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全球约3%的新结核病案例代表多药抗性结核病(MDR-TB)[1]。在这些MDR-TB案例中,阻力结核分枝杆菌对于其他有效的利福平和异烟罪,临床医生分散给其他抗微生物剂。此类待遇选项包括世界卫生组织(世卫组织)第5组药物LIMIZOLID和克拉霉素[1]。LINEzolid在治疗MDR-TB的治疗中表现出优异的功效,但其使用通常是不良事件的困扰[2-4.]。LINEZOLID显示了体外抑菌活动反对玉米菌菌并且在耐药案件中实现培养转化也有效[5.]。体外测试显示,克拉霉素不是非常活跃玉米菌菌,作为最小抑制浓度(MIC)相对较高。临床疗效似乎是可疑的,如文献中所报道的麦克斯,显着高于可实现的血清峰值水平体内[6.]。相反,克拉霉素在肺泡细胞和上皮衬里含有足够的局部浓度,大多数分枝杆菌属于[7.]但虽然荷兰国家分枝杆菌参考实验室(荷兰Bilthovens;未发表的数据)观察到较低的克拉霉素MIC。
由于新的治疗方案数量有限,优化现有的治疗方案是一个可以想象的选择。探索结核病药物之间的协同作用可能有助于改善治疗方案。研究了调查了几种抗核酸药物,如异喹啉,利福平和/或乙胺醇,但没有LINEzolid,揭示了体外与克拉霉素的协同活动反对玉米菌菌[8.]。在本研究中,我们旨在探讨这种可能性体外Linezolid和Clarithromycin之间的协同作用玉米菌菌从多药,单能和药物易感结核病中获得的分离物。
我们随机选择了一个24小组玉米菌菌从国家公共卫生和环境研究所(RIVM, Bilthoven,荷兰)结核病参考实验室的菌株收集物中分离出来的菌株。所选标本为多药耐药13例,药敏5例,单药6例玉米菌菌隔离。使用两种方法进行药物易感性测试:绝对浓度法(ACM)和分枝杆菌生长指标管(MGIT)960系统(BECTON DICKINSON BV,BREDA,荷兰)[9.那10.]。
对于ACM,我们使用了PH 6.6的灭菌中间琼脂,其补充了油酸,牛白蛋白,葡萄糖和过氧化酯酶(Becton Dickinson和Company,Sparks,MD,USA)和不同浓度的药物[9.]。在4,8,12,14,16,19和21天后检查平板的分枝杆菌生长。当没有抗核酸药物的控制良好良好的增长时,分析板材的分析,IE。当菌落清晰可见和可数。此时,检查所有孔是否进行生长抑制。生长抑制定义为控制孔的菌落的<90%。
使用与ACM,MGIT 960系统使用SPICENTER TB存在软件(Becton Dickinson和Company,Sparks,MD,USA)[10.]。每个管含有0.8ml Bactec MgIT药物敏感性补充剂,100μl适当的药物溶液。每小时监测生长。当含有1:100稀释的植物的生长控制管的生长单元值达到400时,分析管。生长抑制定义为GU值<100。
棋盘方法用于研究体外LINEZOLID和CLARITHROMYCIN(SIGMA ALDRICH,ST路易斯,MO,美国)之间的协同作用。在0到0.5μg·mL之间以浓度加入LINEzolid-1和克拉霉素,范围为0-8μg·ml-1,如图所示图1。我们计算了最低分数抑制浓度(FIC),以确定协同作用为:(单独LINEzolid的组合/ MIC的LINZOLID的MIC)+(单独克拉霉素的Clarithromycin的MIC)。Synergy被定义为FIC≤0.5,漠不关心,作为FIC> 0.5至4,并且作为FIC> 4 [11.]。
选定的玉米菌菌(n=24),用MGIT法测定克拉霉素与利奈唑胺之间的协同作用74%,用ACM法测定59%。使用MGIT的中位数(四分位数范围(IQR)) FIC为0.37(0.31-0.47),使用ACM为0.50(0.38-0.75)。这两种药物的组合在任何一种菌株中都没有显示出拮抗作用。由所有选定的方格组成的中间方格玉米菌菌含有克拉霉素和LINEzolid的菌株图1。在77%的MDR-TB分离物(N = 13)中观察到协同作用,使用Mgit和ACM方法中的46%。使用MGIT和0.62(0.375-1.0)在MDR-TB分离株中使用MgIT和0.62(0.375-1.0),将克拉霉素和LINEzolid组合在0.37(0.32-0.37)中的中值(IQR)FIC。
总之,我们观察了克拉霉素与掺入粉刺和癌症素的协同作用。这种发现符合先前的观察结果,即克拉霉素与异烟,利福平和/或乙胺丁醇的协同作用玉米菌菌[8.]。
虽然尚未阐明潜在的机制,但已经提出了通过克拉霉素或线霉素或线唑啉的细胞壁层和细胞包膜的细胞质膜的紊乱或破坏可能发挥作用[8.]。这种中断可能让其他药物更容易渗透,导致观察到的体外协同作用。然而,该假设假设渗透性通常是限制因素。需要研究潜在机制的研究,也可能解释我们观察到的事实体外在大多数情况下协同作用,但不是全部,孤立。虽然展示了这项研究中的大多数分离株体外结合克拉霉素和LINEzolid时的协同作用,确定或预测哪种分离在应用这些药物治疗方案中的展示协同作用将更有趣。实际上,核栏实验尚未经过验证或广泛接受用于在单个情况下定制治疗,因此,员工的截止值偏离1.0的理论截止值[11.]。因此,显示协同作用的分离液的数量可能是低估的。
以前,我们表明,克拉霉素在MDR-TB患者中增加了44%的线唑暴露的暴露[12.]。概述了含义:Clarithromycin可以用作增强剂以增加线唑胺暴露,与低剂量ritonavir和蛋白酶抑制剂相当;而相对便宜的克拉霉素可能会降低相对昂贵的线唑的治疗成本[13.]。这体外我们在本研究中观察到的协同作用进一步加强了将克拉霉素作为二次药物添加到MDR-TB治疗方案的情况。Linezolid和Clarithromycin的增加的药物易感性与增加的线唑胺暴露的组合可能允许进一步减少线唑醛剂量,进一步降低成本和不良事件。有必要对接受两种药物接受两种药物的患者的前瞻性评估,以研究现实生活中的疗效和耐受性。此外,协同作用测试应与其他二线结核病药物和管道中的新结核药物进行。特别是随着下一年从管道出现的新MDR-TB药物的数量,预计将受到限制,应以所有费用避免耐药性。通过使用展示协同作用的组合优化治疗方案可能是一种避免过度扩张使用新药的策略。在考虑2015年后的新战略时,这尤其重要,这是基于结核消除的概念[14.那15.]。
结论,克拉霉素和LINEZOLID显示屏体外在多药抗性中的协同作用玉米菌菌隔离。由于较红醇的促进效果,不良反应的低发生率,低成本,观察到肺组织中的浓度更高,以及体外用线唑和其他抗菌药物的协同作用,克拉霉素的作用在未来的MDR-TB治疗中可能变得更加重要。
脚注
利益冲突:可以在本文的在线版本中找到相关信息www.qdcxjkg.com.
- 已收到2014年3月2日。
- 公认2014年4月1日。
- ©ers 2014.