摘要GydF4y2Ba
最近有人提出,蛋白酶抑制剂调节肺纤维化反应。本研究探讨的博来霉素诱导的肺变化苍白小鼠,缺乏在血清α发展GydF4y2Ba1GydF4y2Ba-蛋白酶抑制剂,弹性蛋白酶抑制能力较低,在同源C57Bl/6J小鼠中。GydF4y2Ba
雄性苍白和C57Bl/6J小鼠接受单次气管内灌注生理盐水或博莱霉素。采用生物化学、形态学和形态计量学方法进行调查。GydF4y2Ba
在Bleomcin后21和72小时的菌株中,肺部显示出与肺气肿相关的炎症细胞浸润的焦点。纤维化随着时间的推移在博来霉素后开发。在14天的纤维化,分别影响23.46±9.48%(平均值±9.48%和40.62±13.34%(P <0.01)C57BL / 6J和Pallid小鼠的肺部。在C57BL / 6J和Pallid小鼠中,肺气肿影响3.68±3.11%和12.57±4.13%(P <0.01)肺。在C57BL / 6J小鼠中,Bleomycin将肺羟脯氨酸含量增加34%,脱染液含量为44%(两者P <0.01)。在Pallid小鼠中,这些增加仅为21%(P <0.01)和6%,这可能反映实质损失。GydF4y2Ba
因此,肺破坏性反应(肺气肿)和随后对博莱霉素的增殖反应(纤维化)在α中增强GydF4y2Ba1GydF4y2Ba蛋白酶抑制剂的缺乏。GydF4y2Ba
这项工作得到了Ministero Dell'universita e Dela Ricerca Scientifica e Tecnologica的授予支持。GydF4y2Ba
博莱霉素是一种抗肿瘤药物,可诱导人和实验动物的肺纤维化GydF4y2Ba1GydF4y2Ba-GydF4y2Ba3.GydF4y2Ba.在啮齿动物中,博来霉素施用诱导,其特征在于白细胞浸润的应变依赖性肺的炎症反应,成纤维细胞增殖和增加胶原含量GydF4y2Ba4.GydF4y2Ba那GydF4y2Ba5.GydF4y2Ba.这张照片通常被认为是人特发敏病肺纤维化的代表性模型GydF4y2Ba6.GydF4y2Ba.GydF4y2Ba
最近有报道称,丝氨酸蛋白酶抑制剂如αGydF4y2Ba1GydF4y2Ba- 蛋白酶抑制剂(αGydF4y2Ba1GydF4y2Ba‐PI)和分泌性白细胞蛋白酶抑制剂(SLPI),以及合成的白细胞弹性酶ONO-5046抑制剂,显著减弱了啮齿动物对博莱霉素的纤维化反应GydF4y2Ba7.GydF4y2Ba-GydF4y2Ba9.GydF4y2Ba. 在人类,蛋白水解酶失活也可能是正常修复的关键事件,正如呼吸窘迫综合征婴儿所证明的,抗蛋白酶活性的缺乏与慢性和纤维化的发展有关GydF4y2Ba10GydF4y2Ba.因此,这些研究表明,抗蛋白酶筛选不仅在肺气肿的发展中,而且在纤维化病变的调节中具有重要作用GydF4y2Ba11GydF4y2Ba那GydF4y2Ba12GydF4y2Ba.因此,研究抗蛋白酶-蛋白酶系统在纤维化模型中的作用可能有助于理解这种疾病的发病机制。GydF4y2Ba
最近被描述为遗传α的模型的Pallid小鼠GydF4y2Ba1GydF4y2Ba像π不足GydF4y2Ba13GydF4y2Ba.苍白(pa)突变最初是在一只野生老鼠身上发现的GydF4y2Ba14GydF4y2Ba通过重复杂交将其置于C57Bl/6J背景上。同源C57Bl/6J pa/pa与正常C57Bl/6J+/+之间的唯一区别在于2号染色体上的pa基因,该基因以常染色体隐性方式遗传GydF4y2Ba15GydF4y2Ba.血清α.GydF4y2Ba1GydF4y2Ba-PI水平的PA小鼠显着低于C57BL / 6J小鼠(2.7±0.4mg·mLGydF4y2Ba-1GydF4y2Ba与GydF4y2Ba4.4±0.3 mg·mLGydF4y2Ba-1GydF4y2Ba, 分别)GydF4y2Ba16GydF4y2Ba.肺气肿的组织学证据只能在12个月以后的pa小鼠中检测到GydF4y2Ba13GydF4y2Ba那GydF4y2Ba17GydF4y2Ba.GydF4y2Ba
因此,研究3-4月龄小鼠对博莱霉素的反应与同基因C57Bl/6J小鼠比较是很有意义的。后者小鼠已知对博莱霉素敏感,血清α值也相对较低GydF4y2Ba1GydF4y2Baπ(4.4±0.3 mg·毫升GydF4y2Ba-1GydF4y2Ba5.9±0.5 mg·mLGydF4y2Ba-1GydF4y2Ba在Balb / c小鼠和5.7±0.5 mg·mlGydF4y2Ba-1GydF4y2Ba在NMRI小鼠中)GydF4y2Ba16GydF4y2Ba那GydF4y2Ba17GydF4y2Ba.GydF4y2Ba
本研究采用生化、形态学和形态计量学方法进行。另外,自近期工作以来GydF4y2Ba在体外GydF4y2Ba和/或GydF4y2Ba体内GydF4y2Ba表明了抗蛋白酶蛋白酶系统中的某些细胞因子的活性的调节作用GydF4y2Ba18GydF4y2Ba-GydF4y2Ba20.GydF4y2Ba在这些动物的肺实质中,还使用免疫组织化学方法研究了肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)和转化生长因子β1(TGF-β1)的存在。最近强调了这些细胞因子在纤维化过程中的重要性GydF4y2Ba21GydF4y2Ba.GydF4y2Ba
材料和方法GydF4y2Ba
博莱霉素治疗GydF4y2Ba
在本研究中使用了具有C57BL / 6J背景和雄性C57BL / 6J小鼠的雄性Pallid(PA / PA)小鼠在这项研究中使用了3-4个月。Pallid小鼠最初是从杰克逊实验室(Bar Harbor,Me,USA)获得的。C57BL / 6J小鼠最初由Charles River(Calco,意大利)提供,并用作控制。所有动物实验符合“涉及动物和人类的研究指导原则”,并受锡耶纳大学当地道德委员会批准的。GydF4y2Ba
对于每种小鼠的菌株,使用不同的动物组。一组在盐水溶液(50μL)中获得0.1μg博莱霉素(罗蒙巴腐牛,Milano,意大利)的单一腹腔内滴注。另一组用相同量的盐水滴下肿瘤内滴注。所有腹腔内滴注都在乙醚麻醉下进行。十四天后,通过切割腹主动脉,用过量的戊巴比妥钠注射来自所有基团的动物。然后切除肺部并加工生物化学分析和组织学检查。在治疗后的14和21小时和3和7天中处死来自每个菌株和组的另外的三只动物,并为常规光学显微镜和免疫组化处理肺部。GydF4y2Ba
支气管肺泡灌洗弹性蛋白酶抑制能力GydF4y2Ba
为了分析支气管肺泡灌洗液(BAL)中弹性蛋白酶抑制能力(EIC)水平,每种菌株使用10只动物。小鼠用戊巴比妥腹腔注射麻醉,切断腹主动脉放血。分离气管,然后用20号钝针插管。借助蠕动泵(P-1 Pharmacia Uppsala,瑞典)对肺部进行冲洗GydF4y2Ba原位GydF4y2Ba3次,每次0.6 平均液体回收率大于95%。600倍离心后获得无细胞BAL液体GydF4y2BaGGydF4y2Ba孵育15 min,检测EIC抗小鼠白细胞弹性蛋白酶(MLE)GydF4y2Ba16GydF4y2Ba.如前所述,MLE被纯化GydF4y2Ba22GydF4y2Ba使用Z-Ala-Ala-Pro-azaAla-ONp进行活性位点滴定GydF4y2Ba23GydF4y2Ba. 它被发现有96%的活性。EIC表达为μg酶抑制/mL BAL。GydF4y2Ba
肺生物化学测定GydF4y2Ba
为了量化肺胶原蛋白和弹性蛋白,动物的动物是用戊巴比妥钠的麻醉,并通过切断腹部主动脉而死。胸廓切开术后,立即除去胸泡。称重肺部,均质(1:5,重量:体积(W:V)),在生物化学测定之前在6n HCl中水解。根据Kivirikko的方法,在肺水解产物中测定羟脯氨酸(Ho-脯氨酸)GydF4y2Ba等GydF4y2Ba.GydF4y2Ba24GydF4y2Ba数据以μg·肺表示GydF4y2Ba-1GydF4y2Ba.GydF4y2Ba
通过酶联免疫吸附试验(ELISA)对水解产物进行地梅碱分析,主要根据球菌GydF4y2Ba等GydF4y2Ba.GydF4y2Ba25GydF4y2Ba. 简而言之,用桥粒碱-血蓝蛋白结合物(AbI)(美国密苏里州欧文斯维尔弹性蛋白产品公司)的兔抗血清与桥粒碱标准品(0-30)孵育 ng)(弹性蛋白产品公司)或充分稀释的水解液,用于16小时 h在室温下。同时,微滴定板(西格玛,美国密苏里州圣路易斯)在0.5%的浓度下孵育 0.05μg桥粒蛋白-白蛋白结合物(弹性蛋白产品公司) M碳酸钠缓冲液pH 9.6在4°C下培养。培养后,用0.05%吐温20在0.15中洗涤孔五次 M磷酸盐缓冲盐水(PBS),pH 7.2,并在0.15中用0.05%吐温20饱和 M PBS,1%牛血清白蛋白(BSA)pH值 7.2为1 h在室温下。然后将八倍等份的AbI标准溶液或AbI样品溶液添加到孔中,持续2小时 h室温下培养。然后用抗兔免疫球蛋白G(IgG)(1:2000)(Sigma)连续孵育微孔2小时 在室温下,用过氧化物酶-抗过氧化物酶复合物(1:200)(西格玛)处理1小时 h在室温下。然后,将2,2′-叠氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)溶液(Sigma)添加到孔中。在室温下培养1h后,在405处读取吸光度 纳米。数据以μg·lung表示GydF4y2Ba-1GydF4y2Ba.GydF4y2Ba
形态学和形态学GydF4y2Ba
不同组小鼠的肺在20 cm H的恒压下用缓冲福尔马林(5%)气管内固定GydF4y2Ba2GydF4y2Ba至少24小时。然后将所有肺脱水,用甲苯清除,石蜡包埋。取肺横切面(7 μm),苏木精伊红染色。形态测量评估包括根据Glagoleff和Weibel的体视学原理,点数计数法测定纤维化体积密度百分比Vv(f)和肺气肿体积密度百分比Vv(e)GydF4y2Ba26GydF4y2Ba:VV = PP,其中Vv为体积密度和PP点的分数叠加在定义的结构变化。点计数通过测定每滑板20个随机视野,并使用多用途格计数每场45个点,总计每900个滑动点的×100的放大倍率进行。纤维化定义为肺泡隔和肺泡空间与细胞外基质的沉积内炎性细胞浸润。肺气肿改变被定义为空气空间的异常增大与肺泡隔的损失,有或没有肺泡壁增厚。的结果的再现性是大于98%。GydF4y2Ba
免疫组织化学GydF4y2Ba
不同组小鼠的肺在20 cm H的恒压下用缓冲福尔马林(5%)气管内固定GydF4y2Ba2GydF4y2BaO为4 h、 然后在同一固定液中再浸泡一小时。然后将样品脱水,在甲苯中清除,并将其包埋在石蜡中。组织切片(8 μm)通过免疫过氧化物酶法对TNF-α、IL-1β和TGF-β1进行染色。切片用0.3%过氧化氢预处理以抑制内源性过氧化物酶的活性。为了检测TGFβ1,切片用1 mg·mLGydF4y2Ba-1GydF4y2Ba透明质酸酶在0.1 M乙酸钠在0.15 M NaCl(pH 5.5)30分钟 37°C条件下的最小值。为了检测TNF-α和IL-1β,切片用0.05%的0.1%胰蛋白酶处理 M-tris-HCl缓冲液,pH 7.6分10秒 37°C下培养30分钟。所有切片也与3%牛血清白蛋白一起培养30分钟 在室温条件下,阻断非特异性抗体结合。然后将其与初级抗体在4°C下孵育过夜。使用的主要抗体为:1:20稀释的小鼠TNF-α兔多克隆抗体(比利时根特免疫遗传学),1:100稀释的小鼠IL-1β兔多克隆抗体(美国纽约州纽约市安提格尼克斯美国公司),以及1:20稀释的小鼠TGF-β1兔多克隆抗体(英国温布利Insight生物技术有限公司)。所有切片均冲洗并与绵羊抗兔IgG抗体孵育30分钟 室温下的最小值。通过添加从兔血清制备的过氧化物酶-抗过氧化物酶复合物显示染色。检测通过在新鲜溶解于0.03%过氧化氢中的二氨基联苯胺中培养100分钟完成 mM-Tris-HCl pH值 7.4. 作为免疫染色的阴性对照,一级抗体被非免疫兔血清取代。GydF4y2Ba
统计分析GydF4y2Ba
对于测量和计算的每个参数,计算单个动物的平均±sd值。组间差异的显著性采用单因素方差分析(ANOVA)计算(F检验)GydF4y2Ba27GydF4y2Ba.Ap‐值≤0.05被认为是显著的。GydF4y2Ba
结果GydF4y2Ba
死亡率GydF4y2Ba
用生理盐水治疗的动物没有死亡。使用博莱霉素后,25%的C57Bl/6J小鼠和31%的苍白小鼠死亡。这种差异没有统计学意义。死亡发生在治疗后7-14天,似乎是由于呼吸衰竭。GydF4y2Ba
Bronchoalveolar灌洗中的弹性酶抑制能力GydF4y2Ba
10只C57Bl/6J小鼠的EIC为7.48±1.48(平均±sd)。淡色小鼠(n=10) EIC明显降低(4.91±0.96,p<0.01)。GydF4y2Ba
肺生物化学测定GydF4y2Ba
HO‐脯氨酸评估结果如图1所示GydF4y2Ba⇓GydF4y2Ba.Bleomycin攻击后的十四天,C57BL / 6J小鼠(n = 7)的肺平均在Ho-脯氨酸中平均显示比盐水处理的小鼠的肺的34%(P <0.01)含量高(n = 7)(203.88±16.26μg·肺GydF4y2Ba-1GydF4y2Ba与GydF4y2Ba152.23±12.18μg·肺GydF4y2Ba-1GydF4y2Ba).类似地,脱霉菌(n = 10)的肺肺源霉素在Hleomcin之后的Ho-脯氨酸中的平均含量为21%(p <0.01),大于盐水处理的小鼠(n = 10)(180.36±14.46(180.36±14.46) μg·lung-1GydF4y2Ba与GydF4y2Ba149.01±12.02μg·肺GydF4y2Ba-1GydF4y2Ba).GydF4y2Ba
图形 1.GydF4y2Ba⇑GydF4y2Ba也显示了肺锁链内容的结果。Following bleomycin, the lungs of the C57Bl/6J mice (n=7) showed a mean desmosine content which was 44% higher than that of the corresponding saline-treated mice (n=7) (3.62±0.52 μg·lung-1GydF4y2Ba与GydF4y2Ba2.52±0.29μg·肺GydF4y2Ba-1GydF4y2Ba).GydF4y2Ba
博莱霉素组小鼠肺desmoine含量与对照组相似(2.61±0.41 μg·肺)GydF4y2Ba-1GydF4y2Ba)(n = 10)和盐水(2.46±0.31μg·肺部GydF4y2Ba-1GydF4y2Ba) (n = 10)组。GydF4y2Ba
形态学和形态学GydF4y2Ba
十个C57BL / 6J对照小鼠中的八个显示正常,固定肺部牙科疗法(图2GydF4y2Ba⇓GydF4y2Ba),而2/10的小鼠出现少量斑块状的微小空气扩张,平均Vv(e)组值为0.39%(表1)GydF4y2Ba⇓GydF4y2Ba).博莱霉素治疗14天后,9只C57BL/6J小鼠(n=9)肺均出现大面积细胞浸润和纤维化,占23.46%。此外,8/9只小鼠也出现了一些肺气肿变化。它们主要位于纤维化病灶附近(图2)GydF4y2Ba⇓GydF4y2Ba)这些病变平均影响3.68%的肺(表1) 1.GydF4y2Ba⇓GydF4y2Ba).GydF4y2Ba
在苍白的对照组中,4/7只小鼠出现少量的纤维化灶,累及0.59%的肺(表1)GydF4y2Ba⇑GydF4y2Ba),而所有动物均有少量斑片状的空域扩大,有时伴有扁平的肺泡间隔。这些病变通常只累及2 - 3个肺泡囊(图2)GydF4y2Ba⇑GydF4y2Ba)影响2.47%的肺部(表1) 1.GydF4y2Ba⇑GydF4y2Ba).博莱霉素治疗14天后,苍白小鼠(n=6)出现最严重的纤维化和肺气肿变化。两种病变在所有动物中均可见,且广泛分布和混杂(图2)GydF4y2Ba⇑GydF4y2Ba), Vv(f)的平均值为40.62%,Vv(e)的平均值为12.57%(表1GydF4y2Ba⇑GydF4y2Ba).GydF4y2Ba
免疫组织化学GydF4y2Ba
染色TNF-α表明,在两种菌株,在肺泡细胞与巨噬细胞的形态特征的微弱反应的对照小鼠和II型肺。After bleomycin in both strains, a clear reaction was seen on the above mentioned alveolar cells as wellon parenchymal areas showing an inflammatory reaction, at 14 h, 21 h and 3 days. At 7 days, the positive staining was also distributed on extracellular matrix components associated with an inflammatory reaction (data not shown).
在对照组小鼠中,IL‐1β反应显示所有肺泡结构的模糊和弥漫性染色。博来霉素治疗14小时后,两种小鼠胸膜下区肺泡细胞均有明显的阳性染色。21 h和3 d时,胸膜下炎症反应和细胞外基质成分也呈阳性。7天以上结构染色较弱(数据未显示)。GydF4y2Ba
在这两种菌株的控制动物,那里几乎到TGFβ没有反应。博来霉素后21小时,第一微弱阳性染色看到的两种菌株的胸膜细胞。在3天后,将阳性反应有贯穿了在第7天肺泡壁细胞的更密集的染色的实质扩散(未示出数据)。GydF4y2Ba
因此,目前的结果不会透露在Bleomycin后的小鼠的两种小鼠中的三种细胞因子的分布和染色强度的明显差异。GydF4y2Ba
在盐水后21和72h,在氧杂环蛋白和曙红染色后在光学显微镜下观察时,用于免疫组化研究的C57BL / 6J和脱髓小鼠的肺部是正常的。在Bleomycin后21和72小时,C57BL / 6J和Pallid小鼠的肺部显示出与可观的肺气肿相关的炎性细胞的焦点(图3GydF4y2Ba⇓GydF4y2Ba).GydF4y2Ba
讨论GydF4y2Ba
这项工作的主要发现是:(1)α缺乏症的影响GydF4y2Ba1GydF4y2Ba‐PI对2个同源品系小鼠对博莱霉素的肺反应的影响(2),以及一个诺沙(博莱霉素)可以诱导两种不同的肺病理,如纤维化和肺气肿。GydF4y2Ba
关于第一点,已知对博莱霉素的反应是菌株依赖性的GydF4y2Ba5.GydF4y2Ba,因此可能与特定菌株的许多独立因素有关。这包括胶原蛋白合成和沉积的变化GydF4y2Ba5.GydF4y2Ba,细胞因子的生产GydF4y2Ba28GydF4y2Ba, H‐2基因型以及非H‐2基因因素GydF4y2Ba29GydF4y2Ba.因此,重要的是要研究与其α不同的同一菌株在同一菌株中的博来霉素病变的结果GydF4y2Ba1GydF4y2Baπ血清。根据一项初步研究的结果,选择博莱霉素治疗后14天的时间点,我们在治疗后14天和35天对动物进行了调查。由于35天期间观察到的死亡率非常高(两种菌株的死亡率都达到70%),因此忽略了35天期间。因此,少数幸存的动物不能被视为具有代表性的样本。GydF4y2Ba
先前据报道,与母体C57BL / 6J菌株的小鼠相比,粘液小鼠在血清α中具有缺陷GydF4y2Ba1GydF4y2Ba-与血清EIC缺陷相关的PI水平GydF4y2Ba16GydF4y2Ba.本研究调查了BAL中的EIC(GydF4y2BaIE。GydF4y2Ba在目标器官)。结果表明,在BAL组,苍白小鼠的EIC值也显著降低。GydF4y2Ba
在这两种菌株中,在纤维化方面对博莱霉素的形态学反应非常相似,包括腔内和肺泡内白细胞浸润和间充质细胞增殖伴结缔组织成分沉积。此外,可见单核细胞灶。然而,形态学上,灰白色小鼠的病变程度几乎是C57Bl/6J小鼠的两倍。同样,灰白色小鼠的肺气肿变化程度也比C57Bl/6J小鼠大3倍以上。因此,在这两个菌株之间没有遗传背景差异的情况下,EIC中较大的缺陷对应于对博莱霉素反应的增强。GydF4y2Ba
本发明的结果,加上意见,即α的外源性给予GydF4y2Ba1GydF4y2Ba‐PI、SLPI和化合物ONO-5046(中性粒细胞弹性酶的特异性抑制剂)显著减弱对博莱霉素的反应GydF4y2Ba7.GydF4y2Ba-GydF4y2Ba9.GydF4y2Ba,表示α比例的作用GydF4y2Ba1GydF4y2Ba‐PI到中性粒细胞弹性蛋白酶在博莱霉素纤维化发展中的作用。GydF4y2Ba
在诊所,α的比例不平衡GydF4y2Ba1GydF4y2Ba众所周知 - 普及中性粒细胞弹性蛋白酶在肺肺部发育中发挥重要作用GydF4y2Ba11GydF4y2Ba那GydF4y2Ba12GydF4y2Ba.它的作用是纤维化的发展是调查的主题。最近,在一些特发性肺纤维化的患者中,中性粒细胞弹性蛋白酶血液中的血液比例为αGydF4y2Ba1GydF4y2Ba‐PI显著高于肺气肿患者和正常个体GydF4y2Ba30.GydF4y2Ba.GydF4y2Ba
中性粒细胞弹性蛋白酶在纤维化发展中的作用机制可能取决于其攻击大量结缔组织蛋白的能力,从而导致严重的组织变化和慢性炎症GydF4y2Ba31GydF4y2Ba那GydF4y2Ba32GydF4y2Ba.或者,或除了这些直接效应之外,中性粒细胞弹性蛋白酶可能施加一些由某些细胞因子的调节组成的间接效应。特别是,Elastase被认为是调制GydF4y2Ba体内GydF4y2BaTNF - α和α预处理的影响GydF4y2Ba1GydF4y2Ba-PI保护小鼠对抗该细胞因子的致死剂量GydF4y2Ba18GydF4y2Ba那GydF4y2Ba19GydF4y2Ba.此外,最近有报道说鼠标弹性蛋白酶抑制剂ONO-5046GydF4y2Ba33GydF4y2Ba博莱霉素可显著降低BAL细胞炎症和基质生成细胞因子mRNA水平GydF4y2Ba9.GydF4y2Ba.的确,在本研究的实验条件下,在博莱霉素后的不同时间间隔内,两株小鼠之间TNF - α、IL - 1β和TGF - β的分布和强度均未发现差异。本研究的总体结果,结合文献中的数据,表明α缺乏GydF4y2Ba1GydF4y2Ba‐PI也在纤维化的发病机制中发挥作用。GydF4y2Ba
关于第二点(一种noxa,两种病理学),C57Bl/6J小鼠在博莱霉素14天后发现纤维化区域附近的肺气肿病变,与其他品系小鼠相比,其血清EIC也有轻度缺乏(约-25%)GydF4y2Ba17GydF4y2Ba.这些肺气肿样病变以前在使用博莱霉素后的C57Bl/6J小鼠中被描述过GydF4y2Ba34GydF4y2Ba那GydF4y2Ba35GydF4y2Ba,但收到了很少的话,如果有的话,注意。它们由伴随肺泡隔膜的扁平化和/或消失的空间扩大。在Bleomycin后14天,肺泡壁有时被增厚,因此这些病变并没有完全满足障碍的官方定义,不包括“显而易见的纤维化”GydF4y2Ba36GydF4y2Ba.因此在这里称为“肺气肿的”。正常的C57Bl/6J小鼠未经治疗不会发生自发性肺气肿。然而,气管内给予N -甲酰- L -蛋氨酸- L -亮氨酸- L -苯丙氨酸(FMLP)或内毒素,会导致中性粒细胞迅速流入肺部和肺气肿GydF4y2Ba37GydF4y2Ba那GydF4y2Ba38GydF4y2Ba.NMRI等小鼠的品系,它们没有α缺陷GydF4y2Ba1GydF4y2Ba‐PI,对FMLP有响应,中性粒细胞流入肺部,但肺气肿没有响应GydF4y2Ba37GydF4y2Ba.因此,肺气肿改变在C57BL / 6J小鼠这里观察到的,可能代表的原发损害,GydF4y2BaIE。GydF4y2Ba博莱霉素灌注后,炎症细胞浸润引起蛋白水解作用的结果。这一假设是基于在博莱霉素治疗后(21和72小时)早期观察到与炎症灶相关的“真”肺气肿区域,因此,远早于纤维化的发展。GydF4y2Ba
在C57BL / 6J小鼠中生化学上,Ho-脯氨酸的肺含量增加,反映了纤维化变化GydF4y2Ba5.GydF4y2Ba,伴随着Desmosine的肺含量增加,这与博莱霉素后以各种时间间隔发现的肺弹性蛋白mRNA表达的增加一致GydF4y2Ba34GydF4y2Ba.GydF4y2Ba
在磷酸盐小鼠中,21和72小时在博莱霉素后,观察到与炎症细胞浸润的斑点区域有关的肺气肿。在14天时,纤维化和肺气肿病变均比在C57BL / 6J小鼠中更严重,并且出现混合。因此,虽然在稍后的时间蛋白的咳嗽小鼠的咳药病变表现为脱盐型,但早期观察表明他们的发展在纤维化之后。然而,由于纤维化过程的收缩力而导致的空气空间扩大的进一步劣化不能排除。GydF4y2Ba
与C57Bl/6J小鼠相比,这些小鼠肺实质的大面积破坏导致肺HO‐脯氨酸含量较低,desmoine含量也有轻微增加。GydF4y2Ba
所有这些数据表明,博莱霉素(noxa)可以在同一个肺中诱导两种截然不同的反应:破坏性肺气肿型和增殖性纤维化型。目前的研究结果扩展了以前用氯化镉获得的研究结果,这是因为单独气管内给药给仓鼠会引起肺纤维化病变,而与β-氨基丙腈(lathyrogen)联合给药会引起肺气肿GydF4y2Ba39GydF4y2Ba.仓鼠,相对于几个物种,也有天生的低血清抗蛋白酶活性GydF4y2Ba40GydF4y2Ba.这些结果表明,在纤维化和肺气肿方面的肺反应的结果可能是由抗转油酶活性的内在水平调节,并且两种病变可以在α存在下共存GydF4y2Ba1GydF4y2Ba-PI缺乏。GydF4y2Ba
- 已收到GydF4y2Ba2000年2月2日。GydF4y2Ba
- 公认GydF4y2Ba2000年9月25日。GydF4y2Ba
- ©ers Journals LtdGydF4y2Ba
参考GydF4y2Ba
- ↵GydF4y2Ba
- ↵GydF4y2Ba
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