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明确检测特定细胞器超微结构或病毒是由电子显微镜需要推断它们的存在。本文还提供了参考图像正确的冠状病毒的识别。https://bit.ly/3IFYDjc
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有兴趣我们阅读的出版Evangelou等。(1),研究了严重COVID-19 SARS-CoV-2诱导衰老。免疫组织化学(包含IHC)和电子显微镜(EM)被用于原位检测的SARS-CoV-2解剖组织。作者用formalin-fixed和石蜡包埋(FFPE)尸检肺COVID-19和non-COVID-19病人执行re-embedding EM和超微结构的分析。他们报告检测SARS-CoV-2肺泡2型细胞内病毒粒子代表COVID-19案例(图1 c Evangelouet al。(1])。三个电子显微图显示假定的病毒颗粒,由箭头表示,记录他们的发现。
通用电气公司的基本工作以来Palade中间的上个世纪(2),我们知道一般细胞细胞器的超微结构特征,这允许他们鉴定。类似的策略,即病毒隔离电磁和结构描述,我们已经学会了区分病毒与细胞的结构标准库存和归类成形态组织(3]。因此,任何特定的亚细胞结构的识别必须证明通过展示他们的典型的结构特点。
Evangelou等。(1]并没有显示出足够的结构细节,允许识别的冠状病毒(CV)粒子。粒子表示在图1 c (Evangelouet al。(1])为“SARS-CoV-2”和“病毒”缺乏基本简历粒子的形态特征,如清晰可见包络生物膜、棒状的峰值在表面和电子致密的颗粒特征子结构内部由于存在的核糖核蛋白(4]。粒子所需满足的一些标准,如电子致密的外表,圆形,椭圆形的形状和大小,大致匹配简历粒子的大小描述FFPE re-embedded材料(58 - 108 nm (4,5])。他们似乎也位于膜隔间,尽管很难清楚地识别除了细胞核和细胞器,也许,粗面内质网,由于有限的总体结构保存。然而,这些基本标准也可以了,可能人为地改变细胞细胞器和颗粒,如多泡体,严重改变线粒体和粗面内质网的内陷(4]。
一般来说,超微结构的保护是负面影响FFPE re-embedding过程采用Evangelou等。(1),在某些情况下,不足以让一个可靠的简历的识别。然而,即使在样品准备的这个过程,特点和基本结构特点的简历可以证明和允许识别的简历(图1)[4- - - - - -7]。简历识别的另一个重要条件是存在大量类似形状的简历粒子在相同的细胞,在结构性受损样品尤为重要。由于负面影响的FFPE re-embedding过程简历粒子的形态,更多的颗粒细胞是必要承认所有相关特性的简历识别比传统的样品制备(图1)[4,5]。
他们允许直接检测形态完整的病毒粒子,如果结构保存足够的,从而间接作为验证工具原位如包含IHC检测方法(5,8]。正确的详细的建议原位检测解剖组织的冠状病毒EM最近编译(5]。积极的包含IHC或原位杂交信号可能指导感染细胞的发现和足够数量的病毒颗粒5]。另一方面,由于包含IHC信号可能是假阳性,他们不应该用于支持不够保存结构的识别通过EM相应FFPE re-embedded样本(5]。还需要注意,包含IHC信号只能表明病毒蛋白质的存在,这并不一定意味着它与一个病毒粒子5]。
在最近上传的预印本,我们确定116的122篇期刊出版物的误解不同细胞结构作为人类样本使用EM SARS-CoV-2粒子,或不够记录病毒的存在5]。超微结构的病毒在人类证明样本是具有挑战性的9),但可以实现的。然而,许多出版电子显微图显示不正确或不够确定病毒使进一步的误解(10]。这个不幸的发展越来越阻碍正确使用诊断EM病毒识别。此外,大量的假阳性EM数据被用来验证其他不足原位如包含IHC检测方法(1,5]。因此,数据被用来解开的细胞趋向性SARS-CoV-2病人组织中需要批判性地重新评估(5]。
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脚注
利益冲突:c . Dittmayer没有披露。m·劳厄没有披露。
- 收到了2022年2月4日。
- 接受2022年3月20日。
- 版权©2022年作者。
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