文摘gydF4y2Ba
肿瘤坏死因子(TNF) -α已被证明是一个重要因素在动物模型的慢性阻塞性肺疾病(COPD)。然而,人类的研究gydF4y2Ba肿瘤坏死因子gydF4y2Ba多态性在慢性阻塞性肺病模棱两可。gydF4y2Ba
六个gydF4y2Ba肿瘤坏死因子gydF4y2Ba单核苷酸多态性(-1031 c / T -863 c / -857 c / T, -237 g / A, -308 g / A和+ 487 g / A)和单体型进行了423年白种人吸烟者(298患者COPD的肺量测定的证据和125没有气流阻塞)。gydF4y2Ba
-308年小等位基因(A)有较高的优势比(或)与慢性阻塞性肺病的多变量分析(控制了年龄、性别、pack-yrs;或1.9,95%可信区间(CI) 1.1 - -3.2)和还差一秒用力呼气容积/用力肺活量。-237年小等位基因(A)较低或与慢性阻塞性肺病(或0.40,95%可信区间0.19 - -0.86)。在COPD患者中,-857年的小等位基因(T)较低或相关的严重的慢性阻塞性肺病(全球倡议阶段III和IV阻塞性肺疾病阶段gydF4y2Ba与gydF4y2Ba阶段I和II,或0.46,95%可信区间0.24 - -0.88)。其他肿瘤坏死因子单核苷酸多态性与慢性阻塞性肺病无关,但-1031/-863单体型CC / TC较低或慢性阻塞性肺病患者gydF4y2Ba与gydF4y2Ba吸烟控制(或0.22,95%可信区间0.05 - -0.97)。gydF4y2Ba
目前的研究增加了进一步的证据表明,肿瘤坏死因子基因型在对香烟烟雾中发挥作用。gydF4y2Ba
慢性阻塞性肺疾病(COPD)发展只有25 - 40%的吸烟者gydF4y2Ba1gydF4y2Ba。然而,在吸烟者对慢性阻塞性肺病的风险因素尚未完全确定。αgydF4y2Ba1gydF4y2Ba抗胰蛋白酶缺乏症,是最好的记录COPD的遗传风险因素,估计仅占1 - 2%的病例gydF4y2Ba2gydF4y2Ba,gydF4y2Ba3gydF4y2Ba。其他宿主因素被怀疑参与了剩余的98 - 99%的病例。gydF4y2Ba
慢性阻塞性肺病的一个候选易感基因是肿瘤坏死因子(gydF4y2Ba肿瘤坏死因子gydF4y2Ba),该基因编码的蛋白质是TNF-α处理。在老鼠身上,TNF-α生产过剩导致肺气肿和炎症gydF4y2Ba4gydF4y2Ba,gydF4y2Ba5gydF4y2Ba和被认为是驱动∼70%的香烟烟雾诱发肺气肿和炎症gydF4y2Ba6gydF4y2Ba,gydF4y2Ba7gydF4y2Ba。TNF-α可能施加的影响通过刺激其他酶的释放,如巨噬细胞metalloelastasegydF4y2Ba8gydF4y2Ba。在COPD患者中,有一个更高浓度的TNF-α支气管活检gydF4y2Ba9gydF4y2Ba、诱导痰gydF4y2Ba10gydF4y2Ba和支气管肺泡灌洗液(BALF)与对照组相比gydF4y2Ba11gydF4y2Ba。痰TNF-α水平在慢性阻塞性肺病急性加重也显著增加gydF4y2Ba12gydF4y2Ba,gydF4y2Ba13gydF4y2Ba。最近的一项荟萃分析发现慢性阻塞性肺病与血清TNF-α水平升高gydF4y2Ba14gydF4y2Ba。相比之下,健康吸烟者没有增加TNF-αBALF中gydF4y2Ba11gydF4y2Ba,gydF4y2Ba15gydF4y2Ba和他们的肺泡巨噬细胞释放TNF-α下降gydF4y2Ba16gydF4y2Ba,gydF4y2Ba17gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
慢性阻塞性肺病患者的因素导致TNF-α但不是吸烟者与正常肺功能是未知的。一种可能性是,gydF4y2Ba肿瘤坏死因子gydF4y2Ba表达式是由基因的单核苷酸多态性(snp)。例如,增加的转录活动gydF4y2Ba肿瘤坏死因子gydF4y2Ba基因与-308等位基因在各种疾病gydF4y2Ba18gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba23gydF4y2Ba。的gydF4y2Ba肿瘤坏死因子gydF4y2Ba-863等位基因与基因有关gydF4y2Ba24gydF4y2Ba从外周血单核细胞和TNF-α表达gydF4y2Ba25gydF4y2Ba。-857 t和-1031 c等位基因的转录活动增加有关gydF4y2Ba肿瘤坏死因子gydF4y2Ba基因gydF4y2Ba25gydF4y2Ba。-237等位基因显示不同的结果与TNF-α蛋白质产量gydF4y2Ba26gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba28gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
尽管有这些承诺gydF4y2Ba在体外gydF4y2Ba研究中,并不是所有的单核苷酸多态性研究COPD人群和那些已经研究了往往相互冲突的结果(表1gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba)。这些不一致可能是由于研究设计的局限性,如小数量的主题,与有限数量的信息单核苷酸多态性基因型,缺乏与多个snp单体型,未能调整了混杂变量,如年龄、吸烟和缺乏比较健康的控制,最相关的对照组。在目前研究的局限性被六型处理gydF4y2Ba肿瘤坏死因子gydF4y2Ba单核苷酸多态性与生物活性在一个大的学科定义良好的生理表型。多变量分析也使用和TNF-α基因型/单体型对慢性阻塞性肺病检查。gydF4y2Ba
方法gydF4y2Ba
参与者的选择和描述gydF4y2Ba
所有受试者研究机构审查委员会批准的协议在美国国家犹太医学及研究中心(美国科罗拉多州丹佛市)或科罗拉多多个机构机构审查委员会(美国科罗拉多州丹佛市),由美国国立卫生研究院的指导方针建议(贝塞斯达,医学博士,美国)。签署知情同意了所有科目。对照组健康志愿者招募了来自当地社区口碑营销和广告,没有报告的呼吸道症状或疾病,吸烟史> 20 pack-yrs。慢性阻塞性肺病患者招募肺门诊部。慢性阻塞性肺病的诊断是使用全球倡议阻塞性肺病(黄金)标准gydF4y2Ba49gydF4y2Ba使用post-bronchodilator在一秒用力呼气量(FEVgydF4y2Ba1gydF4y2BaFEV相比)满后过期gydF4y2Ba1gydF4y2Ba%预测对年龄、性别和种族基于美国的普通人群的样本gydF4y2Ba50gydF4y2Ba。我的病人(FEV黄金状态gydF4y2Ba1gydF4y2Ba/用力肺活量(FVC) < 0.7, FEVgydF4y2Ba1gydF4y2Ba≥80% pred)作为案例。肺气肿患者在高分辨率计算机断层扫描和正常肺功能测试(n = 11)被放置在黄金阶段进行分析(表2gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba
血液采集gydF4y2Ba
总共6毫升的血液从肘前的静脉被撤回到无菌13×1000毫米肝素钠真空采血管+ (BD,富兰克林湖,新泽西,美国)。样品立即被离心机2100×gydF4y2BaggydF4y2Ba在室温下10分钟。淡黄色的外套被除去,储存在-80°C。gydF4y2Ba
DNA提取/隔离和基因分型gydF4y2Ba
淡黄色的外套被用来提取DNA使用QIAamp 96 DNA血液工具包(美国试剂盒,瓦伦西亚,CA)和DNA与nuclease-free筛选了水。总共有六个snp检测在所有科目。-1031 T / C多态性,-863 C / -857 C / T测试使用PCR条件和引物如前所述gydF4y2Ba51gydF4y2Ba。直接单也测试使用两对引物对-857 c / T和-237 g / A和-308 g / A + 488 g /如前所述gydF4y2Ba51gydF4y2Ba,gydF4y2Ba52gydF4y2Ba。每个SNP分析了使用特定的引物序列检测SNP的存在。gydF4y2Ba
数据分析gydF4y2Ba
中每个多态性基因型频率的情况下,控制人口评估偏离哈迪温伯格平衡,使用卡方测试(p < 0.001)。测试案例和基因型的差异控制的上下文中进行了逻辑回归,单变量和多变量(调整性别、年龄和吸烟pack-yrs,在适当的地方)。占主导地位的模型用于基因分析。白人占绝大多数的主题,因此,它是唯一一组分析在目前的研究。单变量和多变量线性回归模型被用来评估基因型对横向连续严重结果的影响(FEVgydF4y2Ba1gydF4y2Ba% pred和FEVgydF4y2Ba1gydF4y2Ba/ FVC)。正常化的转换结果进行连续变量在必要时更好的近似模型的假设。严重程度的分析,黄金阶段是对分轻度到中度(黄金阶段I或II)和严重疾病(黄金阶段III或IV)。例严重和轻度到中度疾病基因型差异评估上下文的逻辑回归单变量和多变量。连锁不平衡的措施,d ' RgydF4y2Ba2gydF4y2Ba,计算使用Haploview(2003 - 2005年版权怀特黑德生物医学研究所,剑桥,妈,美国)。此外,Haploview也用于确定单体型使用置信区间的方法gydF4y2Ba53gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
使用Haplo.Score单体型频率估计gydF4y2Ba54gydF4y2Ba。这个软件使用一个期望maximisation-based算法来计算每个可能的单体型的后验概率组合时为每个单独的单体型阶段是未知的。为了调整的不确定性单体型作业,使用加权逻辑回归模型。每个主题可能不止一次出现在数据集,每个条目的概率加权,单体型组合的个体,这样的总贡献每个人是一个观察。单体型组合和单一的单体型的影响都检测一对特定的单体型的存在gydF4y2Ba与gydF4y2Ba不存在和携带至少一个指定的单体型gydF4y2Ba与gydF4y2Ba没有携带指定的单体型。gydF4y2Ba
结果gydF4y2Ba
人口统计资料gydF4y2Ba
慢性阻塞性肺病和对照组在FEV明显不同gydF4y2Ba1gydF4y2Ba% pred(45.0±19和98.5±18%,慢性阻塞性肺病和控制,分别;p < 0.0001;表2gydF4y2Ba⇑gydF4y2Ba)。对照组与慢性阻塞性肺病患者相比,更有可能是男性,但也有类似的吸烟史(pack-yrs)。只有白种人分析在当下研究人口分层的影响降到最低。gydF4y2Ba
肿瘤坏死因子gydF4y2Ba单核苷酸多态性基因型gydF4y2Ba
肿瘤坏死因子gydF4y2Ba基因型频率在表3中列出gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba。-308小等位基因的基因型(GA或AA)明显比对照组更频繁的在慢性阻塞性肺病患者在两个单变量(比值比(或)1.9,95%可信区间(CI) 1.1 - -3.2;p = 0.03)和多变量分析(或1.9,95%可信区间1.1 - -3.4;p = 0.03;表4gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba)。有更少的机会有-237小等位基因的基因型(GA或AA)在慢性阻塞性肺病患者比对照组多变量分析(或0.40,95%可信区间0.19 - -0.86;p = 0.02;表4gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba
一个基因型与未成年人-857年SNP等位基因(CT或TT)显著降低或在COPD受试者患有严重慢性阻塞性肺病(黄金阶段III和IV)相比,那些有轻中度慢性阻塞性肺病(I期和II)在两个单变量(或0.5,95%可信区间0.26 - -0.95;p = 0.03)和多变量分析(或0.46,95%可信区间0.24 - -0.88;p = 0.02;补充表S3)。没有发现关联的基因型和FEVgydF4y2Ba1gydF4y2Ba% pred(数据未显示),尽管-308年的基因型(GG)与高意味着FEV有关gydF4y2Ba1gydF4y2Ba/ FVC(补充表S4)。没有统计上显著的关联与慢性阻塞性肺病snp -1031, -863 + 488。gydF4y2Ba
单体型分析gydF4y2Ba
建立了单体型根据Gabriel置信区间的方法gydF4y2Baet al。gydF4y2Ba53gydF4y2Ba在这种情况下,使用Haploview单独控制。这种方法使用d '估计和测量的精度(置信界限)来构建单体型(图。1gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba)。块成对d ' < 1实际d '值在广场。虽然估计成对连锁不平衡(LD)之间的许多单核苷酸多态性高,估计的精度不够高履行的标准建设单体型利用snp。估计-1031年SNP和-863年之间的LD SNP是唯一估计有足够的精度来保证施工的单体型。估计频率可以在补充表S5。没有单体型与慢性阻塞性肺病(数据没有显示)。gydF4y2Ba
荟萃分析的-308和-237个snp在慢性阻塞性肺病gydF4y2Ba
为了正确地看待目前的结果,在线数据库的搜索PubMed先前报道的频率gydF4y2Ba肿瘤坏死因子gydF4y2Ba单核苷酸多态性。-308年国民党数据提取表1中列出的所有研究gydF4y2Ba⇑gydF4y2Ba,除了没有报告频率情况下,单独控制gydF4y2Ba31日gydF4y2Ba两只快速跌没有报道,案件gydF4y2Ba37gydF4y2Ba,gydF4y2Ba38gydF4y2Ba,另一个只在COPD受试者报告肺气肿gydF4y2Ba42gydF4y2Ba。结合当前数据与剩余的16个研究(总共有610例病例和1612例对照),基因型与-308年小等位基因被发现有一个或±gydF4y2BasegydF4y2Ba慢性阻塞性肺病的1.28±0.03。四个研究没有使用健康的吸烟者作为对照组或没有状态的个体是否在对照组是烟民gydF4y2Ba29日gydF4y2Ba,gydF4y2Ba32gydF4y2Ba,gydF4y2Ba46gydF4y2Ba,gydF4y2Ba47gydF4y2Ba。因此,数据只是集中研究COPD受试者相比健康吸烟者(图。2gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba),发现一个或±gydF4y2BasegydF4y2Ba慢性阻塞性肺病的1.29±0.04与-308个SNP。gydF4y2Ba
SNP频率为-237年gydF4y2Ba肿瘤坏死因子gydF4y2BaSNP也与其他人群相比。结合目前的结果集中的数据从其他三个研究表1中列出gydF4y2Ba⇑gydF4y2Ba口服补液盐,未达到统计上的显著水平对于所有对象(或±gydF4y2BasegydF4y2Ba1.25±0.12)或研究只是比较COPD受试者和吸烟者(或±gydF4y2BasegydF4y2Ba1.22±0.14;图3gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba
讨论gydF4y2Ba
TNF-α在COPD的发病机制中扮演不可或缺的角色。在目前的研究中,迄今为止最全面的单体型评价使用六个单核苷酸多态性gydF4y2Ba肿瘤坏死因子gydF4y2Ba是执行。这些snp是选择根据他们的协会和生物活性的变化从先前的研究结果在慢性阻塞性肺病。这些snp曾被报导过独立与慢性阻塞性肺病gydF4y2Ba29日gydF4y2Ba,gydF4y2Ba33gydF4y2Ba,gydF4y2Ba41gydF4y2Ba,gydF4y2Ba42gydF4y2Ba,gydF4y2Ba44gydF4y2Ba,gydF4y2Ba46gydF4y2Ba。例如,它被证实基因型(GA或AA) -308年微小等位基因的SNP与更高或慢性阻塞性肺病,相比之下,控制吸烟。其他的单核苷酸多态性(gydF4y2Ba如。gydF4y2Ba有关-237)和单体型较低或有严重疾病或慢性阻塞性肺病或少。gydF4y2Ba
最强大的协会观察是研究最多的SNP, -308(表1gydF4y2Ba⇑gydF4y2Ba)。这个SNP的启动子区域gydF4y2Ba肿瘤坏死因子gydF4y2Ba基因与基因转录增加有关gydF4y2Ba18gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba23gydF4y2Ba。尽管一些更早的研究显示一个协会的-308小等位基因与慢性阻塞性肺病gydF4y2Ba33gydF4y2Ba,gydF4y2Ba41gydF4y2Ba,gydF4y2Ba42gydF4y2Ba,gydF4y2Ba44gydF4y2Ba,gydF4y2Ba46gydF4y2Ba,四个研究亚洲人群gydF4y2Ba41gydF4y2Ba,gydF4y2Ba42gydF4y2Ba,gydF4y2Ba44gydF4y2Ba,gydF4y2Ba46gydF4y2Ba轻微的等位基因频率的低得多。本研究只是第二个显示本协会在白种人中,第一个是波士顿的一个大家庭研究早发性慢性阻塞性肺病研究gydF4y2Ba33gydF4y2Ba。尽管多项研究显示积极的联想,也有13个研究报告-308基因型之间没有联系(GA和AA)和慢性阻塞性肺病,包括10名在高加索人群gydF4y2Ba29日gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba32gydF4y2Ba,gydF4y2Ba34gydF4y2Ba,gydF4y2Ba37gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba39gydF4y2Ba。以前,觉得研究的差异是由于小样本大小(低功率)或小等位基因频率较低gydF4y2Ba29日gydF4y2Ba;然而,森林图(图2所示gydF4y2Ba⇑gydF4y2Ba)表明,尽管人口之间都是有联系的。gydF4y2Ba
第二个最重要的协会在本研究观察到与-237年基因型(GA和AA)。这个SNP与转录活动减少和降低TNF-α生产从外周血单核细胞gydF4y2Ba55gydF4y2Ba。目前高加索对象的多变量分析表明,这种基因型是不太可能被发现在COPD受试者(7%的控制gydF4y2Ba与gydF4y2Ba4%在COPD受试者)。先前的研究已经报道没有联系的SNP与慢性阻塞性肺病gydF4y2Ba29日gydF4y2Ba,gydF4y2Ba30.gydF4y2Ba;这些研究有轻微的等位基因频率控制(分别为4和6%),略低于在目前的研究中(7%)。在另一项研究中gydF4y2Ba33gydF4y2Ba样本大小是更大的(n = 718),然而小等位基因频率也低于对照组(4%控制和6%的情况下;c·赫斯;肺和急救护理部门,布莱根妇女医院、哈佛医学院、波士顿,MA,美国;个人通信)表明,这种联系可能是由于假阳性协会(图3所示gydF4y2Ba⇑gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba
虽然其他gydF4y2Ba肿瘤坏死因子gydF4y2Ba单核苷酸多态性似乎生物活性gydF4y2Ba在体外gydF4y2Ba,只有两个其他的单核苷酸多态性(-376 + 488)在慢性阻塞性肺病研究中曾被报导过gydF4y2Ba29日gydF4y2Ba,gydF4y2Ba30.gydF4y2Ba,gydF4y2Ba33gydF4y2Ba,gydF4y2Ba40gydF4y2Ba。+ 488个SNP与肾细胞癌有关gydF4y2Ba56gydF4y2Ba和前列腺癌gydF4y2Ba57gydF4y2Ba。这个SNP的第一个内含子gydF4y2Ba肿瘤坏死因子gydF4y2Ba记录,但其意义尚不清楚gydF4y2Ba51gydF4y2Ba,gydF4y2Ba58gydF4y2Ba,gydF4y2Ba59gydF4y2Ba。在大多数研究没有联系这个SNP和慢性阻塞性肺病gydF4y2Ba33gydF4y2Ba,gydF4y2Ba40gydF4y2Ba除了一个研究相比,慢性阻塞性肺病患者健康的捐赠者gydF4y2Ba29日gydF4y2Ba。令人惊讶的是,这项研究发现之间的联系+ 488 SNP和慢性阻塞性肺病甚至更强的COPD受试者没有或有限radiographical疾病的证据gydF4y2Ba29日gydF4y2Ba。尽管-376年的SNP是不包括在目前的研究中,它是与增加有关gydF4y2Ba肿瘤坏死因子gydF4y2Ba转录活性和强烈与脑型疟疾的风险增加有关gydF4y2Ba60gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
目前的研究是第一次报告的-857个SNP基因型频率在慢性阻塞性肺病,虽然一直在研究其他肺部疾病。这个SNP认为与减少影响绑定OCT1和核转录因子(NF) -κB转录因子gydF4y2Ba肿瘤坏死因子gydF4y2Ba启动子区域,尽管报道相互矛盾gydF4y2Ba25gydF4y2Ba,gydF4y2Ba61年gydF4y2Ba,gydF4y2Ba62年gydF4y2Ba。虽然在调查这个SNP的或无统计学显著不同,这是与轻度到中度慢性阻塞性肺病(黄金阶段I和II)。这是猜测,-857 t等位基因影响TNF-α生产负面使用不同的转录因子在某些炎症通路,从而导致更少的气道炎症和肺实质的破坏:相似的模型假定的肠道炎症性肠病gydF4y2Ba61年gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
本研究是多种力量之一gydF4y2Ba肿瘤坏死因子gydF4y2Ba单核苷酸多态性研究和单体型分析。虽然只有两个snp在重要的LD,单体型块-1031/-863被发现与慢性阻塞性肺病。这一地区的gydF4y2Ba肿瘤坏死因子gydF4y2Ba也被认为扮演一个角色绑定OCT1和NF-κB转录因子启动子区域的gydF4y2Ba肿瘤坏死因子gydF4y2Ba和小等位基因是导致增加的感觉gydF4y2Ba肿瘤坏死因子gydF4y2Ba转录gydF4y2Ba24gydF4y2Ba,gydF4y2Ba25gydF4y2Ba,gydF4y2Ba63年gydF4y2Ba。小为-1031和-863个snp等位基因也被报道与胃溃疡和胃癌gydF4y2Ba64年gydF4y2Ba。慢性阻塞性肺病的单体型不太可能被发现,CC / TC -1031/-863,目前作者假定,几个小的等位基因在这些网站让病人不太可能TNF-α生产和增加,因此,不太可能发展慢性阻塞性肺病。gydF4y2Ba
总之,目前的研究是一个更大、更全面的研究gydF4y2Ba肿瘤坏死因子gydF4y2Ba多态性在慢性阻塞性肺疾病。-308年证实研究单核苷酸多态性与慢性阻塞性肺疾病和其他协会的gydF4y2Ba肿瘤坏死因子gydF4y2Ba基因也被报道,暗示gydF4y2Ba肿瘤坏死因子gydF4y2Ba多态性可能对烟草烟雾中扮演一个角色。额外的大型独立研究白人和非白种人群都需要复制当前的结果。gydF4y2Ba
支持声明gydF4y2Ba
本研究支持的Kenneth Monfort涉嫌基金会,空姐医学研究所(美国佛罗里达州迈阿密的),专门研究卓越计划肺癌(极光,科罗拉多大学癌症研究所有限公司美国)授予CA58187和一般临床研究中心/美国国立卫生研究院的资助MO1 # RR000051。gydF4y2Ba
感兴趣的语句gydF4y2Ba
没有宣布。gydF4y2Ba
确认gydF4y2Ba
作者要感谢j . Orcutt a . Jonth c·惠勒和m .缺口(医学部门,美国国家犹太医学及研究中心,丹佛,有限公司,美国),r·杜波依斯和k·威尔士(间质性肺病,皇家主管布朗普顿医院地铁站,帝国理工学院科学、技术和医学,伦敦,英国)。gydF4y2Ba
脚注gydF4y2Ba
可以从这个手稿补充数据gydF4y2Bawww.www.qdcxjkg.comgydF4y2Ba
- 收到了gydF4y2Ba2007年8月3日。gydF4y2Ba
- 接受gydF4y2Ba2008年1月23日。gydF4y2Ba
- ©人期刊有限公司gydF4y2Ba
引用gydF4y2Ba
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