摘要
来自慢性阻塞性肺病(COPD)患者的支气管活组织检查标本表明了CD8 + T淋巴细胞,巨噬细胞的增加,巨噬细胞和一些研究,中性粒细胞和嗜酸性粒细胞。戒烟会影响一秒钟内强制呼气量的速度(FEV1)COPD的下降,但对炎症的影响是不确定的。将支气管活组织检查炎症细胞计数与COPD的当前和前吸烟者进行比较。
对三项支气管活检研究的上皮下炎性细胞计数数据进行了汇总分析,这些研究包括当前或已戒烟的COPD患者。
101名受试者(65名吸烟者和36名戒烟者)的细胞计数数据被分析为以下细胞类型:CD4+和CD8+ t淋巴细胞,CD68+(单核细胞/巨噬细胞),中性粒细胞弹性蛋白酶+(中性粒细胞),EG2+(嗜酸性细胞),肥大细胞胰蛋白酶+和肿瘤坏死因子-α的细胞mrna阳性。通过FEV测量,目前吸烟者和已戒烟者的肺功能相似1(%预测)、用力肺活量(FVC)和FEV1/ FVC。结果表明,吸烟者和分析的任何炎症细胞类型或标记的数量之间没有显着差异。
结论是,在已确定的慢性阻塞性肺疾病中,戒烟者和继续吸烟者的支气管粘膜炎症细胞浸润相似。
抽烟本身诱导炎症;骨髓有效果,导致外周血白细胞增多,而且,在重病的吸烟者中,来自CD4(T-Helper)的外周血淋巴细胞平衡转变为CD8(T-抑制件)优势1.在无肺疾病的吸烟者和患有慢性支气管炎(CB)和慢性阻塞性肺疾病(COPD)的人,这种平衡改变也可以在支气管肺泡灌洗液中看到2,支气管镜下取支气管活检标本3.-5.以及从患有肺癌的吸烟者身上切除的气道组织6.那7..
在慢性阻塞性肺病的研究中,一些方案只包括当前吸烟者,而另一些方案包括当前吸烟者和已戒烟者。目前尚不清楚,一旦吸烟者出现炎症,戒烟者是否会在戒烟后恢复正常,或持续出现与当前吸烟者相似的炎症。两项已发表的横断面研究表明,如果症状在出现后继续存在,那么炎症变化即使在戒烟后也会持续存在。第一个研究是Turato做的等等。8.,检查了有CB症状的受试者的支气管活检标本。9名目前吸烟者和7名已戒烟者(均患有CB)与7名健康非吸烟者进行了比较。这项研究包括有气流限制和无气流限制的受试者,以及1秒平均用力呼气量(FEV)1) 77%的预测。与不吸烟的健康对照组相比,CB患者的巨噬细胞、白细胞介素-2受体阳性细胞、极晚激活抗原-1阳性细胞、白细胞介素-1粘附分子-1阳性血管和e-选择素阳性血管数量增加。没有发现有症状的吸烟者和已戒烟者之间的任何细胞标记检查的显著差异8..本研究表明,在持续CB的受试者中,无论吸烟状态如何,炎症都存在。
罗格斯大学的第二项研究等等。9.,共检查了18名COPD患者(平均FEV)159%pred)和11个没有肺病的排烟受试者。COPD组中的四名科目从未吸烟过;所有其余的参与者都是出吸烟者,在研究开始前停止吸烟≥1yr。支气管活检标本表明,与健康的排烟控制相比,COPD组中有更多的Eg2 +细胞(嗜酸性粒细胞)和CD68 +细胞(单核细胞/巨噬细胞)9..这项研究证实,即使戒烟了,慢性阻塞性肺病患者与非戒烟者相比,炎症细胞数量继续增加。因为治疗前后的支气管活检标本现在被用来评估COPD治疗的效果10那11,尤其重要的是欣赏在治疗开始时在基线中的吸烟者和在基线中的炎症细胞的数量是否存在显着差异。如果存在这样的差异,则将当前和排烟人组合在对COPD的这种活检研究中是不合适的。为了回答这个问题,本研究比较了使用稳定的COPD的支气管活组织检查标本中的炎性渗透,所述稳定COPD使用汇总分析了三项先前公布的研究,其中包括101名患者的总共包括101名患者3.那10那11.
方法
来自三种先前公布的研究的基线支气管活检炎性细胞计数数据用于给予包含101名患者的稳定COPD组3.那10那11.所有研究都包含吸烟者和禁烟者作为纳入标准的一部分。包含和排除标准类似于三项研究。Table 1⇓显示吸烟和排烟组的人口统计和肺功能数据。在101例患者中,87名(86%)遇到了英国医学研究委员会的存在标准的CB12.根据全球慢性阻塞性肺疾病倡议标准,受试者为中度至重度COPD13. 患者从胸科诊所和广告中招募。每项研究均获得当地研究伦理委员会的批准,受试者给予书面知情同意。
吸烟状况被记录在纳入研究中并在随后的访谈中确认。吸烟历史在包装中量化,并在表1中给出⇑.在Hattotuwa的研究中等等。10,测量呼出的一氧化碳以验证吸烟状态,发现目前吸烟者的发现显着高(P = 0.0002)。因此,有信心是准确地报道了吸烟状态。在Hattotuwa的研究中等等。10,戒烟者平均戒烟8年(范围1-25年)。其他两项研究没有这种信息。
支气管镜检查是根据美国胸科学会的指导方针进行的,如之前在其他地方描述的3.. 支气管活检标本按每篇文章所述进行处理和免疫染色。简言之,在O'Shaughnessy的研究中等等。3.和Hattotuwa等等。10,活检标本固定并快速冷冻。在网状基底膜下100 μm处计数上皮下阳性细胞。在甘布尔的研究中等等。11,活组织检查标本是固定的,并嵌入石蜡。计算了所有可用的亚脑内的正染色细胞。所有活组织检查加工和评估都在相同的实验室(肺部病理学,伦敦,伦敦,英国伦敦)进行。由于在先前概述的情况下,在所述个体方案之间进行活组织检查加工和计数的方法差异,因此研究的绝对细胞计数与研究之间没有直接相当。然而,在每项研究中使用吸烟者和排烟人之间的细胞计数的标准化平均差异(SMDS),可以组合数据并进行汇总分析。关于以下所有三项研究中包含的以下细胞和炎症的关键标记的结果在本研究中报道:CD4 +和CD8 + T淋巴细胞,CD68 +(单核细胞/巨噬细胞)和中性粒细胞弹性蛋白酶+(中性粒细胞)通过免疫染色;和mRNA阳性细胞用于肿瘤坏死因子(TNF)-α原位杂交。还分析了来自三项研究中的两项研究的eg2 +(嗜酸性粒细胞)和肥大细胞胰蛋白酶+细胞(肥大细胞)的数量。在每项研究中评估细胞计数的可重复性。对每项研究的重复计数的变异系数为O'Shaughnery的1.7-11.4%等等。3.,6.5%的哈托鲁瓦等等。10赌博占2.7%等等。11.
统计分析
所有三个试验的数据都使用Review Manager 4.2.8 (The Cochrane Collaboration, Oxford, UK)进行汇总。利益结果为连续变量;因此,所有数据使用加权平均差和95%置信区间合并,结果使用相同的量表(例如钒铁1%pred)或使用不同尺度测量结果时的SMD(例如CD8计数以细胞·mm计-1或细胞·mm-2)。当所有研究评估相同的结果,但以多种方式进行测量时,SMD被用作汇总统计。在这种情况下,在将试验结果合并之前,有必要将试验结果标准化为统一的量表。SMD表示每个试验中相对于该试验中观察到的变异性的治疗效果大小。因此,平均数差异与平均数比例相同的研究sd具有相同的SMD,无论用于进行测量的刻度是什么。使用DerSimonian和Laird方法测试合并估计数之间的异质性14.为了调整多种比较,施加了Bonferroni校正;因此,本文认为p值<0.01。当没有观察到异质性时,使用固定效果模型报告结果,并且当存在异质性时随机效应模型。目前终点没有异质性存在。进一步解释统计分析在图1中提供⇓和桌子 2.⇓.
吸烟者汇总分析与前吸烟者在一秒钟内强迫呼气量。数据使用固定效果模型(▪(尺寸反射加权))和95%置信区间(水平杆)呈现为加权平均差(WMD)。··············无效果线。钻石的中心表示三项研究的综合效果及其四肢的置信区间95%的置信区间。如果WMD是阳性的,则出吸烟者较高,如果它是负面的,吸烟者较高。在测试朝向总体平均结果的组合结果的异质性时,Chi平方= 1.61(2度自由; P = 0.45)和i2 = 0%. In testing for overall effect, z = 0.79 (p = 0.43).
结果
人口统计学和基线肺功能数据如表1所示 1.⇑.通过FEV测量,吸烟者和戒烟者之间的肺功能没有显著差异1、用力肺活量(FVC)和FEV1/ fvc(表3⇓).图1⇑显示FEV的当前和前吸烟者之间的加权平均差异1(%pred)对每个学习(表2⇑)以及所有三项研究的总体平均值。目前吸烟者和戒烟者之间的任何细胞计数或标记物(CD8、CD4、CD68、中性粒细胞弹性蛋白酶、EG2、肥大细胞和TNF-α)均无显著差异。桌子 3.⇓详细信息测量的所有结果。
进行亚组分析以比较有无CB的受试者。在戒烟组或当前吸烟组中,有无CB的受试者之间未发现任何细胞或标记物的差异。
讨论
来自同一实验室进行的三项研究的数据被合并到一项合并分析中,使用原始数据来调查COPD吸烟者和已戒烟者之间的气道炎症是否存在任何差异。结果显示,吸烟者和戒烟者在CD4+和CD8+ t淋巴细胞、中性粒细胞、CD68+单核/巨噬细胞、EG2+嗜酸性粒细胞、肥大细胞计数和TNF-α基因表达方面无差异。此外,有CB和没有CB的受试者之间的细胞计数没有差异。目前的结果与Turato的发现相一致等等。8.研究发现,在继续产生痰液的吸烟者和吸烟者之间,炎症细胞计数没有差异。罗格斯大学等等。9.与健康的出吸烟者相比,在患有COPD的嗜酸孢菌和巨噬细胞数增加,表明症状前吸烟组中的急性炎症,与本发现一致。佩斯西等等。15报告了与当前吸烟者的CB(平均FEV)相比,出于吸烟者中耻骨上肥大细胞数量减少的趋势(平均值173%pred)15.在已戒烟者和持续吸烟者之间,肥大细胞数量没有发现差异。最近的一项横断面研究比较了吸烟者和戒烟者COPD中的支气管炎症16表明,具有COPD的排烟人具有比当前吸烟者高的CD3 +,CD4 +和血浆细胞数。此外,短期前吸烟者具有比目前吸烟者更高的CD4 +和CD8 +细胞数,而长期出吸烟者具有较低的CD8 +细胞数和CD8 / CD3比和更高的血浆细胞数16.目前的研究并没有显示在COPD的吸烟者和已戒烟者之间CD4+细胞数量的差异。没有分析戒烟持续时间,但这将是一个有趣的焦点,未来工作使用前瞻性纵向研究。
戒烟已经被证明可以提高生存率17减少住院人数18FEV的速率1下降19那20.,至少在温和至中等的COPD中。由于Airway炎症已被证明与COPD中的肺功能有关3.那21在美国,戒烟后炎症症状有望改善。与肺功能相似的现有吸烟者相比,目前的戒烟者没有发现气道炎症减少。从戒烟中获得的益处程度可能取决于戒烟时疾病的严重程度。因此,我们认为,在已建立的COPD中,炎症是由疾病严重程度决定的,而不是由吸烟状况决定的。为了支持这些建议,Willemse在12名COPD患者戒烟1年后的支气管活检标本和痰中发现了持续性炎症等等。22. 相比之下,无症状吸烟者的炎症减轻1 戒烟后一年。肺健康研究20.表明FEV的改善程度1戒烟后肺功能下降。因此,研究戒烟对轻度疾病患者气道炎症的影响可能具有重要意义。为了进一步研究戒烟对炎症、FEV的影响,还需要一项前瞻性纵向研究1下降,加剧和生存。
考虑到戒烟对FEV的有益影响之间的明显分离1下降19那20.,恶化18和生存17和明显缺乏对炎症的影响,对目前发现的另一种解释可能是支气管黏膜炎症在COPD的发展中没有作用。然而,以往的横断面研究显示气流阻塞与气道和实质CD8 t淋巴细胞计数之间存在相关性3.那7.那21,从而将炎症与疾病严重程度联系起来。吸烟可能会影响除本研究中检查的标记以外的标记,例如血浆细胞,白细胞介素-8或结构元素,这是未来工作的一个区域。虽然已经表明吸烟者和具有成立的COPD的吸烟者表现出类似水平的支气管炎炎症,但需要纵向研究,以便明确地展示吸烟对支气管炎炎症的影响。
在任何对活组织检查细胞计数的研究中,重要的是考虑这种信号的生物变异性,并确保细胞计数的可重复性令人满意。如果存在来自可重复测量不良的噪声,则可以防止检测到研究组之间的单元计数的信号,例如对研究组之间的差异。形成本分析的三种合并研究中细胞计数的可重复性令人满意。具有COPD受试者的炎性细胞计数的明显生物可变性,采样策略可以影响所需的样本大小23.与先前类似的研究相比,本分析的样本量大大8.那9.,目前的作者认为,它有足够的力量来显示在本研究分析的所有细胞类型的差异,除了中性粒细胞,它显示出比其他细胞类型更大的变异性23.
当规划涉及慢性阻塞性肺病中的支气管活组织检查的假设测试研究时,重要的是要知道粘膜炎症是否受到吸烟状态的影响。目前的结果支持在研究组中包含慢性阻塞性肺病的慢性阻塞性肺病,用于定量免疫标志物CD8,CD68,CD4,EG2 +(嗜酸性粒细胞),肥大细胞和肿瘤坏死因子-α基因表达。本作者表明,虽然最初被吸烟引起的疾病过程而不是吸烟,但虽然最初诱发疾病的炎症变化本身.有必要进一步了解香烟诱发炎症的基本机制,以及它们是如何触发和如何消除的。结论是,从慢性阻塞性肺疾病患者的支气管活检标本中,戒烟者显示出与持续吸烟者相似的持续黏膜炎症。
致谢
作者想要感谢所有的研究志愿者和C.E. Brightling (Glenfield Hospital, Leicester, UK);D. martin, S. Majumdar, T.W. Ansari和M.J. Gizycki(英国伦敦皇家布朗普顿医院伦敦帝国学院肺部病理学);T.T. Hansel(皇家布朗普顿医院);S.I. Rennard(内布拉斯加州医疗中心,美国东北奥马哈);以及S. Troy, C. Compton, O. Amit和J. Edelson (GlaxoSmithKline, Greenford, UK)对本研究的宝贵贡献。
- 收到了2006年1月27日。
- 公认2007年5月7日。
- ©ers Journals Ltd