文摘
基本原理哮喘的表型出现需要新颖的生物标志物的发现。
目标确定等离子体生物标志物与哮喘表型相关的应用程序的一个新的蛋白质组面板样本两组特征明显的严重(SA)和轻度到中度(MMA)哮喘患者,慢性阻塞性肺病主题和健康对照组(高碳钢)。
方法抗体类数组瞄准177蛋白质主要参与途径与炎症、脂质代谢、信号转导和细胞外基质应用于等离子体从525哮喘患者和高碳钢U-BIOPRED队列,和142例验证队列BIOAIR哮喘和慢性阻塞性肺病。影响口服皮质类固醇(OCS)测定2周,BIOAIR安慰剂对照OCS试验,证实了与客观U-BIOPRED OCS措施。
结果110年U-BIOPRED蛋白质明显不同,主要是高架,在SA与MMA和高碳钢。10蛋白质在SA升高与MMA U-BIOPRED和BIOAIR (alpha-1-antichymotrypsin、载脂蛋白e补充组件9,我补充因素,巨噬细胞炎性蛋白质3,白细胞介素- 6、鞘磷脂磷酸二酯酶3,肿瘤坏死因子受体超家族成员11,改变增长factor-β,谷胱甘肽S-transferase)。口服避孕药治疗大多数蛋白质减少,然而SA之间的差异和MMA校正后仍使用口服避孕药。共识U-BIOPRED蛋白质数据6个集群的集群与哮喘控制、生活质量,血液中性粒细胞、高敏c反应蛋白和身体质量指数,而不是2型炎症生物标记。柱状细胞特定酶羧肽酶A3是集群分化的主要因素之一。
结论血浆蛋白质组小组发现先前未知的但可能有用的Type-2-independent生物标志物和验证几个蛋白质参与的病理生理学SA。
文摘
应用建立的新的蛋白质组面板两个欧洲哮喘组标识血浆蛋白与疾病严重程度独立于2型炎症,建议可能有用的新颖的生物标志物和治疗靶点。https://bit.ly/3jtTq5m
介绍
哮喘是一种常见的慢性炎症性疾病和许多不同的表型共享的常见临床表现情景性呼吸困难,气喘、咳嗽、气流阻塞(通常是可逆的)和(气道高反应1,2]。然而支撑病理学可能被广泛不同。作为个体对治疗的反应不同针对特定途径,更好的预测生物标记需要改善病人的选择、指导治疗和监测反应。目前2型哮喘的生物标记物,如血液嗜酸性粒细胞,总血清免疫球蛋白E (IgE)或呼出一氧化氮的分数(F伊诺),不充分使endotyping,所需的个性化治疗(1]。另一个主要的临床挑战是识别生物标志物反映non-Type-2哮喘,这通常是更严重的和缺乏有效的治疗方法3,4]。
与整体目标生物标志物的发现,冠军(过敏研究中心突出哮喘表型标记)财团开发一个亲和力蛋白质组学小组集中在蛋白质与潜在参与气道或系统性炎症。蛋白质的选择是基于文学评论,数据库搜索和最近的研究发现。四个主要的生物过程反映在蛋白质1)免疫反应,2)脂质中介通路(主要是鞘脂类),3)信号转导和4)细胞外基质(图1)。专家组在non-Type-2-related蛋白质丰富解决未满足临床需要在这个特定的子群。具体地说,我们的目标是检查血浆蛋白对哮喘严重程度和口服皮质类固醇(OCS)治疗。此外,我们的目的是测试假设特定的血浆蛋白概要文件可以识别独特的分子子组的哮喘患者。
最初,科目有轻度到中度(MMA)或严重哮喘(SA),和健康对照组(高碳钢)多中心调查U-BIOPRED(无偏预测生物标志物的呼吸道疾病结果)筛选[5]。U-BIOPRED被验证的发现第二个群组,BIOAIR(纵向评估临床过程和生物标志物的严重慢性气道疾病)(6),样本从主题与MMA或获得SA或慢性阻塞性肺病,安慰剂对照干预前后用口服强的松。这允许比较蛋白质概况与SA)和慢性阻塞性肺病的主题,不同的呼吸系统疾病,可能显示某些重叠的特点,重要的是,评估口服糖皮质激素的药理作用的血浆蛋白测量。研究设计和主要目的所示图1。
方法
主题
发现人群中包括基线EDTA血浆样本U-BIOPRED, SA表型(Clin.Trial.Gov的前瞻性队列研究NCT01976767)[5]。525包括学科,263年与SA (SAn)不吸烟者,95当前或烟SA (SAs /交货),76不吸烟者MMA和91高碳钢(图1)。主题特征和数据可用性总结表1和表S1。
验证组包括142名被试(Clin.Trial.Gov BIOAIR研究NCT00555607)[6]。四周后治疗优化期间,受试者接受了两周,双盲安慰剂对照OCS干预(0.5 mg·公斤−1·天−1强的松)添加到常规治疗,紧随其后的是一个完全相同的只开口服避孕药治疗安慰剂组(图1)。肝素血浆样本58圣,48 MMA和36 COPD患者,在干预前后进行分析。学科特点和数据可用性所示表1和表S1。
进一步的信息关于每个队列的研究设计和诊断标准为每个主题组了补充材料。这两项研究都经伦理委员会批准,每个参与临床机构和参与者提供书面知情同意。
面板设计和悬挂珠阵列蛋白质分析
详细的信息关于蛋白质组177蛋白(表S2)和抗体珠阵列提供了方法论补充材料。简而言之,这个内部开发的基于数组的亲和力蛋白质组学方法利用抗体与磁颜色珠子(MagPlex Luminex Corp .,奥斯汀,得克萨斯州,美国)来创建一个多路复用分析平台(7,8]。测量是使用FlexMAP3D执行仪器(Luminex corp .)和报告为相对荧光强度值。
统计分析
统计分析和可视化进行了R (9,10]。非参数克鲁斯卡尔-沃利斯(多个组),Wilcoxon rank-sum成对(集团)和Wilcoxon符号秩检验(配对)测试是用于连续变量的比较。所有的报道p- - - - - -蛋白质的值调整为多个测试使用Benjamini和业务11)方法和控制错误发现率(罗斯福)为5%。
无人监督的共识,聚类分析被用来识别潜在的子组的哮喘病人,更详细地描述这个过程补充材料。简单,减少的一组变量(n = 139)被选为共识的聚类分析log2转化为每个抗体和z分数强度信号,使用“ConsensusClusterPlus”包在R(执行12,13]。欧几里得距离测量是用来描述对象之间的相似度并medoids周围的分区算法用于聚类。对模型验证,集群是重复1000次,随机去除10%的受试者在每个迭代。模型2 - 10集群的集群稳定性评估的最低比例的含糊不清地聚集对象(14和理想稳定的最小偏差15]。6个集群模型相比略低稳定10 (表S8所有集群(),但展示了更大的一致性图S2e),因此提出了。
对分类识别蛋白质重要的6个集群组,Boruta算法(R包“Boruta”) (16),一个包装器建立在随机森林分类方法,是使用。更多细节,请参阅补充材料。
结果
验证哮喘severity-associated BIOAIR蛋白质
验证队列BIOAIR,群体间的比较显示在23个蛋白质水平显著不同的等离子体抗体(25),看到的表S5。其中,15个蛋白质之间改变MMA和慢性阻塞性肺病(COPD)的所有提升和13之间的SAn和MMA(所有圣升高)。没有发现蛋白质含量的差异之间的SAn和慢性阻塞性肺病。所示图印地,大多数明显不同蛋白质的圣所特有的与MMA、MMA与慢性阻塞性肺病两两组比较。
比较的结果U-BIOPRED BIOAIR, 10蛋白质被证实是SA和两个组别MMAin之间明显不同(表3)。Alpha-1-antichymotrypsin (SERPINA3)、载脂蛋白E (APOE),补充组件9 (C9)、巨噬细胞炎性蛋白质3 (CCL23 (MIP-3)),我补充因素(CFI)、白细胞介素- 6 (il - 6)、鞘磷脂磷酸二酯酶3 (SMPD3)、肿瘤坏死因子受体超家族成员11 (TNFRSF11A(等级),转化生长因子β1 (TGF-β1)及谷胱甘肽S-transferase P (GSTP1),相比在圣都提高MMA (图3)。
商务对血浆蛋白水平的影响
血浆蛋白水平的高度显著差异观察SA和MMA之间可能是由于疾病机制的差异,药物治疗,或两者兼而有之。因此我们使用BIOAIR队列,受试者接受了帷幕,控制和强的松口服试验,研究糖皮质激素治疗对血浆蛋白水平的影响。大部分的蛋白质被发现受到强的松的影响,其中大多数是减少(图4一和b)。10蛋白质在SA BIOAIR和U-BIOPRED升高(图3)、载脂蛋白e、C9、MIP-3 SERPINA3所有显示口服类固醇治疗后显著变化。商务摄入量(APOE SERPINA3增加后图4 c),而C9和MIP-3被降低了。
口服类固醇血浆蛋白的变化中发现BIOAIR经结合处方数据和客观测量尿强的松U-BIOPRED代谢物。据说比较水平之间的圣和没有服用口服避孕药,尿分析,证实了20蛋白抗体(21)U-BIOPRED与口服使用类固醇(有关图2 c和表S6)。符合BIOAIR结果,载脂蛋白e和SERPINA3显示配置文件都是严重程度和激素依赖性,增加从MMA到圣没有服用口服避孕药,并进一步从圣不采取口服避孕药圣服用口服避孕药(图4 c)。没有明显不同蛋白质相比较小的组SAs /交货使用口服和那些没有(图2 c)。
口服类固醇的影响,考虑到多个组比较圣,SAs /交货,MMA和HC重复,受试者报告目前没有口服避孕药使用有限,在他未发现尿强的松代谢物。抗体水平的98蛋白质(126)仍然显著不同U-BIOPRED主题组(图2 b)。成对比较这些团体透露类似的模式对于整个数据集,无论口服避孕药使用(比较图2一个与图2 b)。再一次,没有圣之间的水平差异和SAs /例(数据未显示)。更重要的是,10个复制的蛋白质仍升高SA (FDR-adjustment后显著:APOE C9、MIP-3 CFI, SERPINA3和排名)。总结所有的蛋白质都大大改变了使用这两种方法,包括或不包括商务用户,所示表S7。
识别protein-driven子组的哮喘
确定子组或哮喘的表型,protein-driven一致聚类算法应用于U-BIOPRED哮喘患者。我们集群主体基于其血浆蛋白资料,仅局限于asthma-associated蛋白质识别单变量分析(表S4)。集群评价模型确定六个健壮的集群高稳定性(表S8,图5一个),只在类内相似性定义包括蛋白质的概要文件。通过应用一个分类算法,可以识别108概要(85独特的蛋白质)确认为重要的6个集群的分类(图S3)。尽管所有的蛋白质相关的分类,三个最贡献蛋白质所示图5 b。
模式中观察到集群时,按平均血浆蛋白水平。最常见(63%的139抗体概要文件),最高水平集群1中被发现,随后在减少order by集群6 4、3、2和5。减少蛋白质的等离子体水平相关的集群也减少疾病严重程度的迹象表S9)。虽然主题与SA和MMA被发现在所有集群,集群1中那些股价相对更普遍,4和6每个集群(超过90%)和主题与MMA相对更普遍在集群2,3和5(21% - -37%的受试者每个集群),包含78%的MMA科目。
集群聚合对象相似的临床结果(表S9)。在集群1中,受试者经历低肺功能,最不受控制的哮喘,最低的生活质量和最常见的急性加重。这些受试者身体质量指数(BMI)最高(84%超重,60%肥胖)和系统性炎症的证据反映最高灵敏度CRP升高(hsCRP)和最高血中性粒细胞。他们还显示肥大细胞激活增加的迹象,反映在尿tetranor-prostan-1升高,20-dioic酸(tetranor-PGDM)。相反,集群5包括肺功能最好的年轻学科,最好的哮喘控制、最早出现哮喘和体重指数最低。这些主题也表现出血液中性粒细胞数量最低,最低hsCRP和尿tetranor-PGDM浓度接近正常水平。选择与集群相关的临床和生化变量所示图5 b。
参数之间没有不同集群包括性别分布和商务使用的客观证据。2型炎症的指标,包括血液和痰液嗜酸性粒细胞,F伊诺、循环periostin血清总IgE和特异反应性,也不是明显不同(表S9)。
与Type-2-high哮喘相关的蛋白质
检查是否改变数组中的蛋白质在受试者Type-2-high Type-2-low炎症相比,我们检查了U-BIOPRED数据与两个最近发表的策略定义2型哮喘。分裂哮喘受试者根据复合2型生物标志物得分基于血液嗜酸性粒细胞,F伊诺和血清periostin难治性哮喘所描述的分层计划(锉)[17),没有与任何重要的蛋白质含量的差异有关。在U-BIOPRED,我们最近发表的,高尿白三烯E4 (LTE4)水平有很强的2型协会(18]。在目前的调查,只有7个蛋白质的面板与LTE有关4水平(表S10)。综上所述,这一分析证实蛋白质面板适用于它的目的来确定Type-2-independent信号。
讨论
使用高通量,同时基于数组的蛋白质分析技术分析177选定的血浆蛋白在667例两组建立欧洲哮喘,我们确定了已知和未知的候选人与哮喘严重程度相关的蛋白质。尽管观察口服避孕药对多个蛋白质的影响,对哮喘严重程度仍然对于大多数蛋白质后调整口服避孕药的使用,一个混杂因素在生物标志物发现工作中经常被忽视。此外,蛋白质图谱哮喘病患者分组到集群的模式与临床有意义的差异是2型独立的炎症。
在110年严重的蛋白质显著改变而温和的疾病,许多人参与免疫调节通路。例如,几丁质酶CHI3L1 (YKL-40)和CHIT1 (chitotriosidase))被高架在SA组无论吸烟状态与HC相比,与之前的数据19]。多种炎性细胞因子与病理学相关的SA也不同丰富,包括il - 4、il - 6、il - 10, IL-13, IL-17A IL-26和肿瘤坏死factor-α[20.,21]。严重哮喘患者也显示增加蛋白质水平的表面活性剂,表面活性剂等蛋白D,模式识别分子参与先天免疫反应与抗菌活性(22]。增加血浆水平与以往研究结果(23),大概反映增加上皮损伤和渗透率在外围的航空公司。
的脂质介质通道,我们的研究结果表明,鞘脂类参与哮喘发病机制作为多个鞘脂类代谢的酶升高在SA包括神经酰胺合成酶、鞘磷脂和鞘氨醇激酶磷酸二酯酶。组件的鞘脂类路径,这已经被证明参与哮喘和与疾病严重程度(24,25,代表了潜在的治疗靶点26]。几个全基因组关联研究也在17温度系数与多态性位点的α-酸性糖蛋白1 3 (ORMDL3)基因所在的童年和成年哮喘(27,28]。ORMDL3调节器的鞘脂类合成和基因变异导致增加表达式以及减少鞘脂类新创合成在儿童哮喘29日]。某些类二十烷酸途径酶也升高等SA造血的前列腺素D合酶和cyclooxygenase-1参与许多过程,特别是肥大细胞激活(30.]。
进一步发现蛋白质相比,严重增加轻度哮喘包括补充和凝血级联的成员,确认最近的报告(31日- - - - - -33),以及代谢因素,如胰岛素和瘦素。蛋白质与氧化应激有关,包括超氧化物歧化酶和问题,也升高。这些蛋白质之前一直与空气污染和轻度哮喘(34),但他们在SA pathobiological作用在很大程度上是未知的。
BIOAIR群复制的后续调查的一些发现与10蛋白质在SA MMA相比显著增加两个组别。更多的蛋白质也遵循了同样的趋势在U-BIOPRED观察到,但并未达到统计学意义,可能是因为BIOAIR规模越小。也有可能这个数字可能是更大如果等离子体收集以完全相同的方式在两个研究(即。肝素,或EDTA血浆样本)。然而,研究计划,在不同的时间不同的联盟,因此程序并不相同。不过这项研究展示了互补的力量BIOAIR U-BIOPRED,尽管小方法的差异。
在复制结果与已知的蛋白质参与气道纤维化和改造等TGF-β1 [35)和SERPINA3。后者可能是慢性阻塞性肺病的特殊的意义,在等离子体水平被发现是升高(36]。il - 6,扮演一个角色在特定的病理学,exacerbation-prone、哮喘次表型(37),还增加了SA的病人。有趣的是,等离子体MIP-3升高,符合基因编码的一个强大的协会MIP-3与哮喘控制不佳38]。MIP-3显示,实际上,在聚类分析的最高水平集群中最严重的哮喘控制问卷和哮喘生活质量问卷分数,以及最重要的蛋白质区分集群。在哮喘、载脂蛋白e已经收到关注由于其抑制气道炎症的能力,和一个可以推测,增加水平观察SA是一种保护功能39]。然而,载脂蛋白也可能受到他汀类药物治疗,为此我们研究了MMA和SA之间是否APOE不同切除患者心血管并发症。U-BIOPRED和BIOAIR, APOE仍然在SA显著大于MMA,数据没有显示。
本研究的一个特别的小说方面的探索血浆蛋白的集群配置文件哮喘病患者分为共识组超出了他们的临床诊断。这产生了六集群对象的差异在临床和生化参数。集群按降低血浆中值水平研究蛋白质与表型相关的减少程度。总之,我们观察到集群组和年龄之间的关联,哮喘发作时,BMI,用力呼气量在1 s,加重,血液中性粒细胞,血清hsCRP、哮喘控制和生活质量。然而,没有观察到显著差异在集群与2型炎症相关措施,包括血液和痰液嗜酸性粒细胞,F伊诺血清总IgE,血清periostin锉2型分数或特异反应性。随着相对缺乏蛋白质含量的差异观察哮喘患者划分成Type-2-high Type-2-low子组,这些发现证实蛋白质面板是适合识别Type-2-independent信号的目的。此外,受试者的比例可检测尿强的松代谢物水平相似集群中,建议口服避孕药使用驱动观察集群不是一个因素差异。
血浆蛋白质,尤其重要的集群分类包括羧肽酶A3 (CPA3,肥大细胞特定的羧肽酶存储在分泌颗粒),三方主题包含蛋白质交互33和TRAF3 2。事实上,增加cluster-driven CPA3被尿tetranor-PGDM升高,模仿的主要尿代谢物的主要肥大细胞前列腺素类前列腺素D2 (PGD2)。总的来说,这个证据显示肥大细胞激活的关键作用Type-2-independent SA。有趣的是,这些发现,相比我们之前表明PGD2炎症与2型(18]。因此,综上所述我们的研究结果表明,肥大细胞直径的免疫细胞有广泛参与2型和non-Type-2炎症。
一些新的生物治疗已被批准为控制不足2型哮喘,尽管目前代表了主要的未满足的医疗需要什么改进治疗哮喘病患者很少或根本没有2型炎症的子群(1,2,40]。有趣的是,最引人注目的差异之间的临床特征包括高BMI在集群的集群1,一群也血液中性粒细胞,最高最高的血清CRP,最差的生活质量和大多数发作,可能反映出non-Type-2哮喘组。血清c反应蛋白被建议作为一种生物标志物对中性粒细胞哮喘(41),因此,哮喘的中性粒细胞炎性表型与系统性炎症,增加有关所反映的血清CRP水平升高而non-neutrophilic哮喘(42]。我们的发现可能因此提供一套新的,潜在Type-2-independent生物标记。
当前研究的主要力量是使用两个群特征明显哮喘,使验证的结果在一个独立的人口和提供一个与慢性阻塞性肺病。顺便说一句,SA)和慢性阻塞性肺病无法区分基于测量等离子体中蛋白质的水平,支持“荷兰假说”(43)和严重的阻塞性气道炎症性疾病中常见的分子特性。可以推测,缺乏区别SA)和慢性阻塞性肺病BIOAIR可能是由于哮喘或慢性阻塞性肺病患者的存在这两种组重叠。然而,这是不太可能的包含/排除标准BIOAIR研究旨在减少可能的诊断之间的重叠。SA是一个排斥因素目前的吸烟(> 10每天香烟),大于5包年的历史。事实上,包年的平均次数BIOAIR SA组0,和可逆性也显著提高,正如所料,在SA相比,慢性阻塞性肺病(44]。慢性阻塞性肺病的排斥因素被诊断为哮喘或过敏,此外,慢性阻塞性肺病患者需要电流或烟> 15包年的历史。
这两个研究设计也辅以U-BIOPRED提供更大的数据,观察,横断面研究。BIOAIR,另一方面,虽然小,包括两个干预:标准化的前4周的治疗,减少生物多样性由于治疗上的差异,然后安慰剂对照OCS的审判。进一步的力量是数组的冠军联盟的设计,基于多个假设有关的信号通路相关的哮喘,气道炎症和免疫介导的疾病。结果是成功的大多数蛋白质确实显示疾病严重程度和治疗组之间差异水平。最后,一个方法论的分析本身的优势是,几个分析物,使用多个抗体针对相同的蛋白质,经常显示支持配置文件(图S4)。
进一步利用当前的调查,分析基于现成的等离子体矩阵,支持未来发展微创工具分子哮喘表型出现的护理。高架气道蛋白质的检测,如表面活性剂蛋白质,与SA)和慢性阻塞性肺病血浆从主题,建议增加泄漏严重的疾病,也证实,在肺组织疾病过程可能反映在等离子体。一般来说,调查结果显示更大的系统性影响股价MMA相比,蛋白质含量在轻度哮喘和高碳钢相似。
可能的治疗效果在生物标志物发现工作中经常被忽视,但BIOAIR口服强的松干预启用一个彻底的评估口服避孕药治疗对血浆蛋白的影响资料。结果表明,大多数蛋白质水平降低口服治疗。有趣的是,当U-BIOPRED受试者服用口服避孕药从分析(图2 b),MMA和SA之间的差异保持对于大多数蛋白质,虽然不是所有,这表明等离子体水平被疾病严重程度和口服避孕药治疗影响了。此外,蛋白质改变了OCS无烟SA组并没有改变吸烟SA组口服避孕药使用,事实上,没有蛋白质变化(图2 c)。这可能反映了已知反应降低皮质类固醇和炎症生物标记的差异以及吸烟的哮喘患者(45,46)和(或)是一个权力的问题。SA组U-BIOPRED和BIOAIR比MMA服用大剂量吸入糖皮质激素组,按照入选标准,重要的是要注意,吸入糖皮质激素也可能影响蛋白表达。不幸的是,当前调查的一个限制是,我们无法检查这种可能性的大一一样严格。
总之,抗体阵列我们开发了多个与哮喘严重程度相关的血浆蛋白,同时确认已知蛋白质的参与如炎性细胞因子、生长因子和几丁质酶,以及暗示小说进一步调查的目标。例如,我们的研究结果支持组件的鞘脂类路径和补体级联以及肥大细胞相关蛋白是未来值得更详细的检查。这些发现被发现是独立的影响可能与口服避孕药治疗有关。此外,我们表明,蛋白质概要文件,在其他桅杆特异性羧肽酶,可用于临床哮喘受试者分成六个不同的集群。综上所述,我们提出一个平台,能够提出新颖的生物标记分子表型出现候选人,特别是有关non-Type-2哮喘。未来pharmacotherapeutic的面板也可以帮助发现目标暴露以前未知的途径。
补充材料
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确认
支持nbi(瑞典国家生物信息学基础设施)。我们也感谢全体职员的人类蛋白质图谱和亲和力的蛋白质组学在SciLifeLab斯德哥尔摩的努力。U-BIOPRED研究小组的所有成员和BIOAIR财团是感激地承认。
脚注
U-BIOPRED研究小组成员:哈桑•艾哈迈德大卫•Balgoma一边t·邦萨尔Frederic Baribaud珍妮特Bigler, Bo计费,Hans Bisgaard Michael j . Boedigheimer Klaus Bønnelykke Joost Brandsma,保罗Brinkman,艾瑞卡Bucchioni,多米尼克·伯格,安德鲁·布什Amphun Chaiboonchoe,托尼Checa,克里斯·h·康普顿朱莉·Corfield Danen Cunoosamy, Arnaldo D中保,猩红热艾玛,Veit j . Erpenbeck Damijan Erzen, Klaus Fichtner尼尔惠誉,路易丝·j·弗莱明Elena Formaggio一致Frey玛蒂娜Gahlemann,维多利亚戈斯,亦可郭,西蒙桥本,约翰•Haughney Gunilla Hedlin, Pieter-Paul w . Hekking蒂姆•Higenbottam Jans m . Hohlfeld塞西尔T.J. Holweg,艾伦·j·诺克斯Jon Konradsen尼古拉斯·Lazarinis Diane Lefaudeux特雷西,马修·j·Loza Rene附近地区,亚历山大·曼萨拉·梅斯菲尔德,约翰·g·马修斯,亚历山大•Mazein安德里亚·meis Montse Miralpeix, Nadia习俗,克莱尔·默里,大卫·迈尔斯,莎玛纳兹,Bjorn Nordlund, Laurie Pahus Ioannis Pandis,安东尼•Postle Pavlidis利奥皮帕·鲍威尔,Navin拉奥斯泰西Reinke,阿曼达·罗伯茨,格雷厄姆•罗伯茨安东尼•罗詹姆斯•斯科菲尔德公关沃尔夫冈•Seibold安娜塞尔比,拉尔夫·西格蒙德,Florian歌手,Marcus Sjodin Paul j . Skipp安娜r·苏萨Kai太阳,鲍勃•桑顿Mohib Uddin,维姆·m·范·Aalderen玛莲·范·地表古积Jorgen Vestbo,娜迪亚·h·vis,阿里亚·h·魏格纳,斯科特•s赌注Zsoka Weiszhart,克雷格·e·惠洛克Asa惠洛克,苏珊·j·威尔逊和Valentyna Yasinska。BIOAIR财团成员:g . Brusselle,黛博拉·a·坎贝尔Marco Contoli凯蒂达姆,伊莎贝尔de舵,英格丽·利林,凯瑟琳Devautour,科学家们Duplaga,玛丽安·爱德华·亚历山德拉埃克,汤米·埃克斯特龙Ewa Figiel,弗洛拉Gaber,斯蒂芬妮Gauw,阿格涅斯卡Gawlewicz-Mroczka,黛西gerd, Shushila Haque,洛林休伊特,Pieter Hiemstra,斯蒂芬·t·霍尔盖特,约翰•霍洛韦亚历山大,弗兰克•Kanniess Osten Karlsson,约翰·c·逃学,Maria Kumlin Ann-Sofie Lantz Nikos Lazarinis, Helgo Magnussen,帕特里克·Mallia Ingrid Martling, Lahouari Meziane, Erasmia Oikonomidou,玛丽安·奥尔森伊丽莎白·佩斯Eva Papadopouli, Nikos帕帕多普洛斯,玛丽亚Plataki,董事长米莱拉•Profita Lovisa e . Reinius Kai级,道格拉斯·s·罗宾逊,米凯拉Romagnoli,怀中翅果,凡妮莎Schelfhout, Maria Skedinger Evangelia Stamataki,安十Brinke,伊莎贝尔Vachier, Eva Wallen-Nielsen, Ilonka van Veen Els Weersink,苏珊·j·威尔逊Valentyna Yasinska, Eleftherios Zervas和Bozena Ziolkowska-Graca。
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利益冲突:p . Montuschi没有披露。
利益冲突:j . Musial没有披露。
利益冲突:大肠Niżankowska-Mogilnicka没有披露。
利益冲突:香港奥尔森以外的其他支持阿斯利康提交工作报告。
利益冲突:a .爸爸报告拨款,个人费用,非金融支持和其他葛兰素史克、阿斯利康、勃林格殷格翰的发言,基耶西,Teva, Mundipharma, Zambon,诺华,Menarini,赛诺菲安万特/ Regeneron,罗氏,基金会萨尔瓦多Maugeri,基耶西和爱德蒙制药公司在提交的工作。
利益冲突:K.F.瑞芭报告赠款和阿斯利康的个人费用,勃林格殷格翰的发言,赛诺菲-安万特默克大幅& DOHME诺华,猎户座合作,柏林化学,罗氏,基耶西和赠款从教育和科学研究,德国。
利益冲突:t)及没有披露。
利益冲突:D.E. Shaw报告个人费用和非金融支持葛兰素史克、诺华、阿斯利康外提交的工作。
利益冲突:新墨西哥州Siafakas没有披露。
利益冲突:m . Uhlen没有披露。
利益冲突:J.H. Riley是葛兰素史克公司的员工和股东。
利益冲突:美国贝茨是葛兰素史克公司的员工和股东。
利益冲突:R.J.M. Middelveld报道瑞典战略研究基金会的资助,阿斯利康,瑞典心肺基础和瑞典哮喘和过敏协会外提交的工作。
利益冲突:石球惠洛克没有披露。
利益冲突:K.F.涌报告赠款和葛兰素史克的个人费用,阿斯利康,诺华,默克,勃林格殷格翰的发言,罗氏,赢家外提交的工作。
利益冲突:贝聿铭爱德考克没有披露。
利益冲突:P.J.斯德克已报告赠款从公私阿姆斯特丹联华电子创新药物倡议(IMI)由欧盟(EU)和欧洲制药工业协会联合会(EFPIA)进行研究。
利益冲突:r .也有报告收到费用讲座由诺华公司组织的座谈会,葛兰素史克、阿斯利康和Teva,从Teva和诺华咨询费用;他是一个联合创始人和现任顾问,Synairgen的股票。
利益冲突:p·尼尔森没有披露。
利益冲突:是。Dahlen报告个人费用从阿斯利康、开曼化工、葛兰素史克、诺华、Regeneron,赛诺菲和Teva外提交的工作。
利益冲突:a .詹姆斯没有披露。
支持声明:本研究支持由冠军(过敏研究中心突出哮喘表型标记)财团是由瑞典战略研究基金会资助,卡罗林斯卡医学院、阿斯利康和科学生活实验室联合研究协作和Vardal基金会,瑞典心肺基础,瑞典MRC斯德哥尔摩郡议会研究基金(ALF),瑞典哮喘和过敏协会研究基金会和卡罗林斯卡医学院。这个项目已经收到资金从一个创新药物倡议(IMI)合营企业(居)赠款协议115010号(U-BIOPRED(无偏预测生物标志物的呼吸系统疾病的结果)),是由金融资源的贡献从欧盟第七框架计划(fp7/2007 - 2013)和EFPIA公司的贡献。额外的支持从IMI 2居赠款协议编号为831434 (3 tr(分类、治疗目标和缓解))。这榉接收支持欧盟地平线2020研究和创新计划和EFPIA。BIOAIR财团是由第五和第六框架计划的欧盟,合同号码:qlg1 - ct - 2000 - 01185 (BIOAIR)和食品- ct - 2004 - 506378 (GA2LEN),和几个国家资助机构。答:詹姆斯和m . Kupczyk伯纳德Osher计划支持的是严重的哮喘。p . Emami Khoonsari财务支持的克努特和爱丽丝•瓦伦堡基金会作为国家生物信息学基础设施的一部分,在SciLifeLab瑞典。资金信息,本文已沉积的Crossref资助者注册表。
- 收到了2021年1月15日。
- 接受2021年6月24日。
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