文摘gydF4y2Ba
食用油烟雾(咖啡)是已知与呼吸道疾病和肺癌的风险。的参与gydF4y2Ba反式gydF4y2Ba,gydF4y2Ba反式gydF4y2Ba2、4-decadienal (gydF4y2BattgydF4y2Badde),咖啡的主要成分,是可疑的。gydF4y2Ba
男性cd -®(ICR)小鼠气管内的灌输与8或24 mg·公斤gydF4y2Ba−1gydF4y2BattgydF4y2Badde每周8周。总数量和类型的细胞在支气管肺泡灌洗液(BALF),以及病理变化,和炎症基因调节肺组织的评估。gydF4y2Ba
我们表明,BALF中肺泡巨噬细胞的数量明显增加gydF4y2BattgydF4y2Ba-DDE-exposed动物。组织学检查,dose-correlated增加在支气管肺泡上皮增生和肉芽肿结节连接(BAJ)。尽管克拉拉和肺泡II型BAJ病变细胞存在,只有积极克拉拉细胞增殖。然而,只有肺泡II型细胞被发现在BAJ肉芽肿结节。加强积累磷酸化信号传感器和转录激活3 (pSTAT3),一个已知pro-carcinogenic因素,也发现在许多BAJ损伤肺泡II型细胞。gydF4y2Ba
既是BAJ增生和增强pSTAT3积累已知风险因素与肺腺癌发展增加有关,这些发现表明,gydF4y2BattgydF4y2Badde可能造成肺部致癌的风险。gydF4y2Ba
- 支气管肺泡连接gydF4y2Ba
- 食用油烟雾gydF4y2Ba
- 肺腺癌gydF4y2Ba
- 信号传感器和转录激活3,gydF4y2Ba反式gydF4y2Ba,gydF4y2Ba反式gydF4y2Ba2gydF4y2Ba
- 4-decadienalgydF4y2Ba
肺癌是全世界癌症死亡的主要原因gydF4y2Ba1gydF4y2Ba。尽管吸烟是肺癌的主要危险因素gydF4y2Ba2gydF4y2Ba,在不吸烟的女性肺腺癌的发病率非常高在中国的人口gydF4y2Ba3gydF4y2Ba。最近的流行病学研究表明,暴露在食用油烟雾(咖啡)与中国女性肺腺癌密切相关,香港、新加坡和台湾gydF4y2Ba4gydF4y2Ba,gydF4y2Ba5gydF4y2Ba。加热后,食用油发生热氧化分解为醛生产。诱变增加尿液中代谢物和增强细胞增殖异常(增生)已报告在食管的老鼠暴露在油加热gydF4y2Ba6gydF4y2Ba。除了不吸烟与肺癌的关系在亚洲女性gydF4y2Ba4gydF4y2Ba,gydF4y2Ba5gydF4y2Ba咖啡暴露也被报道与各种呼吸道疾病有关厨房工作人员在挪威gydF4y2Ba7gydF4y2Ba强烈建议一个潜在的人类接触咖啡和呼吸道疾病之间的联系。gydF4y2Ba
咖啡是一个复杂的化学物质的混合物,食用油中脂肪酸,尤其是多不饱和脂肪酸,容易产生醛在加热分解或氧化gydF4y2Ba8gydF4y2Ba。在这些醛,gydF4y2Ba反式gydF4y2Ba,gydF4y2Ba反式gydF4y2Ba2、4-decadienal (gydF4y2BattgydF4y2Badde)是最丰富的和细胞毒性gydF4y2Ba8gydF4y2Ba。gydF4y2BattgydF4y2Badde dienaldehyde容易加热油中发现gydF4y2Ba8gydF4y2Ba和储存食品gydF4y2Ba9gydF4y2Ba,以及餐厅和厨房排放gydF4y2Ba10gydF4y2Ba。最近报道的gydF4y2BattgydF4y2Badde在咖啡浓度非常高:超过100倍高于多环芳烃gydF4y2Ba11gydF4y2Ba。类似于接触的结果gydF4y2Baet al。gydF4y2Ba6gydF4y2Ba,氧化油诱导大鼠食管上皮增生,一项由美国国家毒理学计划NIEHS还演示了病理细胞生长(上皮增生)在大鼠胃当这些动物长期喂食了gydF4y2BattgydF4y2BaddegydF4y2Ba12gydF4y2Ba。因此,潜在的致癌性gydF4y2BattgydF4y2Badde高度怀疑。的丰度gydF4y2BattgydF4y2Badde在咖啡和其潜在的协会在人类肺癌的副作用gydF4y2BattgydF4y2Badde在肺组织或细胞,gydF4y2Ba在活的有机体内gydF4y2Ba,配上具体的调查。gydF4y2Ba
ttgydF4y2Badde报道与小牛胸腺DNA,诱导DNA断裂和损害赔偿金gydF4y2Ba13gydF4y2Ba。它也被报道说gydF4y2BattgydF4y2Badde诱导A549细胞氧化应激和基因毒性(一个人肺癌细胞株)gydF4y2Ba14gydF4y2Ba。在先前的研究中,我们报告说gydF4y2BattgydF4y2Badde暴露增加细胞增殖,表达和释放促炎细胞因子如白细胞介素(IL) 1β和肿瘤坏死factor-α,p27在人类支气管上皮细胞的减少BEAS-2BgydF4y2Ba15gydF4y2Ba,gydF4y2Ba16gydF4y2Ba。我们目前的研究目的是评估和组织病理影响改变引起的肺组织gydF4y2BattgydF4y2BaddegydF4y2Ba在活的有机体内gydF4y2Ba。我们相信,这样的gydF4y2Ba在活的有机体内gydF4y2Ba信息缺乏和是非常必要的。我们进一步认为,这些信息肯定会有助于理解的作用gydF4y2BattgydF4y2Badde的感应肺部致癌作用。gydF4y2Ba
材料和方法gydF4y2Ba
动物研究方案和设计gydF4y2Ba
在这项研究中,54流行男性cd -®(ICR)小鼠(美国查尔斯河实验室,威尔明顿DE)小鼠使用。所有动物都从BioLASCO购买(台湾)和动物设施中心被安置在台湾国立卫生研究院按照标准和批准协议的机构(23±1°C, 39 - 43%相对湿度;水和食物gydF4y2Ba随意gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba
ICR小鼠被用于这项研究,因为一般肺状态的信息(解剖学、组织学和病理学)gydF4y2Ba17gydF4y2Ba,我们有经验使用这种鼠标。在目前的研究中,老鼠被分为三组:21汽车组的小鼠(控制),在低剂量10 (8 mg·公斤gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba体重gydF4y2BattgydF4y2Ba在高剂量组(dde)和23 24 mg·kggydF4y2Ba−1gydF4y2Ba体重gydF4y2BattgydF4y2Badde)。在对照组小鼠气管内的灌输与50μL汽车解决方案,这是准备7.5% v / v tricaprylin(σ化学,圣路易斯,密苏里州,美国)溶解在0.9%氯化钠。老鼠的gydF4y2BattgydF4y2Ba-DDE-exposed组气管内的灌输与8或24 mg·公斤gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba体重gydF4y2BattgydF4y2Ba异氟烷麻醉下dde每周为8周。gydF4y2Ba
工作的剂量方案的选择对我们的研究是基于之前的剂量反应研究。≤24毫克的剂量·公斤gydF4y2Ba−1gydF4y2BattgydF4y2Badde被发现是相对安全的ICR小鼠8周期间曝光。所有动物存活较健康良好的身体相比,体重控制。本研究暴露的持续时间对我们是按照我们之前的决定gydF4y2Ba在体外gydF4y2Ba研究持续了∼8周gydF4y2Ba15gydF4y2Ba,gydF4y2Ba16gydF4y2Ba。在目前的gydF4y2Ba在活的有机体内gydF4y2Ba研究中,我们旨在揭露的动物大约相同的持续时间来比较gydF4y2Ba在体外gydF4y2Ba和gydF4y2Ba在活的有机体内gydF4y2Ba研究,如果需要的话。以确保最终的生物有效剂量,1星期后最终会献祭动物气管内的管理实验(第九周)。整个实验设计和治疗方案如图1所示gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
准备和评估的支气管肺泡灌洗液体和尸体剖检标本gydF4y2Ba
动物被牺牲了gydF4y2Ba通过gydF4y2Ba异氟烷吸入,以确保没有不必要的痛苦。在验尸,整个肺解剖手术和与1毫升生理盐水灌洗。恢复的lavagate被记录下来,保存在单独的标签瓶。gydF4y2Ba
评估引起的肺组织炎症反应gydF4y2BattgydF4y2Badde治疗,总支气管肺泡灌洗液中细胞数量和细胞类型(BALF)动物测定细胞计数器(美国库尔特Inc .、迈阿密、FL)。BALF cytospun在450×gydF4y2BaggydF4y2Ba15分钟使用Shandon Cytospin 4(热科学、沃尔瑟姆,妈,美国)。cytospin涂片随后准备了,刘翔的染色(Tonyar生物技术,道元,台湾)进行区分不同的细胞类型。BALF细胞被分为两大类:上皮细胞和白细胞(包括巨噬细胞、中性粒细胞和淋巴细胞)。细胞学是单独评估,取得了由两个独立的病理学家。数据呈现代表的意思是两个生长残痕。gydF4y2Ba
测量了二硫化谷胱甘肽,谷胱甘肽在小鼠肺gydF4y2Ba
谷胱甘肽(GSH)与o-phthalaldehyde量化反应,产生了与激发和发射荧光产品365和430海里,分别gydF4y2Ba18gydF4y2Ba。简而言之,肺组织是单一化与均化缓冲(154毫米氯化钾,5毫米diethylenetriaminepentaacteic酸和磷酸钾缓冲0.1米,pH值6.8),稀释与相同体积的氧化还原淬火缓冲区(10%三氯乙酸,盐酸40毫米,10毫米diethylenetriaminepentaacteic酸和抗坏血酸)20毫米和离心机14000×gydF4y2BaggydF4y2Ba15分钟在4°C。量化的谷胱甘肽,上层清液与2.5 mg·毫升孵化gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba在氧化还原o-phthalaldehyde淬火缓冲区。总谷胱甘肽的量化,上层清液与2.5 mg·毫升孵化gydF4y2Ba−1gydF4y2Bao-phthalaldehyde亚硫酸氢氧化还原淬火缓冲区包含100毫米。样品在室温下孵化为30分钟和荧光测量在激发和发射在365和430海里,分别gydF4y2Ba18gydF4y2Ba。二硫化谷胱甘肽(GSSG)的数量是根据以下公式计算:GSSG =(总谷胱甘肽−谷胱甘肽)/ 2。gydF4y2Ba
量化的病变引起的支气管肺泡连接gydF4y2BattgydF4y2BaddegydF4y2Ba
肺Formalin-fixed和石蜡包埋组织连续切片在3-μm厚度。第一、第六和十一个部分从每个老鼠肺部被随机选择和苏木精和伊红染色组织学检查。马森的三色的染色也进行演示并确认在支气管肺泡纤维化状态连接(BAJ)病变。gydF4y2Ba
BAJ病变在每个小组评估了两个参数:频率(发生的百分比)和程度的责任人(病变的大小)。BAJ病灶纤维化状态是量化的百分比BAJ病变增加纤维(胶原蛋白)存款。至少三个组织部分从每只动物研究小组检查和评估。BAJ病变的百分比计算的平均数量BAJ病变gydF4y2Ba与gydF4y2BaBAJs总数中发现每个研究小组(BAJ病变/ BAJ×100)。大范围或BAJ病变的严重程度估计的“大小”BAJ病变的发展。周长(每个区域病变)追踪和auto-evaluated定量gydF4y2Ba通过gydF4y2Ba计算机辅助的形态学显微镜与MetaMorph软件(美国PA分子器件、Downington)。的百分比与胶原沉积增加BAJ病变gydF4y2Ba与gydF4y2BaBAJ病变的总数在每个研究小组发现计算BAJ病变与胶原沉积增加数量/总BAJ病变×100。然后进行统计分析gydF4y2Ba通过gydF4y2Ba标准的统计方法统计分析部分中描述。gydF4y2Ba
免疫组织化学gydF4y2Ba
为了识别特定的细胞类型和蛋白质表达参与BAJ病理学、免疫组织化学进行了如前所述gydF4y2Ba19gydF4y2Ba。通用LSAB2装备和发色体轻拍+系统(DakoCytomation、斯特鲁普、丹麦)是用于检测一个抗体的免疫反应性。以下使用特定的抗体:anti-cytokeratin (CK;Chemicon Huissen,荷兰)细支气管上皮细胞;anti-Clara细胞分泌蛋白(CCSP;美国微孔,Billerica的细支气管克拉拉细胞;和anti-prosurfactant蛋白C (proSP-C;Chemicon)肺泡II型细胞。参与细胞增殖或增长(增生)评估的疣状增殖细胞核抗原(PCNA);美国BD转导实验室,列克星敦,KT)。 The immunostaining of phosphorylated signal transducer and activator of transcription 3 (pSTAT3; Cell Signaling, Danvers, MA, USA) was used to detect the localisation of pSTAT3. Normal sera instead of primary antibodies were used as negative controls.
双免疫染色gydF4y2Ba
双免疫染色进行确定proSP-C协会(肺泡II型细胞)和PCNA / pSTAT3或CCSP(克拉拉细胞)和PCNA / pSTAT3 BAJ病变。multivision聚合物检测系统(热费希尔科学、弗里蒙特、钙、美国)在我们的研究中。双免疫染色协议是基于制造商的程序与较小的调整在孵化条件主要抗体。proSP-C孵化时间,或者CCSP pSTAT3调整到2 h和16 h在室温下,分别对小鼠肺组织最优结果。gydF4y2Ba
分析实时rt - pcr的数组gydF4y2Ba
从肺组织RNA提取保存在TriReagent(生活技术,罗克维尔市,医学博士,美国)。互补脱氧核糖核酸的合成都使用了高容量cDNA逆转录工具包(美国应用生物系统公司,培育城市,CA)。六个代表肺cDNA样本选择从车辆- 24 mg·公斤gydF4y2Ba−1gydF4y2BattgydF4y2Ba-DDE-exposed老鼠。在两组之间,炎症基因的相对表达测量使用鼠标炎性细胞因子和受体PCR阵列(pamm - 011;Superarray,弗雷德里克,医学博士,美国)。炎症基因表达的途径分析了使用Metacore™(美国Genego、圣约瑟夫,MI)。gydF4y2Ba
统计分析gydF4y2Ba
细胞数量/人口BALF中车辆,8 mg·公斤gydF4y2Ba−1gydF4y2BattgydF4y2Badde或24 mg·公斤gydF4y2Ba−1gydF4y2BattgydF4y2Ba-DDE-treated小鼠相比gydF4y2Ba通过gydF4y2Ba方差分析的一种方式。PCR的未配对t检验是用于比较数据数组从车辆和24 mg·公斤gydF4y2Ba−1gydF4y2BattgydF4y2Ba-DDE-exposed组。线性回归分析方法被用来分析的严重性或剂量相关性大小BAJ病变引起的gydF4y2BattgydF4y2Badde。所有统计分析使用SPSS 10.0软件基础(美国SPSS,芝加哥,IL)。gydF4y2Ba
结果gydF4y2Ba
改变细胞总数和微分BALF中细胞群从动物接触gydF4y2BattgydF4y2BaddegydF4y2Ba
BALF中,总细胞数在小鼠暴露于24 mg·公斤gydF4y2Ba−1gydF4y2BattgydF4y2Badde相比明显增加了大约两倍的控制(图。2gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba)。微分的BALF细胞计数还显示,上皮和nonepithelial组件(白细胞)24 mg·公斤gydF4y2Ba−1gydF4y2BattgydF4y2Ba-DDE-exposed老鼠2.3倍的控件(图2 bgydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba)。的BALF 24 mg·公斤gydF4y2Ba−1gydF4y2BattgydF4y2Ba-DDE-treated老鼠巨噬细胞没有显著提升2.5倍增加中性粒细胞(多形核细胞)和淋巴细胞计数(图2摄氏度gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba)。这些参数都没有发现显著改变BALF中8 mg·公斤gydF4y2Ba−1gydF4y2BattgydF4y2Ba-DDE-exposed老鼠(图。2gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba
氧化应激状态由谷胱甘肽(GSSG比率gydF4y2Ba
GSH / GSSG比率作为标准,以反映一般在老鼠肺部氧化应激状态。在汽车组,GSH / GSSG比率1.33±0.68。8 mg·公斤gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba和24 mg·公斤gydF4y2Ba−1gydF4y2BattgydF4y2Badde暴露组,谷胱甘肽(GSSG比率分别为1.21±0.81,1.28±0.62,分别。没有明显的交替在肺组织中的GSH / GSSG比率gydF4y2BattgydF4y2Ba-DDE-exposed动物。gydF4y2Ba
肺部病变引起的gydF4y2BattgydF4y2Badde暴露gydF4y2Ba
两个著名的病变的肺部发现老鼠接触gydF4y2BattgydF4y2Badde:上皮增生和肉芽肿结节(图3 bgydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba和c)。病变都位于BAJ和更显著的高剂量(24 mg·公斤gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba)治疗老鼠而不是低剂量(8 mg·公斤gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba(表1)对待动物gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba)。仔细检查这些病变显示BAJ增生显著特征就是nonciliated细支气管上皮增生,淋巴细胞浸润和轻度peri-lesional间质增厚可能代表纤维化(图3 bgydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba插图)。一些BAJ增生可以看到扩展和发展成焦点组织质量或肉芽肿结节,它们主要由上皮增生,lympohocytic浸润,epitheloid细胞和巨噬细胞聚合成纤维细胞(图3 cgydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba)。特殊的组织化学染色(马森的三色的)也证实胶原沉积增加(轻度纤维化)这些BAJ增生性的间隙区域网站和肉芽肿结节(图3 dgydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba和e)。线性回归分析收集到的数据显示dose-correlated增加胶原蛋白沉积,以及数量和规模的BAJ病变(增生和肉芽肿结节)的小鼠暴露gydF4y2BattgydF4y2Badde(表1gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba
同样重要的是要确认的发生增生性活动和描述特定细胞类型的参与BAJ病变。特别的组织化学染色用于肯定和描述等。免疫组织化学、细胞BAJ增生细胞核抗原反应表明CK和(图4gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba和b),确认他们确实起源于上皮(CK)”和“增生性(增生性)在自然界(PCNA阳性)。通过CCSP(克拉拉细胞标记)和proSP-C(肺泡II型细胞标记)染色,克拉拉细胞和肺泡II型细胞可以识别BAJ病变(图4 cgydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba和d)。然而,通过双重染色细胞核抗原抗体(增殖细胞标记),连同其他两个细胞标记(CCSP或pro-SP-C),只有克拉拉细胞,但不是肺泡II型细胞,被发现在这些BAJ积极增生性病变(图4 egydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba和f)。有趣的是,类似的细胞标记染色过程显示,只有肺泡II型细胞,没有克拉拉细胞,存在于BAJ肉芽肿结节(图5度gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba和d)。gydF4y2Ba
的影响gydF4y2BattgydF4y2Badde暴露炎性细胞因子和趋化因子的基因表达gydF4y2Ba
利用实时rt - pcr数组,我们进一步确定调制一些炎性细胞因子和趋化因子在肺组织的动物接触gydF4y2BattgydF4y2Badde。趋化因子配体(CCL) 1(碳碳主题),CCL11, CCL12,趋化因子(科学家主题)配体(CXCL) 13和细胞因子il - 10明显调节,而CCL2和IL-1β中表达下调gydF4y2BattgydF4y2Ba-DDE-treated老鼠(表2gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba)。相比之下,三个受体,CCLR1 IL-R1-II和IL-8R表达下调gydF4y2BattgydF4y2Badde曝光(表2gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba)。进一步阐明潜在的下游调节器或可能影响这些因素gydF4y2BattgydF4y2Ba-DDE-induced炎性基因,我们使用Metacore™(Genego)执行路径分析这些炎症基因。pSTAT3被认定为共同被CCL1激活下游因素,CCL11, CCL12, CXCL13和il - 10都显著升高gydF4y2BattgydF4y2Badde。gydF4y2Ba
增强细胞的pSTAT3 BAJ病变gydF4y2Ba
确认参与的pSTAT3 BAJ病变,我们进一步进行免疫组织化学染色pSTAT3蛋白在肺组织中gydF4y2BattgydF4y2Ba-DDE-treated老鼠。强大的核染色pSTAT3 BAJ被证明在许多细胞病变(图5gydF4y2Ba⇑gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba通过gydF4y2Ba双免疫染色的pSTAT3 CCSP(标记为克拉拉细胞)或proSP-C(肺泡II型细胞的标志),我们进一步证明了增强pSTAT3积累并不是与克拉拉细胞(图5 b相关联gydF4y2Ba⇑gydF4y2Ba),但与肺泡II型细胞(图5度gydF4y2Ba⇑gydF4y2BaBAJ病变)。同样重要的是要注意,虽然克拉拉细胞丰富BAJ增生病变(图5 bgydF4y2Ba⇑gydF4y2Ba),他们没有发现BAJ肉芽肿结节(图5 dgydF4y2Ba⇑gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba
讨论gydF4y2Ba
最近的流行病学研究表明,暴露在咖啡在中国女性不吸烟与肺腺癌密切相关gydF4y2Ba4gydF4y2Ba,gydF4y2Ba5gydF4y2Ba。中国烹饪风格(与强大的咖啡代open-wok烹饪)是导致不寻常的风险敞口gydF4y2Ba4gydF4y2Ba,gydF4y2Ba5gydF4y2Ba。然而,增加呼吸道和肺部疾病厨房员工在欧洲也被报道gydF4y2Ba6gydF4y2Ba表示,咖啡是一种通用在亚洲而不是孤立的健康问题。化学分析显示,gydF4y2BattgydF4y2Badde咖啡是一个重要的组成部分gydF4y2Ba8gydF4y2Ba。gydF4y2BattgydF4y2Badde被认为是强有力地有毒的醛。证实了增加氧化应激和细胞增殖培养的人类肺细胞gydF4y2Ba在体外gydF4y2Ba15gydF4y2Ba在大鼠的胃上皮细胞gydF4y2Ba在活的有机体内gydF4y2Ba12gydF4y2Ba。虽然有充足的流行病学迹象表明咖啡暴露与肺疾病和肺腺癌有关gydF4y2Ba4gydF4y2Ba,gydF4y2Ba5gydF4y2Ba,gydF4y2Ba7gydF4y2Ba,gydF4y2Ba20.gydF4y2Ba、科学验证和演示的实际病理或从动物暴露于pro-cancerous肺组织的变化gydF4y2BattgydF4y2Badde仍然缺乏。本研究旨在提供病理和分子这种联系的证据gydF4y2Ba通过gydF4y2Ba战略计划gydF4y2Ba在活的有机体内gydF4y2Ba研究。gydF4y2Ba
醛,当引入肺部gydF4y2Ba通过gydF4y2Ba气管内的滴剂,当然可能引发组织刺激和炎症反应。增加巨噬细胞BALF中反映这样的刺激和炎症过程。肺泡巨噬细胞对毒物的主要防御细胞在肺的肺泡水平和病原体gydF4y2Ba21gydF4y2Ba。肺泡巨噬细胞的增加,因此,可以作为生物标志物的肺反应清除入侵的病原体或其他刺激物。海拔各种炎性细胞因子、趋化因子和蛋白酶巨噬细胞也被报道gydF4y2Ba22gydF4y2Ba。事实上,海拔在肺巨噬细胞已经在厨房工人暴露于咖啡,和肺泡巨噬细胞被认为是人类作为一个生物标志物用于肺刺激gydF4y2Ba20.gydF4y2Ba,BALF中肺泡巨噬细胞增加gydF4y2BattgydF4y2Badde暴露动物在这个研究是符合观察厨房工人暴露于咖啡gydF4y2Ba20.gydF4y2Ba。然而,这似乎矛盾的研究,虽然有一个减少CCL2水平在8周肺组织,BALF中肺泡巨噬细胞的数量gydF4y2BattgydF4y2Ba-DDE-treated动物是升高的。必须指出,虽然CCL2招聘是一个重要因素的单核细胞(巨噬细胞),组织网站CCL2绝不是巨噬细胞标记gydF4y2Ba23gydF4y2Ba。事实上,它已经表明,CCL2调制是一个时间的过程gydF4y2Ba24gydF4y2Ba。CCL2通常升高的早期或急性期炎症gydF4y2Ba25gydF4y2Ba下降,但后来当巨噬细胞招聘已经消退,纤维化/修复已经启动。本研究的时间点(8周)可能代表了后者的条件。gydF4y2Ba
在我们之前gydF4y2Ba在体外gydF4y2Ba研究中,我们观察到一个IL-1β增加gydF4y2BattgydF4y2Ba-DDE-treated BEAS-2B细胞gydF4y2Ba15gydF4y2Ba。然而,IL-1β少被发现在目前的水平gydF4y2Ba在活的有机体内gydF4y2Ba研究。这gydF4y2Ba在体外gydF4y2Ba与gydF4y2Ba在活的有机体内gydF4y2Ba差异可以解释为其他细胞类型的存在,如淋巴细胞,gydF4y2Ba在活的有机体内gydF4y2Ba但不是gydF4y2Ba在体外gydF4y2Ba。释放IL-1β调制的淋巴细胞gydF4y2Ba26gydF4y2Ba。在gydF4y2BattgydF4y2Ba-DDE-exposed肺、淋巴细胞浸润在BAJ突出病变。虽然感应IL-1β可能发生在肺组织的早期阶段gydF4y2BattgydF4y2Badde曝光,越来越多的此类活动的镇压行动淋巴细胞可能发生在稍后的时间。IL-1β海拔可能只代表一种急性或早期阶段的组织或细胞反应gydF4y2BattgydF4y2Badde,比如观察gydF4y2Ba在体外gydF4y2Ba情况gydF4y2Ba15gydF4y2Ba。本研究为期8周的长期研究。突出的淋巴细胞浸润,肺组织已经发生在这个时期中演示了我们的组织病理学。因此,减少在这麽晚的时间IL-1β水平并不完全令人吃惊。它也可以指出,之间有一个有趣的战略位置图IL-1β肉芽肿和纤维化肺病水平gydF4y2Ba26gydF4y2Ba。我们目前的病理结果(肉芽肿结节开发有轻度纤维化)伴随着减少IL-1β水平。这些观察是一致的发现在某些慢性肺部疾病,如结节病,它还显示肺肉芽肿的形成特点和轻度纤维化改变gydF4y2Ba26gydF4y2Ba。然而,IL-1β为成纤维细胞提供一个积极的信号gydF4y2Ba26gydF4y2Ba。因此,IL-1β水平升高是经常与广泛的间质纤维化,与肺部疾病如特发性肺纤维化gydF4y2Ba26gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
在目前的研究中,我们证明了在BAJ上皮增生是最引起的病理变化特点gydF4y2BattgydF4y2Badde。经典,BAJ上皮增生被描述为bronchiolisation或细支气管细胞产物(主要克拉拉细胞)进入肺泡gydF4y2Ba27gydF4y2Ba。在目前的研究中,我们发现,克拉拉细胞的增殖(细支气管起源)发生在BAJ区。有迹象表明,克拉拉细胞细支气管和肺泡II型细胞都可以像当地的“干细胞”肺与增殖能力和分化gydF4y2Ba28gydF4y2Ba。当地细支气管或肺泡损伤引起的有毒代理人,如香烟烟雾或其他环境毒物,那时可以诱导和分化这些地方干细胞作为组织修复过程的一部分gydF4y2Ba29日gydF4y2Ba。此外,有越来越多的证据表明,克拉拉细胞细支气管和肺泡II型细胞可以为肺tumourigenesis原产地,尤其是对腺癌发展gydF4y2Ba30.gydF4y2Ba。因此,发生支气管肺泡增生不仅反映了组织修复,但也暗示公认的早期癌前期病变的肺tumourigenesis。一些BAJ增生组织的持续发展成焦增生BAJ(肉芽肿结节),观察在我们目前的研究中,让后者事件高度可信的gydF4y2Ba27gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
特别有趣的是在BAJ肉芽肿结节的发展。这些组织增生不是典型的肉芽肿或肉芽肿性炎症病灶出现在许多慢性肺部疾病,如肺结核或结节病gydF4y2Ba26gydF4y2Ba。引起的肉芽肿结节gydF4y2BattgydF4y2Badde没有焦点的组织反应,而是似乎从相邻的上皮增生扩展或扩展。我们目前的研究表明,BAJ增生引起的gydF4y2BattgydF4y2Badde只涉及细支气管克拉拉细胞。此外,虽然克拉拉细胞BAJ增生地区积极发展迅速,很明显,克拉拉细胞的增殖BAJ是自限性的,不延伸到BAJ扩展(肉芽肿结节)。这种现象是一致的,在BAJ上皮增生在一些肺部疾病或损伤gydF4y2Ba31日gydF4y2Ba在上皮增生主要是由细支气管克拉拉细胞。这种类型的上皮(克拉拉细胞)增生主要是在自然和自我修复gydF4y2Ba27gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
在炎症过程中引起的gydF4y2BattgydF4y2Badde,几个趋化因子(如CCL1、11和12,CXCL13)和细胞因子(il - 10)在肺组织被认为是调节。已知的常见下游因子被激活,这些趋化因子和细胞因子在炎症过程中是pSTAT3gydF4y2Ba32gydF4y2Ba,gydF4y2Ba33gydF4y2Ba。当持续激活,pSTAT3不仅可以作为一个关键的中介在肺部炎症和修复gydF4y2Ba34gydF4y2Ba,还可以调节细胞转换导致致癌作用gydF4y2Ba35gydF4y2Ba。事实上,一项研究lung-specific STAT3在转基因小鼠表示,过度的激活STAT3在肺泡II型细胞会导致支气管肺泡腺癌发展的动物gydF4y2Ba36gydF4y2Ba。在我们的研究中,我们演示了增强核协会pSTAT3积累许多BAJ肺泡II型细胞增生和结节。肺泡II型细胞的继续扩散和增强pSTAT3积累在这些细胞在肺组织肯定会增加致癌的风险。gydF4y2Ba
虽然我们之前gydF4y2Ba在体外gydF4y2Ba研究表明,减少谷胱甘肽(GSSG状态可能的潜在机制gydF4y2BattgydF4y2Ba-DDE-induced细胞那时BEAS-2B细胞gydF4y2Ba15gydF4y2Ba,目前gydF4y2Ba在活的有机体内gydF4y2Ba研究未能发现重大的谷胱甘肽氧化还原状态的变化(GSH / GSSG比率)的肺组织gydF4y2BattgydF4y2Ba-DDE-treated动物。这样的差异gydF4y2Ba在体外gydF4y2Ba和gydF4y2Ba在活的有机体内gydF4y2Ba发现可能是由于测量时间的谷胱甘肽氧化还原状态后的肺gydF4y2BattgydF4y2Badde曝光。氧化还原反应可能有一个狭窄的窗户,是短暂的gydF4y2Ba在活的有机体内gydF4y2Ba。测量在稍后的时间,因为,在我们的研究中,将无法证明这样的反应。另一个可能性是gydF4y2BattgydF4y2Ba只-DDE-induced氧化应激发生的微环境内BAJ病变与克拉拉细胞增殖有关。BAJ以外的其他细胞,包括克拉拉细胞病变没有影响gydF4y2BattgydF4y2Badde。BAJ损伤相对较小的地区相比,整个肺区,这个特定的氧化还原变化BAJ病变可能不会明显发现通过测量整个肺。这些推测可能需要确认未来的调查。gydF4y2Ba
总之,我们提供了一个动物模型研究的影响gydF4y2BattgydF4y2Badde,咖啡的主要成分,在肺部。我们演示了特定站点(BAJ)病理变化gydF4y2BattgydF4y2Badde,包括慢性炎性反应,BAJ上皮增生,担子BAJ BAJ增生形成肉芽肿结节。我们进一步证明只有克拉拉细胞参与BAJ增生。此外,增强pSTAT3积累才发现与BAJ肺泡II型细胞病变。克拉拉细胞增殖,诱导结果结节BAJ和一个增强pSTAT3积累在肺泡II型细胞,涉及BAJ肉芽肿结节,都为肺腺癌发展因素会增加风险。我们认为,我们目前的研究不仅提供了强大的科学验证的流行病学观察,肺腺癌和协会发展,也提供了新的和重要的病理影响的信息gydF4y2BattgydF4y2Badde在肺组织gydF4y2Ba在活的有机体内gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
支持声明gydF4y2Ba
本研究支持格兰特(NSC 98 - 2314 - b - 400 - 005)从美国国家科学委员会(台北,台湾)。gydF4y2Ba
感兴趣的语句gydF4y2Ba
没有宣布。gydF4y2Ba
- 收到了gydF4y2Ba2008年9月12日。gydF4y2Ba
- 接受gydF4y2Ba2009年9月9日。gydF4y2Ba
- ©人期刊有限公司gydF4y2Ba
引用gydF4y2Ba
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