文摘
严重的复合杂合的囊性纤维化跨膜电导调节(雌性生殖道)突变和R117H或R117C突变(R117H / C)临床表现,不同典型囊性纤维化(CF)基因的一个偶然的发现。
本研究的目的是评估的影响intron-8 polythymidine序列(IVS8)个体的基因型和表型之间的关系与R117H / C。
所有患者R117H CF / C知道诊所在澳大利亚和新西兰回顾性收集信息的基因型,研究了年龄,胰腺地位,汗水电解质,痰液微生物学和肺功能。
41人(39与R117C R117H和两个),16日在IVS8-5T背景和25 IVS8-7T背景被确定。十二个人提出了临床,四是兄弟姐妹知道R117H / C复合杂合子和25个被新生儿筛查检测。IVS8-5T集团十一14(78%)与氯化汗水结果可用汗水Cl > 60更易·L−15(20%)相比R117H / 7 t集团(卡方= 10.4,p = 0.001)。IVS8-5T两人胰腺癌不足。两IVS8-5T个人最近去世(43岁和19岁)和14个幸存的IVS8-5T集团的11例(79%)症状比较IVS8-7T 8(32%)的人(卡方= 6.1,p = 0.01)。
总之,大多数人与R117H / C IVS8-5T背景有一个高架汗水氯和临床囊性纤维化,在某些情况下是严重的。大多数人R117H / C在IVS8-7T背景没有临床囊性纤维化,但应遵循临床疾病的发展。
基因型和表现型之间的相关性在囊性纤维化(CF)并不总是明确的1。一般来说,那些严重的复合杂合的囊性纤维化跨膜电导调节(雌性生殖道)突变和R117H R117C (R117H / C)温和的疾病。然而,表型的范围可以从古典CF,非典型CF-like肺病、输精管的孤立的先天性缺失(抽象智力),或被发现顺便提一句,在个人是无症状的1,2。R117H / C是四级CFTR突变相关的生产检测蛋白质改变通道属性3,4。通过CFTR R117H / C检测氯运输减少,这被认为解释温和的表型3,4。
变量表示在R117H / C复合杂合的可能解释,部分由于exon-9拼接的效率。Exon-9拼接intron-8 polythymidine序列的影响(IVS8)立即先于拼接受体网站5。polythymidine道是多态序列的5,7或9胸苷(T)和exon-9拼接胸苷序列长度成反比6,7。雌性生殖道失踪exon-9 (CFTR exon-9检测)并不像它缺乏第一个核苷酸功能绑定褶皱。这种剪接变异的影响除了这些突变在其他网站。
变量表示的R117H / C很难确定的临床结果。然而,雌性生殖道的广泛可用性基因突变检测,特别是通过新生儿筛查项目和产前测试,创造了需要预测个体的预后严重的雌性生殖道的复合杂合子突变和R117H / C可能是无症状的时候测试。北美囊性纤维化基金会Consenus小组最近提出了CF的诊断标准8。标准包括两个生产雌性生殖道疾病突变的存在R117H / C时只考虑疾病产生突变在独联体与IVS8-5T8。尽管如此,有报道称,患者CF-like条件与IVS8-7T R117H / C等位基因5,9,10并没有明确的信息强度之间的关系R117H / C,这个IVS8 polythymidine序列和临床结果。
本研究的目的是评估个人的基因型和表型之间的关系已知R117H / C突变的影响IVS8 polythymidine序列。
对象和方法
所有澳大利亚和新西兰的董事(澳大拉西亚人)CF诊所和临床遗传学服务参与CF突变分析被信联系。对于所有个人信息请求,活着还是死去,他们已经出现在诊所和那些已知R117H或R117C突变。R117H和R117C一直被认为是功能上等价的11并在分析相结合,指R117H和R117C统称为R117H / C。记录的信息包括两个等位基因的突变,IVS8序列的两个等位基因,症状导致基因型的检测,可用,年龄,性别,汗水电解质浓度,胰腺地位,痰文化、肺功能测试结果(在一秒用力呼气量(FEV1))和病人的临床状态(肺、胃肠道、肝,没有输精管或其他症状)。
人知道CF诊所董事和临床遗传学服务的基础上一个临床表现(CF的症状或病人复合杂合子的兄弟姐妹R117H / C)或通过新生儿筛查鉴定。新生儿筛查CF是澳大利亚所有国家的常规(西澳大利亚除外)和新西兰。年新生儿筛查CF开始不同的在不同的中心,与第一中心(新南威尔士州)从1981年开始,澳大利亚西部不筛选的时候。所有屏幕中心目前使用新生儿免疫反应性的胰蛋白酶原(红外热成像)作为主要的屏幕后面跟着ΔF508突变分析在这些高(> 99)红外热成像。一个澳大利亚中心(南澳大利亚)包括突变G551D G452X,ΔI507, R553X R117H作为常规筛查的婴儿高红外热成像12。新生儿屏幕上所有个人与一个积极的结果(一个或两个突变)被称为汗测试。婴儿有一个积极的(> 60更易·L−1)或边缘(40 -更易·L−1)氯化汗水和谁有一个身份不明的突变被称为延长突变分析包括:ΔF508, R117H, G551D, A455E, G542X, N1303K, W1282X, 1717 - 1, R560T, R347P, R334W, R1162X, S549N, 621 + 3849 + 10 c > T, IVS8 polythymidine序列。一个澳大利亚的中心(新南威尔士州)进行扩展的突变分析所有ΔF508杂合的负面(< 40更易·L−1氯化)汗在1995 - 1996年研究的一部分评估新生儿筛查13。
方法用于不同的突变检测中心和突变筛选,包括等位基因特异性寡核苷酸杂交(麻生太郎)14限制性内切酶消化,多路放大耐火突变系统(武器)15和heteroduplex分析。
麻生太郎的IVS8 polythymidine序列检测5(南澳大利亚新南威尔士州),与产品大小嵌套式聚合酶链反应(PCR)凝胶电泳16(西澳大利亚,维多利亚)或minisequencing(新西兰)。R117H被武器(西澳大利亚,新南威尔士、维多利亚、塔斯马尼亚,新西兰)或麻生太郎(南澳大利亚)和R117C检测使用限制性内切酶消化(西澳大利亚,新南威尔士、维多利亚、塔斯马尼亚),麻生太郎(南澳大利亚)或武器(新西兰)。
对所有个体,汗水电解质是由毛果芸香碱离子电渗疗法与收集通过吉布森和库克垫技术17或Wescor Macroduct。汗水Cl > 60更易·L−1被认为是诊断CF,奖金更易·L−1边缘和< 40更易·L−1在正常范围内17。一些人有不止一个的汗水已被用于测试和最高的价值分析。胰腺异常状态的存在证实了脂肪小滴在凳子上,尽可能通过为期3天的粪便脂肪收集和在某些情况下正式胰腺刺激测试。微生物评估痰是由个人咯血痰。个人被认为CF相关的呼吸道症状,如果他们有一个排痰性咳嗽,复发性支气管炎或支气管扩张但不能独自哮喘。肺功能研究进行呼吸功能实验室附在每一个CF诊所在所有个人> 6年。个人提出与孤立的抽象智力不孕症诊所,但没有收到后续的呼吸医学专家或CF诊所被排除在研究之外。
结果
基因型
41个人R117H / C (39 R117H和两个R117C)被跟踪的CF诊所在澳大利亚和新西兰。基因型和临床信息为每个表1中给出⇓。34 39个人的复合杂合子R117H / C和ΔF508。两个人的第二个严重的突变(G542X / R117H和G551D / R117H),四个未知第二次突变和一个病人是R117H纯合子。
16个人在一个IVS8-5T R117H背景和25 IVS8-7T背景。每个染色体的阶段是未知的,防止标识R117H之间有直接的联系和IVS8 polythymidine序列。然而,先前的研究已经表明,目前,IVS8-9T发生在独联体与ΔF5085R117H是唯一发生的突变在独联体与IVS8-5T18。
演讲
41(61%)的25个人被发现通过新生儿筛查,12例(29%)因呼吸道症状和四个(10%)的兄弟姐妹R117H / C复合杂合子(三个弟弟有一个积极的新生儿筛查测试和人兄弟姐妹提供临床)。
汗水电解质
十四16个人的IVS8-5T集团和所有25个IVS8-7T集团有汗水测试结果(表2⇓)。均值±sd汗水Cl IVS8-5T集团是80±21更易·L−1这是高于均值±汗水Cl IVS8-7T集团46±21更易·L−1(p < 0.001)。IVS8-5T数量之间的差异和IVS8-7T个人积极(> 60更易·L−1)汗Cl是重要的(卡方= 10.4,p = 0.001)。
胰腺的地位
36个人(88%)胰腺足够(PS),两个人(5%)胰腺(π)和不足3例(7%)有不准确的信息来确定胰腺癌的地位。两个人πR117H / C IVS8-5T背景。
微生物学
痰培养结果可用于所有的IVS8-5T组但只有五个IVS8-7T组。一些人有不止一个生物培养(表3所示⇓)。差异的原因在获得痰微生物之间的组织与年轻和缺乏肺IVS8-7T组的症状。
肺部症状和功能
有两个人死在过去的2年,已经包括在这项研究。都有ΔF508 / R117H (9 5 t / t)基因型和死于化脓性肺病在19岁和43岁的年龄。
的16 IVS8-5T个人,12例(75%)有CF相关呼吸道症状(包括死亡的两个个体)七(28%)相比25 IVS8-7T个人(卡方= 8.7,p = 0.003)。有不同的年龄中位数IVS8-5T和IVS8-7T组(17.8与7.7年,Mann-Whitney p = 0.007)。然而,年龄就没有占不同的两组的症状。使用逻辑回归,调整了年龄、呼吸道症状的差异的比值比为6.1(95%置信区间1.36 - -26.9)。
幸存的39个人,19岁年纪足以执行可靠的肺量测定法。平均FEV1(%)预测的幸存IVS8-5T个人不是IVS8-7T个人(85%的不同与95%,p = 0.4)。
囊性纤维化的其他表现
一个主题有远端胆管梗阻。有三个抽象智力的人发现。两个确诊疝切开术,尽管他们的基因型是已知从新生儿筛查(IVS8-5T和IVS8-7T)和一个提供不孕但后来发现临床特征的CF和汗水Cl > 60更易·L−1。没有一个人有鼻窦炎,鼻息肉或胰腺炎。
讨论
本研究提供的证据表明,变量表示的个人R117H / C突变与IVS8差异有关。大多数人R117H / C和IVS8-5T等位基因实现临床和汗水测试标准的诊断CF虽然大多数患者R117H / C和IVS8-7T等位基因8。大多数IVS8-7T集团在新生儿筛查,发现了在大多数IVS8-5T集团被称为因为症状和结果都老了。然而,调整年龄仍有差异的存在呼吸道症状由于两组之间的CF。
一般来说,个体的复合杂合的严重的突变和R117H / C IVS8-5T背景有胰腺足够的CF,温和而个人有两个严重的突变2。然而,CF可以作为证明了两个严重的呼吸道感染死亡在当前队列和另外两个人胰腺功能不全。在IVS8-7T组五个人汗水氯> 60更易·L−1和其他五氯化边缘型汗的症状。建立化脓性肺部疾病的症状出现在一些老IVS8-7T个体,提高的可能性显著肺部疾病可能产生更多的IVS8-7T组随着时间的推移。
本研究Kiesewetter的相似et al。5研究38胰腺足够的CF患者ΔF508 / R117H基因型,其中31 IVS8-5T等位基因和七个IVS8-7T等位基因。进一步九ΔF508 / R117H个人研究,八个抽象智力只有男性和一个女性是无症状,并在每种情况下R117H IVS8-7T等位基因。IVS8-5T和IVS8-7T分布在有症状的个体之间的差异与ΔF508 / R117H基因型是重要的(卡方= 15.2,p < 0.001)。本研究认识到需要IVS8 polythymidine分析解释R117H突变的个体之间变化。
其他研究发现个人与R117H IVS8-7T背景有肺病。迪安et al。9报告56-yr-old女R117H / IVS8-7T从10岁的年龄,慢性支气管炎并发过敏性支气管肺的曲霉病(ABPA)。主题是胰腺癌足够,正常排汗测试但显然非典型CF的呼吸特征。同样,一个病人在一系列的汗水测试负ABPA R117H IVS8-7T背景和个人可以被认为是一种轻微的CF10。
临床表现的患者的可变性R117H / C突变主要是,但不完全解释为IVS8 polythymidine序列。有人建议,多态(TG) m序列立即近端polythymidine序列也会影响exon-9拼接与剪接机制进行交互19。此外,有证据表明,一些雌性生殖道多态性,例如M470V轨迹,以前被认为是一种无害的多态性,可能会减缓雌性生殖道处理通过内质网,所以不成熟蛋白被释放19。更详细的研究这些多态性的影响是十分必要的。
理解所扮演的角色的重要性IVS8 polythymidine序列在个人与R117H突变被Chmiel在最近的一份报告中突出显示et al。20.。在这份报告中一个婴儿被诊断出患有CF的基础上检测ΔF508和R117H脐带血但没有IVS8 polythymidine测序进行直到很久以后。婴儿是无症状的,有两个正常出汗氯化物(18更易·L−1和20更易·L−1),一个正常的鼻电位差和正常支气管肺泡灌洗。R117H被发现在一个IVS8-7T背景和CF的诊断是改变了,但同样也引起相当大的家庭情感代价。显然在这个时间点这个婴儿没有CF根据共识指南8。的早期识别IVS8-7T会节省大量的焦虑和费用,但仍然是一个婴儿的可能性可能会随着时间的推移,开发一个CF表型。
这个问题是所面临的困难的一个例子提供新生儿筛查和产前诊断中心。如果检测到R117H / C,那么必须intron-8 polythymidine序列分析提供一些指导执行可能的表型。最严重的囊性纤维化患者突变和R117H / C intron-8 polythymidine sequence-5T背景会升高汗水氯和囊性纤维化的临床特征,在某些情况下是严重和过早死亡。大多数人与R117H / C intron-8 polythymidine sequence-7T背景没有囊性纤维化的临床特征虽然超过一半有升高或氯化边缘型汗水。个人与R117H / C intron-8 polythymidine sequence-7T背景应遵循开发临床疾病的潜力。
确认
作者希望承认援助囊性纤维化诊所的董事在澳大利亚和新西兰;p·罗宾逊(墨尔本皇家儿童医院),n .冰箱(墨尔本莫纳什医学中心),j·威尔逊(墨尔本阿尔弗雷德医院),p·库珀(皇家亚历山德拉医院的儿童、悉尼),j·莫顿(悉尼儿童医院、悉尼),p .再见(皇家王子阿尔弗雷德医院、悉尼)、b(板牙Miseriecordae医院,布里斯班)大师,p .弗朗西斯(皇家儿童医院,布里斯班),j·马丁(妇女和儿童医院,阿德莱德),m·霍姆斯(皇家阿德莱德医院、阿德莱德),d·菲茨杰拉德(约翰亨特医院,纽卡斯尔),a·韦斯利(星际飞船儿童医院奥克兰),p . Pattermore克赖斯特彻奇(基督城医院)和临床遗传学服务;,的e·艾德金斯·r·马丁和j .睡(玛格丽特公主医院的儿童,珀斯),c . Meldrum(约翰亨特医院,纽卡斯尔),诉狡猾(皇家亚历山德拉医院的儿童、悉尼),r·特伦特(皇家王子阿尔弗雷德医院、悉尼),w·凯里(妇女和儿童医院,阿德莱德),美国福勒斯特,d . du迴旋和k·福肖(墨尔本默多克研究所)。作者也希望承认p . Chandros的援助部门的临床流行病学和生物统计学,墨尔本皇家儿童医院的统计分析。作者j .宏伟和n . Poplawski支持的澳大利亚国家健康与医学研究委员会。
- 收到了2000年6月26日。
- 接受2001年1月15日。
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