文摘
当前测试的结核病感染结核菌素皮肤试验(TST)、干扰素(IFN) -γ-release化验(干扰素释放)和IFN-γ-induced蛋白质(IP) -10)有局限性和其价值连续识别受感染儿童使用时没有被探索。
本研究描述了结核菌素、干扰素释放和IP-10反应在儿童与成人结核病测试的协议以及是否使用多个测试鉴定更多感染孩子。1 - 15岁的330名儿童(年)接触成人肺结核在埃塞俄比亚和156例对照进行了研究。
儿童接触到成人高杆菌在痰的成绩更有可能有积极的结核菌,IFN-γ和IP-10比控制。正面测试的协议与痰细菌的成绩直接相关(p < 0.001)。负面测试的协议是在控制孩子。测试的连续使用增加儿童的数量分类具有至少一个积极的测试。
使用三个测试增加儿童的数量分为感染。增加与细菌负荷的成年人。只使用一个测试可能低估了受感染儿童的比例,但数据的解释是困难由于缺少参考标准。
儿童与成人有痰检阳性肺结核(PTB)在高感染的风险。尽管这种风险相关联的亲密接触和杆菌痰的成人的浓度指数情况下(1),他们的调查往往是无报酬的,因为除了世纪结核菌素皮肤试验(TST),很少有测试来识别儿童感染肺结核(TB)。干扰素(IFN) -γ-release化验(干扰素释放),这是更具体的比测试,因为他们也没有交叉作用的复合菌群与大多数非结核分枝杆菌或抗原存在于卡介苗(BCG)疫苗,代表一个阶跃变化近几十年来在感染的诊断。敏感性,可以妥协在年幼的孩子,在那些严重营养不良或艾滋病毒合并感染2)和负面测试不排除感染。最近,标记,IFN-γ-induced蛋白质(IP) -10,被认为是一个潜在的测试来识别结核感染。IP-10的优势是它生产的高水平结核分枝杆菌抗原刺激活性和潜在的结核病病例,证明其潜在的生物标志物结核分枝杆菌儿童(3]。IP-10的性能也被认为是独立于年龄和更少的妥协在个人合并感染艾滋病毒4),但标准化测试是新的,低于TST和干扰素释放。
有附加价值的有限的数据结合结核菌,干扰素释放和IP-10测试结果提高识别受感染的儿童和IP-10是否响应模式根据不同的数量杆菌痰中包含的成年的情况下,正如前面演示的TST和干扰素释放。
我们在这里描述是否随之而来的使用测试,干扰素释放和IP-10儿童与成人的痰检阳性肺结核增加儿童的数量,可以贴上感染,以及这些结果是否随杆菌在成年人的痰液的浓度。
材料和方法
这是一个横断面研究1-15-yr-old儿童与成人的痰检阳性肺结核和社区结核病控制没有已知的接触。Hawassa的研究区,南部地区的埃塞俄比亚。史的成人咳嗽> 2周曾诊断为痰涂片阳性肺结核在Hawassa确定连续Bushullo并且主要的健康中心和Hawassa转诊医院。从病人和孩子居住在一个半径Hawassa被邀请参加和参观了在家里。社区控制被定义为明显健康的儿童没有已知的接触成人肺结核和选择从Hawassa及周边农村地区后,准备从村庄内的列表Hawassa半径。村庄被随机选择和一个家庭是由旋转笔选择从每个村庄之间的中心和边缘的村庄。1 - 15岁的一个孩子年确定随机从选中的家庭被邀请参加。
所有参与者儿童应用使用2 U结核菌素纯蛋白衍生物(产后抑郁症RT 23;史坦顿血清研究所,哥本哈根,丹麦)使用结核菌素皮内使用触诊法测定方法和硬化后48 - 72 h。测试结果被分级为负(< 5毫米)、中级(≥5和< 10毫米)和积极的(≥10毫米)。收集血液样本为干扰素释放使用QuantiFERON-TB黄金管(QFT-IT)测试后(Cellestis,维多利亚,澳大利亚)制造商的指示。浮在表面的等离子体从QFT-IT管后离心收获和储存在-70°C。在Bio-Rad IFN-γ测量使用QFT-IT ELISA(英国)赫默尔亨普斯特德镇板读者(550型),阅读在450 nm,分为积极的,消极的或不确定的使用厂家的软件。IP-10浓度测量相同的上层清液使用人类IP-10 ELISA施工工具(Antigenix Inc .)、美国纽约,纽约,美国),根据接收机操作分为积极或消极的曲线,如前所述[5]。艾滋病毒状况建立了使用两个blood-based ELISA方法。
细菌的数量在成人痰被分级为“稀疏”,+ + +或+ + +和用于分层的比例儿童积极的结核菌,IFN-γ或IP-10。IFN-γ的附加值和IP-10计算对孩子负面测试或负TST和IFN-γ描述使用多个测试是否会增加儿童的比例至少有一个积极的测试。
研究协议是经卫生局批准的南部地区,埃塞俄比亚、研究伦理委员会的利物浦热带医学学院和Hawassa大学和埃塞俄比亚科学和技术委员会。孩子们入学后获得明智的父母的同意。这项研究是注册的www.clinicaltrials.gov临床试验注册(数量NCT00456469)。
结果
总共有486名儿童被录取。其中,330(中位数(范围)8岁(1 - 15)岁)接触和156(平均6岁(范围)(1 - 15)岁)是社会控制,具有类似比例的联系人(n = 167, 51%)和控制(n = 79, 51%)男性。成人的痰涂片15(4.5%)孩子们评分+ + +;109(33%)+ +评分;188(57%)+评分;和18(5.5%)被评分“稀疏”细菌。17(3.5%)的孩子没有测试结果和28(6%)没有IFN-γ或IP-10结果。
儿童的比例正IFN-γ或积极IP-10增加而增加成人痰的成绩,从接触的成人的17.6%和23.5%的成绩,在接触成人57%和50% + + +的成绩,分别(卡方趋势p < 0.001),如图所示表1。儿童积极的结核菌素的比例最高(86.7%)也被儿童接触成人+ + +的成绩。然而,儿童与成人的杆菌也有很大一部分积极的测试结果。相比之下,孩子的比例与积极的结核菌,IFN-γ和IP-10低控制(分别为12.8%、13.1%和5.8%)。图1描述的检测结果呈阳性的比例为每个成年人的涂片镜检的三个测试成绩。
图2描述测试的一致性,IFN-γIP-10。儿童的比例与积极的TST和IFN-γ或积极的TST和IP-10成年人痰等级的增加而增加;之间的一致性控制和更高的一致性较低的儿童与成人高痰成绩(+ + +)。同样,结核菌素的负面的一致性,在控制IFN-γ和IP-10高于儿童与成人+ + / + + +痰成绩。IFN-γ之间的一致性和IP-10没有随成人的痰。
435(282接触和153控制)孩子们三个测试的结果。排除中间TST和不定IFN-γ结果后,313名儿童有一个完整的可判断的结果。其中包括九个孩子接触成人+ + + + + 74,+ 109,七痰稀疏成绩和114名对照。图3描述儿童的比例将归类为感染了结核菌素的结果不能单独使用,通过添加IFN-γ结果TST-negative孩子并通过添加IP-10结果TST和IFN-γ-negative孩子。结果提出了分层的成年人的痰成绩。所有的孩子接触到成人+ + +分级被结核菌素阳性或IFN-γ因此IP-10没有添加更多积极的结果。很大一部分的儿童接触到成人+和+ +痰成绩有积极的结核菌素或IFN-γ结果(分别为72%和70%)。这些百分比增加到75%和78%,分别通过添加IP-10作为第三标记。值得注意的是,一个小但是大量的社区控制负面测试但积极IFN-γ(12 114名儿童)或负TST和IFN-γ但正IP-10(114三个孩子)。
同样比例的联系和控制收到BCG (249 335 (74.3%)与156年120例(76.9%),p > 0.5)。虽然接触更有可能有积极的TST和IFN-γ比控制,组内的反应类似无论BCG状态(p > 0.5 TST和IFN-γ儿童有或没有BCG)。感染艾滋病毒的儿童数量是在接触儿童高于控制孩子(27(10%)的258名(2%)的156名儿童进行测试,分别;p < 0.01)。低数量的艾滋病毒感染儿童,然而,排除了进一步分析TST和IFN-γ结果分层的艾滋病毒(表2)。
讨论
儿童与成人有痰检阳性肺结核高危感染和疾病进展。世界卫生组织(WHO)建议启动异烟肼预防密切接触的儿童与成人没有调查孩子是否感染结核病。然而,父母经常不愿提供预防和经常放弃推荐课程(6个月6- - - - - -9]。可能是识别受感染的儿童和针对预防高危人群可能更容易接受父母,但穷人结核菌素的敏感性,与BCG的交叉反应,及其与营养不良的儿童不可靠,immunosupression和严重感染(10限制了该方法的适用性。干扰素释放的局限性也越来越明显和他们近年来广泛使用。结核病诊断中最流行的是地点可访问性是一个主要障碍,因此这些测试的适用性受到他们的成本,可用性和实验室的要求。此外,证据确凿的现象的转换(从消极到积极的)和归复权(从正到负)频繁但知之甚少11]。假阴性反应也被报道在非常年轻的儿童和艾滋病病毒感染者12),虽然他们与结核菌素发生在较低的频率比。此外,干扰素释放从幼儿收集血液的后勤困难,测试加工和采购,导致相当数量的孩子没有可用的测试结果(12]。最近的政策声明中表示,没有足够的性能数据干扰素释放在低收入和中等收入国家,并且考虑到更高的成本使用干扰素释放这些设置不推荐(13]。干扰素释放,然而,有很高的特异性和他们的使用与结核菌素可能增加了诊断价值(2,14]。一些与结核病感染筛查策略来识别个人新兴国际。这些包括单独使用结核菌素或干扰素释放,连续使用两个独立的测试或使用它们,通常TST igra紧随其后。后一种方法被认为是最具成本效益的方案在某些设置,虽然迄今为止只有有限的客观证据(15]。
最近报道IP-10,额外的标记来识别结核感染(16),比IFN-γ大量表达,使其更容易测量血液中。感染艾滋病毒的人能够表达IP-10 [4),这可能是由于一些IP-10-expressing细胞免受艾滋病毒感染。虽然它的性能不如TST和IFN-γ测试良好的文档记录,有人建议在识别感染附加值与干扰素释放[一起使用时,17,18]。
感染的风险在大多数组织相关联的细菌数量的痰成人,随着三个标记以增加痰成绩越来越积极。三个标记的使用增加了个体的数量至少有一个积极的测试,达到100%的儿童与成人+ + +分级。与痰涂片测试的协议不同的分数,同时更高比例的测试是积极的儿童接触到成人+ + +分级和低接触儿童之间的一致性低感染的风险。不幸的是,儿童的数量在+ + +类别很小,研究动力不足检测这些孩子的附加值,这是该集团,前面的测试更有可能是积极的,因此留下一个小的附加值。如果所有的测试都解释为真阳性,有很高比例的儿童与成人结核病感染。使用涂片的成绩,作为感染的风险的一个代理,表明测试可能是真的阳性的反应;然而,这种解释是有问题的评估测试受到缺乏合适的参考标准和没有这个参考标准是不可能区分正确和错误的测试结果。此外,越来越多的控制用一个积极的结果可能反映了假阳性检测率低,积累在使用几个连续测试。因此,我们的结果可能表明,很大比例的无症状感染患儿可能错过了通过使用一个单独的测试和/或大量的儿童在低感染的风险可能至少有一个积极的测试,同时使用低风险人群的测试进行解释时应特别谨慎。
虽然数据的解释仍然是有问题的,但结核菌素结合IFN-γ和IP-10测试增加儿童的比例与一个或多个检测结果呈阳性。增加与杆菌比例加载在成人的痰涂片。高比例的接触感染至少有一个标记,表明孩子接触后被感染的比例到成人肺结核可能低估了通过使用一个单独的测试诊断。
确认
我们感激地区卫生局对这项研究的支持,Hawassa Bushullo卫生中心和Hawassa教学医院。我们要感谢所有的孩子和他们的父母参与了这项研究。
脚注
支持声明
这项研究是由研究脱粒机基金会授予的美国。
临床试验
这项研究是在注册ClinicalTrials.gov标识号NCT00456469。
感兴趣的语句
没有宣布。
- 收到了2012年1月20日。
- 接受2012年5月18日。
- ©2013人队