文摘
左心脏病(方面)经常引起肺血管重塑和肺动脉高压(PH)。然而药理治疗PH值在铲运机缺乏及其病理生理基础仍然是模糊的。我们旨在识别候选机制方面的PH值和测试他们的相关性和治疗的潜力。
在老鼠,铲运机supracoronary引起主动脉条带。全基因组基因芯片分析、候选基因经rt - pcr和西方印迹和功能相关性进行了测试在活的有机体内通过基因和药理策略。
肺的铲运机老鼠,肥大细胞激活是最显著的调节基因本体集群。肥大细胞基因upregulation证实RNA和蛋白质水平和改建血管显示血管周的肥大细胞积累。在铲运机老鼠与肥大细胞稳定器酮替芬治疗,或在肥大细胞缺陷Ws/Ws老鼠,PH值和血管重塑很大程度上减弱。这两种策略也降低PH值和monocrotaline-induced肺动脉高血压血管重塑,显示肥大细胞的作用延伸到non-cardiogenic PH。
PH值在不同的目的,肥大细胞在肺血管和积累导致血管重塑和博士肥大细胞和肥大细胞衍生介质可能有前途的PH值的治疗目标。
三分之二的患者慢性严重奔袭心脏病发展肺动脉压(P巴勒斯坦权力机构)≥25毫米汞柱在休息1]。根据2009年世界卫生组织临床分类,这些患者分为第二大概最大类别的肺动脉高压(PH),即。PH值由于左心脏病(方面)2]。在慢性铲运机,PH值不仅是增加引起的充血性肺血管压力,但经常加重伴随肺血管阻力(PVR)的升高,进而增加右心室后负荷,限制右心室输出,最终促进右心室衰竭(3]。此场景的临床相关性这一事实突显出,PH值,右心室射血分数减少或增加PVR慢性铲运机(每个构成死亡率的独立预测因子4]。然而,与其他形式的PH值,有效的PH值和/或批准的治疗策略由于方面仍然缺乏。
PH值由于铲运机的病理特点是内皮功能障碍,增加船的语气和血管重塑的由于长期过高压力肺循环(5]。在老鼠supracoronary主动脉条带模式复制这些特征(6),我们旨在阐明潜在的细胞和分子机制的理性基础设计新的治疗策略。使用全基因组表达分析我们确定潜在目标基因参与血管调节、炎症或发展途径。值得注意的是,最强的微分调节的upregulation基因与肥大细胞激活有关。基于这一发现,我们提出一个假定的角色为肥大细胞在血管重塑和PH值由于铲运机和潜在的其他,non-cardiogenic形式的PH值。我们测试这个假说通过药理干预和肥大细胞的遗传模型缺乏的老鼠。我们的研究结果发现肥大细胞肺血管重塑的重要推动者PH值不同的目的和建议桅杆cell-targeted策略作为PH值的有前途的干预治疗。
方法
一个详细的材料和方法部分是网上提供的补充材料。总之,PH值由于铲运机在Sprague-Dawley supracoronary引起主动脉带老鼠,肥大细胞缺陷Ws / Ws老鼠或相应的BN /f梅野生型,如前所述6]。Sham-operated老鼠作为控制。Non-cardiogenic PH值是由腹腔内注射野百合碱(MCT) (60 mg·公斤−1在Sprague-Dawley和40毫克公斤−1在Ws/Ws或BN /f梅老鼠)。酮替芬·(1毫克公斤−1体重·天−1)获得饮用水。心肺描述了9周后主动脉条带或虚假的操作,MCT注入和3周后,如前所述[6]。使用超声心动图经胸廓的二维和M-mode成像,左、右心室舒张末期区域确定和三尖瓣环平面收缩偏差(TAPSE)测量右心室收缩期纵向评价函数。
整个老鼠基因微阵列分析带状和控制老鼠的肺和随后的生物信息学分析,概述了补充材料。被热量地图和视觉效果的差异表达基因分析基因本体论(去)类的充实。选择基因,微分表达式被确认在转录和翻译水平通过rt - pcr和免疫印迹分析。血管重塑,肥大细胞积累和脱粒被蒙蔽量化分析组织学部分中描述的补充材料。总之,内侧壁厚在小量化(20 - 50μm直径),中型(50 - 100μm)和更大的(> 100μm)肺小动脉,和non-muscularised的分数,部分肌或完全肌血管和小动脉的血管管腔面积确定。肥大细胞密度测量在甲苯胺中肺部分和周围血管周的肥大细胞的数量每船确定不同的血管口径。造粒指数计算的比率在脱粒肥大细胞颗粒。所有数据都意味着±扫描电镜统计学意义是假定在p < 0.05。
结果
整个老鼠基因微阵列分析后建立的三大鼠肺匀浆PH supracoronary主动脉带和三sham-operated控制。完整的微阵列基因表达数据集访问的综合(GEO)的国家生物技术信息中心存储库。(7]。共有28000个基因分析,微分表达式定义为≥4倍改变p < 0.05明显了120个基因。其中,76年在主动脉带调节和44表达下调与控制肺相比,说明了火山污点(图1一个)。不同调控基因,提出了作为一个热图图1 c编码的蛋白质参与炎症和发展途径,补充凝血级联,血管调节或细胞外基质成分(表1)。然而,最为明显的基因去类微分调节的类“肥大细胞激活”的13个基因显著调节肺主动脉条带与控制(图1 b)。肥大细胞基因的表达增加的概念在PH值由于铲运机被确认为选定的候选基因。rt - pcr (图1 d和e和免疫印迹分析图1 f和g)展示upregulation chymase肥大细胞和肥大细胞肽酶2在肺主动脉条带在基因组和蛋白质组水平。
在大鼠肺肥大细胞积累supracoronary主动脉条带。)火山情节从整体大鼠基因组微阵列分析(总共28000个基因)显示肺匀浆的老鼠基因差异表达与主动脉条带与控制(n = 3)。120年红点描述基因显著(p < 0.05;log10 > 1.3),超过4倍调节(Log2 > 2)或表达下调(Log2 < 2)相比,联合控制的老鼠。相反,蓝点描述没有显著的剩余27880个基因和/或小于4倍调节或表达下调。b)基因本体论(去)集群的系统树图与各自的去“免疫系统过程”条款和加入数字。在整个微阵列,微分调节最为明显的类“肥大细胞激活”。c)热点图描绘了120个不同调节基因的表达模式三个老鼠的肺主动脉条带(AO)和三个控制肺部。颜色代码(红色:upregulation;)差别格林:对这些显示单个基因表达相关基因表达的整个数组。 Annotation according to National Center for Biotechnology Information gene symbols. Bar graphs show upregulation of d) mast cell chymase and e) mast cell peptidase 2 in aortic banding compared with control rats. Data from real time RT-PCR of lung homogenates were quantified in comparison to standard curves produced under the same cycling conditions and normalised to glyceraldehyde-3-phosphate dehyrogenase (GAPDH) expression from the same experiment. Bar graphs and representative Western blots from lung homogenate show increased protein expression of f) mast cell chymase and g) mast cell peptidase 2 in lungs from aortic banding rats compared with controls (α-tubulin serves as loading control). Data from n = 3 each. *: p<0.05与控制。
为了测试一个假定的肥大细胞的功能作用在铲运机的肺血管重塑和PH值,我们应用药理方法通过治疗主动脉带大鼠肥大细胞稳定器酮替芬和遗传策略的使用Ws/Ws大鼠肥大细胞缺陷的(8]。酮替芬治疗的术后普通人明显较低PH值和右心室肥大的发展超过9周的主动脉分班,证明了降低P巴勒斯坦权力机构和右心室重量与未经处理的相比,ketotifen-treated带状老鼠(图2 a - c)。sham-operated控制老鼠没有条带,酮替芬治疗没有检测到肺血液动力学的影响。PH值的衰减酮替芬是主要归因于PVR的正常化,而左心室压力和主动脉流ketotifen-treated和未经处理的大鼠之间没有显著差异(表2在线补充材料),表明酮替芬并没有减轻潜在的充血性心力衰竭。符合我们之前的结果(6),动脉压和全身血管阻力带状和控制老鼠没有差异,同样影响(在线辅料表2)酮替芬治疗。超声心动图分析9周后主动脉条带显示右心室舒张末期面积增加而控制符合肺心病的发展(图2 d - i)。酮替芬治疗基本上正常右心室舒张末期控制价值维度。左心室舒张末期面积增加趋势在大鼠主动脉带独立的酮替芬治疗,但没有意义。TAPSE是减少主动脉带老鼠与控制相比,显示右心室功能障碍,但恢复部分酮替芬治疗(图2胃肠道)。
柱状细胞稳定器酮替芬对血液动力学的影响在肺动脉高压和右心室功能障碍由于心脏病离开了。一)肺动脉压(P巴勒斯坦权力机构),b)肺血管阻力(PVR)和c)右心室(RV)重量相对于体重(bw)控制,带状老鼠和老鼠ketotifen-treated带状。数据从n = 6。d-f)代表超声心动图two-dimensional-images显示左心室(LV)和右心室(RV)在end-diastole d)控制,e)带状和f) ketotifen-treated带状老鼠。注意显著扩张RV带状老鼠,酮替芬减毒的。复制在n = 10。g)房车和h) LV舒张末期面积和我)三尖瓣环平面收缩偏差(TAPSE)控制、带状和ketotifen-treated带状老鼠。数据从n = 10每个;*:p < 0.05与控制;#:p < 0.05与主动脉条带。
相当大的肺血管重塑是明显带状老鼠作为所有分析容器类别内侧壁增厚,即。在中小型肺小动脉的20 - 50μm 50 - 100μm直径,分别在较大的小动脉的> 100μm直径(图3 f)。而大多数小肺小动脉non-muscularised或部分肌控制老鼠,显著增加完全肌在带状老鼠和小动脉是明显与相应减少血管腔区(图3 g和h)。酮替芬治疗显著减毒内侧壁厚的增加在所有容器类别分析,降低微血管muscularisation,增加血管腔面积,因此,在很大程度上预防带状鼠肺微血管改造(图3 a -)。显著肥大细胞积累和脱粒肺带状与控制老鼠相比明显的肥大细胞密度增加,减少粒度和血管周的肥大细胞积累在所有分析血管口径(图3 i (k)。肥大细胞没有co-localise偶尔发生的血管血栓形成或微血管出血带模型,表明这些病态不作为的主要触发肥大细胞招聘。符合其拟议的行动模式肥大细胞稳定器,酮替芬治疗预防肥大细胞脱粒和粒度增加甚至高于控制水平。此外,酮替芬减毒的增加肺肥大细胞密度和阻止尤其是血管周的肥大细胞积累小肺微血管周围20 - 50μm直径(图3 i (k)。
肥大细胞的影响稳定器酮替芬在肺血管重塑和肺肥大细胞在肺动脉高压由于心脏病离开了。代表图像haematoxylin-eosin-stained肺部分)控制,b)带状和c) ketotifen-treated带状老鼠。规模50μm酒吧= 9∼。内侧的肺血管增厚带状老鼠主要由酮替芬废除。复制在n = 5。内侧为肺小动脉壁厚尺寸d) 25 - 50μm, e) 50 - 100μm直径和f) > 100μm肺从控制、带状和ketotifen-treated带状老鼠。g) muscularisation和h)的程度的内部腔面积肺小动脉20 - 50μm直径在肺部控制、带状和ketotifen-treated带状老鼠。muscularisation度表示为非比例、部分或全部肺小动脉肌在肺小动脉的截面总数的百分比。数据从n = 5。我)在肺组织学部分肥大细胞密度,j)造粒和k指数)的血管周的肥大细胞周围的肺血管大小20 - 50μm, 50 - 150μm直径和> 150μm肺从控制、带状和ketotifen-treated带状老鼠。 Data from n = 8 each. *: p<0.05与控制;#:p < 0.05与主动脉条带。
第二,我们解决后备方法肥大细胞对肥大细胞的作用不足Ws/Ws和相应的BN /f梅野生型老鼠到9周的主动脉条带。与野生型相比,在增加P巴勒斯坦权力机构和PVR主动脉条带明显减弱Ws/Ws大鼠(图4 a - c)。同样,右心室肥大(减少图4 a - c)和血管重塑,即。内侧壁厚的增加和muscularisation血管腔的损失,在带状明显减弱Ws / Ws与野生型小鼠相比图4 d - h)。Sham-operatedWs / Ws和野生型老鼠没有任何差异的评估参数。符合的结果Sprague-Dawley老鼠,主动脉带导致肺肥大细胞在野生型BN /积累和脱粒f梅老鼠。同意他们的表型,没有检测到肥大细胞在肺的部分Ws/Ws大鼠(图4 i (k)。
血管重塑和肺动脉高压由于心脏病在肥大细胞缺陷Ws/Ws老鼠。一)肺动脉压(P巴勒斯坦权力机构),b)肺血管阻力(PVR)和c)右心室(RV)重量相对于体重(bw)控制野生型(WT)老鼠,老鼠和带状带状WTWs/Ws老鼠。数据从n = 6。内侧为肺小动脉壁厚尺寸d) 25 - 50μm, e) 50 - 100μm;直径和f) > 100μm肺从控制WT、带状WT和带状Ws/Ws老鼠。g) muscularisation的程度和h)的内部腔面积肺小动脉20 - 50μm直径在肺部控制WT、带状WT和带状Ws/Ws老鼠。数据从n = 5。我)在肺组织学部分肥大细胞密度控制WT、带状WT和带状Ws/Ws老鼠,j)造粒和k指数)的血管周的肥大细胞周围的肺血管大小20 - 50μm, 50 - 150μm直径和> 150μm控制WT和带状WT老鼠的肺。数据从n = 8, *: p < 0.05与控制WT;#:p < 0.05与主动脉带WT。
测试是否肥大细胞的作用也扩大到non-cardiogenic形式的PH值,分析了酮替芬在MCT-induced肺动脉高血压的影响。在3周的MCT注入,Sprague-Dawley老鼠发达PH值和肺血管重塑了增加P巴勒斯坦权力机构,PVR和右心室肥大(图5 a - c)和增加意味着肺小动脉壁厚(图5 d-f相关),这是一个积累和脱颗粒的肥大细胞(图5胃肠道)。类似于我们的发现在带状老鼠,酮替芬治疗减轻这些影响和减毒MCT-induced增加右心室舒张末期面积由超声心动图评估(图5 d-f)。左心室舒张末期面积并不改变通过特定或酮替芬治疗。证实这一概念,肥大细胞可能同样在肺动脉高血压相关,我们下一个而桅杆cell-deficient MCT的影响Ws/Ws和野生型BN /f梅老鼠。BN /f梅的老鼠显示特定的特征模型,即。增加P巴勒斯坦权力机构,PVR和右心室肥大,超声心动图肺心病的迹象,右心室功能障碍和广泛的血管重塑,这些效应明显减弱甚至废除在肥大细胞缺陷Ws/Ws大鼠(图6 f)。这些发现合并视图,肥大细胞在肺血管重塑的作用以及PH值并不局限于铲运机,但扩展到其它类别的PH值,因此可能构成统一的疾病个人独立的病因学机制。
肥大细胞的影响稳定器酮替芬的野百合碱(MCT)全身的肺动脉高压。一)肺动脉压(P巴勒斯坦权力机构),b)肺血管阻力(PVR)和c)右心室(RV)重量相对于体重(bw)控制老鼠,老鼠和老鼠ketotifen-treated MCT MCT-treated。数据从n = 6。d)房车和e)左心室(LV)舒张区和内侧的肺动脉壁厚控制,未经中华人民共和国交通部和ketotifen-treated MCT老鼠。数据从n = 10。g)肥大细胞密度在肺组织学部分,h)造粒指数和我)的血管周的肥大细胞周围的肺血管大小20 - 50μm, 50 - 150μm直径和> 150μm肺的控制,未经中华人民共和国交通部和ketotifen-treated MCT老鼠。数据从n = 8, *: p < 0.05与控制;#:p < 0.05与未经中华人民共和国交通部。
血管重塑和肺动脉高压的野百合碱(MCT)治疗桅杆cell-deficientWs/Ws老鼠。),肺动脉压(P巴勒斯坦权力机构),b)肺血管阻力(PVR)和c)右心室(RV)重量相对于体重(bw)控制野生型(WT)老鼠,MCT-treated WT老鼠和MCT-treatedWs/Ws老鼠。数据从n = 6。d)房车舒张区,e)三尖瓣环平面收缩偏差(TAPSE)和f)内侧的肺动脉壁厚控制WT, MCT WT,未经中华人民共和国交通部Ws / Ws老鼠。数据从n = 10。*:p < 0.05与控制WT;#:p < 0.05与未经中华人民共和国交通部WT。
讨论
这里,我们确定肥大细胞肺血管重塑的催化剂博士基因阵列分析确定“肥大细胞激活”最显著调节PH值类后续到主动脉带,和血管周围肥大细胞积累证实在基因组,蛋白质组学和组织学水平。肥大细胞的功能角色PH值由于铲运机是证明了双重药理和遗传策略,肥大细胞稳定器、酮替芬、肥大细胞缺陷的使用Ws / Ws大鼠减毒:1)PH值;2)PVR的增加;3)肺血管重塑;4)右心室肥大;5)在主动脉舒张右心室扩张带老鼠。酮替芬或肥大细胞缺陷的保护作用是同样明显MCT-induced肺动脉高血压模型,显示肥大细胞的作用扩展到其他形式的博士因此,肥大细胞可能呈现一个小说,并承诺目标治疗PH值。
而肥大细胞历来被认为是关键在过敏和nonallergic免疫反应,越来越多的证据牵连到这些细胞在心血管疾病。肥大细胞刺激内皮细胞的增殖(9)和平滑肌细胞(10),目前的标志博士在目前的研究中,肥大细胞基因的upregulation和肥大细胞在肺心脏衰竭的积累让我们推测肥大细胞的病理生理作用血管重塑和博士值得注意的是,肥大细胞积聚在肺部的概念方面并不新鲜。埃利希(11),在1878年首次发现这种细胞类型,指出,肥大细胞丰富的“布朗肺硬化”,即。在haemosiderosis二尖瓣狭窄。从那时起,几项研究已经证实的积累肥大细胞在PH患者继发肺先天性心脏间隔缺损或二尖瓣狭窄,以及特发性患者PH值(12,13]。这些临床发现被类似的平行观测实验模型的PH值(14,15]。尽管这些研究团结地提议,肥大细胞在肺的积累可能潜在功能相关性PH值和肺血管重塑的病理生理学,这个假设从来没有系统地测试。
几行参数让我们提出,肥大细胞可能发挥重要作用在博士肥大细胞释放包括血清素,生物胺中扮演着重要角色在肺动脉血管收缩和平滑肌细胞增殖16),或组胺,这是一种血管收缩剂在肺静脉。肥大细胞激活肾素-血管紧张素系统已与PH值的发病机制(17)通过肾素的释放和肥大细胞chymase将血管紧张素I转换成血管紧张素ⅱ(18]。肥大细胞也chymase过程pro-matrix metalloprotease 9 (pro-MMP-9)积极MMP-9这是一个生物标志物scleroderma-associated PH值(19]。此外肥大细胞产生collagen-cleaving MMP-13 [20.)以及血小板源生长因子和转化生长因子(TGF) -β,既刺激平滑肌细胞增殖(21]。肥大细胞分泌苯丙酸诺龙(10]TGF-β家族的一员,在PH值升高,又促进平滑肌细胞增殖。最后但并非最不重要,肥大细胞释放白细胞介素- 6在动物模型中扮演着重要角色的PH值(22)和特发性患者血清的PH值升高(23]。综上所述,这些数据不仅巩固肥大细胞可能导致PH值的假设,但是提供了一个潜在的机械基础这一观点。
值得注意的是,肥大细胞也可能的假设角色的底部或者至少导致激酶抑制剂治疗的有效性博士肥大细胞表达高水平的干细胞因子受体酪氨酸激酶c - kit调节他们的成熟,分化和激活(24]。重要的是,multikinase和酪氨酸激酶抑制剂索拉非尼和伊马替尼等,最近成为强大的新治疗策略的PH值(25,26),是强有力的抑制剂的c - kit (27),因此,可能发挥其保护作用至少部分通过抑制肥大细胞的成熟和功能。
基于这些并发数据,我们提出了一个功能角色肥大细胞在肺血管重塑和博士在第一组实验中我们测试这个假说与肥大细胞治疗后大鼠主动脉带稳定器酮替芬。值得注意的是,酮替芬临床批准为口服治疗儿童哮喘。酮替芬治疗有效的减毒PH值的发展,肺血管重塑和右心室肥大在9周后分班。值得注意的是,酮替芬不仅阻止了肥大细胞脱粒但同样减轻肥大细胞聚集在周围的肺实质和肺血管,这表明肥大细胞激活和积累可能相互促进博士然而,一些谨慎的特异性药物干预是有效的,不仅因为酮替芬是肥大细胞稳定器,也组胺H1-receptor拮抗剂,和提出了额外的脱靶效应,这可能包括减少磷酸二酯酶和甲基转移酶活动增加,以及钙拮抗性能(28,29日]。因此,我们应用,遗传策略证实肥大细胞的潜在作用的PH值。
Ws/Ws老鼠有两个白色的发现突变等位基因(Ws)轨迹是相同的c - kit原癌基因。因此,吮吸Ws/Ws老鼠在肥大细胞缺陷和严重贫血由于缺陷柱状细胞和红细胞前体。贫血是减少在成人的大小Ws/Ws老鼠,肥大细胞缺乏是增强,使这个突变的一个有用的模型研究肥大细胞功能(8]。在目前的研究中,血细胞压积之间没有差别Ws/Ws和相应的BN /f梅野生型老鼠的调查(表3在线补充材料),而c - kit阳性细胞在肺组织学部分完全缺席Ws/Ws老鼠(在线补充材料图1)。在带状老鼠,的影响c - kit变异平行酮替芬,在PH值、肺血管和右心室重塑减轻Ws/Ws老鼠。认为c - kit积极肥大细胞积聚在肺部的PH值符合先前的发现低氧诱导的牛模型PH值的动员c - kit +细胞从骨髓进入血液循环,并积累改建肺动脉血管壁(30.]。受体酪氨酸激酶c - kit的成熟至关重要,肥大细胞的分化和激活可能另外提供另一种新兴的治疗效力的机械解释multikinase和酪氨酸激酶抑制剂治疗的PH值(25,26]。然而,c - kit表达和功能并不肥大细胞所独有,但适用于造血的前驱细胞和干细胞,生殖细胞,黑色素细胞,卡哈尔细胞和相当数量的肿瘤(31日]。因此,尽管血管重塑和PH值的衰减Ws/Ws老鼠就不能明确归因于他们的肥大细胞缺陷,我们认为并发结果的药理肥大细胞稳定器和c - kit突变体的遗传模型鼠提供实质性证据功能性肥大细胞在肺血管重塑的作用。
由于肺肥大细胞的积累是一个标志不仅铲运机的同样的其他形式的PH值,我们使用了MCT模型来测试这个概念是否也适用于non-cardiogenic博士类似于带状的影响老鼠,酮替芬治疗或基因肥大细胞缺陷减毒MCT-induced肺血管、血流动力学和右心室的变化,表明肥大细胞可能在肺动脉高血压也起到了重要的作用。值得注意的是,预防色甘酸二钠最近显示肥大细胞脱颗粒的减弱小鼠缺氧PH值的发展(32),肥大细胞缺陷并没有阻止PH值和血管重塑W/Wv类似于老鼠Ws/Ws老鼠有两个突变的等位基因c - kit轨迹(33]。尽管这种明显的不同物种之间可能由于肥大细胞在老鼠的相对缺乏33),它提出了一个问题,学位来自动物模型的数据反映了人类临床情况。大量的肥大细胞在肺患者的PH值(12,13),以及体液介质从人类肥大细胞分泌刺激人体平滑肌细胞扩散支持了这样的观点,即肥大细胞也发挥了基础性作用在人类(PH值21]。然而,这一观点将最终需要考验在适当的临床试验。
我们机械的见解的新兴角色肥大细胞在nonallergic疾病仍然稀缺。未来的研究都在活的有机体内和在体外至关重要的推进我们的理解如何,何时何地肥大细胞导致血管重塑和博士的大量的潜在候选路径提出之前,内部的详细解剖和细胞间的信号事件相关的肥大细胞的作用在PH值超出了本研究的范围。肥大细胞的重要的是,目前识别关键促进肺血管重塑可能产生一个新的治疗策略,从临床批准肥大细胞稳定器抑制剂的肥大细胞的特定成分releasate,或干预措施针对防止动员骨骨髓来源肥大细胞和肥大细胞前体或阻止肺肥大细胞粘附和招聘。
确认
我们要感谢大肠Bieniek(德国吉森大学肺中心吉森),a . Rutenberg和r . Rutenberg(麻醉学的两个部门,德国心脏研究所,柏林,德国)为优秀的技术援助。
脚注
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支持声明
本研究获得金融支持欧盟委员会在6th深刻理解框架计划(合同号- ct - 2005 - 018725 Pulmotension Saarikko, R.T. Schermuly、高家俊Kuebler),安大略省的心脏与中风基金会(6900 NA W.M.Kuebler)和皇后弗里德里希•基金会的奖学金柏林(j .阴和n .阴)。
感兴趣的语句
感兴趣的语句。Saarikko和R.T. Schermuly可以找到www.www.qdcxjkg.com/site/misc/statements.xhtml
- 收到了2010年3月18日。
- 接受2010年的11月9日。
- ©2011人队