抽象的gydF4y2Ba
在哮喘中,人气道上皮细胞(HAECs)部分地通过释放促炎细胞因子白细胞介素(IL)-1β来调节粘膜炎症的强度。然而,IL-1β抑制剂,IL-1受体拮抗剂(IL-1RA)和可溶性IL-1受体II型(SIL-1RII),调节IL-1β生物活性。为了更好地理解气道粘膜中IL-1β活性的控制,在IL的释放中,肿瘤坏死因子(TNF)-α,环状腺苷一磷酸(CAMP)和环状鸟苷胺单磷酸(CAMIC)的作用检查-1β及其培养HAEC的抑制剂。gydF4y2Ba
用TNF-α (2-200 ng·mL)处理haecgydF4y2Ba−1gydF4y2Ba)、二丁基cAMP (0.01-1 mM)、8-溴- cgmp (0.01-1 mM)或载体处理24 h,采用酶联免疫吸附法测定haec条件培养基中细胞因子水平。gydF4y2Ba
haec产生IL-1β、IL-1RA和sIL-1RII,但抑制因子的浓度大大超过IL-1β(分别为约100倍和550倍)。TNF-α剂量依赖性地增加IL-1β细胞因子家族成员的水平。然而,在TNF-α浓度范围内,IL-1β的浓度比其抑制剂的浓度增加更多。cAMP增加了组织和TNF-α刺激IL-1β的释放,但降低了sIL-1RII的释放。相比之下,cGMP对IL-1β无影响,但减少IL-1RA和sIL-1RII的释放。gydF4y2Ba
在基础条件下,人气气道上皮细胞相对于白细胞介素-1β的抑制剂的不成比例释放可能导致白细胞介素-1β介导的生物效应。肿瘤坏死因子-α,环腺苷一磷酸胺和环磷酸单磷酸可以通过增加白细胞介素-1β水平相对于抑制剂在气道粘膜中的抑制剂中的粘膜炎症。gydF4y2Ba
该研究部分受到国家卫生研究所(Bethesda,MD,USA)授予号码R01 HL52700-04。gydF4y2Ba
人气道上皮细胞(HAECs)释放多种细胞因子和趋化因子,调节粘膜炎症的强度gydF4y2Ba1gydF4y2Ba,gydF4y2Ba2gydF4y2Ba.例如,通过HAECs生产的促炎细胞因子,白细胞介素(IL)-1β,被认为在哮喘发病机制中发挥重要作用gydF4y2Ba2gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba9gydF4y2Ba.哮喘患者支气管肺泡灌洗液中IL-1β水平升高,这些水平与气道功能障碍的严重程度相关gydF4y2Ba3.gydF4y2Ba,gydF4y2Ba4gydF4y2Ba.此外,与正常受试者相比,哮喘患者的气管支气管上皮细胞中IL-1β免疫反应性增加gydF4y2Ba5gydF4y2Ba.gydF4y2Ba
由HAECS产生的IL-1β改变了气道结构的机制,并且在哮喘中的功能相对清楚地理解。例如,IL-1β诱导的细胞因子释放(gydF4y2Ba例如gydF4y2Ba调节在激活,正常的T细胞表达和分泌,粒细胞 - 巨噬细胞群刺激因子,肠素,单核细胞趋化肽-4,IL-5,gydF4y2Ba等等。gydF4y2Ba)来自HAECS增强嗜酸性粒细胞趋化性,生存和激活gydF4y2Ba9gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba11.gydF4y2Ba.在嗜酸性粒细胞中,IL-1β诱导IL-9 (t细胞和肥大细胞生长因子)的释放,从而诱导气道嗜酸性粒细胞增多、气道高反应性和杯状细胞上皮化生。此外,IL-1β刺激成纤维细胞生长因子的释放(gydF4y2Ba例如gydF4y2Ba血小板衍生的生长因子)通过HAECs,增强成纤维细胞增殖和胶原合成,从而有助于气道重塑gydF4y2Ba9gydF4y2Ba,gydF4y2Ba12.gydF4y2Ba.最后,IL-1β损害HAECS的环状腺苷一磷酸盐(CAMP)生产响应于βgydF4y2Ba2gydF4y2Ba- 肾上腺素能激动剂,从而损害了粘蛋白间隙gydF4y2Ba13.gydF4y2Ba.gydF4y2Ba
相反,与HAECs产生的IL-1β的生物学效应的相当知识相比,IL-1β释放和生物活性的调节很差。其他组织/细胞类型的工作表明IL-1β生物活性由包含受体拮抗剂(IL-1受体拮抗剂(IL-1RA))的复杂响应改性剂的复杂系统密切调节,其结合但不激活受体,膜结合的诱饵受体(II型受体),和两个IL受体的可溶性形式(SIL-1RI和SIL-1RII)gydF4y2Ba8gydF4y2Ba,gydF4y2Ba9gydF4y2Ba.gydF4y2Ba
在非抑制细胞中的研究(gydF4y2Ba例如gydF4y2Ba血液单核细胞和腹腔巨噬细胞)提示,气道中的IL-1β活性可能受到与哮喘和慢性阻塞性肺病(COPD)相关的多种因素的影响。在单核细胞和巨噬细胞中,IL-1β细胞因子家族成员的细胞外释放受促炎细胞因子、肿瘤坏死因子(TNF)-α和环核苷酸(gydF4y2Ba例如gydF4y2Ba营)gydF4y2Ba14.gydF4y2Ba,gydF4y2Ba15.gydF4y2Ba.在哮喘和COPD中,气道TNF-α水平升高,并与气道阻塞的严重程度相关gydF4y2Ba16.gydF4y2Ba,gydF4y2Ba17.gydF4y2Ba.在疾病中,βgydF4y2Ba2gydF4y2Ba肾上腺素能激动剂、支气管扩张剂和茶碱可增加细胞内cAMP水平。最后,哮喘气道一氧化氮水平的增加可能通过激活鸟苷环化酶而增加环磷酸鸟苷(cGMP)的水平。因此,假设haec释放IL-1β及其抑制剂家族是受TNF-α和细胞内cAMP和cGMP水平变化的调节。通过检测TNF-α、cAMP和cGMP对细胞培养液中IL-1β、IL-1RA和sIL-1RII释放的影响,在培养的haec中验证了这一假设。gydF4y2Ba
材料和方法gydF4y2Ba
细胞培养和刺激gydF4y2Ba
使用HAEC线16-HBE进行实验。细胞在Dulbecco改性的鹰培养基(Biosource,MD,MD,MD,USA)中培养,补充有10%胎牛血清(Sigma,St Louis,Mo,USA),青霉素(100u·mlgydF4y2Ba−1gydF4y2Ba)和链霉素(100mg·mlgydF4y2Ba−1gydF4y2Ba),置于直径100毫米的组织培养皿中,5%二氧化碳/95%空气,37°C,直至融合。培养皿预先涂有VI型人胎盘胶原蛋白(Sigma)。在三个实验中,正常人原代上皮细胞(NHBEs;Cambrex Bioscience, Walkersville, MD, USA)进行了研究。NHBEs在胶原蛋白包被的6孔板上生长,在Cambrex Bioscience的支气管上皮细胞基础培养基(52µg·mL)中富集gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba牛垂体提取物,0.5μg·mlgydF4y2Ba−1gydF4y2Ba氢化可的松,0.5 ng·毫升gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba表皮生长因子,0.5μg·mLgydF4y2Ba−1gydF4y2Ba肾上腺素10µg·毫升gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba转铁蛋白,5μg·mLgydF4y2Ba−1gydF4y2Ba胰岛素,6.5 ng·mlgydF4y2Ba−1gydF4y2Ba三碘罗酮和0.1 ng·mLgydF4y2Ba−1gydF4y2Ba视黄酸。gydF4y2Ba
在汇合中,用TNF-α,CAMP,DIBUTYRYL CAMP的细胞渗透形式或CGMP,8-溴-CGMP(来自SIGMA的均)的细胞可渗透形式处理细胞。车辆处理的细胞(0.1%牛血清白蛋白,磷酸盐缓冲盐水或二甲基硫氧化物)用作对照。在初始时间过程实验中,用TNF-α处理细胞(20ng·mlgydF4y2Ba−1gydF4y2Ba)2-30小时。所有三种细胞因子的最大浓度在24小时时发生。此后,用TNF-α处理细胞24小时(2-200ng·mlgydF4y2Ba−1gydF4y2Ba),二丁酰基阵营(0.01-1 mm),或8-溴-CGMP(0.01-1毫米)。在单独的实验中,测定TNF-α和环状核苷酸的相互作用。在这些实验中,用TNF-α处理细胞(20ng·mlgydF4y2Ba−1gydF4y2Ba)单独或与二丁酰基阵营(1mM)或8-溴-CGMP(1mM)组合。最后,使用PKA和PKG抑制剂,KT 5720和KT 5823(Calbiochem,La Jolla)检查蛋白激酶A(PKA)和蛋白激酶G(PKG)途径在介导丁二醇阵营和8-溴-CGMP的作用中的作用。,CA,USA;0.1-10μm)。在单独的TNF-α之前或组合加入抑制剂1小时。gydF4y2Ba
处理后,收集细胞条件培养液,用Centricon Plus-20过滤器(Millipore, Billerica, MA, USA)离心浓缩20倍,2800 ×离心30-90 mingydF4y2BaggydF4y2Ba在4°C。在测定之前将样品储存在-20℃。收集培养基后,使用0.05%胰蛋白酶和0.53mm乙二胺四乙酸(EDTA)在Hank的平衡盐溶液中脱离细胞,并通过台盼蓝(0.4%)排除评估的活力。在所有实验中,上皮细胞活力> 90%。gydF4y2Ba
细胞因子测定gydF4y2Ba
通过96孔微滴滴板中的固相夹心酶联免疫吸附测定,测量上皮细胞条件培养基中的IL-1β,IL-1RA和SIL-1RII水平。gydF4y2Ba
使用针对IL-1β(BioSource International,Camarillo,Ca,USA)的两种不同的小鼠抗人均单克隆抗体(免疫球蛋白(Ig)G1)测量IL-1β浓度。单独的生物素 - 共轭小鼠单克隆抗体(IgG1κ链)(0.2μg·mlgydF4y2Ba−1gydF4y2Ba;BioSource International)用于检测。通过加入辣根过氧化物酶(HRP) - 缀合的链霉抗生物素蛋白,然后用四甲基苯胺(TMB)为基质,对抗原/抗体缀合物进行比色。使用微孔板读取器(Bio-Rad Model 550; Bio-Rad,Hercules,Ca,USA)测量450nm处的颜色强度。以三份测定样品。通过使用重组人IL-1β作为标准的标准曲线的插值计算样品培养基中的浓度。IL-1β测定中检测阈值<0.19pg·mLgydF4y2Ba−1gydF4y2Ba.gydF4y2Ba
使用针对IL-1RA的单次小鼠抗人均单克隆抗体(IgG1)测量IL-1RA浓度,如上所述用于IL-1β的相同生物素/链霉蛋白检测系统。用于测量IL-1RA的抗体认识到IL-1RA的所有三种同种型。IL-1RA测定中检测阈值为〜4 pg·mlgydF4y2Ba−1gydF4y2Ba.gydF4y2Ba
使用针对SIL-1RII(R&D Systems,Minneapolis,Mn,Mn,USA)的小鼠抗人均单克隆抗体测量上皮细胞条件培养基中的SIL-1RII浓度。由于II型受体在上皮细胞中的I型受体上占据占II型受体的影响,因此测量SIL-1RII而不是SIL-1RIgydF4y2Ba18.gydF4y2Ba,gydF4y2Ba19.gydF4y2Ba,SIL-1RII对IL-1β表现出比SIL-RI更大的亲和力gydF4y2Ba20.gydF4y2Ba.使用单独的针对人sIL-1RII的酶标兔多克隆抗体检测抗原/抗体复合物(R&D Systems),并按照IL-1β试验的描述监测反应。sIL-1RII检测的阈值<10 pg·mLgydF4y2Ba−1gydF4y2Ba.gydF4y2Ba
统计分析gydF4y2Ba
通过配对的T检验进行对照和实验组中平均值的比较。为了使细胞对各种刺激的差异进行标准化,数据也表达为对照值(车辆处理细胞)的百分比。通过单向反复措施的差异分析(ANOVA)通过单向反复测量评估TNF-α,二丁酰=,8-Bromo-CGMP和PKA和PKG抑制剂剂量/响应效应进行细胞因子浓度。在P <0.05水平下拍摄了组平均值差异的意义。gydF4y2Ba
结果gydF4y2Ba
培养的16-HBE细胞和HAEC的原发性培养物组成型释放到培养基中的IL-1β,IL-1RA和SIL-1RII(表1gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba).IL-1β的量浓度比IL-1RA低约100倍,比sIL-1RII低约550倍。gydF4y2Ba
16-HBE细胞对白细胞介素(IL)-1β及其抑制剂的结构性释放gydF4y2Ba
TNF-α的影响gydF4y2Ba
TNF-α(2-200ng·mlgydF4y2Ba−1gydF4y2Ba)在24小时内引起IL-1β,IL-1RA和SIL-1RII水平的增加(所有P <0.001(ANOVA))(图1gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba).然而,三种IL-1β细胞因子家庭成员Totnf-α的响应性质和程度不同。例如,IL-1β的增加在整个TNF-α浓度范围内进行,而IL-1RA和SIL-1RII的增加在20ng·mL下达到高原gydF4y2Ba−1gydF4y2BaTNF-α。此外,IL-1β水平的增加比例大(gydF4y2Ba即。gydF4y2Ba~8倍)比IL-1RA和SIL-1RII(~1.4-2倍)的〜8倍。gydF4y2Ba
![图。1。-gydF4y2Ba](http://www.qdcxjkg.com/content/erj/24/3/360/F1.medium.gif)
肿瘤坏死因子(TNF)-α对A)白细胞介素(IL)-1β,B)IL-1受体拮抗剂(IL-1RA)和C)可溶性IL-1受体II型(SIL-1RII)释放的影响-hbe细胞。数据显示为平均值±gydF4y2Ba扫描电镜gydF4y2Ba(11实例)。TNF-α增加了24小时的所有三种细胞因子的水平。然而,对于IL-1β(P <0.001)而言,相对增加比IL-1RA(P = 0.003)或SIL-1RII(P = 0.018)更大。gydF4y2Ba
营地和CGMP的影响gydF4y2Ba
Dibutyryl阵营(1 mm)处理增加IL-1β释放单独和在TNF-α存在下(图2AgydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba).相反,二丁基cAMP对IL-1RA的释放没有影响,但降低了组成型和TNF-α诱导的sIL-1RII的释放(见图)。3和4gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba).gydF4y2Ba
a)二丁酰胺腺苷一磷酸二磷酸二磷酸二磷酸二磷酸二磷酸(CGMP)在16-HBE细胞释放白细胞介素(IL)-1β中的8-溴 - 环状鸟苷。细胞在1 mM环核苷酸存在或不存在(□)条件下孵育24小时。数据显示为平均值±gydF4y2Ba扫描电镜gydF4y2Ba.a)14实验;b)8实验。Dibutyryl-camp将IL-1β的释放增加进入培养基和增强的肿瘤坏死因子(TNF)-α诱导的释放。相比之下,8-溴-CGMP对IL-1β释放没有影响。gydF4y2BansgydF4y2Ba:无情。gydF4y2Ba#gydF4y2Ba:P <0.03;gydF4y2Ba¶gydF4y2Ba:P <0.003;gydF4y2Ba+gydF4y2Ba:P <0.002gydF4y2Ba相对gydF4y2Ba缺少环核苷酸。gydF4y2Ba
a)二丁基环磷酸腺苷(cAMP)和b) 8-溴环磷酸鸟苷(cGMP)对16-HBE细胞释放白细胞介素-1受体拮抗剂(IL-1RA)的影响。细胞在1 mM环核苷酸存在或不存在(□)条件下孵育24小时。数据显示为平均值±gydF4y2Ba扫描电镜gydF4y2Ba.A) 8个实验b) 5个实验。二丁酰cAMP对IL-1RA的释放无影响。相反,在肿瘤坏死因子(TNF)-α不存在的情况下,8-溴代cgmp显著抑制IL-1RA的释放,并拮抗TNF-α的作用。gydF4y2BansgydF4y2Ba:无情。*:P <0.05;gydF4y2Ba#gydF4y2Ba:P <0.02gydF4y2Ba相对gydF4y2Ba缺少环核苷酸。gydF4y2Ba
A)二丁酰胺腺苷一磷酸二磷酸二磷酸(CAMP)和B)的8-溴环偶氮醇单磷酸(CGMP)在可溶性白细胞介素-1受体型II(SIL-1RII)释放的16-HBE细胞中。细胞在1 mM环核苷酸存在或不存在(□)条件下孵育24小时。数据显示为平均值±gydF4y2Ba扫描电镜gydF4y2Ba.a)12实验和b)8实验。Dibutyryl Camp抑制SIL-1RII释放到培养基中和拮抗肿瘤坏死因子(TNF)-α诱导的释放中。8-Bromo-CGMP具有类似的效果。*:P <0.05;gydF4y2Ba#gydF4y2Ba: p < 0.02;* *: p < 0.01gydF4y2Ba相对gydF4y2Ba缺少环核苷酸。gydF4y2Ba
与Dibutyll阵营的效果相比,8-溴-CGMP(1mm)在TNF-α的缺乏和存在中显着降低IL-1RA和SIL-1RII释放(图3B和4BgydF4y2Ba⇑gydF4y2Ba⇑gydF4y2Ba),但对IL-1β没有影响(图2BgydF4y2Ba⇑gydF4y2Ba).gydF4y2Ba
Dibutyll阵营和8-溴-CGMP用剂量变化的影响,并且浓度为1毫米,最大(表2gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba).gydF4y2Ba
循环核苷酸对肿瘤坏死因子-α细胞因子释放的影响gydF4y2Ba#gydF4y2Ba刺激16-HBE细胞gydF4y2Ba
PKA和G抑制剂对二叶丁蛋白阵营和8-溴-CGMP的反应的影响gydF4y2Ba
PKA抑制剂KT 5720可抑制二丁基cAMP (1 mM)诱导的IL-1β释放增加(p<0.01),但对sIL-1RII释放无抑制作用(表3)gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba).gydF4y2Ba
KT 5720对16-HBE细胞释放IL -1β和可溶性IL-1受体II型(sIL-1RII)的影响gydF4y2Ba
PKG抑制剂KT 5823逆转了IL-1RA释放的8-溴-CGMP诱导的抑制(P <0.01),但对SIL-1RII释放的抑制没有影响(表4gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba).gydF4y2Ba
KT 5823对白细胞介素(IL)-1受体拮抗剂(IL-1RA)和可溶性IL-1受体II型(SIL-1RII)的释放的影响gydF4y2Ba
IL-1β细胞因子通过NHBE细胞的原发性培养释放:对TNF-α和营地的反应gydF4y2Ba
NHBEs产生IL-1β、IL-RA和sIL-1RII(三个实验)。IL-1β和IL-RA浓度分别为48±15和527±76 pg·mLgydF4y2Ba−1gydF4y2Ba分别超过16-hbe细胞中的那些。相反,SIL-1RII浓度(31±3 pg·mLgydF4y2Ba−1gydF4y2Ba)的产量低于16-HBE细胞。gydF4y2Ba
TNF-α刺激诱导NHBE的响应,其与16-HBE细胞(三个实验)相似(图5gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba).gydF4y2Ba
![图5. -gydF4y2Ba](http://www.qdcxjkg.com/content/erj/24/3/360/F5.medium.gif)
肿瘤坏死因子-α(TNF-α)对A)白细胞介素(IL)-1β,B)IL-1受体拮抗剂(IL-1RA)和C)可溶性IL-1受体II型(SIL-1RII)释放的影响正常人支气管上皮细胞的原发性培养物。数据显示为平均值±gydF4y2Ba扫描电镜gydF4y2Ba(3实例)。gydF4y2Ba
最后,二丁基cAMP (1mm)作用24h,给予20ng·mL刺激的细胞gydF4y2Ba−1gydF4y2BaTNF-α,对IL-1β和SIL-1RII释放(三个实验)产生了类似的效果,在16-HBE细胞中观察到的那些(数据未显示)。gydF4y2Ba
讨论gydF4y2Ba
IL-1β在呼吸道中的生物学效应取决于IL-1β的浓度,相对于氏胞质抑制剂gydF4y2Ba9gydF4y2Ba.IL-1β抑制剂的三种形式已被描述:1)IL-1RA,它竞争性地结合功能活跃的I型受体,但不诱导信号;2) II型受体,其胞浆内结构域被截断,使其功能失活;3)两种IL-1受体(sIL-1RI和sIL-1RII)的可溶性形式,这两种受体由活化的细胞脱落,可逆地结合IL-1β。gydF4y2Ba
添加到这种复杂性,已经描述了三种IL-1RA的同种型(gydF4y2Ba即。gydF4y2Ba分泌IL-1RA和两种体内型IL-1RA(类型I和II)))gydF4y2Ba9gydF4y2Ba.分泌型IL-1RA在炎症细胞如单核细胞和中性粒细胞中大量表达gydF4y2Ba21.gydF4y2Ba.相比之下,细胞内IL-1RA的两种同样型由气管皂细胞的角质形成细胞和上皮细胞表达,鼻子,角膜和胃肠道gydF4y2Ba21.gydF4y2Ba,gydF4y2Ba22.gydF4y2Ba.实际上,在HAECs中,细胞内IL-1RA分泌并保留细胞内gydF4y2Ba22.gydF4y2Ba.值得注意的是,本研究中使用的抗体检测到IL-1RA的所有三种亚型。gydF4y2Ba
在细胞活化中,从细胞表面切割IL-1受体类型以产生可溶性形式,可逆地结合和失活IL-1βgydF4y2Ba18.gydF4y2Ba.有趣的是,在上皮细胞中,诱骗II型受体的数量超过I型受体gydF4y2Ba18.gydF4y2Ba,gydF4y2Ba19.gydF4y2Ba.此外,SIL-1RII对IL-1β具有比IL-1A更高的亲和力,并且抑制IL-1β比SIL-1RI更有效gydF4y2Ba20.gydF4y2Ba.结果,在气道上皮中,SIL-1RII可能是两个可溶性受体的功能更重要的。gydF4y2Ba
对于目前的作者的知识,本实验是首先通过HAEC进行同时检查IL-1β和ITSMAJOR抑制剂的释放。此外,首次描述了SIL-1RII的HAEC释放,是IL-1β的重要抑制剂。本研究结果表明,HECS组成型释放IL-1β,IL-1RA和SIL-1RII。然而,IL-1RA和SIL-1RII的浓度组成型在16-HBE细胞和NHBE中的IL-1β中的浓度远远大于IL-1β。gydF4y2Ba
HAECS对粘膜炎症发病的重要贡献,部分是通过产生IL-1β。本研究结果表明,在基础条件下,在气道上皮细胞的细胞外空间中存在的较大浓度的IL-1β和IL-1β的浓度应具有灭活IL-1β的影响。支持这一概念是Coulter的观察gydF4y2Ba等等。gydF4y2Ba23.gydF4y2Ba相对于IL-1β的10-100倍摩尔过量的IL-1ra或100-1,000倍摩尔过量的SIL-1RII完全抑制IL-1β活性(如IL-1β-诱导的IL-8释放评估).结果,本数据表明,在“正常”条件下,HAECS在粘膜中施加“抗炎”偏差,至少关于IL-1β家族。gydF4y2Ba
TNF-α增加了所有三种细胞因子(IL-1β,IL-1RA和SIL-1RII)的释放。然而,有趣的是,三种细胞因子的TNF-α反应不同。在IL-1β的情况下,在整个TNF-α浓度范围内增加增加。相反,IL-1RA和SIL-1RII的增加最大为20 ng·mLgydF4y2Ba−1gydF4y2BaTNF-α。此外,IL-1β释放的TNF-α诱导的增加比IL-1RA和SIL-1RII的增加。在这方面,在这方面是支气管肺泡灌洗液中的TNF-α浓度与哮喘受试者的气道阻塞的严重程度相关gydF4y2Ba1gydF4y2Ba.因此,这些数据表明,在哮喘中存在的条件下,HAECs可以通过释放不成比例的IL-1β而不是IL-1RA和SIL-1RII来促进TNF-α的炎症。此外,增加营地生产的代理商(gydF4y2Ba例如gydF4y2BaβgydF4y2Ba2gydF4y2Ba- 肾上腺素能支气管扩张剂和前列腺素gydF4y2Ba2gydF4y2Ba(铂族元素gydF4y2Ba2gydF4y2Ba)),其将刺激IL-1β释放,同时抑制IL-1RA和SIL-1RII释放,将增加到这种效果。对这方面的IL-1β诱导磷脂酶a的表达是兴趣gydF4y2Ba2gydF4y2Ba和PGE.gydF4y2Ba2gydF4y2Ba在HAECS中生产gydF4y2Ba24.gydF4y2Ba.pgydF4y2Ba2gydF4y2Ba反过来,强烈刺激HAECS中的营地生产,这表明存在自分泌自我放大环gydF4y2Ba25.gydF4y2Ba.该扩增回路可能有助于随着TNF-α浓度的增加观察到的IL-1β释放的指数增加gydF4y2Ba25.gydF4y2Ba.最后,细胞内CGMP的一氧化氮诱导的增加将倾向于减少IL-1β的IL-1RA和SIL-1RII水平。gydF4y2Ba
CAMP浓度增加增加组成型和TNF-α诱导的IL-1β释放,但抑制IL-1RA和SIL-1RII释放。PKA依赖性途径对Dibutyll阵营的IL-1β反应完全责任,如特定PKA抑制剂KT 5720,完全逆转这种效果的事实所证明。然而,KT 5720并未对IL-1RA和SIL-1RII逆转Dibutyryl营地效果,表明PKA无关的途径控制这些细胞因子的释放。gydF4y2Ba
与二丁基cAMP相比,8-溴- cgmp对IL-1β的释放没有影响,但抑制了构成性和TNF-α诱导的IL-1RA和sIL-1RII的释放。kt5823抑制了8-溴- cgmp对IL-1RA的作用,提示pkg依赖途径控制IL-1RA和sIL-1RII的释放。相反,8-bromo-cGMP对sIL-1RII释放的影响没有被KT 5823改变,表明PKG-independent途径控制着sIL-1RII的释放。gydF4y2Ba
与以往研究比较gydF4y2Ba
先前的研究表明,响应二氧化氮和二异氰酸酯,通过HAEC释放IL-1βgydF4y2Ba26.gydF4y2Ba,gydF4y2Ba27.gydF4y2Ba并响应IL-4,IL-13和干扰素-γ的释放IL-1RAgydF4y2Ba22.gydF4y2Ba,gydF4y2Ba28.gydF4y2Ba.Coulter.gydF4y2Ba等等。gydF4y2Ba23.gydF4y2Ba证明HAECs和人肺泡上皮(A549)细胞均产生IL-1RA。令人痛心的是,通过HAEC释放的IL-1RA释放比从肺泡上皮细胞高度高〜60倍。gydF4y2Ba
然而,与目前的结果相反,库尔特gydF4y2Ba等等。gydF4y2Ba23.gydF4y2Ba未能检测HAECS或A549细胞中的SIL-IRII或相应的信使核糖核酸。在本研究中获得的不同结果和CoultergydF4y2Ba等等。gydF4y2Ba23.gydF4y2Ba很难解释。然而,细胞培养条件的差异可能导致获得的不同结果。例如,CoultergydF4y2Ba等等。gydF4y2Ba23.gydF4y2Ba似乎在组织培养塑料上种植了人的上皮细胞。本细胞在胶原基质上生长,刺激培养的人血单核细胞刺激IL-1β和IL-1RA的产生和释放gydF4y2Ba29.gydF4y2Ba.在本研究中,胶原蛋白基质上的生长细胞也可以可以想象在HAEC中刺激SIL-1RII表达。gydF4y2Ba
关于TNF-α和CAMP对IL-1β细胞因子家族成员通过HAECS释放的TNF-α和CAMP的效果的数据与其他细胞系统中获得的数据相容。例如,在脂多糖刺激的人幼儿细胞中,细胞内cAMP水平的增加增强了IL-1β的转录和释放gydF4y2Ba30.gydF4y2Ba.在大鼠下丘脑微胶质细胞中获得了类似的结果gydF4y2Ba31.gydF4y2Ba.然而,有趣的是cAMP对IL-1β释放的影响是依赖于细胞类型的。例如,cAMP的增加或β-肾上腺素能激动剂的刺激可抑制人血单核细胞、小鼠腹腔巨噬细胞和下丘脑星形胶质细胞中IL-1β的产生gydF4y2Ba14.gydF4y2Ba,gydF4y2Ba15.gydF4y2Ba,gydF4y2Ba31.gydF4y2Ba.gydF4y2Ba
结论gydF4y2Ba
综上所述,本研究的结果表明,人类气道上皮细胞释放白介素-1β、白介素-1受体拮抗剂和可溶性白介素-1受体II型:1)相对于白介素-1β,本构性偏向于释放更多的抑制剂;2)肿瘤坏死因子-α增强;3)受肿瘤坏死因子-α、环磷酸腺苷和环磷酸鸟苷的不同影响,使抑制剂与白细胞介素-1β的比值降低。gydF4y2Ba
- 收到了gydF4y2Ba2003年8月4日。gydF4y2Ba
- 接受gydF4y2Ba2004年3月29日。gydF4y2Ba
- ©ers Journals LtdgydF4y2Ba
参考gydF4y2Ba
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