文摘gydF4y2Ba
Purinergic信号调节气道防御机制,表明细胞外嘌呤可以作为气道炎症生物标记物在囊性纤维化(CF)。gydF4y2Ba
嘌呤三磷酸腺苷(ATP)、二磷酸腺苷(ADP)、腺苷酸(AMP)和腺苷测定痰从21岁成年人(自发地从七CF患者咯血,诱导健康对照组14日)正常的价值观和CF-associated变化进行评估。随后,嘌呤含量以支气管肺泡灌洗液(BALF)来自37个孩子(25 CF患者,12疾病控制)并与中性粒细胞计数,呼吸道感染和肺功能的存在。无创评估气道嘌呤,ATP水平测量使用luminometry呼出的气息凝结(EBC)与CF和14名健康对照组14个孩子,然后14 CF孩子在肺恶化。gydF4y2Ba
ATP和音箱都是高架痰和BALF CF科目与控制。BALF、ATP和AMP含量负相关与中性粒细胞计数肺功能和强烈相关。在EBC, ATP含量增加CF相对于控制和减少治疗后的CF肺恶化。gydF4y2Ba
嘌呤三磷酸腺苷和腺苷酸候选人中性气道炎症的标志物。测量嘌呤在痰或呼出的气息凝结可能提供一个相对简单的和非侵入性方法来跟踪这个炎症。gydF4y2Ba
细胞外腺嘌呤嘌呤,包括嘌呤核苷三磷酸腺苷(ATP)及其代谢产物,是重要的信号分子在气道表面。这些嘌呤作为受体激动剂对purinergic信号通路气道粘液间隙中扮演关键的角色。事实上,ATP-mediated信号调节气道表面液体体积,纤毛功能和粘蛋白的分泌gydF4y2Ba1gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba3gydF4y2Ba,每个控制粘液间隙率的关键。gydF4y2Ba
嘌呤也协调多个组件的炎性细胞反应肺防御的一部分。例如,炎性刺激增强从上皮细胞释放ATPgydF4y2Ba4gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba6gydF4y2Ba和炎症细胞gydF4y2Ba7gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba10gydF4y2Ba。特别是,刺激中性粒细胞释放ATP和积累细胞外ATP和腺苷酸(AMP)gydF4y2Ba10gydF4y2Ba,gydF4y2Ba11gydF4y2Ba。炎症也会影响airway-luminal细胞外嘌呤代谢,通过改变ectonucleotidase活动在上皮细胞表面gydF4y2Ba12gydF4y2Ba通过添加ectonucleotidase与炎症细胞的积累相关的活动gydF4y2Ba8gydF4y2Ba。ATP释放到气道表面在炎症反应刺激炎性细胞反应,包括中性粒细胞的趋化性和脱粒gydF4y2Ba10gydF4y2Ba,gydF4y2Ba13gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba15gydF4y2Ba巨噬细胞,细胞因子的生产和氧化会破裂gydF4y2Ba16gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba18gydF4y2Ba,激活淋巴细胞和嗜酸性粒细胞gydF4y2Ba17gydF4y2Ba。腺苷形成由于ATP释放还可以作为信号分子与促炎和抗炎作用gydF4y2Ba19gydF4y2Ba,gydF4y2Ba20.gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
purinergic信号在肺部炎症的重要性gydF4y2Ba在活的有机体内gydF4y2Ba。例如,ATP (P2Y受体gydF4y2Ba1gydF4y2Ba- r和P2YgydF4y2Ba2gydF4y2Ba- r)缺陷的小鼠表现出受损的肺部炎症反应和难以消除假单胞菌gydF4y2Ba21gydF4y2Ba。同样,鼠标菌株与适度增加肺腺增强白介素(IL) 4-mediated炎症反应gydF4y2Ba22gydF4y2Ba,更高的肺腺苷水平导致气道炎症和肺纤维化gydF4y2Ba23gydF4y2Ba,gydF4y2Ba24gydF4y2Ba。gydF4y2Ba在活的有机体内gydF4y2Ba研究气道嘌呤在人类有限,尽管增加ATP的水平一直在观察鼻灌洗液gydF4y2Ba25gydF4y2Ba和血液gydF4y2Ba26gydF4y2Ba与囊性纤维化(CF)的主题,腺苷水平炎症在治疗哮喘和呼吸道分泌物是与疾病状态gydF4y2Ba27gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba29日gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
嘌呤作为调停人的角色的炎症反应表明,他们也可能是炎症的标志物。然而,细胞外的浓度和模式腺嘌呤嘌呤在正常和病变人类呼吸道表面在很大程度上仍未知。本研究的目的是测量水平的嘌呤在人类呼吸道分泌物和评估他们的潜在生物标志物的气道炎症,特别是儿童CF。首先,嘌呤含量以痰建立正常的价值观和评估变化与CF。此外,嘌呤含量测定的上层清液黏脓性的材料从CF肺部吸气模式移植。这后,支气管肺泡灌洗液(BALF)收集从临床上儿童接受支气管镜检查和相关性之间寻求嘌呤和建立标记呼吸道疾病,包括中性粒细胞计数、感染及肺功能的存在。最后,一种简单而无创的方法来衡量儿童气道嘌呤通过测量ATP水平呼出的气息凝结(EBC)是探索。gydF4y2Ba
方法和材料gydF4y2Ba
研究对象gydF4y2Ba
受到人口分布表1中列出gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba。控制人口是健康的个体,除了BALF的研究,其中包括以下疾病控制:两个主题原发性纤毛运动障碍与复发性咳嗽和喘息和10个科目,都是临床稳定在支气管镜检查的时间。所有受试者在北卡罗来纳大学教堂山分校(教堂山、数控、美国),和研究机构审查委员会批准。gydF4y2Ba
研究设计gydF4y2Ba
气道分泌物嘌呤含量之间的差异被CF人口控制的比较评估。嘌呤含量之间的关系和其他疾病的标记被回归分析评估。gydF4y2Ba
方法gydF4y2Ba
从健康对照组痰是收集和处理使用感应如前所述gydF4y2Ba30.gydF4y2Ba。简而言之,粘液插头被选中,称重和孵化dithiotreitol溶解粘液为0.1%。添加柠檬酸钠在0.32%的样本缓冲区限制嘌呤的水解。样本然后洗杜尔贝科的PBS、过滤和分析细胞生存能力,细胞计数和微分。吐痰从CF收集的对象是自发的,但诱导样品处理相同。gydF4y2Ba
多发性骨髓瘤是恢复人类CF 13切除肺部的气道腔的移植gydF4y2Ba31日gydF4y2Ba。这种材料是离心机440000×gydF4y2BaggydF4y2Ba60分钟4°C和上层清液过滤0.2 -µm过滤和冻结在-80°C。gydF4y2Ba
BALF得到gydF4y2Ba通过gydF4y2Ba临床显示支气管镜检查。能整除的是放在冰,离心机11000×gydF4y2BaggydF4y2Ba在4°C 5分钟去除细胞和细菌,和上层清液立即冷冻和储存在-80°C。单独的整除处理细胞鉴别和定量微生物文化。gydF4y2Ba
使用一个RTube EBC收集gydF4y2BaTMgydF4y2Ba设备(呼吸系统研究,Inc .,夏洛茨维尔,弗吉尼亚州,美国)。冷却管在-10°C,直到举行前立即收集,并通过设备主体呼出在7分钟的潮汐呼吸。没有鼻子剪辑。从RTube EBC被找回gydF4y2BaTMgydF4y2Ba和冻结在-80°C到分析。gydF4y2Ba
嘌呤分析gydF4y2Ba
腺嘌呤嘌呤在气道分泌物使用etheno-derivatisation和高效液相色谱法测定gydF4y2Ba32gydF4y2Ba。样本煮2分钟前分析,核苷酸酶的灭活。gydF4y2Ba
LuminometrygydF4y2Ba
luciferin-luciferase化验是修改之前描述的协议gydF4y2Ba33gydF4y2Ba。100年短暂µL整除从每个样本分析的光室LB953 AutoLumat光度计(坏Wildbad Berthold技术GmbH德国)在100年µL注入luciferin-luciferase鸡尾酒(荧光素160µg·毫升gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba和荧光素酶8µM)。发光10年代记录并与ATP并行执行校准曲线。gydF4y2Ba
分析gydF4y2Ba
所有数据都表示为±gydF4y2BasegydF4y2Ba除了人口统计信息,报告为±gydF4y2BasdgydF4y2Ba。没有遵循正态分布的数据D 'Agostino-Pearson测试对数转换分析之前,包括所有嘌呤和中性粒细胞计数测量。对比使用未配对t组进行,除了预处理和抗生素比较,进行配对数据。相关性进行使用皮尔逊相关性。gydF4y2Ba
结果gydF4y2Ba
嘌呤含量正常的诱导痰和CF痰gydF4y2Ba
建立正常的嘌呤含量和评估这些改变是否在CF,嘌呤被感应以痰收集来自14个健康成年人和自发地咳出痰七成人CF科目。鉴于嘌呤和炎症之间的关系,提出痰嘌呤会升高与CF主题,一种疾病的特点是高水平的气道炎症。嘌呤使用etheno-derivatisation和高效液相色谱法,测定技术已成功地利用测量嘌呤从各种生物液体gydF4y2Ba32gydF4y2Ba。评估的复苏和嘌呤代谢痰透露,嘌呤可以随时恢复和测量控制和CF口水(回收率:89 81%,控制和CF),而嘌呤代谢在处理过程中可以通过添加柠檬酸钠有限的样本(详情见补充数据)。gydF4y2Ba
口水的分析显示预期的增加在CF痰中性粒细胞炎症与控制(14700gydF4y2Ba与gydF4y2Ba240中性粒细胞·毫克gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba分别为痰;p = 0.01)。不同的模式和嘌呤浓度也被观察到。分析嘌呤浓度在正常口水显示模式的腺苷≈AMP >二磷酸腺苷(ADP) > ATP。相比之下,CF痰含有ATP和安保水平上升,但不是ADP或腺苷,相对于控件(图1gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba)。事实上,ATP腺苷比例升高的口水CF科目与控制(意味着±gydF4y2BasegydF4y2Ba:33.0±6.6gydF4y2Ba与gydF4y2Ba分别为0.99±0.2,;p = 0.003), AMP腺苷比率(1.85±0.4gydF4y2Ba与gydF4y2Ba分别为0.08±0.0 CF和控制;p = 0.007)。确保感应程序控制并不影响结果,嘌呤含量检查配对自发地咳出痰和诱导痰液样本三个人(一个CF与慢性阻塞性肺疾病患者和两个)。嘌呤水平实际上是适度高(约1/2)诱导的样本,表明CF和控制之间的差异不能归因于使用的感应控制人口(数据未显示)。gydF4y2Ba
评估这些结果是否可再生的气道分泌物不可以吐痰,多发性骨髓瘤从航空公司获得的外植CF肺移植的时候。嘌呤在多发性骨髓瘤的模式从13外植CF肺类似于观察CF痰,比例较高的AMP和腺苷水平相对较低(图1 bgydF4y2Ba⇑gydF4y2Ba)。因此,嘌呤在CF分泌物的模式似乎是独立的样本收集技术。gydF4y2Ba
气道嘌呤是高架BALF中儿童呼吸道疾病和与中性支气管炎gydF4y2Ba
目前作者希望确定嘌呤和呼吸道疾病之间的关系也可以观察到孩子。由于频繁的孩子无法咳出痰痰,气管分泌物获得使用支气管肺泡灌洗(BAL)。BALF前瞻性地收集和分析来自25个孩子CF和12 non-CF科目(疾病控制;直流)。类似于前面的数据,更高水平的ATP和AMP CF BALF中观察到,与直流BALF相比,与AMP出席最高的绝对浓度(图2gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba)。ADP和腺苷水平不同的组。gydF4y2Ba
而更高水平的ATP和AMP BALF中观察CF主题,它不能区分差异是否CF特定或反映了更高水平的呼吸道细菌感染和/或中性支气管炎CF呼吸道疾病的标志gydF4y2Ba34gydF4y2Ba。确定变量与嘌呤最密切相关的水平,一个多元回归模型被用来评估CF状态,是否存在气道感染的病原体(> 50000毫升gydF4y2Ba−1gydF4y2BaBALF文化)或中性白细胞细胞计数BALF中最好的预测ATP或安保水平。在生成的模型,只有中性粒细胞计数成为ATP或音箱的一个重要预测的水平,具有较强的相关性ATP和AMP(图2 bgydF4y2Ba⇑gydF4y2Ba)。相比之下,中性粒细胞计数并没有很强的关联与腺苷(r = -0.22, p = 0.19)或ADP (r = 0.25, p = 0.14)。类似的相关性之间的痰样本观察中性粒细胞计数和ATP和AMP (r = 0.75, p = 0.0007和r = 0.81, p = 0.0001),尽管结果是有限的少数学科从他可以获得准确的细胞计数(三个CF主题和14控制)。这些数据表明,ATP和放大器主要是中性粒细胞炎症的标志物。gydF4y2Ba
气道嘌呤与肺功能有关gydF4y2Ba
由于中性粒细胞炎症介导许多CF呼吸道疾病的临床表现,包括肺功能下降,目前作者检测BALF嘌呤含量之间的相关性和肺功能。尽管生之间显著的相关性观察ATP和AMP价值观和肺功能(数据未显示),这是承认变量稀释BALF气道分泌物可能混淆BALF生物标志物与临床结果之间的关系。当前作者试图控制稀释使用BALF血清尿素比,一种广泛使用的问题尽管稀释标记gydF4y2Ba35gydF4y2Ba。然而,之间的相关趋势观察尿基稀释因子和中性粒细胞计数(r = -0.40, p = 0.056),这表明BALF尿素水平出土文物增加患病的航空公司,也许通过增加尿素的射流在洗胃上皮细胞发炎gydF4y2Ba35gydF4y2Ba。因此,另一种方法来控制稀释使用ATP的比率或AMP腺苷是检查,因为比率并没有受到稀释的影响。这种方法是基于观察ATP和AMP与标记的呼吸道疾病,而腺苷不。正如预期的那样,显著的相关性观察ATP /腺苷和AMP /腺苷比率与中性粒细胞的百分比dilution-independent支气管炎的标志(图3gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba)。此外,嘌呤之间存在显著的相关性也见过每分比率和预测在一秒用力呼气量(FEVgydF4y2Ba1gydF4y2Ba;图3 bgydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba)。这些数据表明,用适当的方法来控制稀释,气道ATP和安保水平与临床相关疾病严重度指数作为生物标志物预期的中性粒细胞炎症。gydF4y2Ba
ATP在EBC与气道炎症相关gydF4y2Ba
虽然目前的数据表明,嘌呤ATP和AMP与CF儿童中性粒细胞炎症的潜在生物标志物,风险和技术挑战与BAL限制了临床应用。确定气道嘌呤可以使用一种简单而无创测量方法在儿童,嘌呤在EBC探讨了检测的可行性。gydF4y2Ba
在试点研究,EBC从一小群获得健康和CF的孩子在每组(4)。最初使用etheno-derivatisation和高效液相色谱分析表明EBC嘌呤浓度低于etheno-derivatisation检测阈值在大多数个人(数据未显示)。更敏感的方法,高度敏感和特定luminometry方法被利用,被广泛用于衡量ATP水平在生物样本gydF4y2Ba25gydF4y2Ba,gydF4y2Ba36gydF4y2Ba,gydF4y2Ba37gydF4y2Ba。luminometry,上面一个信号背景中检测出的每个飞行员EBC样品(平均±gydF4y2BasegydF4y2Ba(范围)840±320(157 - 2428)任意光单元(ALU))。符合ATP特定的信号,信号消失与示例pre-incubation 30分钟2单位·毫升gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba的ATP酶降解apyrase(后处理15±5运算器;图4gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba),但不是在时间控制孵化项目。基于已知的标准相比,EBC ATP浓度低picomolar范围,符合那些以BALF和痰后考虑到10gydF4y2Ba3gydF4y2Ba-10年gydF4y2Ba4gydF4y2Ba(或更高版本)稀释EBC的气道分泌物gydF4y2Ba38gydF4y2Ba,gydF4y2Ba39gydF4y2Ba。在此浓度范围,再现性温和,within-sample变异系数在20 - 30%之间。出于这个原因,EBC ATP水平报告为重复测量的平均值。gydF4y2Ba
进一步评估与luminometric EBC ATP水平方法,初步研究已扩展到包括EBC收集从共有14个孩子在诊所定期CF和14名健康对照组。与前面的结果一致,EBC ATP水平升高与健康对照组相比,儿童CF(图4 bgydF4y2Ba⇑gydF4y2Ba)。治疗的CF恶化减少中性气道炎症gydF4y2Ba40gydF4y2Ba;因此,它是治疗期间提出EBC ATP水平会下降。探索这种关系,EBC收集来自14个孩子CF的开始和结束过程中肺恶化静脉注射抗生素,其中包括4 CF从先前的研究主题。均值±gydF4y2BasdgydF4y2Ba治疗持续时间为21.6±3.3天,用抗生素治疗选择的医生。正如所料,抗生素治疗后肺功能改善(意味着±gydF4y2BasdgydF4y2BaFEVgydF4y2Ba1gydF4y2Bapre - % pred: 60.1±20.1%gydF4y2Ba与gydF4y2Ba70.1±19.9%的抗生素,p≤0.01)。这种改善与EBC ATP水平下降了三倍(图4 cgydF4y2Ba⇑gydF4y2Ba),符合先前观察到的变化在痰中性粒细胞炎症治疗后的标志gydF4y2Ba40gydF4y2Ba。尽管这些数据是初步的,他们表明EBC ATP水平适应模式预期中性粒细胞炎症的生物标志物。gydF4y2Ba
讨论gydF4y2Ba
细胞外的信号分子是嘌呤purinergic信号通路调节气道防御,包括黏膜纤毛的间隙和管腔内的炎症反应。在目前的研究中,证明了模式和这些嘌呤浓度有强烈关系CF气道炎症。分析分泌物CF科目获得痰,多发性骨髓瘤和BALF提供了一个非常一致的图片AMP是占主导地位的嘌呤,ATP和AMP高架在CF与控制(表2gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba)。这种模式的嘌呤不同显著相对平等的AMP和腺苷水平观察痰从正常的受试者,进而报告类似于正常气道上皮细胞的文化gydF4y2Ba32gydF4y2Ba。尽管与CF主要是研究对象,数据表明,嘌呤和中性粒细胞炎症之间的关系不是CF具体。然而,进一步的研究是必要的在目前的发现可以自信地普遍non-CF呼吸道疾病。gydF4y2Ba
虽然气道嘌呤的来源不确定在本研究中,嘌呤含量之间的关联度和中性粒细胞计数表明,中性粒细胞可能导致嘌呤含量的主要因素CF气道分泌物。这一结论与之前的研究一致表明,激活中性粒细胞展览增加释放ATP和积累AMPgydF4y2Ba41gydF4y2Ba。然而,嘌呤释放坏死或凋亡细胞不能被排除在外,也不能一个重大贡献从炎症气道上皮细胞或其他炎症细胞被排除。尽管细菌细胞外的另一个潜在来源嘌呤,似乎不太可能,大大促进了细菌ATP释放水平在CF痰(∼10随处可见gydF4y2Ba7gydF4y2Ba·毫升gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba)gydF4y2Ba42gydF4y2Ba。AMP的积累表明相对缺乏的5′核苷酸酶代谢AMP腺苷,模式已观察到孤立的中性粒细胞(缺少5′核苷酸酶)但不是气道上皮细胞gydF4y2Ba32gydF4y2Ba,gydF4y2Ba43gydF4y2Ba。因此,高水平的AMP样本中获得的航空公司表明,中性粒细胞主导嘌呤核苷酸的代谢模式在这些气道表面。gydF4y2Ba
不管底层机制(s),强烈的相关性水平中性粒细胞计数表明,气道的ATP和AMP中性粒细胞炎症的潜在生物标志物。目前的数据表明,测量的ATP EBC可能持有的承诺作为一个简单的和非侵入性方法来评估儿童中性气道炎症的程度。事实上,大约三倍减少CF的EBC ATP水平治疗后肺恶化相似之处减少中性粒细胞在痰液细胞计数和引发水平类似的待遇gydF4y2Ba40gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
然而,目前结果还强调了许多已知的限制EBC分析。附近的测量ATP浓度很低,阈值检测,表明小技术文物或变化可以显著影响结果。此外,小卷EBC收集杜绝测量ATP和稀释的标记。因此,系统无法评估样本稀释组间的差异,可能导致观察到的差异。因此,进一步改进方法需要更彻底的评估的潜在临床EBC嘌呤测量。gydF4y2Ba
当ATP和AMP成为潜在的生物标记物,为腺苷,并未观察到类似的结果。虽然BALF中腺苷的含量是类似于先前发表的价值gydF4y2Ba27gydF4y2Ba,目前的作者没有观察气道的高浓度腺苷gydF4y2Ba27gydF4y2Ba,gydF4y2Ba28gydF4y2Ba或相关疾病严重性前所述哮喘gydF4y2Ba29日gydF4y2Ba。这种差异可能反映了根本性的差异在哮喘气道病理生理学和CF。CF的特点是一种病原体,neutrophil-dominated气道炎症的更少的细胞有很大区别,嗜酸性粒细胞丰富,且相对无菌哮喘气道炎症中观察到。这些发现表明,中腺苷含量因素负责增加哮喘并不常见的中性正是CF的支气管炎。gydF4y2Ba
除了探索潜在的炎症气道嘌呤的生物标记,目前的研究也提供了新的见解purinergic信号通路在呼吸道疾病。虽然不可能准确地确定BALF中稀释样品,三磷酸腺苷和腺苷水平BALF与先前的报道是一致的gydF4y2Ba25gydF4y2Ba,gydF4y2Ba27gydF4y2Ba,先前的研究表明,气道分泌物BALF中可能是稀释10 - 100倍gydF4y2Ba35gydF4y2Ba。鉴于这种程度的稀释,gydF4y2Ba原位gydF4y2BaATP水平会高于平均有效浓度(ECgydF4y2Ba50gydF4y2Ba)P2YgydF4y2Ba2gydF4y2Ba在气道上皮细胞ATP受体(0.24μM)gydF4y2Ba44gydF4y2Ba和方法激活P2Y所需的水平gydF4y2Ba2gydF4y2Ba在炎症细胞受体gydF4y2Ba13gydF4y2Ba,gydF4y2Ba45gydF4y2Ba。这些因素表明,ATP-mediated purinergic信号可能是自适应增加呼吸道细菌感染,导致更高的黏膜纤毛的清除和炎性细胞的活化。同样,平均腺苷水平在健康和CF航空预计在ECgydF4y2Ba50gydF4y2BaA1和负责腺苷受体的值(分别为0.31和0.73μM)上发现炎症细胞gydF4y2Ba46gydF4y2Ba,gydF4y2Ba47gydF4y2Ba,虽然有点低于欧盟gydF4y2Ba50gydF4y2Ba占统治地位的腺苷受体(A2b)在气道上皮细胞表达gydF4y2Ba32gydF4y2Ba。腺苷水平没有与标记的疾病,目前作者不会预料到adenosine-mediated信号与中性粒细胞炎症,会增加,增加ATP腺苷比率可能会支持更多的炎性环境gydF4y2Ba20.gydF4y2Ba。然而,最近发表的证据表明AMP可能作为腺苷受体激动剂,直接gydF4y2Ba48gydF4y2Ba或转换后腺上皮表面gydF4y2Ba49gydF4y2Ba。因此,提高腺苷受体信号介导通过音箱,可以调节增加炎症。gydF4y2Ba
总之,目前的研究表明嘌呤恢复在中性气道炎症和气道分泌物是生物标志物升高在囊性纤维化呼吸道疾病。嘌呤的测量结果表明,呼出的气息凝结可能是有用的作为一种无创性评估气道炎症的方法,尽管进一步的改进是必要的。gydF4y2Ba
支持声明gydF4y2Ba
小C.R.以斯帖支持由国家卫生研究院(NIH),批准号K12 RR17667,北卡罗莱纳大学项目转化的科学。N.E.亚历克西斯被美国环境保护署支持,批准号CR829522。萨达姆政权唐纳森被格兰特没有支持。K08 HL68617来自美国国立卫生研究院。C.G.摩尔是由国家卫生研究院的基金支持K12 RR023248和K30 RR022267。鲍彻司令部是由国家卫生研究院的基金HL34322和HL084934支持。N.E.亚历克西斯,E.R. Lazarowski萨达姆政权支持的唐纳森和钢筋鲍彻NIH专门面向临床研究中心(SCCOR)计划,批准号NHLBI P50HL084934。gydF4y2Ba
感兴趣的语句gydF4y2Ba
没有宣布。gydF4y2Ba
确认gydF4y2Ba
作者要感谢c . van Heusden(教堂山北卡罗来纳大学教堂山分校、数控、美国)寻求帮助来测量气道嘌呤含量样品。gydF4y2Ba
脚注gydF4y2Ba
可以从这个手稿补充数据gydF4y2Bawww.www.qdcxjkg.comgydF4y2Ba
- 收到了gydF4y2Ba2007年7月16日。gydF4y2Ba
- 接受gydF4y2Ba2008年1月20日。gydF4y2Ba
- ©人期刊有限公司gydF4y2Ba
引用gydF4y2Ba
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