文摘
尽管nitrate-nitrite-NO通路中的生物标志物的兴趣最近增加,亚硝酸盐(NO之间的关联2−)和硝酸盐(NO3−),哮喘,过敏敏化作用和鼻炎尚不清楚。
该研究旨在评估之间的关系没有2−/不3−和呼出一氧化氮的分数(F伊诺)水平与哮喘、过敏敏化作用和鼻炎。
等离子体和呼出的气息凝结(EBC)没有2−/不3−和F伊诺水平测量523名成年人的法国流行病学研究哮喘的遗传和环境。过敏敏化作用被定义为一个积极的皮肤戳破测试至少一个高空过敏症。受试者分为non-sensitised、敏感和过敏性鼻炎。
等离子体不2−/不3−任何疾病表型水平无关。EBC没有2−/不3−任何哮喘表型水平无关。EBC没有2−/不3−和F伊诺只敏感学科水平相关(r = 0.21±0.10, p = 0.01)。EBC没有2−/不3−和F伊诺敏感的水平高于non-sensitised学科(调整几何平均数(95% CI): 2.36 (1.96 - -2.84)与1.72(1.38 - -2.14)μmol每毫克蛋白,p = 0.008;和18.3 (16.7 - -20.0)与十亿分之14.8 (13.3 - -16.5),p = 0.0006),分别的渐进关系敏感对象过敏性鼻炎患者(p < 0.0001)。
结果表明,EBC没有2−/不3−和F伊诺水平可能被视为生物标记的过敏敏化作用强度和鼻炎。
文摘
EGEA研究:呼出硝酸盐或亚硝酸盐/水平不得被视为标记强度过敏和鼻炎http://ow.ly/uKbxh
介绍
兴趣测量生物标记在呼出的气息凝结(EBC)呼吸道疾病的流行病学研究增加了在过去的几年中。通路参与哮喘的病理生理学中,一氧化氮(NO)的新陈代谢,也称为nitrate-nitrite-NO通路已经越来越多的在这个研究领域1]。没有复杂的新陈代谢,都没有衡量的呼出分数(F伊诺如亚硝酸盐(NO)和NO-related化合物2−)和硝酸盐(NO3−)是相关的生物标志物,有助于更好地理解病理生理学哮喘和过敏的2]。
F伊诺是研究最多的,它通常被视为一种无创性气道炎症的间接标记(3]。流行病学和临床研究显示水平的增加F伊诺在儿童和成人哮喘,和积极的关系F伊诺研究和过敏敏化作用是一致的,无论鼻炎或哮喘4]。研究之间的联系2−也没有3−水平与哮喘、过敏或鼻炎导致更多的冲突的结果都在成人和儿童5- - - - - -17]。到目前为止,所有这些研究同时测量EBC没有执行2−/不3−和F伊诺水平在同一主题。最近,在大量的成年人从法国流行病学研究哮喘的遗传和环境(EGEA), EBC没有2−/不3−和F伊诺水平被发现是相关的科目没有哮喘(18]。
一氧化氮在病理生理学不同的功能和角色,这可能是更好的解释为考虑其区域化生产(19]。在这项研究中,我们比较了总没有关联2−/不3−水平测量两个隔间(等离子体和EBC)和F伊诺水平与哮喘、过敏敏化作用和鼻炎523成年人EGEA研究。我们提出,协会将根据不同隔间,生物标记和结果进行了研究。
方法
研究设计
数据收集用于分析的框架EGEA的12年的随访。EGEA法国队列研究是基于一组初始的哮喘病例及其一级亲属,和控制(第一次调查中,n = 2047;https://egeanet.vjf.inserm.fr/)。先前所描述的协议和描述性的特点(20.,21]。后续的初始群体进行了2003年和2007年之间(22]。活着队列(n = 2002)、92% (n = 1845)完成了一个短,自行管理的问卷调查,其中1601年完成检查。所有科目回应问卷基于国际标准化的工具来诊断哮喘和确定呼吸道和过敏症状,治疗,和环境风险。目前的横断面分析包括那些成人在第二个调查(≥16岁,n = 1570成年人)与数据在哮喘、鼻炎,过敏敏化作用,和可用的测量EBC没有2−/不3−和F伊诺水平(n = 523)。主题包含在分析更年轻、更经常报道目前哮喘和鼻炎,和更高水平的没有2−/不3−和免疫球蛋白E (IgE)比未包含在分析(n = 1047)。性的两组相似,吸烟,哮喘现状,过敏敏化作用,肺功能测试,嗜酸性粒细胞计数(表S1在补充数据)。
伦理批准获得相关机构审查委员会(科钦皇家港口医院和Necker-Enfants病医院,巴黎,法国)。由所有参与者签署书面知情同意。
呼吸表型
课题以哮喘被定义为一个肯定的答复:“你曾经呼吸急促喘息休息?”,或者“你曾经有哮喘吗?”,或如果他们被招募为哮喘病例在第一次调查。
过敏敏化作用被定义为一个积极的皮肤针刺试验(SPT +)平均鞭痕直径≥3毫米的消极控制至少一个12高空过敏症(室内:猫,Dermatophagoides pteronyssinus,自然状态下;户外:橄榄、桦木、Parieteria犹太文物猫尾草,Cupressus和豚草花粉;和模具:曲霉属真菌,枝孢属herbarum和链格孢属清塞音)。受试者分为敏感,如果他们有一个或多个SPT +。当前的鼻炎是由积极回答的两个问题:“你曾经有鼻炎吗?”或者“你过花粉热吗?”和积极的回答“你有打喷嚏或流鼻涕问题在过去的12个月?“过敏性鼻炎被定义为当前鼻炎和一个或多个SPT +。在三组受试者也归类为non-sensitised(没有SPT +),只敏感(一个或多个SPT +和目前没有鼻炎),有过敏性鼻炎(一个或多个SPT +和当前鼻炎)。
嗜酸性粒细胞被定义为嗜酸性粒细胞计数≥5%。细节在其他表型在补充数据。
生物表型
EBC收集RTubeTM(呼吸研究Inc .夏洛茨维尔,弗吉尼亚州,美国)根据一个标准化的方法。短暂,RTube和去离子水冲洗,彻底干燥。参与者呼吸口头潮汐卷成一个喉舌附加到冷冷凝器(−20°C)。他们坐在舒适的头枕。头部和背部的座位都是微微倾斜着呼吸演习期间避免任何唾液污染(见补充数据的更多细节)。
总nitrite-nitrate(不2−/不3−)水平测定血浆和EBC如前所述23]。所有测量都是在重复完成。分析intra-run不精确是低于3%。测量变异系数> 15%和极端异常值(n = 7)被排除在分析(见补充数据的更多细节)。
的测量F伊诺之前意识到其他肺功能测试根据美国胸科学会/欧洲呼吸学会建议(见补充数据)。188bet官网地址执行测量只在三个五中心参与EGEA研究,这在很大程度上解释了磨损的数字对象包含在分析总数相比。F伊诺水准测量在50毫升·s−1流量(如前所述)(22]。
统计方法
联合分布的哮喘,SPT +和当前鼻炎了维恩图(图1)。总等离子体和EBC没有2−/不3−和F伊诺水平的日志10转换结果的偏态分布。
也作为EGEA研究的一部分,我们先前报道,等离子体2−/不3−水平增加绿叶蔬菜消费和减少吸烟者和储存时间,EBC没有2−/不3−水平下降与接触吸烟者和周围的臭氧浓度(23),F伊诺水平与季节有关的检查(22]。此外,存储时间和考试的季节随中心。因此,估计调整为:1)年龄、性别、吸烟、绿叶蔬菜消费和等离子体中心2−/不3−;2)年龄、性别、吸烟、环境臭氧浓度和EBC没有中心2−/不3−;和3)年龄、性别、身高、吸烟和中心F伊诺。因为氮的氧化物的比例高(没有x,包括没有2−也没有3−)据报道,没有被N比每个单独测量信息guyenet al。(13(没有)2−+没有3−)/不比率(没有x/不比率)也被研究过。
吸入激素(ICS)使用可以减少F伊诺水平,没有2−/不3−和F伊诺生物标志物参与相同的通路,ICS使用与EBC没有2−/不3−水平进行了研究。因为增加的体重指数(BMI) /肥胖已经降低F伊诺水平,估计也调整的BMI作为敏感性分析。
总没有关系2−/不3−的水平,F伊诺水平,没有x比例(不2−+没有3−)/没有和哮喘表型,过敏敏化作用和当前鼻炎与线性回归模型估计。参数估计进行了评估采用广义估计方程(天),与一个可交换的相关工作在家庭占潜在的聚类(SAS混合过程)。统计显著性水平被设定为α= 0.05。双面的假定值报告协会估计。都进行了分析使用SAS软件,版本9.3 (SAS研究所有限公司、卡里、数控、美国)。
结果
523名成年人的特点归纳了他们的哮喘状况表1。正如所料,主题与嗜酸性粒细胞哮喘有显著较高的FEV低1%预测,更多的支气管hyper-responsiveness (BHR), SPT +,和经常报告当前的鼻炎,比科目没有哮喘。在调整年龄、性别和吸烟,下面的嗜酸性粒细胞哮喘和之间的关联(或3.12,95%可信区间1.72 - -5.66),FEV1(平均±sd107.7±10.5与97.5±11.0% pred), BHR(或4.18,95%可信区间2.66 - -6.57),SPT +(-7.72或5.07,95% CI 3.32)和当前鼻炎(-6.85或4.62,95% CI 3.11)被证实(p < 0.0005)。嗜酸性粒细胞计数,IgE和F伊诺水平与哮喘受试者明显高于那些没有(p < 0.0001)。EBC没有2−/不3−水平无关ICS使用(数据没有显示,p = 0.5)。
成对EBC没有之间的联系2−/不3−,F伊诺水平和血液嗜酸性粒细胞计数
EBC没有2−/不3−水平与嗜酸性粒细胞计数,而F伊诺水平在所有科目与嗜酸性粒细胞呈正相关,在non-sensitised和敏感主题(表2)。在敏感话题,EBC没有2−/不3−呈正相关,F伊诺的水平。
中位数(范围)F伊诺人群中值为15.6磅(2.4 - -99.0)。分层显示根据这个值EBC没有积极和重要的关联2−/不3−在学科水平和过敏敏化作用高于中位数只有(2.66 (2.06 - -3.43)与1.64(1.18 - -2.28)μmol每毫克蛋白,p = 0.01和2.03 (1.52 - -2.71)与1.76(1.30 - -2.38)μmol每毫克蛋白,p = 0.4,在对象之上和之下的中值,分别)。
等离子体和EBC没有2−/不3−,F伊诺水平和哮喘和哮喘相关的表型
等离子体和EBC没有2−/不3−当前水平与哮喘,哮喘症状评分,哮喘控制(数据没有显示,所有p > 0.3)。此外,等离子体不2−/不3−水平与过敏敏化作用和当前鼻炎无关。
等离子体和EBC没有2−/不3−水平与嗜酸性哮喘和哮喘发病年龄(表3)。正如预期的那样,一个积极的和重要的协会之间的观察F伊诺水平和嗜酸性哮喘(表3),但没有观察到其他重要的协会。
EBC没有2−/不3−和F伊诺水平,没有x/不比和过敏敏化作用
积极的协会在边缘之间观察到EBC没有意义2−/不3−水平和SPT + (表4)。协变量在模型中进行调整,包括哮喘,EBC没有2−/不3−正与SPT +显著相关水平,观察和积极的协会在临界意义与当前鼻炎。此外,积极和逐渐增加的EBC没有2−/不3−水平与定量观察SPT评分(SPTQ)在补充数据(图S1),当对象被划分在以下组:没有SPT +, SPT +, SPT +和当前鼻炎(表4和图2)。中位数(范围)EBC没有2- - - - - -/不3- - - - - -价值在我们的人口是2.35(1.14 - -4.9)μmol每毫克蛋白(表1)。分层显示根据这个值正向且显著高于中值和1)之间的关联过敏敏化作用(或1.92,95%可信区间1.25 - -2.97,p = 0.003), 2)当前鼻炎(或1.52,95%可信区间1.01 - -2.28,p = 0.04),和3)SPT +只或两个SPT +和当前的鼻炎与没有SPT +(或1.64,95%可信区间1.01 - -2.66,p = 0.04或2.16,95%可信区间1.29 - -3.59,p = 0.003,分别)哎呀回归模型与调整年龄、性别、吸烟、环境臭氧浓度、哮喘和中心。
类似于EBC没有2−/不3−,F伊诺水平也是正相关的过敏敏化作用表示为SPT + (表4),逐步增加与SPTQ(图S1)和过敏敏化作用和当前鼻炎。F伊诺也显著,与当前的鼻炎呈正相关。之间的关联F伊诺水平和SPT +,和当前的鼻炎被证实当BMI,而不是高度添加作为协变量模型(数据未显示)。
无显著关联(没有之间的观察2−+没有3−)/不比率(没有x/不比率)和SPT +当前鼻炎或两者(表4和图2)。在分析SPT +室内、户外或模具单独过敏原,EBC没有2−/不3−水平显示积极和显著的关联与敏化作用模具过敏原F伊诺水平呈正相关的室内过敏原(表4)。
讨论
本研究进行大样本的成年人与一个精确的表型描述显示,第一次的协会的异同F伊诺和EBC没有2−/不3−水平与哮喘、过敏敏化作用和鼻炎。结果显示EBC不高2−/不3−和F伊诺水平受试者过敏敏化作用,与当前鼻炎,特别是当存在。只有F伊诺水平被发现患有哮喘。EBC没有2−/不3−和F伊诺水平呈正相关敏感话题,EBC没有2−/不3−水平被发现在较高的受试者与过敏敏化作用有关F伊诺水平。
523名受试者的选择包括在当前分析是首先由随机的可用性F伊诺测量三个五参与中心(22的可用性),其次感兴趣的其他变量。哮喘的定义是非常精确的在我们的研究中,由于哮喘病例在胸部诊所招募,并成立了一个过程包括真正的哮喘患者,导致假阳性的风险非常有限。BHR患病率,衡量一个醋甲胆碱挑战测试在无哮喘者相当高。一个可能的解释是,一些科目没有哮喘一级亲属的哮喘病例。然而,这个结果是一致的相对相当数量的无症状与BHR在横断面流行病学研究报告主题,从62.4%至19.3不等。主题包含在分析EBC没有较高2−/不3−和F伊诺水平比非选择性的主题。其他当前研究的局限性是那些通常与横截面数据的分析。
我们之间没有联系2−/不3−水平测量等离子体和任何疾病表型。我们之前报道,等离子体和EBC没有2−/不3−水平(没有联系18]。没有很复杂的新陈代谢,和生产的2−/不3−在等离子体与EBC由于其上。在等离子体2−/不3−生产来自多个来源,如细菌,酶法生产和食物来源(24]。EBC电离不3−也没有2−(不稳定)可能出现后,从没有与氧气反应(25)或从激活免疫细胞在肺部的排液26]。总的来说,没有的特异性代谢在等离子体和EBC可以部分解释缺乏与等离子体的任何临床表型。我们的结果与V的假设相一致illanueva和Giulivi(19),因为没有更好的区域化生产在病理生理学解释其不同的功能和作用。
没有发现协会之间完全没有2−/不3−水平EBC和哮喘表型,以前在其他研究报告(8,14]。与我们的结果相反,总没有其他的研究报道2−/不3−水平相比,哮喘患者EBC中提升健康不吸烟的科目(17),健康nonatopic控制(5)或控件(9]。这些相互矛盾的结果可能是由于数量非常小的对象包含在这些研究中,用于测量的各种方法2−也没有3−水平,参照群体的比较和其他的选择差异如表型相关定义。旁边,信息没有过敏敏化作用或受试者被定义为哮喘患者如果他们都哮喘和过敏,建议增加2−/不3−水平可能比哮喘与过敏。此外,这些先前的研究已经表达了没有2−/不3−除以数量的蛋白质水平。据克艾斯和Wirtz(27),总蛋白的测定EBC确认是重要的蛋白质和肽标记之间的比较研究。他们应该被执行除了特定的标记研究,和我们之前发现没有2−/不3−EBC呈正相关的蛋白浓度的水平在我们的研究(28]。
在文献中报道(4,29日),积极的关系F伊诺水平和哮喘,过敏敏化作用,和当前鼻炎在这项研究中被发现。据我们所知,我们的研究报告首次联系的异同F伊诺和呼出的气息凝结2−/不3−水平与哮喘、过敏敏化作用和当前鼻炎。我们发现积极的EBC没有之间的关联2−/不3−和F伊诺水平的敏感话题,EBC没有之间2−/不3−水平较高的受试者的过敏敏化作用F伊诺的水平。EBC不一致,我们发现2−/不3−和F伊诺水平增加过敏敏化作用,SPT的数量+,逐渐敏感话题之间的关系观察只和那些过敏敏化作用和鼻炎。立即实用性不能推断出的结果在这个流行病学研究的框架,但总的来说,我们的研究结果表明,EBC没有2−/不3−和F伊诺水平可能被视为生物标记的过敏敏化作用强度和鼻炎。纵向研究也需要更好地理解这些生物标记物的作用,符合的想法的一部分包括氧化和nitrosative“过敏进行曲”过程。
通过考虑EBC没有2−/不3−和F伊诺水平而不是每个孤独,我们的研究结果提供了互补的有趣的信息。更进一步,我们还研究了之间的关系x(没有2−+没有3−)/没有比和过敏敏化作用。不幸的是,这个比例并不比考虑测量EBC没有信息2−/不3−一个人。与我们的结果,也包括年代-nitrosothiols(没有2−+没有3−+年代-nitrosothiols) /不,发现更好的评估炎症在哮喘病例对照研究(13比单独每个氧化氮的测定。这种差异可能部分解释的结果缺乏测量年代-nitrosothiols在我们的研究中,我们研究了过敏敏化作用,而不是炎症,和/或通过不同的研究设计。
总的来说,即使我们的结果需要被复制,他们可能会建议一个角色nitrate-nitrite-NO通路的过敏敏化作用。我们建议接触过敏原产生吸收和诉讼,树突状细胞诱导Th2细胞敏感个体的发展。最近的证据表明,气道上皮也扮演着重要的角色在过敏性气道反应释放白介素(IL) -25年,IL-33和胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)激活树突状细胞,嗜碱性粒细胞,嗜酸性粒细胞和Th2细胞(30.,31日]。TSLP, IL-25 IL-33促进嗜酸性粒细胞诱导气道粘膜的IL-5生产。嗜酸性气道炎症可能会增加不集中,随后产生的形成不2−,没有3−和活性氮物种EBC。
结果在本研究报告强调没有代谢的复杂性。最初考虑完全惰性,现在明显,硝酸盐和亚硝酸盐是生理循环血液和组织形式没有和其他生物活性氮氧化合物(2]。他们可能被视为存储池不是生物活性,从而补充了没有synthase-dependent通路。没有和相关化合物是由各种各样的住宅和呼吸道炎症细胞(32]。过敏原,树突细胞和气道上皮细胞受到刺激,并释放各种细胞因子激活树突状细胞,嗜碱粒细胞,肥大细胞,嗜酸性粒细胞和Th2细胞,导致嗜酸性粒细胞活化和增殖33]。我们先前报道,F伊诺水平与血嗜酸性粒细胞计数呈正相关(18),还有在体外证据表明,人类血液嗜酸性粒细胞产生没有和参与的监管没有池在肺组织中(34,35]。此外,没有调节的Th1 / Th2平衡有利于Th2反应和IL-5生产,因此招聘嗜酸性粒细胞进入航空公司。然而,即使EBC没有2−/不3−水平可以被视为一个潜在的生物标记过敏在我们的研究中,其具体的作用仍然是未知的,和机械的研究是必需的。通过本研究的结果建议,和报道Erzurum和G阿斯顿(36],nitrate-nitrite-NO途径的复杂性提供了证据,更有针对性的生物标记需要加入全球计划,以帮助我们确定一个类型的响应或表型对于给定的病人,需要多种因素的集成在系统生物学的方法。也需要进一步的研究来更好的研究协会我们观察到在这个流行病学研究,以及潜在的实用价值的结果。
总之,我们首次报告在一个大型的流行病学研究,总没有2−/不3−和F伊诺水平EBC与过敏敏化作用有关,鼻炎。nitrate-nitrite-NO通路的作用在“过敏”3月在纵向研究需要进一步调查。然而,相反已被证明F伊诺,我们没有发现一个协会的生物标志物与临床表型的哮喘。研究这两个F伊诺和EBC没有2- - - - - -/不3- - - - - -可能有助于解决之间的关联没有新陈代谢和哮喘,过敏敏化作用和鼻炎。
确认
作者感谢所有那些参与学习和各方面的考试,和所有那些监督研究中心。作者感谢三CIC-Inserm单位内克尔,格勒诺布尔和马赛支持这项研究,受试者被检查。他们也感谢三起生物里尔(CIC-Inserm),埃夫里市(中心国家德Genotypage)和Annemasse (Etablissement法语杜唱)生物样品存储的地方。感谢所有的人参加,没有他们的研究是不可能的。
EGEA合作小组的成员如下。协调:诉Siroux(流行病学、自2013年以来的首席研究员),f . Demenais(遗传学),即销(临床方面),r . Nadif(生物学)和f·考夫曼(1992 - 2012)首席研究员。呼吸病学:Inserm U 700年,巴黎:m . Korobaeff (Egea1)和f·巴斯坦·努克可荣获(Egea1);Inserm U 707年,巴黎:即Annesi-Maesano (Egea1-2);Inserm CESP / U 1018年,瑟:f·考夫曼,n . Le Moual r . Nadif议员Oryszczyn (Egea1-2)和r . Varraso;Inserm U 823,格勒诺布尔:诉Siroux。遗传学:Inserm U 393年,巴黎:j·法因戈尔德;Inserm U 946年,巴黎:e . Bouzigon f . Demenais和M.H. Dizier;CNG,埃夫里市:即肠道(西班牙巴塞罗那现在CNAG)和m .莱斯罗普(现在麦吉尔大学蒙特利尔、QC、加拿大)。临床中心:格勒诺布尔:即销和c .第一道; Lyon: D. Ecochard (Egea1), F. Gormand and Y. Pacheco; Marseille: D. Charpin (Egea1) and D. Vervloet (Egea1-2); Montpellier: J. Bousquet; Paris Cochin: A. Lockhart (Egea1) and R. Matran (now in Lille); Paris Necker: E. Paty (Egea1-2) and P. Scheinmann (Egea1-2); Paris-Trousseau: A. Grimfeld (Egea1-2) and J. Just. Data and quality management: Inserm ex-U155 (Egea1): J Hochez; Inserm CESP/U 1018, Villejuif: N. Le Moual; Inserm ex-U780: C. Ravault (Egea1-2); Inserm ex-U794: N. Chateigner (Egea1-2); Grenoble: J. Quentin-Ferran (Egea1-2).
脚注
可以从本文的补充材料www.qdcxjkg.com
支持声明:研究资助部分由PHRC-Paris PHRC-Grenoble, ANR 05 - s - 020 02/05 - 9 - 97, ANR-06-CEBS, ANR - ces - 2009,地区北部加莱海峡,默克夏普和Dohme (MSD),和GA2LEN项目,全球过敏和哮喘的欧洲网络。
利益冲突:披露可以找到与本文的在线版本www.qdcxjkg.com
- 收到了2013年11月19日。
- 接受2014年2月28日。
- ©2014人队