文摘
肺纤维化是一种严重的微观表现polyangiitis (MPA)。Antimyeloperoxidase (anti-MPO)在MPA患者血清抗体可以激活MPO和导致活性氧簇(ROS)的生产。虽然ROS水平高的细胞毒性,低水平可以诱导成纤维细胞增殖。因此,我们提出anti-MPO抗体诱导的氧化应激可以导致肺纤维化。
24 MPA患者(45血清)参加这项研究,其中包括九名患者(22血清)肺纤维化。血清晚期氧化蛋白产品(AOPP) MPO-induced次氯酸(HOCl)和serum-induced纤维母细胞增殖是化验。
AOPP水平,MPO-induced HOCl生产和serum-induced纤维母细胞增生患者高于健康对照组(p < 0.0001, p = 0.0001, p = 0.0005)。增加HOCl生产与活动性疾病相关(p = 0.002)。血清AOPP水平和serum-induced纤维母细胞增殖活跃MPA和肺纤维化患者的高(p < 0.0001)。纤维母细胞增殖显著线性关系,AOPP水平和观察HOCl生产只有在肺纤维化患者。
氧化应激,特别是生产HOCl通过与anti-MPO MPO抗体的相互作用,可能导致纤维化的过程中观察到MPA。
微观polyangiitis (MPA)是影响小型船只坏死性血管炎。虽然皮肤、胃肠道肌肉骨骼和神经系统症状可以观察到MPA,最典型的症状包括快速进行性肾小球肾炎和肺参与。古典肺参与由肺泡出血继发肺毛细管炎(1,2]。肺纤维化也是一个潜在的严重的MPA的表现,但轻度肺纤维化的死亡率显著增加(2- - - - - -4]。尽管肺纤维化MPA可以从迭代结果的肺泡出血、肺纤维化患者的一半没有咯血史和肺纤维化疾病的最初表现,有时几年前的诊断MPA (2,5]。
MPA与多种自身抗体循环有关,特别是anti-neutrophil细胞质抗体(ANCAs),可以发现在75 - 80%的病例。MPA, ANCAs展览主要是细胞核周围的荧光模式和髓过氧化酶(MPO)执导。尽管anti-MPO抗体(Abs)与肺纤维化(2,5),他们的角色在这个病理生理过程知之甚少。
Anti-MPO Abs在内皮损伤起着关键的作用在体外和血管炎的发展在活的有机体内(6- - - - - -8]。他们可以触发一个在中性粒细胞氧化破裂在体外(6),导致损伤内皮细胞通过MPO激活和次氯酸(HOCl)生产8]。总之,这些研究结果支持anti-MPO Abs的细胞毒性效应通过活性氧的生成在MPA (ROS)。ROS是已知引起纤维母细胞增生和纤维化的发展,观察到其他病理条件下,如特发性肺纤维化、系统性硬化症(SSc)和恶性肿瘤(9- - - - - -11]。因此,我们提出anti-MPO Abs诱导的氧化应激可以导致纤维化的发展MPA患者。我们比较anti-MPO Abs的血清标志物的氧化应激和细胞增殖,并将这些参数与肺纤维化的存在或缺乏。
患者和方法
病人和血清采样
24例(45血清)与MPA(九个男性和15个女性;均值±sd59.3±12.5岁,年龄范围25 - 77岁)被包括在研究(表1)。九的24例(22 45血清)的肺纤维化。所有患者anti-MPO Ab-associated血管炎会议教堂山的定义术语(12MPA的诊断。肺纤维化存在以下定义的结果在高分辨率计算机断层扫描(CT)扫描的胸部:蜂窝边缘分布和/或牵引支气管扩张。MPA患者的CT扫描异常符合肺纤维化、肺功能测试进行使用肺量测定法和体积描记法(表2)。
21时获得的血清样本耀斑,包括7名从肺纤维化患者血清。24血清中也获得临床缓解,包括15从肺纤维化患者血清。因此,从九22血清MPA患者肺纤维化和23个血清15 MPA患者没有分析肺纤维化。12血清12患者积极anti-proteinase 3 (anti-PR3) Ab-positive肉芽肿病与polyangiitis (GPA)(瓦格纳)(anti-PR3-GPA)和五个患者血清从五个活跃anti-MPO Ab-positive GPA (MPO-GPA)作为控制。所有病例的GPA biopsy-proven。此外,40从40健康献血者血清作为控制。所有捐助者给他们书面知情同意。血清都是前瞻性随访期间收集的1995年4月至2010年2月在全国转诊中心的坏死性Vasculitides(法国巴黎)。
使用伯明翰血管炎疾病活动评估活动得分(英国)13]。均值±sdbva MPA的分数在诊断肺纤维化患者为22.7±3.9,20.0±5.2,那些没有肺纤维化(p = 0.1935)。bva得分为22.6±8.9,23.2±5.2与MPO-GPA PR3-GPA和在这些患者,分别。活动性疾病与bva > 3,而不活跃的疾病与bva < 3。抽样时,MPA患者肺纤维化接受低剂量的强的松(< 10 mg·−1)20例,用药4例和治疗两种情况。抽样时,MPA患者没有肺纤维化接受低剂量的强的松(< 10 mg·−1)10例,中间剂量的强的松(10 - 30毫克·−1)在四种情况下,硫唑嘌呤在两种情况下,静脉注射环磷酰胺在一个案例中,没有治疗9例。12 PR3-GPA患者和5 MPO-GPA患者接受低剂量的强的松(< 10 mg·−1)在9和4例,咪唑硫嘌呤在五和两个情况下,甲氨蝶呤在四也没有的情况下,也没有在四和一个病例的治疗,分别。
ANCA, anti-MPO Ab和anti-PR3 Ab化验
所有血清ANCA筛查通过间接免疫荧光法使用ethanol-fixed正常新鲜的中性粒细胞(14]。Anti-MPO Abs ELISA测定,按照制造商的推荐(生物进步,Emerainville、法国)。结果表示在非盟·毫升−1。浓度< 20盟·毫升−1被认为是消极的。Anti-PR3 Abs测量使用Varelisa PR3工具包(Phadia、Montigny-le-Bretonneux、法国)。
在体外代HOCl MPO的MPA血清的存在
的量化生产的HOCl MPO的MPA血清进行如前所述[8]。
纯化MPO (Calbiochem、圣地亚哥、钙、美国)被稀释2μg·毫升−1在PBS和涂96孔板(黑色Optiplate;帕卡德,位于美国IL)。与PBS三洗后,每个血清稀释1:10 100μL存入在室温下井和孵化了60分钟。36μM鲁米诺和400年μM H2O2在PBS稀释添加到启动反应。HOCl生产是由化学发光测量使用光度计(融合;帕卡德)在37°C。非盟HOCl生产。值得注意的是,我们的技术方法消除了MPA血清从油井重复洗涤。因此,MPA血清没有孵化与H2O2。
测定血清MPO
血清浓度的MPO夹心ELISA测定,按照制造商的推荐(σ,圣路易斯,密苏里州,美国),在所有从患者和健康对照组血清。测定的灵敏度阈值> 1.5 ng·毫升−1。
量化的血清ceruloplamin
ceruloplamin血清浓度是衡量immunonephelometry所描述的制造商(BNII;Dade-Behring,法国巴黎)。正常的值在0.17和0.70之间mg·L−1。
在血清化验的先进氧化蛋白质产品
高级氧化蛋白质产物(AOPP)被分光光度法化验如前所述[15]。200年试验井,μL血清稀释1:20在PBS被分发到96孔板和20μL醋酸是补充道。接下来,10μL 1.16碘化钾是补充道。在标准井,10μL 1.16 M碘化钾是添加到200年μL chloramine-T紧随其后20μL醋酸的解决方案。0 - 100的范围内校准使用chloramine-Tμmol·L−1。吸光度是立即在340 nm标(融合)。AOPP浓度被表示为μmol·L−1chloramine-T等价物。
纤维母细胞增殖试验
纤维母细胞增殖试验进行了如前所述[10]。短暂,NIH 3 t3成纤维细胞(美式文化收集应变号码crl - 1658;4×103细胞·好−1)被播种到96 -孔板(合演,剑桥,妈,美国)和孵化50μL MPA或控制血清稀释150年μL rpmi - 1640培养基(美国表达载体,卡尔斯巴德,CA)没有胎牛血清在37°C公司5%248 h。细胞增殖是由脉冲细胞与3H]胸苷(1μCi·−1在最后16 h(文化)。结果表示为每分钟计数(cpm)的绝对数量。
血清总抗氧化能力的测定
血清的抗氧化能力是由测量的形成自由基阳离子2,2′-azino-bis (3-ethylbenzthiazoline-6-sulfonic酸)使用抗氧化试验装备(开曼Chemical-Interchim、Montlucon、法国)基于光度方法之前被米勒和Rice-Evans [16]。测量样品一式三份和结果表示为±sd在mM Trolox等价物。
纤维母细胞增殖在HOCl或AOPP的存在
NIH 3 t3成纤维细胞(4×103细胞·好−1)被播种到96 -孔板(配角)和孵化与不同数量的HOCl(浓度从1.5×10−132.5×10−9米)48 h。细胞增殖是由胸腺嘧啶核苷掺入。结果表示为cpm的绝对数量。牛血清白蛋白(BSA)氧化为1毫米HOCl 1 h在室温下。蛋白质在一夜之间被透析对PBS和测试AOPP的内容。NIH 3 t3成纤维细胞(4×103细胞·好−1)被播种到96 -孔板(配角)和孵化50μL稀释的氧化或nonoxidised蛋白制剂和150年μL没有胎牛血清的培养基在37°C公司5%248 h。细胞增殖是由胸腺嘧啶核苷掺入。结果表示为cpm的绝对数量。
统计分析
数据意味着±sd。使用非参数统计分析进行Mann-Whitney紫外线测试未配对的数据或回归分析根据斯皮尔曼等级相关测试。的假定值< 0.05被认为是显著的。统计分析进行了两次:第一次包括血清和第二次使用只有一个每个病人血清样本。相对应的血清最活跃的阶段选择和比较活跃和弛张阶段,我们也使用相应血清最长的缓解期。
结果
Anti-MPO Ab水平,氧化应激标记和在体外纤维母细胞增殖MPA患者相比,控制
anti-MPO Ab的中值水平,HOCl生产serum-activated MPO、血清AOPP水平和serum-induced扩散的MPA患者成纤维细胞均明显高于健康对照组(中位数75(范围1 - 227)与2(鹿)IU (p < 0.0001), 201年(133 - 425)与155年(136 - 170)非盟(p < 0.0001), 243 (10 - 952)与130(0 - 260)μmol·L−1chloramine-T等价物(p = 0.0001)和23174 (2000 - 144749)与9516年(303 - 31745)cpm (p = 0.0005),分别;图1)。MPO-GPA没有肺纤维化的患者表现出类似HOCl生产serum-activated MPO和血清AOPP的水平,但比MPA患者低serum-induced增生的成纤维细胞(23174 (2000 - 144749)与9021 (4490 - 23362)cpm;p < 0.001)。导致MPA, MPO-GPA PR3-GPA病人了表1在线的补充材料。
Antimyeloperoxidase (anti-MPO)抗体水平(Ab),氧化应激标记和在体外纤维母细胞增殖在微观polyangiitis (MPA)患者与健康对照组相比。意味着)anti-MPO Ab水平,b)次氯酸serum-activated MPO (HOCl)生产,c)血清氧化蛋白质产品(AOPP)先进水平和d) serum-induced扩散NIH 3 t3成纤维细胞化验在45 MPA患者血清从24,在40从健康对照组血清,五血清5患者积极anti-MPO Ab-positive肉芽肿病与polyangiitis (anti-MPO-GPA)患者和12血清12活跃anti-proteinase 3 Ab-positive GPA (anti-PR3-GPA),在材料和方法部分描述。实线代表手段和胡须代表标准偏差。cpm:每分钟计数。
Anti-MPO Ab水平,氧化应激标记和在体外纤维母细胞增殖活跃或弛张MPA
血清样本的时候,中位数bva 18岁(范围6-27)活跃MPA患者和1(0 - 2)弛张MPA患者。
的anti-MPO Ab水平MPA活动性疾病患者类似弛张疾病患者(平均75 (20 - 227)与77(5 - 200)国际单位;无意义的;图2一个)。在体外,HOCl生产serum-activated MPO活动性疾病患者明显高于那些忽轻忽重的疾病(228 (172 - 425)与189(133 - 241)盟;p < 0.01;图2 b)。血清AOPP的中位数水平和serum-induced纤维母细胞增殖没有显著不同的积极的或间歇性的疾病患者(241 (37 - 952)与246(10 - 674)μmol·L−1chloramine-T等价物(无意义的)和15089年(2687 - 144749)与23769年(2000 - 110355)cpm(无意义的),分别;图2 c和d)。在所有情况下,这些标记的平均值高于MPA患者比健康对照组活跃的或间歇性的疾病。
Antimyeloperoxidase (anti-MPO)抗体水平(Ab),氧化应激标记和在体外纤维母细胞增殖活跃,忽轻忽重的微观polyangiitis (MPA)。意味着)anti-MPO Ab水平,b)次氯酸serum-activated MPO (HOCl)生产,c)血清氧化蛋白质产品(AOPP)先进水平和d) serum-induced NIH 3 t3成纤维细胞的增殖有21份化验血清从16 MPA活动性疾病患者和24血清来自14个弛张MPA患者。伯明翰活动性疾病被定义为血管炎活动评分分数> 3。实线代表手段和胡须代表标准偏差。cpm:每分钟计数。ns:不重要的;#:p < 0.0001。
Anti-MPO Ab水平,氧化应激标记和在体外纤维母细胞增殖有关的MPA与否与肺纤维化有关
anti-MPO Ab和HOCl生产由serum-activated MPO水平没有显著不同,没有肺纤维化患者(平均72 (20 - 200)与75 (20 - 227)IU (p = 0.93)和224年(167 - 425)与201年(133 - 280)盟(p = 0.58),分别),但肺纤维化患者明显高于健康对照组(2 (1 - 7)IU (p < 0.0001)和155年(136 - 174)IU (p < 0.0001),分别)(图3 a和b)。平均anti-MPO Ab serum-activated MPO水平和HOCl生产的肺纤维化的患者,明显高于健康对照组(p < 0.0001, p < 0.0001,分别)。
Antimyeloperoxidase (anti-MPO)抗体水平(Ab),氧化应激标记和在体外纤维母细胞增殖在micrscopic polyangiitis (MPA)有或没有肺纤维化有关。意味着)anti-MPO Ab水平,b)次氯酸serum-activated MPO (HOCl)生产,c)血清氧化蛋白质产品(AOPP)先进水平和d) serum-induced NIH 3 t3成纤维细胞的增殖在22个血清化验从9 MPA患者肺纤维化和23个血清中15例肺纤维化。肺纤维化是由典型的纤维化的迹象的存在与变更相关的计算机断层扫描的肺功能测试,在材料和方法部分描述。e)血清总抗氧化活性测定在MPA患者和无纤维化,和健康的话题。实线代表手段和胡须代表标准偏差。cpm:每分钟计数。ns:不重要的;*:p < 0.05;#:p < 0.0001。
血清AOPP患者肺纤维化水平高于无纤维化的病人(中位数389 (10 - 952)与210(10 - 797)μmol·L−1chloramine-T等价物),但是差异没有达到显著性(p = 0.11) (图3 c)。然而,平均血清AOPP水平显著高于肺纤维化患者,在较小程度上,没有肺纤维化的患者比健康对照组(130(0 - 260)μmol·L−1chloramine-T等价物;分别为p < 0.0001和p < 0.05)。
Serum-induced纤维母细胞增殖明显高于肺纤维化患者比没有纤维化患者和健康对照组(中位数45434(范围2000 - 144749)与9366年(9366 - 28533)(p < 0.0001)和9516年(303 - 31745)cpm (p < 0.0001),分别),但是没有区别没有纤维化患者和健康对照组(p = 0.58) (图3 d)。当包括每个病人,只有一个血清serum-induced纤维母细胞增生患者仍明显高于肺纤维化的患者相比无纤维化(77974 (60565 - 132941)与9444 (2687 - 28075)cpm;p = 0, 0098)。
总抗氧化活性较低的MPA患者肺纤维化患者比没有肺纤维化和健康对照组(平均0.4885(范围0.4203 - -0.6792)与0.6843(0.4223 - -0.8989)和0.7077(0.5281 - -0.8920)毫米Trolox等价物,分别;在这两种情况下p < 0.0001),但没有统计学差异没有肺纤维化患者和健康对照组(图3 e)。
血清MPO水平和血浆铜蓝蛋白MPA患者没有差异,没有肺纤维化(意味着±sd4.5±3.4与3.5±5.2 ng·毫升−1(p = 0.2098)和0.34±0.06与0.37±0.07 g·L−1(分别为p = 0.3536))或健康受试者(4.5±3.4与5.2±3.5 ng·毫升−1(p = 0.6628)和0.34±0.06与0.36±0.07 g·L−1(p = 0.4330),分别)。
anti-MPO Ab水平之间的相关性,HOCl生产、血清AOPP水平和MPA NIH 3 t3成纤维细胞的增殖有或没有肺纤维化
anti-MPO Ab之间没有显著相关水平,HOCl生产、血清AOPP水平和成纤维细胞的增殖MPA患者没有肺纤维化(数据没有显示)。
相比之下,在肺纤维化患者,anti-MPO Ab之间的相关性观察水平和HOCl生产(r = 0.56;p < 0.01),如前所述8]。我们还发现之间的显著相关性HOCl生产MPO水平和血清AOPP患者(r = 0.48;p < 0.05) (图4)。然而,没有发现相关血清AOPP水平和anti-MPO Ab之间的水平。
之间的相关性antimyeloperoxidase (anti-MPO)抗体(Ab)水平,次氯酸(HOCl)生产、血清(AOPP)水平和先进的氧化蛋白质产品在体外NIH 3 t3成纤维细胞扩散微观polyangiitis有或没有肺纤维化有关。根据配对的斯皮尔曼测试数据回归分析是用来分析之间的相关性)anti-neutrophil胞浆抗体(ANCA)和HOCl (r = 0.56;p < 0.01), b) AOPP和HOCl (r = 0.48;p < 0.05), c) AOPP和ANCA(无意义的),d) NIH 3 t3细胞增殖和ANCA(无意义的),e) NIH 3 t3细胞增殖和HOCl (r = 0.72;p < 0.001), f) NIH 3 t3细胞增殖和AOPP (r = 0.56;p < 0.01)。cpm:每分钟计数。
在MPA患者肺纤维化,没有观察之间的相关性在体外成纤维细胞的增殖和anti-MPO Ab水平(r = 0.16;p = 0.45) (图4)。很强的相关性之间的观察成纤维细胞的增殖和生产HOCl (r = 0.72;p < 0.001)和血清AOPP的水平(r = 0.56;p < 0.01)。
之间没有相关性观察肌酐水平和生产活性氧或成纤维细胞的增殖。此外,还有没有患者的表型差异和差异MPA患者或无纤维化肾的牵连。
疾病活动和肺纤维化之间的关系
活动性疾病的时候,观察无显著差异的anti-MPO Ab之间的水平和HOCl生产或没有肺纤维化患者图5 a和b)。增加AOPP水平观察活动性疾病患者和肺纤维化的患者相比活动性疾病和肺纤维化。活动性疾病时,血清AOPP水平和serum-induced纤维母细胞增生肺纤维化患者明显高于没有肺纤维化患者(平均477.4(范围148 - 952)与200.9(37 - 797)μmol·L−1chloramine-T等价物(p < 0.05)和91948年(42171 - 144749)与9444年(2687 - 28075)cpm (p < 0.001),分别)(图5度和d)。
关系miscroscopic脉管炎(MPA)活动和肺纤维化。意味着)antimyeolperoxidase (anti-MPO)抗体水平(Ab), b)次氯酸serum-activated MPO (HOCl)生产,c)血清氧化蛋白质产品(AOPP)先进水平和d) serum-induced NIH 3 t3成纤维细胞扩散化验七从四个活跃的MPA患者血清和肺纤维化在14个血清从12活跃MPA患者没有肺纤维化,在15个血清从六个弛张MPA患者和肺纤维化和9个血清8弛张MPA患者没有肺纤维化。实线代表手段和胡须代表标准偏差。cpm:每分钟计数。ns:不重要的;*:p < 0.05;* *:p < 0.01;* * *:p < 0.001。
缓解的时候,anti-MPO Ab水平无显著差异,血清AOPP水平观察肺纤维化患者与患者之间无纤维化。显著增加HOCl生产也观察到患者的弛张疾病和肺纤维化的患者相比弛张MPA没有纤维化意义(平均192.3(范围167 - 231)与177.0(133 - 240)盟;p < 0.05)。忽轻忽重的疾病,患者serum-induced纤维母细胞增殖是肺纤维化患者高于没有肺纤维化患者(p < 0.01)。
HOCl和AOPP调节成纤维细胞增殖
低浓度HOCl(从1.5×10−131.5×10−10米)诱导成纤维细胞增殖显著增加(p < 0.05),而更高浓度的HOCl诱导成纤维细胞增殖和细胞死亡减少(p < 0.05) (图6)。低浓度氧化产生的AOPP的BSA HOCl(25μg·毫升−1)纤维母细胞增殖率明显增加了8.5% (p < 0.05),而更高浓度的HOCl-oxidised BSA诱导显著减少17%的纤维母细胞增殖率与nonoxidised BSA (p < 0.0001) (图6 b)。
次氯酸(HOCl)和高级氧化蛋白质产品(AOPP)调节成纤维细胞增殖在体外。NIH 3 t3成纤维细胞与1.5×10孵化−13-1.5×10−10M HOCl或AOPP(生成的氧化与HOCl牛血清白蛋白(BSA),在材料和方法部分描述)48 h。纤维母细胞增殖是由胸腺嘧啶核苷掺入。实验进行了一式三份。实线代表手段和胡须代表标准偏差。cpm:每分钟计数。
讨论
我们最近发现血清anti-MPO Ab水平之间的相关性和MPA HOCl生产8),而血清富含AOPP的profibrotic作用在硬皮病(10]。我们已经观察到类似的现象在MPA和氧化应激的作用在肺纤维化的发展。
在第一步中,我们发现由serum-activated HOCl MPO的生产在体外在健康受试者在MPA高于。血清AOPP的水平,一个标记的蛋白质氧化(15MPA患者),也高于健康对照组。的HOCl MPA血清MPO激活后产生在体外与疾病的活动。这些结果与最近的研究,凸显了氧化应激的作用(尤其是MPO-mediated)发病机理的MPA (8,17,18]。我们在之前的报告中显示,anti-MPO Abs可以激活MPO和提高生产HOCl导致内皮细胞损伤(8]。此外,槽et al。(17]发现更高层次的Abs HOCl-low-density脂蛋白(检测)患者的血管炎和anti-MPO Abs,患者比anti-PR3 Abs、建议加强MPO-mediated LDL氧化发生在血管炎患者和anti-MPO Abs。此外,chloride-induced汞可以抑制血管炎抗氧化分子(18]。
在第二个步骤中,我们观察到在体外serum-induced MPA患者的成纤维细胞的增殖高于健康者。这一现象可能是由活性氧的前导性质(10,11),而不是从anti-MPO Abs的直接行动,在某些情况下,可以增加纤维母细胞增殖的激活增殖蛋白激酶通路(11]。的确,我们最近描述了ROS的关键作用和AOPP SSc的发病机理,结缔组织疾病与皮肤和肺纤维化(10]。SSc,从肺纤维化患者血清含有高水平的AOPP触发纤维母细胞增生多从没有肺纤维化患者血清。此外,中和AOPP的还原剂β-mercaptoethanol完全废除纤维化的过程(19]。
在活跃的MPA, HOCl产量增加在肺纤维化的患者和那些没有肺纤维化。然而,在肺纤维化患者血清AOPP水平增加,可能导致了在体外serum-induced扩散成纤维细胞和肺纤维化,已经观察到在SSc [10]。虽然因果关系不能成立,强大和重要HOCl浓度之间的相关性,AOPP水平和纤维母细胞增殖表明HOCl造成MPO激活anti-MPO Abs诱发AOPP的形成,引发成纤维细胞增殖,导致肺纤维化。我们假设HOCl和AOPP导致肺纤维化是由我们的观察,加强HOCl AOPP增加纤维母细胞增殖。最后,肺纤维化患者表现出较低的血清抗氧化活性比其他MPA患者没有肺纤维化,表明额外的因素和分子可能参与HOCl引发的纤维化的调制。这一事实的水平HOCl生产类似的肺纤维化患者与患者之间没有肺纤维化表明HOCl氧化蛋白质的方式是不同的个体之间。因此,尽管类似水平的HOCl生产、肺纤维化患者不同于那些没有肺纤维化在纤维化过程中的后续步骤(即。HOCl AOPP代,纤维母细胞增生),由于血清抗氧化性能降低。以来重要的是,我们的结果是特定于anti-MPO-associated MPA在另一个病态的自身免疫状况与肺纤维化等SSc,病人的血清不诱导增加生产HOCl相比健康受试者的血清(数据没有显示)。
我们的结果是相似的在考虑所有的血清的研究和在考虑只有一个每个病人血清样本。尽管这种限制与平移值的使用,我们的研究结果认为pro-fibrotic活性氧的作用。
ROS在肺纤维化的发展的作用已经被报道在大量的病理条件下,如支气管肺的早产婴儿发育不良(20.),成人呼吸窘迫综合征(21,22),结节病(23)、特发性肺纤维化(24)、硅肺病的动物模型和asbestos-induced肺纤维化(25,26]。最相关的模型展示ROS在肺纤维化的作用当然是肺纤维化小鼠模型引起的气管内的博来霉素滴注法。博来霉素诱导的肺纤维化通过ROS-mediated机制废除的抗氧化分子N乙酰半胱氨酸。然而,ROS参与这个过程的类型和他们的作用机制仍不清楚11]。
事实上,虽然活性氧的生产过剩是常与细胞凋亡或坏死(27,28),暴露在低水平的活性氧可以增加多种哺乳动物细胞的生长。此外,活性氧ROS的基础水平和食腐动物的减少人类和啮齿动物正常细胞增殖抑制成纤维细胞,表明细胞内ROS浓度之间的联系和成纤维细胞增殖的速度29日- - - - - -31日]。因此,我们观察到低浓度HOCl及其氧化产品AOPP增加纤维母细胞增殖,而高剂量的HOCl AOPP高细胞毒性,与先前的报道是一致的。
虽然它的作用不是直接证明了在目前的研究中,我们的研究结果表明,HOCl MPO和anti-MPO Abs之间的相互作用产生的,本身或蛋白质氧化后,诱导成纤维细胞增殖,在一些人发起纤维化的过程。此外,血清AOPP水平和serum-induced纤维母细胞增殖在体外可以预期评估生物标记在MPA患者肺纤维化的活动。
确认
我们感谢美国Dubucquoi (Laboratoire d 'Immunologie du CHRU德里尔,里尔,法国)为我们提供生物样品和诉Viallon (Laboratoire de Biostatistiques式科钦,巴黎,法国)统计分析提供帮助。
脚注
可以从本文的补充材料www.www.qdcxjkg.com
感兴趣的语句
一份声明中对d Montani可以发现www.www.qdcxjkg.com/site/misc/statements.xhtml
- 收到了2009年9月20日。
- 接受2010年10月15日。
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