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表皮生长因子受体(EGFR)的酪氨酸激酶结构域中的体细胞突变是在肺癌中具有极大临床兴趣的分子靶标。特别是,它允许使用酪氨酸激酶抑制剂对特定疗法的临床疗效的能力(IE。Gefitinib或Erlotinib已得到压力1,,,,2。
有趣的是,我们的小组已经表明,呼出的呼吸冷凝物(EBC)可能是一种有用的无创方法,可以收集从高高和深处衍生的生物样品3,,,,4。EBC已被证明是关于非小细胞肺癌(NSCLC)的分子改变的信息,并表征了气道/肺中的氧化和炎症过程5,,,,6。特别是,我们最近证明了来自EBC和同一患者的肿瘤组织的重叠的微卫星特征,表明它已经包含了可能对早期肺癌诊断有用的遗传标记4。
我们的目的是验证在EBC中研究EGFR突变的可能性,因此,将其再次用作肺癌的无创诊断工具。因此,研究了23名NSCLC组织学证据的患者。正如几份报道表明,最频繁的突变是外显子19中的框架缺失,外显子21(L858R)中的点突变或外显子20(T790m)中与酪氨酸激酶抑制剂有关的氨基酸取代(T790m)2在所有病例的石蜡组织中提取的DNA和10例患者的EBC中,对EGFR的外显子进行了18-21。
首先分析肿瘤组织中的EGFR突变。只有一名患者在外显子19,745_750del中出现病理缺失(4.3%;图1×)。21例患者的整个分析区域中存在几种多态性。大多数多态性都在内含子区域:RS17337100 IVS17-104 C> A(n = 3);RS2017000 IVS19+96A> g(n = 6);RS10241451 IVS19-60T> C(n = 7);以及外显子20中的一个同义词:rs1050171 g787a(n = 21;表1×)。关于EBC分析,我们验证了使用未处理的EBC进行突变检测的可能性,如先前唯一研究的研究,该研究研究了EBC的DNA基因突变7。通过在未经处理的EBC上应用PCR协议,我们无法获得足够数量的清洁扩增子。然后,我们使用纯化的DNA进行序列。在患者中研究了EBC-DNA的患者,并在内含子19和20和外显子20中携带多态性的九名患者中进行了研究。未通过测序这些位点证明了任何改变(图1)×)。
还研究了相同的10名患者的微卫星不稳定性和五个基因座的杂合性丧失,这在先前的研究中已经鉴定3,,,,4。3P染色体的五个多态性微卫星标记是肺癌缺失的热点,据信与肺癌发生有关。在EBC-DNA和肿瘤组织DNA中进行的分析证实了我们先前在两个生物部位中相同的微卫星改变的发现4。
这些结果表明,EBC中存在的细胞成分可能不代表肿瘤。EBC-DNA中可能发生微卫星改变的证据,例如在肿瘤组织DNA中与EGFR体细胞突变相比,可能取决于两个主要原因。首先,微卫星的改变更加频繁,并取决于DNA片段中的变化,而EGFR突变发生在较低的频率下,并且影响一个或几个核苷酸。其次,微卫星的改变可能取决于诱发因素的作用(IE。酒精,吸烟,等等)在口服粘膜上,而不是依赖肿瘤的躯体改变。
总之,呼出的呼吸冷凝物不能用于研究上皮生长因子受体的体细胞改变。但是,它是检测肺癌风险易感标记的合适样本。
利益声明
没有人宣布。
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