文摘
闭塞性细支气管炎是一种并发症后同种异体造血干细胞移植(HSCT)。闭塞性细支气管炎的管理由强化的免疫抑制治疗,但治疗反应差。我们调查的影响环孢霉素(CsA),他克莫司(吸收FK506),甲基强的松龙(mpr),霉酚酸酯(MMF)和everolimus扩散主要从HSCT患者肺myofibroblasts闭塞性细支气管炎综合征(BOS)。
细胞被分离出8 BOS HSCT患者外科肺活检。扩散是评估3H]胸腺嘧啶核苷掺入。
活检显示压缩性的闭塞性细支气管炎在三个病人,在五个病人淋巴细胞性细支气管炎。CsA和吸收FK506显著诱导myofibroblasts扩散。mpr和MMF造成显著的抑制增殖,而everolimus没有效果。与吸收FK506聚集有关,mpr和MMF显著抑制增殖。串行肺功能测试在12个月后下肺活检和三联疗法证明患者淋巴细胞性细支气管炎有显著改善在1 s (FEV用力呼气量1),而FEV1闭塞性细支气管炎患者的不变。
我们的数据展示的前导钙调磷酸酶抑制剂对主要的影响人类肺myofibroblasts HSCT后从患者获得BOS。相比之下,基于MMF的观察抗增殖能力在体外,MMF-based钙调磷酸酶inhibitor-free治疗策略应该进一步HSCT后闭塞性细支气管炎患者进行评估。
文摘
钙调磷酸酶inhibitor-free方案需要进一步评价干细胞移植后在闭塞性细支气管炎http://ow.ly/qeKha
介绍
同种异体造血干细胞移植(HSCT)是一种治疗选择建立几个恶性和非恶性的疾病(1]。然而,长期生存受到疾病的复发和慢性移植的发展与宿主疾病(GvHD),最常见的晚期并发症同种异体HSCT后(2]。肺部的慢性移植物抗宿主病的表现,闭塞性细支气管炎(3),有一个报道的发生率[5 - 20%4,5]。闭塞性细支气管炎的特点是固定的气流阻塞的新发展,体现与咳嗽、呼吸困难,喘息3,6]。闭塞性细支气管炎一词代表组织病理学证实诊断,显示细支气管上皮损伤,闭塞的细支气管腔上皮和平滑肌之间和炎症7]。在缺乏组织学确认,闭塞性细支气管炎综合征的临床诊断(BOS)需要下降气流在肺功能测试和空气滞留在计算机断层扫描(CT)扫描(3,8]。
尽管闭塞性细支气管炎慢性移植物抗宿主病密切相关(9),异构组织病理学结果和临床过程意味着形成闭塞性细支气管炎是一种多因子的过程涉及同种免疫的和nonalloimmune机制(10]。闭塞性细支气管炎的发病机制被认为是由重复的肺组织损伤。这些损伤可能是由于不同的因素,如供体t淋巴球和接受者之间的交互上皮细胞(11),组织损伤引起的调节方案(12)或感染(13]。免疫抑制药物是否在闭塞性细支气管炎发展中发挥作用和/或发展HSCT后,除了对感染的易感性增加,尚未被研究过。
数据从肺移植的文献表明,钙调磷酸酶抑制剂和糖皮质激素等免疫抑制剂可能有益的发展措施,以减缓BOS [14,15]。因此,治疗闭塞性细支气管炎HSCT后基于重新建立或扩充与大剂量免疫抑制治疗系统性皮质类固醇和其他代理人,即环孢霉素(CsA)和他克莫司(吸收FK506) [16,17]。然而,尽管不同的治疗方法,预后的闭塞性细支气管炎仍然贫穷,总的3年死亡率高达65%18]。此外,增强免疫抑制可能是有限的潜在好处,由于发生危及生命的肺部感染。目前,没有大型对照试验数据是可用的,闭塞性细支气管炎治疗是基于专家意见和小案例系列。
CsA的纤维发生的影响和吸收FK506在肾移植已经被广泛的研究19),主要是由高架的表达改变增长factor-β[20.,21]。此外,以前的数据表明,CsA可以直接刺激细胞增殖(22,23),提高钙调磷酸酶抑制剂的可能性可能导致肺部慢性移植物抗宿主病的发展。本研究的目的是调查在体外免疫抑制药物的效果CsA,吸收FK506,甲基强的松龙(mpr),霉酚酸酯(MMF)和everolimus主要人类肺细胞的增殖能力获得BOS HSCT后患者。
材料和方法
病人
主要的人类肺细胞培养成功建立了肺组织从外科肺活检获得的八BOS HSCT后患者。所有的病人有一个不可逆转的衰退在1 s (FEV用力呼气量1)> 15%,提示为闭塞性细支气管炎的症状,因此接受了最后的外科肺活检诊断。肺活检之前所有的病人有高分辨率CT扫描,并进行了灵活的支气管镜检查和支气管肺泡灌洗(BAL)排除感染引起的肺功能下降。CT扫描进行分析肺浸润,支气管壁增厚、支气管扩张和空气滞留。道达尔和微分灌洗液细胞进行计数。肺活检是由胸腔镜手术(槽)。肺楔形膨胀和缓冲福尔马林固定为4%。石蜡包埋后,切成4-μm部分标本,常规苏木精和伊红染色,弹力van Gieson阿尔新blue-periodic酸性品红,格罗克特乌洛托品银染色。综述了组织部分由两个有经验的肺部病理学家。病人特点所示表1。所有的病人群体的一部分,临床特点是更详细地描述一个单独的纸(24]。
肺功能测试
患者进行了临床评估和一套完整的肺功能测试之前和之后HSCT,大桶之前,大桶后3、6和12个月。肺功能测试进行使用身体体积描记法和一氧化碳扩散能力(Jaeger,维尔茨堡,德国)。据欧洲呼吸协会执行所有测试标准(188bet官网地址25]。从七个病人肺功能随访数据可用;一个病人死于严重感染诊断BOS后4个月。
细胞培养
人类肺组织与人类伦理委员会批准,获得大学的巴塞尔(瑞士巴塞尔)和书面知情同意了所有病人外科肺活检。主要人类肺细胞培养建立了先前报道(26]。简单、新鲜周围肺组织获得了从接受诊断的患者的肺切除,1毫米的,切成小块3是放在pre-wetted 25厘米2细胞培养瓶。培养基,由RPMI (Gibco表达载体,紫花苜蓿,瑞士)补充10%胎牛血清(FCS) (Gibco), 20 U·L−1青霉素、μg·20毫升−1链霉素和2.5μg·毫升−1两性霉素B (Gibco),第四天更换一次。标准条件下细胞生长(37°C, 21% O2,5%的公司2)。融合细胞层90%与0.5%胰蛋白酶溶液trypsinised disodiumEDTA在1毫米。所有实验用细胞在三到六。
免疫荧光分析
免疫荧光分析细胞被镀在RPMI six-well盘子和成长,FCS的10%。细胞被固定为4%福尔马林(10分钟)和permeabilised乙酸(3:1,冰冷的,10分钟)。细胞被屏蔽5%牛血清白蛋白(1 h)和孵化纤连蛋白抗体(圣克鲁斯,LabForce AG) Nunningen,瑞士),α-smooth肌肉肌动蛋白(Nunningen Epitomics、LabForce AG),瑞士)和cofilin (Santa Cruz)的1 h。主要的抗体被发现的fluorescein-conjugated山羊anti-rabbit (Bethyl实验室、Lubio科学、苜蓿、瑞士),fluorescein-conjugated驴抗体(南方生物技术,BioConcept、Allschwil、瑞士)或cy3-conjugated山羊anti-rabbit抗体(表达载体;瑞士卢塞恩)cofilin、纤连蛋白和α-smooth肌肉肌动蛋白,分别为1 h。原子核的可视化,4,6-diamido-2-phenylindole盐酸盐(Sigma-Aldrich、书、瑞士)添加(5分钟)和孔板随后在荧光显微镜检查。
扩散分析
主要人类肺myofibroblasts被播种到96孔板的密度1×105细胞·毫升−1,增长到60 - 70%汇合的在生长介质。细胞与PBS冲洗两次,然后serum-starved 24 h。Myofibroblasts孵化的RPMI有或没有药物(控制)。mpr的影响(甲基强的松龙;Sigma-Aldrich)、CsA(山地明;瑞士诺华制药,巴塞尔),吸收FK506 (Prograf;藤泽,大阪,日本),everolimus (Sigma-Aldrich)和MMF(在所有实验中使用霉酚酸,MMF)的生物活性形式(霉酚酸,Sigma-Aldrich)进行评估。Myofibroblasts孵化与RPMI补充10% FCS被用作控制增生性反应。19 h 1μCi[之后3H]胸苷(PerkinElmer, Zaventem,比利时)在10μL RPMI被添加到每个。进一步5 h后潜伏期,100μL 1 M氢氧化钠是添加到每个细胞然后收获到滤板(PerkinElmer)使用Filtermate unifilter - 96收割机(PerkinElmer)。过滤板被干在室温下过夜,然后添加20μL闪烁液(PerkinElmer)每个。每分钟计数得到在TopCount微型板块闪烁计数器(PerkinElmer)每样1分钟。
统计分析
统计比较是由使用配对t成对观测。p≤0.05被认为是显著的。在适用情况下,数据显示为±意味着什么扫描电镜至少有三个独立的实验。
结果
所示的八个病人的特点表1。绝对FEV的下降意味着(范围)1在移植前(基线稳定)和肺活检是-39% (-17.5 - -65.5%)(表1)。辐射变化对高分辨率胸部CT扫描,重点归纳了困气和支气管扩张的迹象表1。3例患者的中性粒细胞数量升高BAL流体和另外三个有高比例的淋巴细胞。没有病人伴有感染。肺组织活检显示典型的闭塞性细支气管炎3和淋巴细胞性细支气管炎患者5例(表1)。代表的肺组织部分闭塞性细支气管炎和淋巴细胞性细支气管炎所示图1。Post-biopsy BOS组成的组合治疗类固醇,吸收FK506和MMF患者(表1)。
)代表肺组织切片与闭塞性细支气管炎偏心,牙龈结缔组织口供(箭头所指)没有炎症。弹力范Gieson染色。b)代表的肺组织切片论证一个上皮内淋巴细胞性细支气管炎单核炎症浸润和缺乏腔的消亡。苏木精和伊红染色。c)代表肺淋巴细胞的细支气管炎强调上皮内CD8淋巴细胞的存在。CD8 immunohistological染色。酒吧= 100μm规模。
所示图2,培养主肺细胞表现出典型的梭形形态的间充质细胞,免疫荧光研究表明积极的免疫反应对纤连蛋白(图2 b)和α-smooth肌肉肌动蛋白(图2 d),识别与myofibroblasts细胞。这进一步证实了积极的免疫反应的典型myofibroblast cofilin标志(图2 f)。细胞保持这些特点在几个段落文化。
主要人类肺细胞应用b)纤连蛋白,d)α-smooth cofilin肌肉肌动蛋白和f)。相应的相衬图片所示面板),c和e)。细胞成长为融合在正常生长培养基,然后固定和permeabilised。主要添加fluorescein-labelled抗体进行检测(绿色)或Cy3-labelled(红色)二级抗体。通过荧光显微镜可视化。酒吧= 200μm规模。
myofibroblasts扩散与10% FCS增长刺激后增加四倍(406±115%)与细胞生长在FCS-free介质(图3)。我们发现基线之间无显著差异(FCS-free)和10% FCS-stimulated myofibroblasts增殖能力来源于患者组织学证实闭塞性细支气管炎与获得患者淋巴细胞细支气管炎。
10%胎牛血清的影响(FCS)生长介质myofibroblast扩散而无血清培养基。主要人类肺myofibroblasts (n = 8)孵化24 h与血清RPMI介质或含有10% FCS的RPMI。细胞生长是评估3H]胸腺嘧啶核苷掺入。每个测试的)绝对值细胞系;b)意味着±扫描电镜值8个独立的实验中,表示为相对扩散与控制(无血清RPMI)。每个实验进行了一式三份。cpm:每分钟计数。
低浓度的CsA (0.01 mg·L−1和0.1 mg·L−1未经处理的细胞(相比)显著诱导细胞增殖图4)。CsA 0.01 mg·L−1造成39.9±11.9%诱导细胞生长与未经处理的对照相比(p < 0.05) (n = 8日图4)和0.1 mg·L−1CsA有着相似的刺激效应为32.7±12.6%诱导细胞生长(p < 0.05) (n = 8日图4)。只有高剂量CsA (50 mg·L−1)56±14.3%的增长产生了显著的抗增殖作用减少(p < 0.05) (n = 8日图4)。然而,这种效果是伴随着细胞的生存能力下降(台盼蓝排斥),(早些时候报道27]。同样,吸收FK506引起了诱导细胞增殖在低浓度(图4 b)在0.001 mg·L−1吸收FK506造成37.6±15.1%诱导细胞生长(p < 0.05) (n = 8日图4 b),在0.01 mg·L−138.3±15.5%诱导细胞生长(p < 0.05) (n = 8日图4 b)和0.1 mg·L−1吸收FK506 27.0±12.2%刺激的影响细胞增殖(p < 0.05) (n = 8日图4 b)。显著的抗增殖效果只观察吸收FK506浓度的5 mg·L−1(27个±15.4%抑制;n = 8, p < 0.05) (图4 b),但又结合细胞生存能力下降。mpr在任何浓度没有growth-stimulatory影响,但显著抑制扩散引起的浓度的10 mg·L−1(14.8±4.9%的抑制;n = 8, p < 0.05) (图4摄氏度),50 mg·L−1(18.2±7.5%的抑制;n = 8, p < 0.05) (图4摄氏度)和100 mg·L−1抑制(35.7±7.5%,n = 8, p < 0.05) (图4摄氏度)。同样,MMF引起显著的增殖抑制浓度为0.01 mg·L−1(17.9±3.4%的抑制;p < 0.05) (图4 d)和1毫克·L−1(25.6±9.0%的抑制;p < 0.05) (图4 d)。Everolimus没有显著影响细胞增殖在任何浓度测试(n = 8) (图4 e)。
药物对myofibroblast扩散的影响与血清RPMI相比。主要人类肺myofibroblasts (n = 8)孵化24 h与浓度增加)环孢霉素a, b)他克莫司(吸收FK506), c)甲强龙,d)霉酚酸酯或e) everolimus。无血清RPMI担任控制。细胞生长是评估3H]胸腺嘧啶核苷掺入和价值观提出了均值±扫描电镜在八个不同的细胞系进行独立的实验,表示为相对扩散与控制(无血清RPMI)。*:p < 0.05。
没有区别在药物治疗后增生性反应细胞系分组时根据组织学发现:细胞系来源于闭塞性细支气管炎肺不不同细胞系来源于淋巴细胞增殖反应肺毛细支气管炎(数据没有显示)。
根据管理BOS治疗(表1),从患者获得myofibroblasts BOS HSCT后刺激与吸收FK506的结合(0.01 mg·L−1)、mpr (10 mg·L−1)和MMF(1毫克·L−1)。所示图5这三重治疗引起显著抑制细胞增殖(33抑制±6.9%,p < 0.05) (图5),这是更明显比单独使用mpr在同一浓度。研究的MMF部分抗增殖效果,myofibroblasts仅在MMF刺激,这引起了类似的抑制作用为三重刺激(40.2±5.0%抑制,p < 0.05) (图5)。
联合治疗效果与他克莫司(吸收FK506),霉酚酸酯(MMF)和甲基强的松龙(mpr)和MMF独自myofibroblast扩散与血清RPMI相比。主要的人类肺myofibroblasts孵化24 h和吸收FK506 (0.01 mg·L−1),MMF(1毫克·L−1)和mpr (10 mg·L−1与MMF)或(1毫克·L−1单独)。无血清RPMI担任控制。细胞生长是评估3H]胸腺嘧啶核苷掺入和价值观提出了均值±扫描电镜独立的实验中,表示为相对扩散与控制(无血清RPMI)。
后续进行肺功能测试在3、6和12个月后肺活检。图6描述了FEV的进程1(%)预测时间点的所有病人的大桶,3、6和12个月后肺活检。图6 b显示的发展意味着FEV1%的pred两组。pre-lung-biopsy值相比,患者淋巴细胞性细支气管炎有统计学意义的意思是FEV的改善1% pred 3个月后(+ 17.3%,n = 5, p≤0.05) (图6 b),6个月(+ 30.9%,n = 4, p≤0.05) (图6 b)和12个月后(+ 29.2%,n = 4, p≤0.05) (图6 b),而患者组织学闭塞性细支气管炎FEV显示无显著变化1% pred。
![图6 -](http://www.qdcxjkg.com/content/erj/43/1/221/F6.medium.gif)
一)在1 s (FEV用力呼气量1)%所有八个病人的预测;b)意味着FEV1%的pred值病人组与组织学证实闭塞性细支气管炎(n = 3)和病人组与淋巴细胞性细支气管炎(n = 5)。时间点显示胸腔镜手术,3个月,手术后6个月和12个月。*:p≤0.05。
讨论
在这项研究中,我们调查了在体外免疫抑制剂的增殖能力的影响主要从患者获得人类肺myofibroblasts同种异体HSCT后BOS。我们发现临床相关的钙调磷酸酶抑制剂CsA和吸收FK506浓度(CsA 0.01 mg·L−1和0.1 mg·L−1;和吸收FK506 0.001 mg·L−1,0.01毫克·L−1和0.1 mg·L−1)增强myofibroblasts扩散,而MMF和mpr显著抑制细胞增殖引起的。最后,吸收FK506的联合治疗,MMF和mpr,根据治疗BOS管理在我们的学习小组中,显著抑制myofibroblast扩散引起的。
外科肺活检仍是诊断的金标准的闭塞性细支气管炎3]。然而,通常是避免外科肺活检术,由于这个病人组中潜在的高发病率和死亡率。在一项研究为由T奥玛仕等。(28)只有13%的怀疑与闭塞性细支气管炎患者接受外科肺活检组织学确认,因此有限BOS的组织学相关数据是可用的。在我们八BOS患者中,只有三个(38%)显示一个典型的压缩性的闭塞性细支气管炎模式在肺活检。其他五个病人显示组织学模式突出的淋巴细胞浸润的淋巴细胞性细支气管炎细支气管壁变上皮炎症和损伤。发现大约有三分之一的患者BOS表现出典型的组织模式的压缩性的闭塞性细支气管炎是由一系列更大的数据HSCT BOS患者接受外科肺活检(24]。淋巴细胞性细支气管炎被归类为一种变体肺移植物抗宿主病(16,29日]。然而,当前的知识标准不允许决定是否淋巴细胞性细支气管炎和闭塞性细支气管炎是两个独立的过程,还是淋巴细胞性细支气管炎和闭塞性细支气管炎代表早期(淋巴细胞性细支气管炎)和后(闭塞性细支气管炎)阶段相同的疾病过程,即。慢性肺移植物抗宿主病。假设纤维化过程中观察到的闭塞性细支气管炎是由炎症阶段之前(淋巴细胞性细支气管炎)支持的观察在大鼠模型肺移植后的闭塞性细支气管炎,淋巴细胞浸润纤维闭塞的前体(30.]。此外,病人情况的基础上慢慢进步BOS,它已被证实最近淋巴细胞浸润在支气管壁纤维化之前闭塞性细支气管炎的典型病理结果(31日]。
无论组织模式,增强免疫抑制疗法,包括钙调磷酸酶抑制剂,广泛用于BOS HSCT后的治疗。然而,迄今为止的有益影响钙调磷酸酶抑制剂治疗的BOS /闭塞性细支气管炎HSCT后还没有被证明。CsA和吸收FK506抑制磷酸酶,负责calcium-dependent信号转导,从而防止淋巴因子基因的转录,如白介素2和抑制t细胞的活化和增殖32]。然而,CsA的纤维发生的效应和吸收FK506在肾移植和动物和所述在体外模型(19- - - - - -21]。纤维发生的影响主要是由表达转换增长factor-β升高,抑制基质金属蛋白酶活性和增广成纤维细胞胶原合成(20.,21]。据我们所知,我们是第一个人类肺细胞文化主要来源于HSCT患者BOS,我们利用这些细胞能够证明CsA和临床相关的免疫抑制吸收FK506浓度有显著的前导作用主要人类肺myofibroblasts。这种效果的浓度观察躺在0.001 mg·L−1和1毫克·L−1CsA和之间的0.001和0.01 mg·L−1为吸收FK506,因此对应于目标遗传损伤的浓度0.15 - -0.25 mg·L−1CsA和0.01 - -0.02 mg·L−1吸收FK506 [33]。我们的在体外数据显示的前导作用的钙调磷酸酶抑制剂主要人类肺细胞与其他细胞类型的数据(22,23,对应于观测pro-fibrotic效果在活的有机体内(34]。在非常高的浓度才CsA (50 mg·L−1)和吸收FK506(5毫克·L−1)发挥anti-proliferative影响主要人类肺myofibroblasts在我们在体外模型。但这种效果是伴随着细胞生存能力下降27),这些浓度没有进一步追求。即使组织CsA和吸收FK506浓度明显高于血药浓度,不太可能,这些组织浓度高会到达肺部,因为积累这些亲脂性的药物主要发生在lipid-rich器官(35]。重要的是要注意,肺组织浓度预计将增加额外的CsA吸入,这种新形式的管理提供了一个生存的优势与传统疗法在肺移植受者与闭塞性细支气管炎36]。虽然我们观察到类似的前导CsA和吸收FK506使用时在我们的临床相关的浓度在体外模型中,临床数据证明了吸收FK506优于CsA对自由从BOS肺移植后37),和课程lung-transplanted BOS[患者的肺功能15]。然而,没有可比数据HSCT患者。
与测试钙调磷酸酶抑制剂,mpr产生了重大growth-inhibitory效应浓度的10,50和100毫克·L−1。这些类固醇脉冲浓度可能达成的500 - 1000毫克/天(38),可能最初诊断后的闭塞性细支气管炎。观察到的mpr的抗增殖作用在体外模型符合数据提交之前(39,40]。我们的在体外数据反映了高剂量的临床经验注射。mpr可能造成有利的反应在骨髓移植后闭塞性细支气管炎41]。相比之下,孤立肺移植后淋巴细胞性细支气管炎患者FEV没有任何改善1脉冲mpr治疗后(42]。
类似于mpr, MMF显著抑制细胞增殖引起的,这是与以前公布在体外数据(39,43,44]。1 mg·L的浓度−1MMF对应目标遗传水平移植患者(45]。MMF已被证明是安全有效的使用时作为一线肺移植后免疫抑制(46从钙调磷酸酶抑制剂)和转换MMF患者肺移植术后BOS导致一些病人移植肾功能的稳定(47]。此外,在未来的试验比较MMF与咪唑硫嘌呤在肺移植受者移植物失功可以证明MMF显著降低由于BOS和倾向于提高总生存期(48]。
Everolimus,哺乳动物雷帕霉素靶的抑制剂,对细胞增殖在我们没有显著影响在体外模型。everolimus一直在前面所述的抗增殖作用non-haematopoietic造血细胞(49,50]。然而,在这些研究everolimus只有抑制增长factor-triggered扩散(49,50),而我们观察药物的效果在FCS - / growth-factor-free细胞培养基。尽管肺移植的数据显示出显著减少肺功能下降的速率下everolimus治疗(51),BOS HSCT后不存在这样的数据。最后,everolimus应该小心使用由于潜在的重要的肺和肝毒性52- - - - - -55]。
闭塞性细支气管炎/淋巴细胞性细支气管炎的诊断后,所有8个病人在这个研究小组与三联疗法治疗包括mpr、吸收FK506 MMF。因此,我们还测试了这联合治疗的效果在体外模型和结合mpr和MMF能够完全抵销的前导吸收FK506的潜力。重要的是,这种效应可能主要归因于MMF,与MMF monostimulation表现出类似的抗增殖效果比三重刺激。观察到的在体外growth-inhibitory MMF的影响进一步药物的潜在的权力限制fibroproliferative疾病的进展,并凸显了需要进行进一步的临床研究药物。我们意识到我们的在体外模型并不完全代表了多个不同的细胞类型之间的影响和可溶性因素导致闭塞性细支气管炎在活的有机体内。然而,考虑到我们在体外数据,钙调磷酸酶抑制剂的作用治疗闭塞性细支气管炎HSCT后至少应该质疑,和MMF-based(钙调磷酸酶inhibitor-free)方案可能会进一步评估,包括与阿奇霉素MMF的组合作为一个预防措施,后者已被证明能够降低BOS肺移植后(56]。到目前为止,只有一个随机试验研究MMF的影响在初始治疗慢性移植物抗宿主病(57]。然而,由于BOS患者被排除在这个试验和数字的新诊断BOS低,没有任何有关MMF的效果影响的结论BOS之后才能得出结论。
最后,分析连续随访肺活检后肺功能测试,在上述三重免疫抑制治疗显示,组织淋巴细胞性细支气管炎患者经历了统计相关FEV的改进1% pred,而在患者组织学证实闭塞性细支气管炎FEV1% pred保持不变,这是符合一系列更大的结果(24]。这个临床观察支持我们在体外数据显示与mpr anti-proliferative联合治疗的影响,MMF和吸收FK506。然而,这种有益的效果似乎主要发生在患者淋巴细胞细支气管炎,但不是在那些与闭塞性细支气管炎,从而表明,只有在与大量的炎性细胞浸润条件疾病的进展可以推迟,而只有很少炎症但明显纤维化的潜在好处可能是有限的。重要的是,嗜中性球> 15%的液体已经证明是FEV的预测1BOS肺移植后患者应对阿奇霉素(58),而病人没有嗜中性球受益于增加的白三烯受体拮抗剂montelukast [59]。这些发现转移到我们的学习小组,人会增加阿奇霉素这些组织淋巴细胞性细支气管炎患者的免疫抑制方案和相关BAL嗜中性,中性粒细胞淋巴细胞较低的和额外的对那些病人montelukast细支气管炎。最近的数据获得HSCT患者BOS证明阿奇霉素和montelukast允许减少类固醇曝光(60),但没有改善肺功能值下阿奇霉素治疗在一项随机安慰剂对照研究61年]。相比之下,结合标准免疫抑制治疗和montelukast引起肺功能测试值的改善患者的慢性移植物抗宿主病(62年]。
我们承认,目前的研究有一定的局限性。首先,我们使用药物浓度范围内的目标遗传损伤的水平,但可能不能反映肺组织浓度。但是,没有代表性数据存在于组织研究药物的浓度。此外,我们在体外模型,而像一个常数输液的药物,相比之下的高峰和低谷水平在活的有机体内的情况。其次,钙调磷酸酶抑制剂的机制发挥他们的前导作用没有解决,但这将超过这个手稿的范围。第三,研究的患者数量很小。由于闭塞性细支气管炎是一种罕见的疾病,一些患者进行肺活检,这将是一个巨大的挑战更大的病人数量。然而,考虑到结果的一致性,我们相信,我们的数据是代表这种类型的实验。最后,我们都知道,结果得到的过渡在体外模型必须谨慎进行,临床实践和控制需要临床试验来测试基础研究数据。
结论
我们的数据表明,CsA和吸收FK506的前导影响主要从患者获得人类肺myofibroblasts BOS同种异体HSCT后,和他们的角色在治疗闭塞性细支气管炎HSCT后可能会受到质疑。然而,吸收FK506, mpr和MMF显著抑制细胞增殖在体外,这主要是由于growth-inhibitory MMF的效果。我们的研究表明,在闭塞性细支气管炎患者HSCT MMF-containing,钙调磷酸酶inhibitor-free方案应该进一步评估。
脚注
利益冲突:没有宣布。
- 收到了2012年12月10日。
- 接受2013年3月27日。
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