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我们饶有兴趣地读了罗西亚斯的文章等。1在最近的问题欧洲呼吸杂志。作者试图用呼气冷凝液验证一些测定法。罗西亚斯所描述的价值观等。1非常相似,那些由许多实验室报道,但我们对数据的解释是不同的。我们在这个媒介验证类似检测的经验表明,在这些低浓度测量的介质是有问题的,正因为如此,我们与文章下面的担忧,而一些研究者需要了解的。
首先,Rosias等。1上加标样品,其中该穗是远远超过所测量的值的平均值的变化(CV)的基于系数。给出的简历中基于样品加秒杀,而不是单独的样品。在大多数试验中,工作范围产生其是CV的<15%2。然而,根据我们的经验,在低浓度下,由于分析的非线性,CVs变得更高3。提供了掺加样品的CV人为地降低的CV,并且不给测量接近下水平检测在测定的介质的固有可变性的真实表示。
其次,作者指出,“简历的使用并不总是表达可变性的理想方式:当平均值低时,简历值可能会异常高。”1。根据我们的经验,在介体的低水平增加的CV是测定(信噪比)的增加的可变性的一个真正的反射。在低浓度,检测往往成为非线性的,因为所有的结果都是基于插值,简历将在本质上,是固有的高3。Figure 1⇓展示了一个典型的ELISA光密度与对于分泌性白细胞蛋白酶抑制剂浓度曲线使用在不同浓度下的蛋白质的用于测定观察到的CV作图。该图清楚地表明,其中所述测试变为非线性,的CV为10%提高到高达70%。这真正体现了在这些情况下测定的可变性。
第三,Rosias等。1表明当样品加入10 pg·mL时,可以看到基质效应-1而不是100 pg·mL-1。这表明,在掺加水平低,样品的组分可能与所述测定或介体,这是一个公认的现象干涉。However, spiking with 100 pg·mL-1,or even 10 pg·mL-1,考虑到实际采样值在1-6 pg·mL之间,可能会掩盖和掩盖这种矩阵效应-1所以任何干扰实验的化合物本身都可能是低浓度的。如果在低浓度下存在基质效应,这将对产生的读数的可靠性产生重大影响,在使用测定法时应予以考虑。
第四,作者推测,生物标志物测量结果的差异可以解释为稀释、凝析液质量、不同的采集技术、样品处理、存储条件和分析技术的差异。尽管这一切可能是正确的,使用低浓度引用罗西亚斯等。1我们已经描述了在单个样本中广泛的变异性,主要是由于试验中的变异性3。当实验本身的可变性如此之高时,我们不认为评论其他可变性来源是谨慎的。
最后,作者没有明确量化的任何检测下限。检测的下限限定的差异从零,但并不能够预测,其中精确的测量开始。定量的下限定义了测定是线性的浓度,并且其中CV和尖峰回报是已知的并且对于给定的测定中可接受4。
我们认为,定量的下限是中央的调解员在这个矩阵中的这些浓度的测量,并使用电流检测方法表明,呼出的呼吸凝不是蛋白质测量的理想采集方法3。无论是更敏感的蛋白质组学方法的可靠性克服待观察这些问题仍然存在。
利益声明
没有宣布。
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