我们感谢Dittmayer和劳厄给我们机会澄清问题的识别冠状病毒(CV)粒子通过电子显微镜(EM)在我们最近的出版物1]。我们想对作者的语句,如下:
有一个重要的新兴市场20多年的经验,我们深知所有细胞细胞器的超微结构特征及其潜在变形工件和病毒的超微结构特征,其中包括冠状病毒在受感染的细胞和组织都进行了广泛的描述(2- - - - - -5]。
有关实验方法是在我们的调查1),组织样本选择性删除申请EM,苏木精和伊红染色部分的指导下,从formalin-fixed石蜡包埋(FFPE)尸检肺组织块。随后,他们deparaffinized re-embedded根据标准EM环氧树脂的过程。实际上,组织的超微结构特征没有保存完好,预见,由于组织样本进行了嵌入的过程在deparaffinization石蜡和额外的治疗,脱水,渗透,最后re-embedding在环氧树脂2]。超微结构的另一个事实影响适当的评价功能在当前设置源于有限的可用性和稀薄的检测石蜡包埋COVID-19肺尸检,并nοt不允许重复的过程中,经常发生在新兴市场,还是直接嵌入在环氧树脂的尸检材料。
在这种背景下,简历粒子的超微结构也可能受到影响,不得透露所有的形态学特征,也得到布洛克的支持et al。2021年,Krasemann等。2022(预印本版本)。在我们的研究中,图1 c(iv)和(v),简历粒子,邻近的内质网(ER)在液泡中,分别有部分可见生物膜,而周围的绒毛是明显的在所有简历粒子(图1 civ-vi)暗示膜粒或峰值。实际上,峰值更形象化的薄切片为EM当福尔马林或戊二醛固定的组织全体染色与丹宁酸和醋酸双氧铀先于组织嵌入在环氧树脂2,6]。此外,毫无疑问,简历粒子绝对是位于邻近的ER (图1 c(四)和空泡(图1 cv, vi)虽然不保留超微结构,它们不是误解与其他人为改变结构,如线粒体肿胀或恶化多泡体,例如明显图1 c(v)高于泡粒子有两个简历。Α不满足的标准描述细胞的存在众多,同样形状的简历粒子(2,6]。然而,这可能是由于低病毒载量的特定的细胞。根据Krasemann等。2022(预印本版本),在SARS-CoV-2感染2型pneumocytes formalin-fixed尸检肺为EM(但不是deparaffinized)加工,广泛的细胞内病毒负荷观察每个分段单元概要(范围:4 - 620细胞内颗粒),“呈现巨大的差异在粒子检测”的可能性。在我们的研究中,特定的细胞被选为了描述对应的划分在半薄部分细胞(图1 c额外的考试后我)。在另一个at₂感染细胞相同的样本,同样形状的简历粒子分为囊泡,相邻细胞表面,被确定(图1)。他们满足所有的超微结构的标准deparaffinized EM和再加工组织,如电子致密的外表,部分可见生物膜(图1箭头),表面在其中的一些预测(图1箭头),呈现他们的身份无可争辩的。
然而,研究Evangelou的主要信息等。(1]SARS-CoV-2-induced细胞衰老相关的炎性表型COVID-19疾病结果和病毒突变。使用EM是一个冗余的实验方法进行了补充SARS-CoV-2检测的主要方法与前景识别简历粒子,尽管被认为是技术上的限制。科学概念的有效性已被广泛证实的实验水平,与分子(rt - pcr),原位(免疫组织化学)和在体外化验(维洛细胞和alveospheres感染),提供整体的新颖见解底层细胞机制发生在COVID-19疾病。在我们看来,我们的工作应该在后者被认为概念棱镜。
脚注
利益冲突:PB接收研究经费从阿斯利康和勃林格殷格翰集团和阿斯利康的科学顾问,勃林格殷格翰的发言,Epi-Endo,诺华,地区和梯瓦。其他作者希望宣布无利益冲突。
- 收到了2022年2月4日。
- 接受2022年4月13日。
- 版权©2022年作者。
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