摘要
氰化氢产生氰化物金黄色葡萄球菌和在活的有机体内并不是唯一的生物标志物铜绿假单胞菌http:///wly/4nsh7y.
编辑器:
早期发现铜绿假单胞菌在囊性纤维化(CF)患者中至关重要,因为在后期的根除是极其困难的[1].到目前为止,一直认为氰化氢(HCN)可以被认为是一种特异性的生物标志物铜绿假单胞菌呼出的气[2- - - - - -5].只有伯克不过也会产生HCN在体外[6,7]但HCN不是生物标志物不过复杂的感染在活的有机体内[8].据我们所知,缺乏HCN不是由其他病原体产生的实际证据。研究了HCN的排放金黄色葡萄球菌,是整个儿童时期主要的CF病原体,但却非常有限。在一份单一的报告中,有5种菌株被证明产生低值在体外[9),而在活的有机体内研究尚未报告。
因此,我们通过临床实时测量HCN的产生S.金黄色葡萄球菌隔离在体外和呼出的呼吸中的HCN水平S.金黄色葡萄球菌- 与无感染的CF患者相比,与无感染的CF患者相比,以及健康人作为对照。此外,我们调查了吗?S.金黄色葡萄球菌从呼吸中检测到HCN的患者身上培养的菌株能够产生HCN。
五个临床分离株S.金黄色葡萄球菌将CF患者的痰液以初始浓度5×10接种到50 ml脑心汤中6CFU·毫升-1.用于分析细菌顶空(三次)和测定生长曲线的装置已在前面描述。
CF患者(年龄≥6岁)分别从荷兰奈梅亨大学医学中心(Radboud University Medical Center)和荷兰鹿特丹伊拉斯谟医学中心(Erasmus Medical Center)门诊招募。本研究得到了当地医学伦理委员会(CMO - Nijmegen/Arnhem)的批准,放弃了书面知情同意。年龄≥12岁的参与者和6-18岁儿童的父母获得了口头同意。
我们包括非吸烟、感染和非感染CF患者以及健康对照组。感染定义为培养S. aureus,P. eruginosa或者不过在呼吸当天的痰液中,或在前12个月内在呼吸日或> 50%的痰样品(最少四个样品)。没有感染被定义为没有S. aureus,P. eruginosa或者不过在过去12个月的痰样本(至少4个样本)中。痰标本作为常规临床护理的一部分。在取样前,所有的参与者都用水漱口。每个受试者提供两个单口呼出的呼气样本,分别收集在3-L Tedlar袋(ProCare b.v., Groningen, Netherlands)中,流速为300 mL·s−1使用呼吸取样器(Loccioni, Angeli di Rosora,意大利)[10.].简而言之,参与者通过细菌过滤器(空气安全有限公司,墨西哥,英国)和一个连接到CO的不可释放的T型(REARURA,CA)和不可释放的T型件(REAMUPED,VENTURA,CA)呼出2传感器和校准缓冲管。从总呼出中,丢弃死腔空气(150 mL),其余部分收集在采样袋中。呼气样品间隔90秒采集,并在分析前最多保存8小时。如前所述,使用基于激光的光声光谱对呼吸中的HCN进行量化[8,11.].呼出的HCN水平被标准化为呼吸公司2分析时考虑浓度和平均值。
验证特定的S.金黄色葡萄球菌随机选择的菌株S.金黄色葡萄球菌- 在呼吸中检测到HCN的患者能够生产HCN,我们测量了从这五个培养的氢汞生产S.金黄色葡萄球菌菌株。该菌株从呼吸采样当天采集的痰液中分离。HCN的总生产量在体外30 h以上与相应患者的呼吸水平进行比较。
全部S.金黄色葡萄球菌临床分离株在体外产生HCN,尽管不同菌株的产生水平不同(图1一个).产菌时间约为3 h, 6 ~ 7 h达到最大值,接种后24 ~ 30 h向检出限下降。绝对产量范围为(平均值±SD.) 45.8±37.4 nmol(分离株3)~ 994.2±807.0 nmol(分离株2)大于30 h。
万物的成长S.金黄色葡萄球菌从接种开始对菌株进行48 h的监测(数据未显示)。所有菌株在固定相中浓度相当(108-10年9CFU·毫升−1).接种后,临床分离物1,2和3在16小时内达到固定相,而第4和5次增长较慢,大约20小时后达到固定相。
我们纳入17例CF患者S.金黄色葡萄球菌(10S.金黄色葡萄球菌在痰液中进行呼吸采样和7日用S.金黄色葡萄球菌在> 50%的痰样品中,中位数(赤脚放位范围(IQR))年龄15(11-31.5)岁),并获得八个CF患者的组合组S.金黄色葡萄球菌感染组和12名健康对照组(IQR年龄中位数为24(21-28)岁)。呼出HCN水平S.金黄色葡萄球菌与未感染的CF患者和健康对照组联合组(中位数(IQR)38.0(25.9-71.3)(25.9-71.3)相比,感染的CF患者显着高得多。与21.9 (6.8 - -32.8) pmol·毫升−1有限公司2, p = 0.01)。与健康对照组相比,未感染CF患者呼吸中的HCN水平没有统计学差异(中位数(IQR) 21.7(7.0-48.6))。与19.6 (3.4 - -30.7) pmol·毫升−1有限公司2,p = 0.85)。
HCN的生产水平S.金黄色葡萄球菌呼吸采样当日痰中分离出的HCN菌株高于呼吸采样当日痰中分离出的HCN菌株,二者呈正相关(Spearman r=0.97) (图1 b).
本研究表明HCN是由金黄色葡萄球菌并且存在于呼出的呼吸中S.金黄色葡萄球菌受感染的CF患者。Gilchristet al。[9]培养了五种S.金黄色葡萄球菌在血液琼脂上,在24,48,72和96小时的情况下报道1-6百卢比的HCN浓度为1-6余量,与我们研究中测量的那些较低。应变,培养方法(浮游生物)的变化与生物膜条件),培养基(脑心输注与(血琼脂)或取样时间可能是造成这些差异的原因。通过对比HCN的生产动态和细菌的生长曲线可以得出S.金黄色葡萄球菌开始在指数增长阶段产生HCN并在菌株之间变化。HCN是一种富有毒的化合物,众所周知,抑制细胞呼吸[12.].我们推测绝对产量的差异可能导致了它们之间的毒力差异S.金黄色葡萄球菌菌株,因为HCN与肺损伤、肺功能受损有关[13.和CF中宿主反应有效性的降低[11.].因此,HCN水平升高的患者可能会受益于早期CF肺病中的侵袭性抗生素治疗。HCN水平S.金黄色葡萄球菌感染患者明显高于非感染患者和健康对照组的联合组。相关的HCN水平在体外在呼吸中表明HCN水平来源于呼吸S.金黄色葡萄球菌肺部感染。
我们的结果表明呼出气体中的HCN并不是唯一的生物标志物铜绿假单胞菌感染,这是一个重大缺陷,在试图开发一种专门的诊断工具,以早期发现铜绿假单胞菌CF患者。
脚注
支持声明:由Longfonds资助(项目第3.3.11.002项目)。本文的资助信息已存入开放式资助服务员注册表.
利益冲突:无声明。
- 已收到2015年12月11日。
- 接受2016年4月25日。
- 版权所有©2016