摘要gydF4y2Ba
caspase级联是由Fas介导的细胞凋亡刽子手。Fas死亡域相关蛋白(FADD)与Fas相互作用,通过激活caspase-8引起细胞凋亡。此前已有研究表明,Fas-Fas配体通路可能参与了特发性肺纤维化(IPF)的病理生理学过程。本研究的目的是研究IPF中上皮细胞fas信号分子。gydF4y2Ba
对10例经胸腔镜活检获得的IPF患者和7例正常肺实质标本进行FADD、caspase-1和-3免疫组化和末端脱氧核苷酸转移酶介导的脱氧尿三磷酸nick末端标记(TUNEL)方法。研究了fas连接诱导肺上皮细胞A549 caspases的表达和激活。gydF4y2Ba
与对照组相比,IPF上皮细胞中FADD、caspase-1和-3的免疫反应级别以及TUNEL阳性信号明显升高。fas连接诱导A549细胞细胞核和细胞质中caspase-1和-3表达上调。Procaspase-1、-3和-8在凋亡细胞中被激活,而在活细胞中不被激活。gydF4y2Ba
虽然不能进行特发性肺纤维化的肺上皮细胞中的Caspase活性的直接测量,但这些结果表明Fas信号传导途径在特发性肺纤维化的肺上皮细胞中上调。gydF4y2Ba
本研究得到了日本文部科学省科学研究资助项目(09670620)的资助。gydF4y2Ba
凋亡是在各种生理和病理条件下观察到的受调控的细胞死亡。不适当的细胞凋亡导致各种疾病,如免疫缺陷和自身免疫性疾病,以及恶性肿瘤gydF4y2Ba1gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba3.gydF4y2Ba.特发性肺纤维化(IPF)是一种慢性和通常致命的肺病。虽然IPF的疾病仍然未知,但该疾病的特征在于慢性肺泡瘤后的间质纤维化。先前已经证明,在IPF中的支气管和肺泡上皮细胞中存在脱氧核糖核酸(DNA)损伤和细胞凋亡gydF4y2Ba4gydF4y2Ba,提示上皮细胞死亡可能导致成纤维细胞的替代。也有报道称,在肺上皮细胞中Fas上调,而在IPF中浸润的炎症细胞中Fas-配体(FasL)表达gydF4y2Ba5gydF4y2Ba.因此,fas介导的细胞凋亡可能参与了IPF的发病机制。gydF4y2Ba
白细胞介素- 1 β转换酶(ICE)家族最近被证实在多种细胞凋亡过程中发挥重要作用,包括fas介导的细胞凋亡gydF4y2Ba6gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba9gydF4y2Ba.已经鉴定出14个ICE/cell death abnormal-3 (CED-3)半胱氨酸蛋白酶家族成员gydF4y2Ba10gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba13gydF4y2Ba,并命名为caspasesgydF4y2Ba14gydF4y2Ba.在凋亡过程中,失活的caspase在Asp-X位点发生裂解,产生大、小亚基,共同构成活性caspase。由“启动子”caspases(如caspase-8)的激活开始的蛋白水解级联反应导致“效应子”caspases(如caspase-3)的激活,后者随后切割底物,包括聚二磷酸腺苷(ADP)-核糖)聚合酶、层蛋白和dna依赖蛋白激酶。导致细胞凋亡的形态学特征gydF4y2Ba11gydF4y2Ba,gydF4y2Ba15gydF4y2Ba.与死亡领域(FADD)的FAS关联蛋白是FAS下游的信号传感器gydF4y2Ba16gydF4y2Ba.FasL连接Fas后,Fas通过FADD的细胞内死亡区域与FADD结合。FADD通过其死亡效应域与caspase-8结合,形成一种死亡诱导信号复合物,导致caspase-8的激活。gydF4y2Ba
为了评估FADD和caspases是否与IPF中肺上皮细胞的DNA损伤和凋亡有关,本研究研究了FADD、caspase-1和caspase-3在IPF患者肺组织中的表达。并将免疫组化结果与末端脱氧核苷酸转移酶介导的脱氧尿苷三磷酸(dUTP)标记末端标记法(TUNEL)检测的凋亡细胞数进行比较。还存在以来发现的免疫反应性检测在细胞核和细胞质IPF的肺上皮细胞的免疫组织化学,这是检查是否还把从细胞质细胞核当由Fas-ligation激活使用人类的肺上皮细胞系(A459)。它还检测了caspases被fas连接上调和激活的细胞是否正在发生凋亡。gydF4y2Ba
材料和方法gydF4y2Ba
案例材料gydF4y2Ba
该研究对由胸腔瓣肺活检获得的肺样品进行。表1中提出了10例IPF患者的临床资料gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba.男9例,女1例,年龄55 ~ 69岁,平均63岁。其中8人吸烟,2人不吸烟。IPF的诊断是通过结合病史、体格检查、实验室检查、胸片、肺功能检查和组织学检查结果,根据先前描述的标准确定的gydF4y2Ba17gydF4y2Ba.所有IPF患者的肺活检标本中的组织学发现与UIP的患者相容。将IPF的结果与孤立性肺结核肺癌肺切除术获得的七种正常肺部牙科床标本的结果进行了比较。这些是四个男性和三个女性,其年龄从56-78 YRS(平均67岁),都是吸烟者。gydF4y2Ba
特发性肺纤维化患者的临床特征gydF4y2Ba
组织准备gydF4y2Ba
组织标本在10%福尔马林中固定过夜,并包埋在石蜡中。石蜡切片贴于经聚赖氨酸预处理的玻片上。这些切片在二甲苯中洗涤3次,每次5分钟,然后在100%、95%和80%乙醇中分别脱水5分钟,最后用蒸馏水漂洗。gydF4y2Ba
肺组织中fas相关蛋白与死亡区域和半胱天冬酶的免疫组化gydF4y2Ba
水合高压灭菌用作Caspase-1和FADD的免疫染色的预处理,如先前由Shin描述的gydF4y2Baet al。gydF4y2Ba18gydF4y2Ba.在二甲苯中的甲烷化和乙醇中的再水化之后,将组织切片在121℃下在填充蒸馏水的玻璃罐中以121℃高压灭菌,以完全浸入部分并在0.1M磷酸盐缓冲盐水(PBS)中洗涤三次。使用由组合Sab-Po套件(Nichirei Corporation,Tokyo,Japan)使用改性的链霉抗生物素蛋白 - 生物素化过氧化物酶技术进行免疫组织化学。在室温下兔血清封闭非特异性蛋白染色30分钟。将这些部分与山羊抗FADD多克隆抗体(Santa Cruz Biotechnology,Santa Cruz,Ca,USA)孵育,山羊抗Caspase-1多克隆抗体(Santa Cruz Biotechnology)和山羊抗Caspase-3多克隆抗体(Santa Cruz生物技术)在4℃过夜。用PBS冲洗这些部分,并用生物素化的抗山羊免疫球蛋白G(IgG)温育30分钟,用0.3%过氧化氢在甲醇中处理30分钟以抑制任何内源过氧化物的活性。将载玻片洗涤,与链霉抗生物素蛋白 - 生物素 - 过氧化物酶复合物孵育30分钟,并根据制造商的方向开发。随后将这些部分用血红素染色并安装。根据免疫反应细胞的百分比,染色程度从0-3分析出:0,0%; 1, <10%; 2, 10–50%; 3, >50%.
肺组织凋亡分析gydF4y2Ba
采用市场上可用的试剂盒(Takara Biomedicals, Kusatsu, Japan),采用TUNEL法检测细胞凋亡。在蛋白酶消化和去除内源性过氧化物酶后,切片在含有末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)和异硫氰酸荧光素标记的dUTP的混合物中孵育。然后用抗异硫氰酸荧光素抗体标记过氧化物酶处理切片。用3,3 ' -二氨基联苯胺四盐酸盐进行反应,并用甲基绿进行复染。在×250放大显微镜下计数整个切片区域TUNEL阳性细胞数。gydF4y2Ba
用抗Fas抗体治疗肺上皮细胞系(A549细胞)gydF4y2Ba
人类肺上皮细胞系A549在ROSWELL PARK纪念学院(RPMI)1640媒体(Sigma Chemical Co,St Louis,Mo,USA)培养,胎儿牛血清(FBS,Gibco-Brl,Grand Island,NY,美国),青霉素和链霉素在培养箱中,5%COgydF4y2Ba2gydF4y2Ba在37°C。如前所述,干扰素-γ和激动性抗fas单克隆抗体治疗用于诱导凋亡gydF4y2Ba19gydF4y2Ba.简而言之,用100ng·ml处理细胞gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba激动抗Fas单克隆抗体(CH-11; MBL,名古屋,日本)或同种型匹配的小鼠免疫球蛋白-M(IgM)(MBL,Nagoya,Japan)作为在40 ng预处理后对培养基中的CH-11的控制·ML.gydF4y2Ba−1gydF4y2BaIFN-γ (Shionogi, Osaka, Japan) 6 h。添加CH-11 24小时后收获细胞,用于流式细胞术、caspase活性测定、western blot和免疫细胞化学检测。gydF4y2Ba
A549细胞的凋亡分析gydF4y2Ba
用碘化丙啶(PI)检测A549细胞的凋亡情况。PBS洗涤后,用70%乙醇在4℃下固定细胞1小时。细胞重悬,室温黑暗,PBS中加入0.5 mg核糖核酸A和100µg PI孵育15分钟。细胞用1.0 mL PBS洗涤和重悬,并用Coulter EPICSXL流式细胞仪(Coulter, Luton, United Kingdom)进行分析。gydF4y2Ba
A549细胞上caspases的活性gydF4y2Ba
用荧光CaspACE测定caspase-1和caspase-3的活性gydF4y2BaTMgydF4y2Ba分析系统(Promega, Madison, WI, USA)。简单地说,通过1×10的匀浆制备细胞蛋白提取物gydF4y2Ba6gydF4y2Ba cells in a hypotonic buffer (25 mM Hepes, pH 7.5, 5 mM MgCl2gydF4y2Ba,1mM乙二醇 - 双 - (β-氨基乙醚)-N,N,N',N'-四乙酸(EGTA),1mM苯基甲基磺酰氟(PMSF),1μg·mLgydF4y2Ba−1gydF4y2Ba亮抑酶肽和抑肽酶)。匀浆在12000 ×离心gydF4y2BaggydF4y2Ba10分钟后收集上清液。20µg提取的蛋白与荧光四肽底物Ac-YVAD-AMC用于caspase-1或Ac-DEVD-AMC用于caspase-3孵育。在激发波长为360 nm和发射波长为460 nm的条件下,用荧光分光计测定了裂解底物的荧光。gydF4y2Ba
A549细胞胱天蛋白酶的免疫细胞化学gydF4y2Ba
去除培养基并用PBS冲洗后,用10%福尔马林固定细胞5分钟。将细胞重悬在500µL 10%福尔马林中,用等量的熔融、低熔点2%琼脂糖将三滴悬液放入模具中。琼脂糖块被石蜡包埋。取载玻片上的5µm石蜡切片,二甲苯洗涤脱蜡,然后脱水。对caspase-1和caspase-3进行免疫细胞化学,如肺组织中fas相关蛋白与死亡域和caspase免疫组织化学中所描述的,与未进行水合高压灭菌的肺组织中的免疫细胞化学相同。gydF4y2Ba
Western blot检测A549细胞的caspasesgydF4y2Ba
经IFN-γ预处理后,分别收集分离的细胞和附着的细胞。细胞蛋白经1×10匀浆制备gydF4y2Ba6gydF4y2Ba在样品缓冲液(500mm三(羟甲基)-氨基甲烷(tris)- hcl pH 6.8, 2%十二烷基硫酸钠(SDS), 10%甘油,0.6%巯基乙醇)中煮沸2分钟。采用sds -聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)对蛋白进行分离。通过SDS-PAGE,将蛋白转移到聚偏氟乙烯疏水膜(Millipore, Bedford, MA, USA)。用含0.05% Tween-20 (TBST)的Tris缓冲盐水在4°C下过夜,用5%脱脂奶粉阻断膜。用TBST冲洗膜,用一抗在4°C封闭缓冲液中孵育过夜。冲洗后,用生物素化的抗山羊IgG在室温下孵育30分钟。采用增强化学发光法(Amersham, Piscataway, NJ, USA)建立印迹。gydF4y2Ba
统计数据gydF4y2Ba
TUNEL阳性细胞数的差异和caspase活性的差异用未配对t检验进行分析。免疫反应等级的差异通过曼-惠特尼u检验进行分析。免疫反应等级与TUNEL阳性细胞数的相关性采用Spearman秩相关系数评估。p值<0.05被认为具有统计学意义。gydF4y2Ba
结果gydF4y2Ba
肺组织免疫组织化学gydF4y2Ba
肺泡和支气管上皮gydF4y2Ba
在IPF患者的肺组织中的肺组织和支气管上皮细胞中检测到FADD,caspase-1和Caspase-3的表达,而这些蛋白质的阳性信号在正常的肺部进行阴性或弱。在细胞质中发现FADD的正信号。Caspase-1和Caspase-3的阳性信号不仅在细胞质中发现,但也发现在细胞的细胞核中(图1gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba).与正常肺部薄壁组织相比,在IPF中的肺泡和支气管上皮细胞中显着上调了FADD,Caspase-1和Caspase-3的免疫反应性等级(图2gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba).gydF4y2Ba
死亡结构域(FADD)Caspase-1和Caspase-3的Fas-Compatiating蛋白的免疫组化分析。在细胞质中检测到FADD(A,D),并且在足细胞质和IPF的Lubg tisues中的支气管和肺泡上皮细胞中检测到Caspase-1(B,E)和Caspase-3(C,F)。在巨噬细胞中也发现了FADD和acaspasease的正信号。在正常的肺实质(G,H和I)中未检测到这些信号的强度(分别为G,H和I)(原始倍率,A,B,C,G,H,I:×62.5,D,E,F;×125)。gydF4y2Ba
![图2.-gydF4y2Ba](http://www.qdcxjkg.com/content/erj/17/2/180/F2.medium.gif)
FAS与死亡域(FADD),Caspase-1和Caspase-3中A)支气管和B)肺泡上皮细胞,C)肺泡巨噬细胞和D)淋巴细胞的免疫染色蛋白质的免疫染色蛋白每个圆数代表个人。闭合圆圈是特发性肺纤维化和开放圆圈的患者是对照患者。*:P <0.05;**:P <0.01;ns:不可思议。gydF4y2Ba
肺泡巨噬细胞gydF4y2Ba
在细胞质中发现FADD的阳性信号,并且在IPF和正常肺部牙龈中的肺泡巨噬细胞中检测到Caspase-1和Caspase-3的阳性信号(图1gydF4y2Ba⇑gydF4y2Ba).IPF的肺组织的免疫反应性等级明显高于正常肺部薄壁组织的肺组织(图2gydF4y2Ba⇑gydF4y2Ba).gydF4y2Ba
淋巴细胞gydF4y2Ba
在IPF或正常肺部的淋巴细胞中未检测到FADD或Caspase-3的免疫反应性,而在IPF中的细胞质和淋巴细胞核的细胞质和核中检测到Caspase-1,但不在正常的肺部薄膜(图1gydF4y2Ba⇑gydF4y2Ba).与正常肺实质相比,IPF中这些蛋白的免疫反应级别更高(图2)gydF4y2Ba⇑gydF4y2Ba).gydF4y2Ba
TUNEL法测定肺组织gydF4y2Ba
在IPF中,TUNEL主要在细支气管和肺泡上皮细胞中显示阳性信号(图3)gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba),而正常肺实质则很少有阳性信号(图3)gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba).在炎性病变中,子弹的正信号在炎症病变中占主导地位。与正常肺部薄壁组织相比,IPF中调节阳性细胞的数量显着增加(图3gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba).在包括IPF和对照组在内的所有患者中,FADD、caspase-1或caspase-3的免疫反应性分级与TUNEL阳性细胞数量之间存在显著相关性,但在IPF中不存在。gydF4y2Ba
末端脱氧核苷酸转移酶介导的脱氧尿苷四磷酸镍嵌剂(TUNEL)染色的代表性结果。TUNEL染色的正信号主要检测到a)支气管和b)肺泡上皮细胞。c)含有少量的正信号正常肺实质;d)与正常肺部疾病(NLP)(原始放大倍数,A,C;×62.5,B;×125,肺组织中肺组织中的调节组织阳性细胞的数量显着增加(P <0.01))。gydF4y2Ba
A549细胞中的凋亡和胱天蛋白酶活性gydF4y2Ba
经IFN-γ预处理的CH-11处理24小时后,部分A549细胞从培养皿中分离出来,未处理的细胞或经IFN-γ预处理的对照IgG细胞均贴壁于培养皿上。图4.gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba在A549细胞上证明使用PI进行细胞凋亡的流式细胞术的结果。在25%的A549细胞中观察到凋亡,施用CH-11,IFN-γ预处理。图4.gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba在A549细胞中证明Caspase-1和Caspase-3活性。在使用IFN-γ预处理后,在施用CH-11之后,Caspase-1和Caspase-3活性在24小时内显着增加。实际上,通过Fas-Catzizats比较了Caspase-3的活性增加了〜7倍。gydF4y2Ba
a)未处理的细胞,b)对照免疫球蛋白M (IgM)和干扰素-γ (IFN-γ)的细胞,c) IFN-γ和CH-11处理的细胞,用碘化丙啶(PI)染色,流式细胞术分析CH-11诱导A546细胞凋亡。与未处理或单独IgM和IFN-γ处理的细胞相比,箭头所示的凋亡细胞明显。d)经IFN-γ预处理的CH-11处理后,A549细胞中Caspase-1和e) caspase-3活性显著高于未处理细胞或IFN-γ预处理的对照组细胞。gydF4y2Ba+gydF4y2Ba: p < 0.005;* *: p < 0.01;* * *: p < 0.001。gydF4y2Ba
caspase在A549细胞中的免疫反应性gydF4y2Ba
未处理的A549细胞中未检测到caspase-1或caspase-3的免疫反应性。IFN-γ预处理的CH-11处理24小时后,A549细胞上的染色质凝结和细胞核碎裂为凋亡的形态学特征,同时细胞质和细胞核中caspase-1和caspase-3的免疫反应性(图5)gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba).gydF4y2Ba
A549细胞中caspase-1和caspase-3的免疫组化分析形态学上检测到caspase-1和caspase-3在凋亡A549细胞胞质和细胞核中的表达(分别为a和b),而这些蛋白(c和d,分别)在未经处理的细胞(数据未显示)或使用干扰素-γ (IFN-γ)预处理的对照免疫球蛋白G (IgG)的细胞中检测不到(原始放大,×250)。gydF4y2Ba
Western blot检测A549细胞的caspasesgydF4y2Ba
在IFN-γ预处理的CH-11处理24小时后,分离细胞中caspase -l的前型和激活片段上调,与附壁细胞或IFN-γ预处理的对照IgG细胞相比(图6)gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba).在用IFN-γ预处理处理CH-11后,在分离的细胞中,在分离的细胞中观察到Caspase-8和Caspase-3的性质和活化片段(图6gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba).在附着的细胞和细胞中施用对照IgG的细胞和细胞中未检测到这些形式或片段。gydF4y2Ba
用Caspase-1p20,Caspase-8p20和Caspase-3 p11的抗体分析Western印迹分析,分别在A549细胞(A,B和C)中的抗体分析。在用干扰素-γ(IFN-γ)预处理的CH-11施用后,在分离的细胞中观察到胱天蛋白酶的夸大症,并在分离的细胞中观察到胱天柱的活化片段。泳道1:用IFN-γ预处理给予控制免疫球蛋白-G(IgG)的细胞;泳道2:用IFN-γ预处理施用CH-11后的附着细胞;泳道3:用IFN-γ预处理给予CH-11后的分离细胞。gydF4y2Ba
讨论gydF4y2Ba
本研究初步证明,与正常肺实质相比,IPF患者肺组织中FADD、caspase-1和caspase-3在细支气管和肺泡上皮细胞中高表达。结果还表明,与正常肺实质相比,IPF中以肺上皮细胞为主的TUNEL阳性细胞数量明显增加,这与之前的工作相一致gydF4y2Ba4gydF4y2Ba.TUNEL阳性细胞数与FADD、caspase-1或caspase-3的免疫反应程度相关。虽然caspase的阳性信号并不总是意味着细胞正在死亡,而且本研究中使用的所有抗caspase抗体都可以识别caspase的活性和非活性形式,这些结果提示,caspases的过表达可能反映了IPF中肺泡和细支气管上皮细胞凋亡通路的上调。gydF4y2Ba
在IPF的细支气管和肺泡上皮细胞中不仅可以观察到胞浆中caspase-1和caspase-3的表达,还可以观察到核染色。为了检测凋亡信号刺激时,caspases的免疫反应性是否位于细胞核和细胞质,我们进行了caspases的免疫细胞化学,并在IFN-γ预处理后检测A549细胞上caspase的活性。结果表明,在激活caspase-1和caspase-3的A549细胞中,有caspase-1和caspase-3的核染色。NakagawaragydF4y2Baet al。gydF4y2Ba20.gydF4y2Ba应用免疫组化技术也证明了caspase-1和caspase-3在消退或凋亡的肿瘤细胞中从细胞质转移到细胞核。虽然caspase的细胞分布还不清楚,但caspase-3切割的许多底物都定位于细胞核,这表明caspase可以转移到细胞核。此外,以往的研究表明,在细胞凋亡执行阶段,前蛋白酶通过其前域的核定位信号从细胞质运输到细胞核gydF4y2Ba21gydF4y2Ba,gydF4y2Ba22gydF4y2Ba.目前的结果gydF4y2Ba体外gydF4y2Ba提示caspase-1和caspase-3可能在人肺上皮细胞系凋亡过程中转移到细胞核内。这些结果提示,IPF肺上皮细胞中caspases的核表达可能反映了caspases的激活和凋亡的执行过程。gydF4y2Ba
为了研究表达表达呼应酶的细胞是否实际上经历了凋亡,进行了对A549细胞上的Caspase-1,Caspase-3和Caspase-8的激活的Western印迹分析。与对照细胞或附着的细胞相比,在用IFN-γ处理后,所有这些胱天蛋白酶在脱离的细胞中被上调并激活。FADD是Fas下游的信号传感器,通过其死亡效应域与Caspase-8结合,并制成一种死亡诱导的信号络合物,导致Caspase-8的激活。因此,Caspase-8的激活表明FADD是功能性的。作者表明,在凋亡细胞中上调并激活了Fas-Signalion途径和胱天蛋白酶级联,但不在活细胞中。gydF4y2Ba
肺泡巨噬细胞和淋巴细胞是IPF炎性病变中存在的主要炎症细胞。据认为,这些细胞通过调节或通过细胞因子网络调节或促进炎症和免疫应答来发挥重要作用。在本研究中,肺泡巨噬细胞显示FADD,Caspase-1和Caspase-3的阳性信号,而淋巴细胞对于Caspase-1具有正染色,但在IPF中的Caspase-3和FADD负染色。在正常的肺实质中,肺泡巨噬细胞对于这些分子呈正染色,并且淋巴细胞为Caspase-1阳性,尽管这些信号的强度弱于IPF中的强度。这些观察结果致力于将FADD和Caspases致力于调节肺泡巨噬细胞和淋巴细胞的凋亡,以控制病理状态的炎症反应,并在生理条件下维持稳态。gydF4y2Ba
炎性细胞中的胱糖表达的另一种可能性可能涉及在这些细胞中激活促炎细胞因子。Caspase-1被描述为Pro-Interseukin(IL)-1β和Pro-IL-18的转化器到活性形式gydF4y2Ba23gydF4y2Ba,gydF4y2Ba24gydF4y2Ba.Caspase-1缺陷小鼠具有较少的IL-1β,肿瘤坏死因子-α和IL-6gydF4y2Ba25gydF4y2Ba.巨噬细胞和淋巴细胞释放多种炎性细胞因子,包括成熟的IL-1β。与caspase-1类似,其他caspase已被描述具有激活IL-1β的能力gydF4y2Ba26gydF4y2Ba.除了凋亡的作用外,巨噬细胞和淋巴细胞中caspases的过表达可能具有与IPF病理生理相关的促炎功能。gydF4y2Ba
总之,本研究表明,与正常肺部牙科的特发性肺纤维化的支气管和肺泡上皮细胞中,Caspase-1,Caspase-3和Fas关联蛋白的表达,与正常的肺纤维化相比,在支气管术和肺泡上皮细胞中上调。细胞核中的阳性染色除了细胞质之外可能牵引胱天蛋白酶的活化,以及对这些表达的上调gydF4y2Ba体内gydF4y2Ba和gydF4y2Ba体外gydF4y2Ba.caspases上调和激活的细胞实际上正在发生凋亡gydF4y2Ba体外gydF4y2Ba.在特发性肺纤维化的巨噬细胞和正常肺实质中也检测到fas死亡域相关蛋白和半胱天冬酶的表达。这表明这些分子在病理和生理状态中发挥一定的作用,除了介导细胞凋亡外,还可能具有促炎作用。fas信号分子上调可能在介导肺上皮细胞凋亡中发挥重要作用,并可能与特发性肺纤维化的病理生理机制有关。gydF4y2Ba
- 已收到gydF4y2Ba1999年9月10日。gydF4y2Ba
- 接受gydF4y2Ba2000年9月15日。gydF4y2Ba
- ©ers Journals LtdgydF4y2Ba