文摘gydF4y2Ba
中性粒细胞激活状态及其与炎症的关系环境社区获得性肺炎(CAP)仍然不够了。我们旨在评估戴帽的中性粒细胞凋亡和细胞因子模式72 h的治疗后,患者对感染分辨率及其影响。gydF4y2Ba
中性粒细胞凋亡的血液和支气管肺泡灌洗(BAL)测定在nonresponding帽(NCAP),在回应帽(血液)和没有感染的病人(控制)。促炎(白介素(IL) 6,引发)和抗炎细胞因子(IL - 10)测量。主要结果是临床稳定和天的住院治疗。gydF4y2Ba
基底中性粒细胞凋亡是高NCAP的矿山和血液,而自发凋亡(24 h后文化)较低。细胞因子在NCAP高于响应限制和控制:il - 6在BAL和血液增加,引发BAL和il - 10在血泊中。增加基底细胞凋亡(≥20%)在BAL NCAP的降低系统性il - 10 (p < 0.01),早期临床稳定(p = 0.05)和更短的住院时间(p = 0.02)。发现了一个显著相关系统性il - 6和il - 10天达到稳定和住院时间。gydF4y2Ba
72 h后治疗,增加基底肺泡中性粒细胞凋亡的差别可能导致对这些炎症和更快的临床稳定。gydF4y2Ba
社区获得性肺炎(CAP)的发病率为每1000名成年人(5gydF4y2Ba1gydF4y2Ba)和住院病人的死亡率范围在5%和15%之间。一个适当的宿主反应促进微生物杀死,同时限制过度的炎症和组织损伤(gydF4y2Ba2gydF4y2Ba]。然而,∼10%的上限患者发展nonresponding帽(NCAP),导致延迟决议和糟糕的结果(gydF4y2Ba3gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba
在帽,激活血液中的中性粒细胞迁移和积聚在肺部,摄取和杀死细菌,最后,进行细胞凋亡。巨噬细胞清除凋亡中性粒细胞,从而排除后续释放炎性细胞因子,促进解决炎症(gydF4y2Ba4gydF4y2Ba,gydF4y2Ba5gydF4y2Ba]。尽管中性粒细胞免疫细胞通常是短暂的,它们的寿命延长是其功效的关键。然而,随着中性粒细胞的裂解酶也能导致器官损伤,激活和生存必须严格监管gydF4y2Ba5gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba9gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba
在NCAP)持续肺和系统性炎症已经报道(gydF4y2Ba10gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba12gydF4y2Ba]。然而,中性粒细胞激活的状态还有待阐明。我们提出的持续激活中性粒细胞在肺NCAP可能导致炎症和延迟的解决方案的维护。gydF4y2Ba
我们的目的主要是为了评估中性粒细胞凋亡和细胞因子模式(白介素6 (IL),引发和IL - 10),肺和血液,住院患者NCAP。其次,我们研究了影响的临床参数稳定和保持(洛杉矶)的长度。gydF4y2Ba
方法和材料gydF4y2Ba
研究设计gydF4y2Ba
患者进行前瞻性研究中承认帽。肺炎被定义为新的渗透与整合的症状和实验室结果(发烧≥38°C,脓性痰和白细胞数≥12000毫米gydF4y2Ba−3gydF4y2Ba)。排除标准入学前15天,免疫抑制治疗。gydF4y2Ba
NCAP组入选标准:临床条件实现NCAP治疗72 h后(参见下面的定义)和性能的支气管镜检查显示医生负责。患者纳入研究进行支气管镜检查时的那一天。gydF4y2Ba
两对照组年龄(±10岁)和共病相匹配条件包括:1)帽组由帽患者达到临床稳定性(下面定义);2)对照组由病人没有感染称为周围肺结节或小咯血的支气管镜检查。gydF4y2Ba
我们收集的数据在年龄、性别、吸烟习惯、并发症、临床症状和体征,肺炎严重程度指数(gydF4y2Ba13gydF4y2Ba),胸部x光和生化分析、微生物的发现,和之前和现在的抗生素治疗。gydF4y2Ba
这项研究是大学伦理委员会的批准和Politecnic医院拉菲(瓦伦西亚,西班牙)和书面知情同意。没有支气管肺泡灌洗(BAL)流体帽组中获得,因为道德委员会将不会批准支气管镜检查患者足够的反应。gydF4y2Ba
定义gydF4y2Ba
NCAP被定义为持续的高温(≥38°C)和/或72 h的抗生素治疗后临床症状、胸部影像学进展的肺炎(> 50%增加浸润以及持久性的高温和/或临床症状),积脓症、脓毒性休克和/或机械通风的必要性gydF4y2Ba12gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba
帽组由病人满足临床稳定标准(gydF4y2Ba14gydF4y2Ba,gydF4y2Ba15gydF4y2Ba]。稳定的成就被定义为所有的以下参数:温度≤37.2°C,心率≤100次每分钟,每分钟呼吸率≤24次,收缩压≥90毫米汞柱,氧饱和度≥90%或动脉氧张力≥60毫米汞柱不补充氧气。gydF4y2Ba
洛杉矶是计算的天数从入院到出院。gydF4y2Ba
获取和处理落下帷幕gydF4y2Ba
根据推荐指南[执行落下帷幕gydF4y2Ba16gydF4y2Ba]。NCAP组涉及叶落下帷幕了,在那些患者弥漫性肺浸润或在对照组,在中间叶或海豆芽。5整除的无菌生理盐水被灌输,马上吸气。第一个整除(20毫升)丢弃。其余四整除(30毫升)汇集在一起在一个siliconised无菌玻璃:这四个整除的一半被送到一个微生物实验室,另一半生物化学实验室。均值±gydF4y2Ba扫描电镜gydF4y2Ba落下帷幕的体积流体获得39±3毫升。gydF4y2Ba
中性粒细胞从BAL样品净化gydF4y2Ba
球样品被离心353×立即颗粒状gydF4y2BaggydF4y2Ba5分钟在4°C。上层清液量测量和冷冻。颗粒与培养基resuspended (RPMI 1640无酚红;表达载体,卡尔斯巴德、钙、美国),通过两层纱布,离心机353×gydF4y2BaggydF4y2Ba5分钟在4°C。细胞颗粒与PBS洗两次,用低渗的解决方案(NH resuspendedgydF4y2Ba4gydF4y2BaNaHCO Cl 155毫米gydF4y2Ba3gydF4y2Ba2.46毫米,EDTA·4 hgydF4y2Ba2gydF4y2BaO 3.72毫米;pH值7.4)5分钟在冰上。离心后304×gydF4y2BaggydF4y2Ba5分钟在4°C,小球在PBS resuspended。嗜中性粒细胞数量和活力测定用台盼蓝排斥法(gydF4y2Ba17gydF4y2Ba,gydF4y2Ba18gydF4y2Ba]。光学显微镜研究cytospin幻灯片被展示全景的染色方法(Panreac Quimica SA,巴塞罗那,西班牙)。gydF4y2Ba
血液样本的准备gydF4y2Ba
在NCAP,支气管镜检查前得到了血液样本,帽组,在达到稳定。等离子体整除之前撤回为细胞因子测定中性粒细胞隔离ELISA。如前所述(执行隔离的中性粒细胞gydF4y2Ba19gydF4y2Ba]。颗粒是resuspended 5分钟在冰上低渗的解决方案,和旋转与PBS 304×gydF4y2BaggydF4y2Ba为5分钟颗粒中性粒细胞(类似于BAL样本)。细胞被resuspended PBS和统计。gydF4y2Ba
通过流式细胞仪检测细胞凋亡gydF4y2Ba
中性粒细胞是沾膜联蛋白V检测设备(tacgydF4y2BaTMgydF4y2Ba膜联蛋白V-fluorescein异硫氰酸酯(FITC);研发系统,明尼阿波利斯,美国制造商的指示。样本分析使用一个史诗XL(美国佛罗里达州Hialea, beckman coulter) [gydF4y2Ba20.gydF4y2Ba]。中性粒细胞是封闭的根据他们的前进和侧散射特性最低10000的事件从每个样本。控制包括设置补偿没有染色的细胞,细胞染色膜联蛋白V或独自propidium碘。凋亡细胞区别于正常细胞和坏死细胞通过标签膜联蛋白V和排除propidium碘。每个族群都表示为一个中性白细胞总数的百分比。gydF4y2Ba
此外,染色与CD16 FITC(物联网;beckman coulter)在单独的整除BAL和血液样本用于检测阳性嗜中性粒细胞人口。gydF4y2Ba
检测细胞凋亡的增量(自发凋亡)24小时后gydF4y2Ba在体外gydF4y2Ba文化中,中性粒细胞被播种RPMI补充10%的边后卫,gydF4y2BalgydF4y2Ba谷氨酰胺和抗生素(青霉素和gentaminicin;英杰公司)和培养24小时的37°C。gydF4y2Ba
测量细胞因子il - 6,引发和il - 10在矿山和等离子体gydF4y2Ba
il - 6的决心,引发和il - 10进行商业酶联免疫测定法技术(BD Biociencias Pharmingen,马德里,西班牙)制造商的指示。检测4.7 pg·毫升的极限gydF4y2Ba−1gydF4y2Bail - 6、3.1 pg·毫升gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba引发,7.8 pg·毫升gydF4y2Ba−1gydF4y2Bail - 10。gydF4y2Ba
统计分析gydF4y2Ba
使用SPSS 12.0和GraphPad执行统计分析软件(美国圣地亚哥,CA)。卡方测试被用于分类变量,和Mann-Whitney紫外线测试连续变量。相关性分析使用枪兵的ρ相关分析。数据显示为±gydF4y2Ba扫描电镜gydF4y2Ba除非另有指示。细胞因子的水平,显示为中位数和四分位范围(差)。p < 0.05的值被认为是具有统计学意义。端点变量进行分析对BAL的基底中性粒细胞凋亡分层高(≥20%,75的基底细胞凋亡)或低(< 20%)细胞凋亡率。gydF4y2Ba
结果gydF4y2Ba
群体的一般特征gydF4y2Ba
60例(29 NCAP) 15帽和16控制没有感染)招募了。六NCAP患者排除另一种诊断:肺结核患者,与肺癌三,一个组织与闭塞性细支气管炎和肺炎,并且有侵袭性肺曲霉病,离开23日学习小组。NCAP的特点是:11持续发烧患者和临床恶化,九个胸片发现进展的浸润与胸腔积液(两个),和三个呼吸衰竭需要侵入性通风;其中一个患者死亡。对照组没有感染包括16个成年人,七小咯血和九与周围肺结节,其诊断排除感染和并发症的性别和年龄在NCAP类似组和帽组(gydF4y2Ba表1gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba
中值(差)区间样本采集自进入天NCAP组是6天(4 - 8),并盖组5(4 - 5)天。gydF4y2Ba
病原学的诊断在NCAP集团成立于14(60.9%)例:7gydF4y2Ba链球菌引起的肺炎gydF4y2Ba,一个gydF4y2Ba大肠杆菌gydF4y2Ba,两个耐甲氧西林gydF4y2Ba金黄色葡萄球菌gydF4y2Ba(耐甲氧西林金黄色葡萄球菌)gydF4y2Ba铜绿假单胞菌gydF4y2Ba和五个混合病因学(3gydF4y2Ba肺炎链球菌gydF4y2Ba和其他微生物,两个耐甲氧西林金黄色葡萄球菌和其他)。在平衡液,以下微生物分离:一个gydF4y2Ba肺炎链球菌gydF4y2Ba,两个gydF4y2Ba链球菌gydF4y2Baspp。,gydF4y2Ba肠球菌gydF4y2Baspp。,gydF4y2Ba铜绿假单胞菌gydF4y2Ba,两个耐甲氧西林金黄色葡萄球菌,一个gydF4y2Ba鲍曼不动杆菌gydF4y2Ba,10个可能不致病的微生物,在三个案例。病因学帽组:4gydF4y2Ba肺炎链球菌gydF4y2Ba(27%)gydF4y2Ba铜绿假单胞菌gydF4y2Ba在10例(7%)和不明。gydF4y2Ba
细胞凋亡和细胞因子导致BAL和血液gydF4y2Ba
血白细胞计数(gydF4y2Ba表1gydF4y2Ba)和BAL流体在NCAP显著高于组。细胞凋亡值从流式细胞术(gydF4y2Ba图1 a - cgydF4y2Ba)而获得的数据判断核形态通过光学显微镜(gydF4y2Ba图1 dgydF4y2Ba)和类似的结果。gydF4y2Ba
流式细胞术的一个代表支气管肺泡灌洗(BAL)样本。)中性粒细胞被封闭的根据他们的前锋(FS)和侧散射(SS)的特点。b)确认中性粒细胞封闭的区域,人口细胞沾CD16抗体(异硫氰酸荧光素(FITC)共轭)。c)封闭的区域,包含中性粒细胞。水平轴代表的染色强度膜联蛋白V (FITC;对数刻度)和垂直轴的强度propidium碘染色(π;对数刻度)。d)光学显微镜cytocentrifuge BAL中性粒细胞的幻灯片。gydF4y2Ba
落下帷幕的基底细胞凋亡(gydF4y2Ba图2gydF4y2Ba在NCAP)高(13±3%)与控制(6±3%)相比,尽管意义是没有达到;没有数据可供帽(如方法和所述材料部分)。类似的模式相比,血液在NCAP控制和帽(15±4%,4±1%和6±2%,分别)(gydF4y2Ba图2 cgydF4y2Ba)。之间没有显著相关性被发现凋亡中性粒细胞在矿山和血液在NCAP组。自发凋亡24 h后的文化研究的一个子集(n = 5)患者中性粒细胞凋亡的观察gydF4y2Ba在体外gydF4y2Ba(gydF4y2Ba图2 bgydF4y2Ba和d)。自发凋亡是低血NCAP(相比之下,控制和限制;p < 0.05)。同样的模式出现在拜尔(帽与控制相比,没有数据)虽然没有达到意义。gydF4y2Ba
细胞凋亡的中性粒细胞在支气管肺泡灌洗(BAL) nonresponding社区获得性肺炎(NCAP)和控制(a和b)和外周血NCAP)控制和社区获得性肺炎(CAP)患者(c和d)。细胞凋亡中性粒细胞净化后决定(基底细胞凋亡,a和c)gydF4y2Ba在体外gydF4y2Ba文化24 h(自发凋亡,b和d)。细胞凋亡率被定义为凋亡细胞的比例相比在24小时(0 h。数据均值±gydF4y2Ba扫描电镜gydF4y2Ba。gydF4y2Ba*gydF4y2BaNCAP: p < 0.05gydF4y2Ba与gydF4y2Ba控制;gydF4y2Ba#gydF4y2BaNCAP: p < 0.05gydF4y2Ba与gydF4y2Ba帽。gydF4y2Ba
系统中描述了细胞因子的平均水平gydF4y2Ba图3gydF4y2Ba。il - 6明显高于NCAP落下帷幕的病人(控制),和血液(相比之下,控制和趋势与帽)。引发高在NCAP(控制)落下帷幕,尽管没有差异被发现血液中(相比之下,控制和限制)。相反,il - 10水平明显高于显示血液中(与控制和CAP)相比,没有落下帷幕(控制)的差异。gydF4y2Ba
![图3 -gydF4y2Ba](http://www.qdcxjkg.com/content/erj/38/5/1158/F3.medium.gif)
细胞因子水平nonresponding社区获得性肺炎(NCAP),社区获得性肺炎(CAP)和对照组在支气管肺泡灌洗(BAL)和外周血。数据中位数和四分位范围。*:p < 0.05;* *:p < 0.01;gydF4y2Ba#gydF4y2Ba:p = 0.06gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
NCAP组落下帷幕与血液中细胞因子水平显示明显高于中值(差)引发落下帷幕的水平,4358年(868 - 12117)gydF4y2Ba与gydF4y2Ba38 (24 - 78)pg·毫升gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba,明显高于血il - 10, 22 (9-60)gydF4y2Ba与gydF4y2Ba3 (2 - 9)pg·毫升gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba有关il - 6,而没有发现差异。gydF4y2Ba
NCAP组il - 6之间显著正相关关系被发现血液和BAL流体(r = 0.7, p = 0.01)。落下帷幕也发现il - 6水平显著相关,il - 10水平在血液(r = 0.7, p = 0.02)。显著相关的中性粒细胞的百分比和绝对计数BAL发现引发BAL (r = 0.6, p = 0.01和r = 0.7, p < 0.01,分别)。gydF4y2Ba
临床解决方案和结果gydF4y2Ba
NCAP的患者死亡。中位数(差)的天数达到临床稳定12(7日至18日)天,洛杉矶中值为20天(开车)。基底高嗜中性粒细胞凋亡BAL(≥20%)与洛杉矶表现出显著的负相关(r = -0.5, p = 0.02)和天需要达到临床稳定性(r = -0.4, p = 0.05)。高细胞凋亡BAL患者有较短的洛杉矶(平均10gydF4y2Ba与gydF4y2Ba21天),需要更少的(平均7天稳定gydF4y2Ba与gydF4y2Ba13天)。血液中嗜中性粒细胞凋亡没有关联与临床稳定或洛杉矶(r = -0.2, p = 0.4和r = -0.1, p = 0.7)。gydF4y2Ba
细胞因子水平NCAP分层根据高(≥20%)或低(< 20%)基底BAL中性粒细胞凋亡中描述gydF4y2Ba图4gydF4y2Ba。系统性的il - 10在那些高细胞凋亡显著降低。趋势降低il - 6,引发被发现在高的细胞凋亡在矿山和血液。血液中il - 6和il - 10水平显示积极的显著相关性的天数达到临床稳定性(r = 0.7, p < 0.01, r = 0.7, p < 0.01,分别)和il - 10洛杉矶(r = 0.7, p = 0.02)。帽组显著正相关被发现血il - 6和il - 10的天数达到临床稳定性(r = 0.4, p = 0.02和r = 0.7, p < 0.001,分别),洛杉矶(r = 0.4, p = 0.03和r = 0.7, p < 0.001,分别)。gydF4y2Ba
支气管肺泡灌洗(BAL)和血液中细胞因子水平nonresponding社区获得性肺炎患者分为低(< 20%)或高(≥20%)BAL细胞凋亡。数据中位数和四分位范围。*:p < 0.05。gydF4y2Ba
讨论gydF4y2Ba
本研究最重要的发现是:1)系统性基底NCAP组中性粒细胞凋亡明显高于对限制和控制,而自发凋亡在24 h较低;2)炎症模式显示更高的促炎细胞因子il - 6和引发落下帷幕,和更高的il - 6和il - 10在血;3)NCAP患者增加了基底细胞凋亡在落下帷幕(≥20%)达到临床稳定之前,洛杉矶比较短;4)低基底肺泡细胞凋亡与高血il - 10和趋势引发和il - 6在BAL和血液。gydF4y2Ba
后的细胞凋亡中性粒细胞炎症差别杀死微生物被认为是必不可少的对这些而阻碍了其细胞毒性成分的释放。戴帽的相关性高的初始和持续的炎症已经彻底研究。首次提出在NCAP炎性细胞因子,在72 h,与慢有关临床稳定和贫穷的结果gydF4y2Ba12gydF4y2Ba,gydF4y2Ba21gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba23gydF4y2Ba]。正如预期的那样,我们的研究结果显示,细胞因子水平和肺泡中性粒细胞增加,这反映了一个持续的炎症以及一定程度的细胞凋亡。事实上,我们发现基底中性粒细胞凋亡在落下帷幕(12%)高于DgydF4y2BaroemanngydF4y2Baet al。gydF4y2Ba(gydF4y2Ba24gydF4y2Ba)(1%),可能是因为他们包括病人在早期阶段。有趣的是,我们还发现在血液中性粒细胞凋亡,略高反射的功能连续感染。gydF4y2Ba
尽管绝对的基底细胞凋亡增加,中性粒细胞生存也是长时间;也就是说,其功能寿命提高。控制的自发凋亡在24小时高于在NCAP)报道其他地方(gydF4y2Ba4gydF4y2Ba]。这个发现说明了在感染嗜中性粒细胞的命运,特别是因为BAL中性粒细胞并没有完全净化的球细胞和细胞因子释放的培养细胞会反映gydF4y2Ba在活的有机体内gydF4y2Ba炎症过程。有趣的是,在患者临床稳定、基底和自发凋亡模仿的模式控制没有感染。戴帽的降低系统性基底细胞凋亡代表一个阶段白细胞的下降,它对应于一个解决感染减少细胞因子(il - 6和il - 10)。这些结果表明,不同的嗜中性粒细胞凋亡动能是NCAP患者的一个特色。gydF4y2Ba
活化的中性粒细胞是必要的清除感染,以及他们的细胞凋亡充分解决炎症(gydF4y2Ba25gydF4y2Ba]。在感染的初始阶段,细胞因子可能会增强中性粒细胞的激活,尤其是引发'中性粒细胞,并延长他们的寿命gydF4y2Ba26gydF4y2Ba]。我们已经证实高促炎细胞因子il - 6水平和引发BAL液体治疗72 h后,果然在NCAP的病人。有趣的是,主要的炎性细胞因子在肺循环和体循环隔间显示不同的模式:高落下帷幕,引发il - 10在血液和类似的il - 6水平在两个隔间。年代gydF4y2BachuttegydF4y2Baet al。gydF4y2Ba(gydF4y2Ba27gydF4y2Ba)也报告了类似的结果引发和重症肺炎患者il - 6。引发高水平落下帷幕与血液中突出的活跃阶段感染和中性粒细胞的upregulation。事实上,引发之间的正相关和中性粒细胞绝对计数落下帷幕了。有关il - 6,我们发现落下帷幕,在血液中水平之间的正相关关系,这表明炎症过程起源于肺继续系统性的隔间。相反,il - 10水平在血液表明主要抗炎模式。事实上,显著降低系统性il - 10和趋势降低il - 6在患者临床稳定。把所有这些结果在一起,不同的炎症决议提出的速度:慢比系统在肺。此外,我们发现系统性炎症分辨率和临床分辨率之间的相关性,gydF4y2Ba即。gydF4y2Ba在系统性il - 6和il - 10和稳定和洛杉矶。gydF4y2Ba
肺泡中性粒细胞之间的相互作用,细胞因子和适当恢复体内平衡还远远没有完全理解。我们的研究结果表明,当肺泡细胞凋亡是低落下帷幕,系统性il - 10和引发BAL流体。这种联系可能有几种解释。首先,减少细胞凋亡可能反映了一个持续的炎症与延长组织损伤的可能性。其次,细菌负荷或病原体本身,可能会改变细胞凋亡从而逃避他们有效的杀死gydF4y2Ba26gydF4y2Ba]。第三,一个旺盛的细胞因子的环境可能会延迟细胞凋亡,在急性肺损伤报告,它是与失调相关的细胞凋亡gydF4y2Ba28gydF4y2Ba]。由于长期在脓毒症中,延迟细胞凋亡核factor-κB导致中性粒细胞激活保持活跃(gydF4y2Ba29日gydF4y2Ba,gydF4y2Ba30.gydF4y2Ba]。然而,增强中性粒细胞凋亡减少肺损伤和死亡率有关联(gydF4y2Ba31日gydF4y2Ba]。在动物模型中,局部的细胞凋亡被发现功能在解决肺炎(gydF4y2Ba32gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba
临床意义的肺泡细胞凋亡被证明在分析解决传染性参数。我们发现一个更高的肺泡细胞凋亡明显与速度相关的临床稳定和较短的洛杉矶。类似的系统水平之间的显著相关性被发现,在NCAP和回应帽,细胞因子、临床稳定性和洛杉矶。gydF4y2Ba
据我们所知,这是第一个研究探讨中性粒细胞凋亡的作用,在NCAP肺和系统性。关于潜在的局限性,我们必须指出可能的β错误统计分析由于数量有限的情况下包括和缺乏BAL回应帽组。gydF4y2Ba
总之,基底细胞凋亡在NCAP很高在肺和血液而自发凋亡在回应24小时低于上限。引发高水平BAL流体与中性粒细胞在肺的积累有关。系统性炎症与il - 6和il - 10与延迟相关临床稳定性和洛杉矶。在NCAP)更早些时候与基底肺泡中性粒细胞凋亡临床稳定性和较低的洛杉矶,这表明嗜中性粒细胞凋亡排除了持续的炎症,从而导致更快的恢复正常的体内平衡。gydF4y2Ba
脚注gydF4y2Ba
支持声明gydF4y2Ba
这项工作得到了cib de心血管Respiratorias (CIBERES),卡洛斯三世卫生研究所的计划,拨款Bancaja-Fundacion对位拉Investigacion医院拉菲,Conselleria de Sanidad de la Comunidad Valenciana (AP-018/06)和saf2009 - 08913。gydF4y2Ba
感兴趣的语句gydF4y2Ba
没有宣布。gydF4y2Ba
- 收到了gydF4y2Ba2010年12月10日。gydF4y2Ba
- 接受gydF4y2Ba2011年3月8日。gydF4y2Ba
- ©2011人队gydF4y2Ba