文摘gydF4y2Ba
支气管肺泡灌洗(BAL)中执行专家中心提高了理解的婴儿囊性纤维化肺病(CF)。大多数研究者从单个叶样品,确定是否落下帷幕的结果可以推广到其他肺段。gydF4y2Ba
33 CF的孩子,年龄1.5 -57个月,经历了以随机的顺序序列中间和海豆芽叶落下帷幕的权利。标本每个叶都有单独的定量细菌学,细胞学和细胞因子分析。gydF4y2Ba
细菌数≥1×10gydF4y2Ba5gydF4y2Ba集落形成单位(cfu)·毫升gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba9例(27%)受试者的观察,包括六只涉及右侧中部叶。这六个孩子有类似炎症指标对中产和海豆芽叶,和白介素8 (IL)浓度在后者明显高于观察海豆芽叶内的24 CF细菌计数< 1×10的孩子gydF4y2Ba5gydF4y2Bacfu·毫升gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba。海豆芽嗜中性粒细胞和引发水平相关的最佳右中部叶细菌数量。gydF4y2Ba
这个囊胞性纤维症儿童的观察研究表明,当检测到炎症的两肺、细菌分布更不均匀。从单个叶支气管肺泡灌洗微生物的发现可能因此,不能推广到其他肺段。当执行支气管肺泡灌洗在囊性纤维化的孩子,重要的是要样品从多个网站。gydF4y2Ba
本研究由默多克儿童研究所的支持和JB慈善基金,墨尔本,澳大利亚。gydF4y2Ba
而新生婴儿的肺囊性纤维化(CF)最初是正常的gydF4y2Ba1gydF4y2Ba,结构和功能的变化可能发生在早期的年龄gydF4y2Ba2gydF4y2Ba,gydF4y2Ba3gydF4y2Ba。灵活的支气管镜检查和支气管肺泡灌洗(BAL)使得检测呼吸道病原体和炎症降低航空公司的无症状的CF分别的婴儿gydF4y2Ba4gydF4y2Ba。最近,一些CF婴儿被发现气道炎症没有呼吸道病原体被发现gydF4y2Ba5gydF4y2Ba,gydF4y2Ba6gydF4y2Ba。这导致人们猜测,CF的基本缺陷本身可能引发炎症gydF4y2Ba5gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba7gydF4y2Ba。然而,在澳大利亚墨尔本,作者无法证实这些观察gydF4y2Ba8gydF4y2Ba。相反,它吧,增加细菌数量与炎症指标升高有关。然而,这并不是一个线性关系,因为炎症显著增加后细菌数量达到1×10gydF4y2Ba5gydF4y2Ba集落形成单位(cfu)·毫升gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba9gydF4y2Ba。尽管BAL通常表现在肺和样品池进行分析,大多数CF BAL研究儿童样本从一个叶,通常是海豆芽gydF4y2Ba5gydF4y2Ba,gydF4y2Ba6gydF4y2Ba,gydF4y2Ba10gydF4y2Ba,gydF4y2Ba11gydF4y2Ba。作者假设抽样从单个叶可能无法检测病原体在肺部。通过收集样本两肺,执行一个单独的分析,这是决定是否BAL研究结果从一个叶可能推广到其他地区。gydF4y2Ba
方法gydF4y2Ba
主题gydF4y2Ba
自1989年以来,维多利亚,澳大利亚有一个新生儿CF筛查项目gydF4y2Ba12gydF4y2Ba。诊断证实了建立ΔF508突变纯合性或汗水氯浓度≥60更易·LgydF4y2Ba−1gydF4y2Ba。所有的病人管理的皇家儿童医院呼吸内科主任墨尔本。gydF4y2Ba
从1990年开始,新诊断婴儿符合招聘到一个纵向早期CF肺部疾病的人群为基础的调查gydF4y2Ba4gydF4y2Ba,gydF4y2Ba8gydF4y2Ba,gydF4y2Ba9gydF4y2Ba。受试者接受一个初始,然后每年,BAL tocollect下呼吸道分泌物。皇家儿童医院道德在人类研究委员会批准了研究和书面知情同意了从每个孩子的父母或监护人在支气管镜检查。gydF4y2Ba
连续八个月期间,33 CF婴幼儿进行支气管镜检查作为纵向研究的一部分,被录取。没有接受静脉注射抗生素或抗炎药物和7(21%)新诊断CF受试者第一次支气管镜检查。gydF4y2Ba
婴儿的CF患者人群在目前的研究中,落下帷幕两肺标本集中增加了炎症指标当细菌数量≥1×10gydF4y2Ba5gydF4y2Bacfu·毫升gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba9gydF4y2Ba。这个诊断阈值是将受试者分为两组用于进一步分析。的临床特征研究参与者表1中给出gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba。虽然受试者≥1×10gydF4y2Ba5gydF4y2Bacfu·毫升gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba老,两组之间的差异通常是轻微的,不具有统计学意义。gydF4y2Ba
支气管肺泡灌洗gydF4y2Ba
拜尔港是在全身麻醉下进行。后局部应用利多卡因灵活的支气管镜(奥林巴斯模型BF3甜,外部直径3.6毫米,吸入通道1.2毫米;奥林巴斯公司美国海德公园,纽约,美国)被引入通过喉罩气道越低,避免吸入通道的使用,直到下面的提示支气管镜的船底座gydF4y2Ba8gydF4y2Ba,gydF4y2Ba9gydF4y2Ba。随机的顺序,首先是嵌入右侧中部叶或海豆芽支气管。从支气管网站优化采样一个体积小灌洗是由灌输1毫升·公斤gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba(最大20毫升)无菌,nonbacteriostatic生理盐水在室温下通过吸入通道2 - 3岁以上。盐水是立即吸进一套无菌吸10 - 20岁以上使用的负面压力100 - 150毫米汞柱。支气管镜提示下,嵌入相反的支气管进一步单卷灌洗。gydF4y2Ba
麻醉诱导后,应用局部利多卡因声带之前,一个cotton-tipped横扫后口咽拭子,扁桃体和咽喉。血液收集的静脉穿刺和允许在室温下凝块。球液标本每个叶分开,并立即在冰上运到实验室进行处理。gydF4y2Ba
微生物学gydF4y2Ba
如前所述gydF4y2Ba8gydF4y2Ba,gydF4y2Ba9gydF4y2Ba500μL BAL流体是连续稀释到六个不同的媒体(马血,甘露醇盐,MacConkey巧克力杆菌肽、溴棕三甲铵,和gydF4y2Ba伯克不过gydF4y2Ba选择性琼脂)定量细菌学,给予1×10的检测下限gydF4y2Ba1gydF4y2Bacfu·毫升gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba。口咽拭子飞跑到相同的媒体。主题与呼吸道症状也落下帷幕,鼻咽吸入物检测呼吸道病毒通过直接荧光抗体和文化gydF4y2Ba13gydF4y2Ba。呼吸道细菌病原体被确定为gydF4y2Ba金黄色葡萄球菌gydF4y2Ba,gydF4y2Ba流感嗜血杆菌gydF4y2Ba,gydF4y2Ba铜绿假单胞菌gydF4y2Ba,gydF4y2Ba莫拉克斯氏菌属复活gydF4y2Ba,gydF4y2Ba链球菌引起的肺炎gydF4y2Ba,gydF4y2Ba伯克不过gydF4y2Ba或gydF4y2BaStenotrophomonas maltophiliagydF4y2Ba。相比之下,gydF4y2Ba奈瑟氏菌属gydF4y2Ba物种,α溶血性链球菌,gydF4y2Ba嗜血杆菌gydF4y2Ba(非gydF4y2Ba流感嗜血杆菌gydF4y2Ba物种、类白喉和凝固酶阴性葡萄球菌被判定为上呼吸道菌群。gydF4y2Ba
细胞学和细胞因子水平gydF4y2Ba
总细胞数测定100μL uncentrifuged BAL液使用纽鲍尔血球计计数室(韦伯,特丁顿,英国)。离心后微分单元数量估计300μL整除落下帷幕的流体在72gydF4y2BaggydF4y2Ba5分钟Cytospin-2-cytocentrifuge(美国Shandon南方乐器,Sewick PA), Wright-Giemsa染色和计数细胞在放大石油×1000。凝结的血液和BAL液离心机在500年gydF4y2BaggydF4y2Ba5分钟在4°C和上层清液立即存放在−70°C到测试的时间。中性粒细胞趋化因子白介素(IL) 8 double-sandwich测量,单克隆酶immunoabsorbent测定,确定自由和受体结合引发(Medgenix诊断、Fleurus、比利时)。分析检出限为0.7 pg·毫升gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
一些研究报告,尿素和白蛋白扩散到BAL流体在支气管镜检查和炎症状态导致高估上皮衬里流体体积gydF4y2Ba14gydF4y2Ba结果报道,每毫升BAL流体。gydF4y2Ba
统计分析gydF4y2Ba
数据分析使用一款统计软件发布12(一款统计软件公司,州立大学,宾夕法尼亚州,美国)。病原体和细胞计数(每毫升),引发的浓度,有强烈偏斜分布;遵循标准的做法这是对数转换为近似常态和概括为几何意味着95%可信区间(CI)。淋巴细胞百分比子集近似对称分布,分析没有转换。内和组间比较连续变量分别进行了使用配对和两个示例t(在适当的地方在对数尺度)。比例比较通过卡方测试和细菌数之间的联系,中性粒细胞和引发用斯皮尔曼相关评估。gydF4y2Ba
结果gydF4y2Ba
结果为每个≥1×10的9个CF的婴儿gydF4y2Ba5gydF4y2Bacfu·毫升gydF4y2Ba−1gydF4y2BaBAL流体如表2所示gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba。而落下帷幕样本三个受试者细菌数≥1×10gydF4y2Ba5gydF4y2Bacfu·毫升gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba两叶,另外六这些病原体的数字局限于右侧中部叶。在四个主题(数字1、2、3和5)有细菌负荷两个示例站点之间的巨大差异。除了主题2,9个婴儿BAL中单一病原细菌检测液体的文化。观察细菌之间的一致性叶7的9个学科,除了主题6,有同样的病原体分离BAL和口咽的文化。gydF4y2Ba
三十个受试者上呼吸道菌群中确定的至少一个落下帷幕的文化。这些不致病的细菌的几何平均菌落数相似都是对中产和海豆芽BAL标本(4.5gydF4y2Ba与gydF4y2Ba2.7×10gydF4y2Ba2gydF4y2Bacfu·毫升gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba),不随订单样品。相比之下,呼吸道病毒没有检测到。gydF4y2Ba
正确的中部叶第一次BAL样品订单16 (48%)。总的来说,没有样品卷两叶之间的差异。平均值(标准差(sd);范围)复苏BAL流体体积和平均百分比值正确的中产和海豆芽叶都是7.2 (4.4;队)gydF4y2Ba与gydF4y2Ba7.9 (4.6;- mL)和41.9 (15.9;15 - 75)%gydF4y2Ba与gydF4y2Ba43.7 (15.7;分别为17 - 75)%。BAL概要文件从六个CF婴儿≥1×10gydF4y2Ba5gydF4y2Bacfu·毫升gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba只发现在他们中间叶和24 CF科目与< 1×10gydF4y2Ba5gydF4y2Bacfu·毫升gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba表3中给出了吗gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba。球流体炎症指数升高两叶从主体单方面病原体数量≥1×10gydF4y2Ba5gydF4y2Bacfu·毫升gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba。显著差异选择右侧中部叶炎症标记物在场当这些受试者相比,婴儿的数量< 1×10gydF4y2Ba5gydF4y2Bacfu·毫升gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba。引发类似的差异观察,达到意义,当球炎性指标海豆芽叶内的两组进行比较。gydF4y2Ba
33个科目,右中间叶细菌病原体的人数显著相关右侧中部叶和海豆芽中性粒细胞(r = 0.55;p < 0.01gydF4y2Ba与gydF4y2Bar = 0.41;p < 0.05)和引发(r = 0.35;p < 0.05gydF4y2Ba与gydF4y2Bar = 0.55;p < 0.01)值分别。相比之下,海豆芽中致病性细菌数量与正确的中部叶中性粒细胞(r = 0.44;p < 0.01)和海豆芽引发浓度(r = 0.37;p < 0.05)。gydF4y2Ba
虽然引发集中在几个BAL样本升高,血清引发水平仍低(范围3.3 - -8.1 pg·毫升gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba)和血清引发浓度之间没有相关性和病原体数字BAL液体。gydF4y2Ba
讨论gydF4y2Ba
这项研究表明BAL发现单叶CF婴儿可能不代表改变发现肺内的其他地方。当细菌数量可以分配严重不均,气道炎症似乎更普遍。这或许可以解释为什么单一叶BAL研究报告一些CF婴儿炎症没有检测到生物。因此,当执行BAL研究呼吸道感染和炎症在CF的孩子,不止一个网站应该取样。gydF4y2Ba
先前的研究已经报道,地区差异存在于CF肺部疾病参数。上呼吸道和下呼吸道气道表面液体成分之间不同的网站gydF4y2Ba15gydF4y2Ba和肺部病理与受伤的几个地区收入的比例在不同的时间。CF婴儿这是支持高分辨率计算机断层扫描显示支气管扩张最常见的包括上部叶,特别是正确的肺gydF4y2Ba2gydF4y2Ba。这些更严重的变化在上部叶持续到成年gydF4y2Ba16gydF4y2Ba,证实了尸检gydF4y2Ba17gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
事后剖析成人的研究也表明,细菌不是均匀分布在整个CF肺gydF4y2Ba18gydF4y2Ba。黏液状的gydF4y2Ba铜绿假单胞菌gydF4y2Ba丰富的细支气管,在网站的活跃炎症和闭塞的变化,但缺席纤维化领域或相对保存完好的肺组织gydF4y2Ba19gydF4y2Ba。地区差异在细菌负荷最近报道在12个稳定成人CF患者gydF4y2Ba20.gydF4y2Ba。都有1×10gydF4y2Ba5gydF4y2Ba1×10gydF4y2Ba8gydF4y2Bacfu·毫升gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba的gydF4y2Ba铜绿假单胞菌gydF4y2Ba或gydF4y2Ba金黄色葡萄球菌gydF4y2Ba在右侧上部叶落下帷幕的标本。相比之下,这些细菌并没有检测到正确的中间或下叶样品6个科目。然而,炎症出现在上部叶也在肺段细菌缺席或发现数量较小。这些发现与本研究的数据一致。gydF4y2Ba
为什么炎症发展的肺段内小的细菌无法生长的通常的培养技术是未知的。这可能是因为检测细菌存在数量减少,只有通过分子技术或产品,如脂多糖的持久性gydF4y2Ba20.gydF4y2Ba,gydF4y2Ba21gydF4y2Ba。其他人都观察到细菌负荷和气道炎症之间的非线性关系gydF4y2Ba9gydF4y2Ba,gydF4y2Ba22gydF4y2Ba,这表明炎症变化没有可检测呼吸道病原体可能是感染从之前解决gydF4y2Ba8gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
也有证据表明一个更广义气道炎症反应在肺局部细菌gydF4y2Ba20.gydF4y2Ba。的大鼠模型gydF4y2Ba铜绿假单胞菌gydF4y2Ba肺感染,细菌进入正确的安装导致局部炎症和细胞因子释放gydF4y2Ba23gydF4y2Ba。然而,当大的接种物被部署,血浆细胞因子水平增加,发达相反的肺部炎症变化。成人患者严重的单边肺炎引起细胞因子浓度BAL noninvolved肺标本gydF4y2Ba24gydF4y2Ba。细菌数量之间的相关性在正确的中部叶和海豆芽表明系统性炎症的因素可能会影响当地的反应。临界阈值是否高于细菌改变肺泡上皮屏障的完整性,破坏炎症介质的划分gydF4y2Ba25gydF4y2Ba,是重要的CF是不确定的。血清引发水平与细菌数量或炎症没有被观察到。在研究老年CF慢性肺部疾病患者报告温和循环炎症介质的高度gydF4y2Ba26gydF4y2Ba,gydF4y2Ba27gydF4y2Ba,这些可能只代表当地生产的增加细胞因子和可能不是任何病理生理学意义。gydF4y2Ba
虽然定量细菌学和诊断阈值≥1×10gydF4y2Ba5gydF4y2Bacfu·毫升gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba病原菌的CF孩子调整潜在的上呼吸道感染gydF4y2Ba9gydF4y2Ba,这可能不确定个人发展或部分治疗感染或区分解决气道炎症的感染和其他原因。海豆芽BAL的整合和细菌数量增加流体从受试者l, 4和6表明,感染可能是出现在这叶。虽然这可能解释的一些观察,科目2,3和5在细菌数量之间的巨大差异两叶,但炎症变化保持在每一个网站。gydF4y2Ba
未来的招聘的CF婴儿诊断新生儿筛查程序允许肺部疾病的早期检测未经选择的人口。如预期在这个年轻的人口研究,只有27%的人大量的细菌在其较低的航空公司。右侧中部叶的优势作为细菌的网站可能因此出现由抽样误差或单独的机会。然而,抽样顺序,BAL回报百分比和口咽部菌群计数两组之间的比较对象。第二BAL的重要污染样品的残余首样在支气管镜似乎不太可能,因为没有明显的顺序影响上呼吸道菌群或致病细菌菌落计数。使用相对较大的整除BAL流体的文化,和使用几个板块包含选择性和非选择性的媒体减少微生物采样错误的风险。同样,使用单一体积小支气管灌洗优化检测支气管内生物和气道炎症gydF4y2Ba28gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
在目前的研究中,无菌的原因海豆芽炎症似乎不太可能。渴望从gastro-oesophageal回流通常包括上部叶gydF4y2Ba29日gydF4y2Ba叶,而海豆芽是最不容易显示支气管扩张gydF4y2Ba2gydF4y2Ba。然而,pH监测和检查BAL标本进行脂肪拉登肺泡巨噬细胞进行。gydF4y2Ba
最后,这个观察研究表明,细菌数量在一些婴儿肺囊性纤维化可能并不均匀。相比之下气道炎症的迹象可能会发现在一个以上的叶。这些发现支持实验动物模型和临床成人cyctic纤维化和事后剖析研究的主题。从单个叶支气管肺泡灌洗微生物结果可能不会因此,总是代表着其他地区发现的肺。这就可以解释为什么一些婴儿单一叶支气管肺泡灌洗的研究报道缺乏检测呼吸道炎症的病原体。它强调的重要性抽样从多个肺段或叶当使用支气管肺泡灌洗研究囊性纤维化肺病。gydF4y2Ba
确认gydF4y2Ba
作者欣然承认k·布朗的支持和员工的皇家儿童医院的麻醉部门继续支持这个项目。gydF4y2Ba
- 收到了gydF4y2Ba2000年5月12日。gydF4y2Ba
- 接受gydF4y2Ba2000年10月18日。gydF4y2Ba
- ©人期刊有限公司gydF4y2Ba
引用gydF4y2Ba
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