差异表达在seralutinib-treated SU5416 / H鼠肺相对于车辆(补充表S2)。两个六个microrna与seralutinib治疗后下降相比,车辆(mir - 135 a - 5 - p: p = 0.01;mir - 146 a - 5 - p: p = 0.02),符合观察增加BMPR2蛋白(图5 k, l)。四个microrna增加seralutinib,包括mir - 381 - 3 - p,这表现出最大的表达式转变和明显高于seralutinib和伊马替尼组相对于车辆组。
讨论
PDGFR CSF1R和c - kit信号在PAH的病理学和发展起着至关重要的作用[9- - - - - -15,21- - - - - -26,30.,31日]。针对这些途径因此持有承诺作为多环芳烃的治疗策略。Seralutinib是一个高度有效的PDGFR CSF1R和c - kit激酶抑制剂,是第一个也是唯一酪氨酸激酶抑制剂故意设计成治疗多环芳烃。seralutinib独特的物理性质使它适合吸入给药途径,潜在优化治疗效果,同时限制系统性风险和相关的副作用。
伊马替尼在PAH的临床试验提供了概念证明,针对PDGFR信号会影响多环芳烃疾病进展(21]。然而,伊马替尼的进一步发展是有限的由于副作用归因于较高的系统性风险。伊马替尼的临床经验提供了动力和基本原理开发一种酪氨酸激酶抑制剂针对通路相关的多环芳烃和优化直接交付到患病的被吸入肺部。
除了优化吸入交付,seralutinib显示伊马替尼相比其他一些独特的特点。例如,只有在HLFs seralutinib抑制ERK的磷酸化。这种差异可能是很重要的,因为本构激活ERK1/2是扩散的司机在BMPR2-silenced PAH-derived细胞(32]。Seralutinib显示13到20倍更大的力量在人类PASMCs和抑制癌细胞增殖HLFs相比,伊马替尼。此外,seralutinib比伊马替尼更强有力的反对CSF1R和c - kit激酶。当前数据的一个限制是没有复合分析patient-derived细胞。PAH-derived PASMCs和HLFs显示改变代谢和功能的信号相比,健康细胞(33,34]。未来的研究使用PAH患者细胞可以提供额外的洞察这些化合物的影响。
两个动物模型的多环芳烃被用来检查吸入的疗效seralutinib: SU5416 / H模型和MCTPN模型。SU5416 / H模型再现了人类的多环芳烃的重要特性,包括angio-obliterative病变和血管重塑35]。MCTPN模型增加炎症、纤维化,增加肺动脉压力和阻塞性血管内膜病变(一个功能不是MCT-only模型中观察到的)(36,37]。虽然认识到药物研究的结果表现在动物模型的多环芳烃不一定转化为人类疾病,我们研究的模型复制人类PAH的关键特性和不同的方面。此外,实验旨在证明治疗效果后肺动脉高压成立而不是预防策略。
Seralutinib阻止MCTPN模型中的多环芳烃发展和逆转肺动脉高压SU5416 / H模型方式细胞和细胞龛之间的剂量反应关系。血液动力学的改善是伴随着逆转肺血管重塑,在中位数水平以上病人减少,增加肺BMPR2和炎症指标的改善。针对的途径直接或间接seralutinib脱颖而出的关键病理管理节点改造与多环芳烃(图8)。在我们一对一的临床前研究,seralutinib和伊马替尼降低肺动脉平均RVSP, PVRI和中位数水平以上病人相比,车辆;然而,统计上seralutinib更可靠的效果。此外,seralutinib有更大的影响在恢复小肺动脉muscularisation朝着正常的相比,伊马替尼。有趣的是,BMPR2 seralutinib-treated组恢复到正常水平,但不是imatinib-treated组。此外,尽管seralutinib MCP-1下降(CCL2),伊马替尼没有。复合能力的差异,激酶选择性和下游信号资料以及目标覆盖在活的有机体内可能导致观察到的差异seralutinib和伊马替尼。
Seralutinib比伊马替尼是一个更强有力的PDGFRβ抑制剂。因为信号通过PDGFRαPDGFRβ可能调解不同的重要的病理影响肺血管重塑,有效抑制激酶可能导致改善功效在活的有机体内。Seralutinib也是一个明显比伊马替尼CSF1R的有效抑制剂,可能有助于减少炎症和逆转重塑。在MCTPN seralutinib-treated动物研究中,抑制和PDGFR CSF1R信号通路可能是导致血管周的观察到的减少纤维化。虽然我们不能排除down-modulation在当前的研究中观察到的炎症标记物可能是一个间接结果seralutinib逆转重塑的影响,MCP-1调制已经直接关系到人类巨噬细胞内的信号转导CSF1R [38,39),因此表明seralutinib目标订婚。未来的研究来评估潜在的抗炎和anti-fibrotic属性seralutinib会感兴趣的。
BMPR2损失在PAH的发病机制中起着举足轻重的作用,和PDGFR信号之间的串扰和BMPR2表达报道(9]。众所周知,microrna能调解PDGFR信号之间的串扰和BMPR2,由压抑BMPR2表达式直接或间接抑制其他目标,改变BMPR2 [40- - - - - -42]。我们确定了六个microrna预测抑制大鼠和人类BMPR2 SU5416 / H差异表达的老鼠seralutinib处理。其中,mir - 135 - 5 - p和mir - 146 - 5 - p在seralutinib-treated减少肺,符合观察BMPR2增加。值得注意的是,mir - 135——一个曾被卷入人类肺动脉高压(42,43),与BMPR2-specific表达式在动物模型(41,44]。例如,在鼠标ovalbumin-urban颗粒物(OVA-PM)模型的多环芳烃,治疗antago - mir - 135 a恢复BMPR2水平观察到在健康的肺41]。我们研究的一个限制是,mir - 135 - 5 - p表达式只有四分之一的动物中发现使用伊马替尼治疗,这表明microrna的观察到的变化可能不是唯一的因素在BMPR2 seralutinib集团(鉴于BMPR2伊马替尼组持平)。表达mir - 146 - 5 - p与seralutinib减少在我们的研究中,提高血清中PAH患者相对于健康对照组,并已被证明能够促进HPAECs扩散(45]。虽然据报道mir - 376 b由PDGF-BB,我们并没有发现明显的监管这microrna的在我们的模型中9]。几个额外的预测BMPR2-regulating microrna (即。预测减少BMPR2 seralutinib治疗后蛋白表达)升高。例如,mir - 381 - 3 - p在seralutinib强烈调节和伊马替尼组相比,车辆。这microrna预计弱抑制BMPR2还功能作为一个肿瘤抑制基因,阻止癌症细胞系增殖(46]。此外,增加mir - 381 - 3 - p可以抑制TGF-β和抑制人类支气管平滑肌细胞增殖47]。的净效应BMPR2这些microrna的表达作为一个整体并没有为特征,是很难预测的。未来的研究可以揭示每个microrna的贡献seralutinib的作用机理。无论机制,增加BMPR2 seralutinib治疗后可能导致协同效应结合治疗方法专门针对苯丙酸诺龙/ TGF-β通路。
Seralutinib也是一个强有力的c - KIT抑制剂和减少SCF-induced自身磷酸化HPAECs工具包。缺氧被证明能增加c - kit表达肺动脉内皮细胞,增强血管生成响应自洽场和导致肺血管病理SU5416 / H鼠模型(26]。c - kit的渗透+细胞(内皮祖细胞和肥大细胞)也在肺动脉丛状的在多环芳烃的肺部病变(8,23,27,48]。Lung-targeted交付seralutinib可能降低风险与系统c - kit抑制通过限制抑制疾病的网站。
量化包含IHC PDGFRα整体强度的增加,PDGFRβCSF1R和c - kit在人类PAH肺而控制。我们的研究结果与先前的报道是一致的增加表达PDGFRα,PDGFRβ和c - kit人类PAH的肺11,23]。据我们所知,这是第一个报告增加CSF1R表达人类的多环芳烃。这些发现支持目标的相关性CSF1R除了pdgfr和c - kit在多环芳烃。包含IHC PDGFRα的/β和CSF1R鼠MCTPN和SU5416 / H模型显示模式中看到类似人类的多环芳烃。
总之,seralutinib交付作为吸入干粉是有效的多环芳烃在两个临床前模型。因为这些动物模型的多环芳烃复制人类疾病的不同特性,这一事实seralutinib展示了强大的功效在两个模型的可能性增加seralutinib人类多环芳烃作为治疗的疗效。BMPR2水平的改善与seralutinib观察是一致的小肺动脉PAH的逆转重塑。目前的标准治疗在多环芳烃的功能主要是血管舒张,有限的对新生内膜增殖和肺血管重塑的影响。我们的研究表明,seralutinib直接改善对肺血管重塑的影响,导致改善心肺血流动力学参数。这些研究的设计确保seralutinib完全建立疾病条件下启动,从而展示潜在的疗效在治疗环境。观察逆转重塑的小肺动脉和修复大鼠肺BMPR2表达式的多环芳烃模型表明seralutinib可能影响多环芳烃的潜在的原因。Seralutinib目前在临床开发PAH患者(NCT04456998)。
补充材料
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确认
作者欣然承认ITR实验室(加拿大)生活中的药代动力学和药效学研究;IPS Therapeutique(加拿大)在活的有机体内功效,研究3;乔安娜·彭(qq PK咨询有限责任公司、美国)药代动力学建模伊马替尼剂量选择,在活的有机体内研究。PHBI是人类肺组织的来源用于免疫组织化学。
脚注
所选数据之前提出如下:Galkin,克莱蒙斯B,加西亚E,等。GB002小说吸入PDGFR激酶抑制剂,演示效果的Su5416缺氧肺动脉高血压大鼠模型。循环2019;140:A11102。Sitapara R,呼吸暂停,Salter-Cid L,et al .体内功效的一部小说,吸入PDGFRα/β抑制剂,GB002,河鼠肺动脉高血压的野百合碱和肺切除术模型。循环2019;140:A12947。Galkin, Sitapara R,克莱蒙斯B,等。GB002药理学特征,小说吸入PDGFR激酶抑制剂为肺动脉高血压发展。欧元和J2020;56:5。64年,3550年。
作者的贡献:a . Galkin和r . Sitapara同样作为第一作者在数据的生成和解释和发展这个手稿的内容。所有作者做出实质性贡献的概念或设计工作,或收购,数据的分析和解释工作;起草或修订工作至关重要的知识内容;,并最终批准提交出版的版本。所有作者同意负责所有方面的工作在确保相关问题的准确性或完整性的任何部分工作适当的调查和解决。
利益冲突:a . Galkin r . Sitapara b·克莱蒙斯·e·加西亚,肯尼迪,d . Guimond L.L.卡特,a . Douthitt r . Osterhout d .呼吸暂停l . Salter-Cid和L.S. Zisman员工并持有股票期权在薄纱生物,Inc . a . Gandjeva报告支持目前的工作从轻飘飘的生物,Inc .(大鼠组织幻灯片进行分析提供给机构)和咨询费轻飘飘的生物,Inc .)在提交工作。.立筋报告赠款P01HL152961和R24HL123767从Pulmokine NIH和股票期权,在提交工作。L.S. Zisman Pulmokine就业报告,Inc .)从国家卫生研究院资助(HL102946)和专利的激酶抑制剂和喷雾干燥配方,在提交工作。
支持声明:这项工作是由薄纱生物,在Pulmokine有限公司工作,公司是由国家卫生研究院授予HL102946 L.S. Zisman。.态度得到了国家卫生研究院的基金:P01HL152961 R24HL123767。资金信息,本文已沉积的Crossref资助者注册表。
- 收到了2021年8月27日。
- 接受2022年5月20日。
- 版权©2022年作者。
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