文摘gydF4y2Ba
炎症、氧化应激和细胞凋亡,参与慢性阻塞性肺疾病(COPD)发病机理,可能激活p38子群的增殖蛋白激酶(MAPKs)。因此,本研究的目的是评估表达式的磷酸化,p38 MAPK的活动形式(phospho-p38)在肺部的慢性阻塞性肺病患者。gydF4y2Ba
手术标本来自18个吸烟者与慢性阻塞性肺病疾病严重程度的不同阶段,加上九吸烟和八不吸烟的主题与正常肺功能。通过免疫组织化学方法量化Phospho-p38 +细胞在肺泡壁和肺泡空间。此外,免疫印迹分析phospho-p38和总p38α同种型肺泡巨噬细胞表达的。gydF4y2Ba
Phospho-p38 +肺泡巨噬细胞和肺泡壁Phospho-p38 +细胞增加严重和轻/中度COPD患者,相比之下,吸烟和不吸烟的控制。此外,他们具有负相关性的值在一秒用力呼气量(FEVgydF4y2Ba1gydF4y2Ba),FEVgydF4y2Ba1gydF4y2Ba/用力肺活量。免疫印迹分析表明,磷酸化p38,但不是总p38α同种型,特别增加肺泡巨噬细胞在慢性阻塞性肺病患者。gydF4y2Ba
p38增殖作用的激活蛋白激酶通路似乎参与了慢性阻塞性肺疾病的发病机制。目前的研究结果表明,这种蛋白质可能是一个合适的药物治疗干预的目标。gydF4y2Ba
香烟烟雾中扮演着关键角色在慢性阻塞性肺疾病(COPD)的发病机制。多的信息关于COPD发病机理来自表现在动物模型或实验研究gydF4y2Ba在体外gydF4y2Ba系统,并不总是直接反映什么是发生在人类疾病。然而,众所周知,氧化剂和由于吸烟促进肺部炎症,氧化应激介导的,至少在某种程度上,激活的转录因子核转录因子(NF) -κB和激活蛋白(美联社)1,协调多个基因的表达在慢性阻塞性肺病认为重要,如白介素8 (IL)和肿瘤坏死因子(TNF) -αgydF4y2Ba1gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba3gydF4y2Ba。这些促炎细胞因子和趋化因子,连同IL-1β强烈激活p38子群的增殖蛋白激酶(MAPKs),一个家庭也包括细胞外的信号转导酶signal-regulated激酶(ERK)和c-jun NHgydF4y2Ba2gydF4y2Ba终端激酶(物)gydF4y2Ba4gydF4y2Ba。MAPKs组织层级结构分成三个模块,操作gydF4y2Ba通过gydF4y2Ba磷酸化级联,将它们转化为活性形式,从而使他们的交互细胞核与细胞质基质和易位,许多MAPK的目标,如转录因子和组蛋白gydF4y2Ba5gydF4y2Ba。ERK通路刺激尤其是通过g蛋白耦合和生长因子受体参与细胞增殖、分化和存活,而物和p38模块主要是通过激活细胞因子与炎症和细胞凋亡gydF4y2Ba6gydF4y2Ba。MAPK家族内,物和p38子组参与调解促炎反应,尽管人们似乎在慢性阻塞性肺病中发挥重要的作用。的确,p38激活关键炎性细胞类型与疾病的起始和进展gydF4y2Ba7gydF4y2Ba。p38还似乎是最有效的MAPK在稳定,在转录后水平,相关的细胞因子和趋化因子的mrna COPD发病机制,如TNF-αIL-1β,il - 6和引发gydF4y2Ba8gydF4y2Ba。相反,p38抑制剂能够减弱疾病严重COPD动物模型;因此,人们目前代表了小说的主要基于MAPK抑制抗炎治疗gydF4y2Ba9gydF4y2Ba。p38 MAPK的四种不同的亚型,指定的α、β、γ、δ,似乎分别以不同的功能模式和细胞表达谱。特别是,肺巨噬细胞主要表达α异构体;这些细胞也表达p38δ,但不是p38β或p38γgydF4y2Ba10gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
最初的炎症活动导致COPD发病机理可能代表气道非特异性损伤因子的反应。然而,慢性阻塞性肺病与异常肺部炎症,甚至在病人停止吸烟gydF4y2Ba11gydF4y2Ba。能够提出一些不恰当和self-amplifying致病性电路可能防止易感个体解决炎症反应。在这个生物环境,激活一个关键炎性信号通路如p38 MAPK、可以起到至关重要的作用。当前作者因此研究磷酸化的表达,活跃的p38周围肺组织和肺泡巨噬细胞的主要文化从吸烟者与慢性阻塞性肺病,相比与吸烟和不吸烟的控制。目前的研究的初步结果已报告之前以抽象的形式gydF4y2Ba12gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
方法gydF4y2Ba
学科特点gydF4y2Ba
四组的受试者接受孤独的周围癌或肺切除的肺减容手术(LVRS)招募了研究:七个吸烟者有严重/非常严重的慢性阻塞性肺病(全球倡议在慢性阻塞性肺疾病(黄金)阶段3和4),11吸烟者轻/中度慢性阻塞性肺病(黄金阶段1和2),九吸烟和八不吸烟的控制(无症状和肺功能正常)。5个严重/严重COPD受试者接受LVRS,虽然两个接受了肺癌切除术。轻/中度疾病患者,控制吸烟者和不吸烟者肺癌切除术。肺功能测试期间进行手术前一周。固定的气道阻塞的定义根据最近的指导方针gydF4y2Ba13gydF4y2Ba在一秒钟用力呼气量比(FEVgydF4y2Ba1gydF4y2Ba)用力肺活量(FVC) < 70%的预测;所有患者吸入后400年< 12%的可逆性μg舒喘灵。gydF4y2Ba
胸片获得48小时内的肺功能的研究。在病人的一个子集,在肺气肿的得分计算的基础上,评价标准roentgenographic肺气肿如前所述的迹象gydF4y2Ba14gydF4y2Ba。简单地说,其中包括过分膨胀的迹象,gydF4y2Ba即。gydF4y2Ba抑郁和压扁的偏侧膈(评估后前位的和横向视图)和增加胸骨后的空间,分别得分从0到3。评估肺血管异常,后前位的电影分为四个象限的船底座。每个象限分析是否存在不同的血管异常,被分配一个个人得分从0到0.5。四个象限的部分成绩总结并结合产生的过分膨胀的分数累计得分约不等。gydF4y2Ba
在之前的研究中,慢性阻塞性肺病患者没有发作,这被定义为增加呼吸困难与痰液的质量和数量的变化,导致主体就医gydF4y2Ba15gydF4y2Ba。所有科目都免费的急性上呼吸道感染,没有收到前48小时内支气管扩张剂。受试者nonatopic(负皮肤测试常见的过敏原提取物),没有历史的哮喘和过敏性鼻炎。gydF4y2Ba
本研究符合《赫尔辛基宣言》gydF4y2Ba16gydF4y2Ba,通知每个学科得到书面同意接受手术或支气管镜检查。gydF4y2Ba
免疫组织化学gydF4y2Ba
胸膜下薄壁组织的组织块被获得的叶在手术,避免与肿瘤区域。样品固定在4%甲醛和嵌入在石蜡,如前所述gydF4y2Ba17gydF4y2Ba。使用兔子主要单克隆抗体免疫组织化学进行p38 MAPK (phospho-p38)的活性形式(稀释1:10 0;细胞信号技术公司,丹弗斯,妈,美国),avidin-biotin复杂(ABC-complex设备;Dako有限公司、威、英国)和快速的检测红色基质染色(Dako有限公司)。gydF4y2Ba
Phospho-p38疣状是量化肺泡壁和肺泡巨噬细胞如下。在肺实质细胞计数,只有一层的肺泡壁细胞检查,以避免偏见引起的技术相邻肺泡壁等文物gydF4y2Ba18gydF4y2Ba。肺泡壁内积极染色细胞的数量是计算使用光学显微镜(BX41;奥林巴斯、东京、日本),连接到一个录像机连接到计算机图像系统(Image-Pro +;美国媒体控制论Inc .,马里兰州贝塞斯达)。短暂,在放大×630,肺泡壁的长度测量,和phospho-p38-positive MAPK在这些肺泡壁细胞数。共有10个领域,随机分布在幻灯片,进行评估对于每个主题和表达的结果是阳性细胞数量·毫米gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba肺泡壁如前所述gydF4y2Ba17gydF4y2Ba。简单,评价phospho-p38表达式在肺泡巨噬细胞,≥100肺泡内巨噬细胞空间进行评估。肺泡巨噬细胞被定义为单核细胞的细胞质,更易出现在肺泡空间,而不是依附于肺泡壁。结果阳性巨噬细胞数目表示·大功率领域(高通滤波器)gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba。纠正可能出现的差异在绝对数量的巨噬细胞,结果也表示为phospho-p38-positive巨噬细胞巨噬细胞总数的百分比gydF4y2Ba18gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
免疫组织化学分析肺泡壁的炎症细胞浸润。简单,鼠标单克隆抗体被用于识别的中性粒细胞(anti-elastase M752;Dako有限公司)、巨噬细胞(anti-CD68 M814;Dako有限公司)和CD8 +细胞(anti-CD8 M7103;Dako)如前所述gydF4y2Ba19gydF4y2Ba。共有10个领域,随机分布在幻灯片,进行评估对于每个主题和表达的结果是阳性细胞数量·毫米gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba肺泡壁如前所述gydF4y2Ba17gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
例临床和功能没有知识的编码和测量数据。gydF4y2Ba
细胞培养和免疫印迹gydF4y2Ba
细胞从两个COPD患者,一个吸烟和不吸烟的控制(与正常肺功能)获得在支气管镜检查,收集在无菌生理盐水和离心机500×gydF4y2BaggydF4y2Ba5分钟gydF4y2Ba20.gydF4y2Ba。撤掉上层清液,细胞球洗和resuspended 10毫升的罗斯威尔公园纪念研究所(RPMI)中添加抗生素(100 U·毫升gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba青霉素和100μg·毫升gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba链霉素;σ,圣路易斯,密苏里州,美国)和二性霉素b(1μg·毫升gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba;美国马里兰州盖瑟斯堡GIBCO BRL,,)。细胞形态学测定使用Diff-Quick染色(美国佛罗里达州巴克斯特、迈阿密、);> 95%的每个细胞制备细胞巨噬细胞。细胞被稀释至1×10gydF4y2Ba6gydF4y2Ba巨噬细胞·毫升gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba,镀到six-well板块(1毫升·gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba),并允许为2 - 4 h,以促进附件孵化。随后,中移除和新鲜的培养基是补充道。这些细胞被孵化一夜之间在37°C公司为5%gydF4y2Ba2gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
文化后,细胞trypsinised 5分钟,在补充RPMI resuspended,离心机在4°C 5分钟,然后细胞溶解在radioimmunoprecipitation免疫印迹试验(里帕)缓冲区(150毫米氯化钠,1.5毫米MgClgydF4y2Ba2gydF4y2Ba10毫米,氟化钠,10%的甘油,4毫米EDTA,特里同x - 100 1%, 0.1%钠十二烷基硫酸盐(SDS)、脱氧胆酸盐1%,50 mM玫瑰,pH值7.4,加上磷酸酶和蛋白酶抑制剂混合物,β-glycerophosphate 25毫米,1毫米NagydF4y2Ba3gydF4y2Ba签证官gydF4y2Ba4gydF4y2Ba1毫米phenylmethanesulphonylfluoride 10μg·毫升gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba亮抑酶肽,10μg·毫升gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba抑肽酶)。蛋白质提取然后分开使用12.5% SDS-polyacrylamide凝胶电泳(sds - page)和转移到聚乙二烯二氟化物膜(Amersham淀粉微球,小都,英国)。使用相同的anti-phospho-p38单克隆抗体进行免疫印迹用于免疫组织化学。被“剥夺”后,膜与anti-p38α抗体(re-probed Autogen Bioclear;Calne,威尔特郡,英国)。抗体绑定使用增强化学发光的视觉(ECL-Plus;Amersham淀粉微球)。gydF4y2Ba
统计分析gydF4y2Ba
组数据表示为±gydF4y2Ba扫描电镜gydF4y2Ba或中值(范围)。使用以下测试组之间的差异进行分析多个比较:方差分析对临床数据;和组织学Kruskall-Wallis测试数据。Kruskall-Wallis后的Mann-Whitney紫外线测试进行了测试在适当的时候。斯皮尔曼等级相关系数测试用于检查组织学参数和功能数据之间的关系。概率p < 0.05的值被认为是重要的。gydF4y2Ba
结果gydF4y2Ba
临床研究结果gydF4y2Ba
表1gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba显示了受试者的临床特点。的四组受试者类似的关于年龄和吸烟的吸烟者有相似的价值观的三组pack-yrs。吸烟者的三组包括吸烟者和戒烟,和所有人都戒烟> 1年。如预期的选择标准,FEV的值gydF4y2Ba1gydF4y2Ba% pred和FEVgydF4y2Ba1gydF4y2Ba/ FVC比率是不同的四组(p < 0.0001):吸烟者患有严重慢性阻塞性肺病FEV明显降低gydF4y2Ba1gydF4y2Ba% pred和FEVgydF4y2Ba1gydF4y2Ba/ FVC比吸烟者轻/中度慢性阻塞性肺病,吸烟者与正常功能和非吸烟者为所有比较(p < 0.0001)。此外,吸烟者轻/中度COPD % pred FEV明显降低gydF4y2Ba1gydF4y2Ba和FEVgydF4y2Ba1gydF4y2Ba/ FVC比吸烟者与正常肺功能(p < 0.0005)和非吸烟者(p < 0.002)。在吸烟者与慢性阻塞性肺病、支气管扩张剂的平均响应是5%。的四组受试者在动脉氧张力也不同(gydF4y2BaPgydF4y2Ba啊,一个gydF4y2Ba2gydF4y2Ba)值(p = 0.008)。事实上,吸烟者患有严重慢性阻塞性肺病较低gydF4y2BaPgydF4y2Ba啊,一个gydF4y2Ba2gydF4y2Ba值比吸烟者轻/中度慢性阻塞性肺病(p = 0.03),吸烟(p = 0.005)和不吸烟的控制(p = 0.04),而在其他三组之间差异无显著意义的主题。此外,动脉二氧化碳张力没有显著差异(gydF4y2BaPgydF4y2Ba,有限公司gydF4y2Ba2gydF4y2Ba)在四个学科组。残余体积的平均值(房车;% pred)和放射性肺气肿吸烟者患有严重慢性阻塞性肺病的得分都高于与轻/中度COPD吸烟,而相反的是真的对的平均%值扩散能力的肺一氧化碳(gydF4y2BaDgydF4y2BaL,有限公司gydF4y2Ba)。然而,由于测量房车(连同肺气肿分数)gydF4y2BaDgydF4y2BaL,有限公司gydF4y2Ba在只有一个子集的病人进行一个正式的统计分析并不适用于这些参数。gydF4y2Ba
临床特点的主题gydF4y2Ba
免疫组织化学结果gydF4y2Ba
phospho-p38量化的结果在肺泡巨噬细胞和肺泡壁如图1所示gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba3gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba。中位数数字和相对范围的细胞表达phospho-p38如表2所示gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
![图1 -gydF4y2Ba](http://www.qdcxjkg.com/content/erj/31/1/62/F1.medium.gif)
个人计算激活p38增殖kinase-positive (phospho-p38 +)在肺泡巨噬细胞空间的吸烟者有严重/非常严重的慢性阻塞性肺病(COPD),与轻/中度COPD吸烟,控制吸烟和不吸烟的主题与正常肺功能。肺泡巨噬细胞的数据表示为%。- - -:中位数的值。gydF4y2Ba#gydF4y2Ba:p = 0.001;gydF4y2Ba¶gydF4y2Ba:p = 0.0008;gydF4y2Ba+gydF4y2Ba:p = 0.02;gydF4y2BaƒgydF4y2Ba:p = 0.01。gydF4y2Ba
![图2 -gydF4y2Ba](http://www.qdcxjkg.com/content/erj/31/1/62/F2.medium.gif)
个人计算激活p38增殖kinase-positive (phospho-p38 +)细胞在肺泡壁的吸烟者有严重/非常严重的慢性阻塞性肺病(COPD),与轻/中度COPD吸烟,控制吸烟和不吸烟的主题与正常肺功能。数据表示为细胞的数量·毫米gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba肺泡壁。- - -:中位数的值。gydF4y2Ba#gydF4y2Ba:p = 0.0004;gydF4y2Ba¶gydF4y2Ba:p = 0.0005;gydF4y2Ba+gydF4y2Ba:p = 0.0005;gydF4y2BaƒgydF4y2Ba:p = 0.006。gydF4y2Ba
![图3 -gydF4y2Ba](http://www.qdcxjkg.com/content/erj/31/1/62/F3.medium.gif)
疣状)吸烟与慢性阻塞性肺病和b)吸烟者与正常肺功能显示激活p38增殖kinase-positive (phospho-p38 +)细胞在肺泡壁和anti-phospho-p38 phospho-p38 +肺泡巨噬细胞单克隆抗体。箭头:phospho-p38 +肺泡巨噬细胞;箭头:肺泡壁内phospho-p38 +细胞。酒吧= 150μm规模。gydF4y2Ba
激活形式的p38增殖作用蛋白激酶(phospho-p38)阳性的疣状肺实质的量化gydF4y2Ba
Phospho-p38 + %的巨噬细胞巨噬细胞总数增加与吸烟者相比,严重慢性阻塞性肺病患者与正常肺功能(p = 0.0008)和非吸烟者(p = 0.001)。Phospho-p38 +巨噬细胞也增加相比,吸烟者与轻/中度COPD吸烟(p = 0.01)和不吸烟的控制(p = 0.02)。之间没有发现显著差异吸烟者患有严重慢性阻塞性肺病和轻/中度慢性阻塞性肺病,也不吸烟者与正常肺功能和不吸烟者之间。得到了类似的结果,当结果表示为phospho-p38 +巨噬细胞·高通滤波器gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba(表2gydF4y2Ba⇑gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba
显著差异的四组受试者进行观察还在肺泡壁phospho-p38 +细胞(p < 0.0001)。事实上,phospho-p38 +细胞的数量·毫米gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba提高集团的严重慢性阻塞性肺病患者与吸烟相比(p = 0.0005)和不吸烟的控制(p = 0.0004)。Phospho-p38 +细胞在肺泡壁也增加相比,吸烟者与轻/中度COPD吸烟(p = 0.006)和不吸烟的控制(p = 0.0005)。再一次,没有观察到显著差异吸烟者之间严重的慢性阻塞性肺病和那些轻/中度慢性阻塞性肺病,也不吸烟者与正常肺功能和不吸烟者之间(表2gydF4y2Ba⇑gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba
检查不同的炎症细胞亚型发现CD8 + t细胞浸润,肺泡壁的数量,但不是巨噬细胞和中性粒细胞,四组中明显不同的科目检查(p = 0.002)。特别是,CD8 + t细胞增加吸烟者患有严重慢性阻塞性肺病(中位数(范围):8.3(6.9 - -14.4)细胞·毫米gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba)和吸烟者轻/中度COPD·mm(5.2(1.8 -13)细胞gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba控制吸烟者(2.4)与(1.4 - -2.6)细胞·毫米gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba;分别为p = 0.004, p = 0.03)和非吸烟者(2·毫米(0 - 3)细胞gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba;分别为p = 0.008, p = 0.03)。之间无显著差异观察吸烟者患有严重慢性阻塞性肺病和轻/中度慢性阻塞性肺病,也不吸烟者与正常肺功能和不吸烟者之间。gydF4y2Ba
肺泡壁检查的总长度(意味着±gydF4y2Ba扫描电镜gydF4y2Ba)4.3±0.4毫米吸烟者患有严重慢性阻塞性肺病,5.3±0.4毫米与轻/中度COPD吸烟,吸烟者6.6±0.4毫米与正常肺功能,在不吸烟者6.8±0.2毫米。gydF4y2Ba
当所有的吸烟被视为一组,逆相关性观察phospho-p38 +巨噬细胞和FEV之间gydF4y2Ba1gydF4y2Ba% pred值(p = 0.008, r = -0.52)或FEVgydF4y2Ba1gydF4y2Ba/ FVC比率(p = 0.006, r = -0.54)。逆phospho-p38 +细胞之间的相关性也发现在肺泡壁和FEV的值gydF4y2Ba1gydF4y2Ba% pred (p = 0.001, r = -0.65), FEVgydF4y2Ba1gydF4y2Ba/ FVC比率(p = 0.0003, r = -0.71)。此外,之间存在着负相关的数量在肺泡壁和phospho-p38 +细胞gydF4y2BaPgydF4y2Ba啊,一个gydF4y2Ba2gydF4y2Ba值(p = 0.04, r = -0.41)。gydF4y2Ba
当与炎症细胞的关系被认为是,phospho-p38 +肺泡壁细胞呈显著正相关与CD8 +细胞浸润,肺泡壁的数量(p = 0.0006;r = 0.75),但与中性粒细胞和巨噬细胞。gydF4y2Ba
最后,phospho-p38表达式并不是与累积吸烟史和不会受到吸烟现状。gydF4y2Ba
西方免疫印迹分析gydF4y2Ba
明显增加p38 MAPK的磷酸化是细胞中发现蛋白质提取肺泡巨噬细胞经两个COPD患者与吸烟和不吸烟的控制(图4所示gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba)。相比之下,没有观察到的差异对总p38αMAPK表达的肺泡巨噬细胞在四个科目检查(图。4gydF4y2Ba⇓gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba
![图4 -gydF4y2Ba](http://www.qdcxjkg.com/content/erj/31/1/62/F4.medium.gif)
西方免疫印迹分析p38增殖激活蛋白激酶(phospho-p38)和p38α同种型表达的人类肺泡巨噬细胞获得两个患者的慢性阻塞性肺疾病(COPD),以及一个吸烟者和不吸烟者(NS),与正常肺功能。gydF4y2Ba
讨论gydF4y2Ba
目前的研究显示增加的磷酸化形式p38 MAPK在肺泡巨噬细胞和肺泡壁的吸烟者与慢性阻塞性肺病。免疫印迹分析证实了增加phospho-p38表达在慢性阻塞性肺病患者肺泡巨噬细胞,在没有任何改变的总p38α水平。此外,phospho-p38表达与肺功能损害的程度和CD8淋巴细胞浸润,肺泡壁的数量。最好的目前作者的知识,目前的研究提供了第一个证据获得人类肺组织的潜在p38激活炎症过程中所扮演的角色与慢性阻塞性肺病。gydF4y2Ba
免疫组织化学和免疫印迹实验中,anti-phospho-p38单克隆抗体被用来专门承认两个磷酸化p38的网站(180年苏氨酸和酪氨酸182)。自双磷酸化涉及这些氨基酸网站发生在p38α和p38β亚型和表达的β同种型似乎局限于t细胞gydF4y2Ba21gydF4y2Ba,它可以被合理认为phospho-p38检测到肺巨噬细胞主要是α异构体。因此,phosphorylation-dependent激活p38α可能是一个主要的分子事件信号机制的延续在慢性阻塞性肺病炎症过程。这是确认p38α和-β抑制剂抑制细胞因子的能力生产在COPD动物模型gydF4y2Ba7gydF4y2Ba。gydF4y2Ba在体外,gydF4y2Bap38 MAPK磷酸化最近显示增加了史密斯gydF4y2Baet al。gydF4y2Ba10gydF4y2Ba在脂多糖(LPS)刺激肺巨噬细胞,而在当前的研究中,被检测出含有高水平的phospho-p38表达在肺泡巨噬细胞和肺泡壁gydF4y2Ba在活的有机体内gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
众所周知,肺泡巨噬细胞在COPD的发病机制中发挥核心作用不断释放蛋白水解酶导致的破坏肺部组织。这些细胞也可能安排炎性反应,分泌大量的细胞因子和趋化因子。p38 MAPK激活是一个至关重要的步骤,合成多种炎症介质,特别是LPS-induced释放TNF-α从人类肺巨噬细胞是依赖p38-mediated TNF-αmRNA的稳定gydF4y2Ba10gydF4y2Ba。此外,p38失活引起p38α/β抑制剂显著减少TNF-α生产。gydF4y2Ba
目前的结果也指其他细胞参与COPD发病机理。在这方面,t细胞免疫应答的重要球员在慢性阻塞性肺病和转向与趋化因子受体CXCR3增加1型轮廓表达和释放TNF-αinterferon-γ被描述在这个疾病gydF4y2Ba22gydF4y2Ba,gydF4y2Ba23gydF4y2Ba。最近的证据表明,在人类支气管上皮细胞,CXCR3-induced趋化性是非常依赖于由p38 MAPK信号通路gydF4y2Ba24gydF4y2Ba。此外,在目前的研究中,一个数字之间的正相关关系被phospho-p38 +细胞和肺泡壁内的CD8 +细胞。在一起,这些结果表明,有一个严格的p38通路之间的相互作用和早期激活,这可能导致炎症反应的延续。最好的目前作者的知识,它还不知道p38表达同功酶的CD8 +淋巴细胞)。然而,- 2生产,这些细胞可以被选择性抑制剂抑制p38α-βgydF4y2Ba25gydF4y2Ba。这两个亚型因此似乎最相关的CD8 + t细胞功能gydF4y2Ba21gydF4y2Ba。双重的磷酸化p38α和p38β检测CD4 +和CD8 + t细胞gydF4y2Ba26gydF4y2Ba。更具体的可用性抗体识别不同p38亚型,以及人们的发展和更大的选择性抑制剂,可能有助于更好地描述p38亚型表达的优先CD8 +淋巴细胞)。这个表达式模式可能有相关功能的影响,因为,例如,p38β是一个更有力的刺激,当与α异构体相比,激活转录因子2gydF4y2Ba26gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
目前发现,获得在人类肺癌样本,确认和扩展先前的研究在实验模型的吸烟引起的肺部炎症。MarwickgydF4y2Baet al。gydF4y2Ba27gydF4y2Ba检测大鼠肺发现暴露于香烟烟雾和增强p38磷酸化,与转录因子的激活增加有关NF-κB AP-1。此外,他们观察到显著的染色质重组hyperacetylation组蛋白4与phospho-acetylation组蛋白3一起减少组蛋白脱乙酰酶(HDAC)活动。伊藤gydF4y2Baet al。gydF4y2Ba28gydF4y2Ba最近调查了表达和HDAC活性在慢性阻塞性肺病患者的周围肺组织,显示HDAC活性平行的渐进损伤显著增加引发mRNA和4组蛋白乙酰化作用。有趣的是,引发基因转录受NF-κB及其激活控制,至少部分由p38 MAPK-mediated 3组蛋白磷酸化丝氨酸10gydF4y2Ba29日gydF4y2Ba。根据这些考虑,它可以建议phosphorylation-dependent p38 MAPK的激活可能贡献,与组蛋白修饰,肺部炎症的发病和进展。这种交互可能成为重要的在考虑穷人应对类固醇观察不仅在COPD患者还在吸烟的哮喘患者。提出了几种机制来解释类固醇阻力;其中,众所周知,激活p38 MAPK磷酸化糖皮质激素受体(GR)gydF4y2Ba在体外gydF4y2Ba,从而减少类固醇绑定关联gydF4y2Ba30.gydF4y2Ba。因此,基因的转录活动由糖皮质激素会受损,由此减少了MAPK磷酸酶(MKP) 1表达,这确实是引起GR激活gydF4y2Ba31日gydF4y2Ba。因此,它是可能的,在严重慢性阻塞性肺病,过度phospho-p38活动可以实现前馈电路进一步放大MAPK通路的作用。在这种情况下,p38激活将更加持久,因为缺陷。差别由于MKP-1脱磷酸化对这些gydF4y2Ba
在目前的研究中,p38激活巨噬细胞和肺泡壁被烟斗本身不调节,因为类似的免疫反应性与正常肺功能存在于吸烟者和不吸烟的控制。此外,phospho-p38表达式不会受到吸烟现状或累积吸烟史。这个场景是不同的动物模型,观察接触烟草烟雾是足以提高p38磷酸化gydF4y2Ba27gydF4y2Ba。相比之下,p38刺激人类的严格相关疾病的存在,因为一旦建立了固定的气流限制,p38 MAPK激活坚持即使戒烟。重要的是要注意,炎症反应持续在吸烟者在戒烟后COPD长gydF4y2Ba11gydF4y2Ba。在一起,这些观察结果支持的观点,除了吸烟之外,不同因素之间复杂的相互作用(包括遗传易感性、空气污染和呼吸道感染)促进慢性阻塞性肺病,它的特点是高可变性的表型表达。gydF4y2Ba
当前研究的局限性是它可能进行手术标本主要来自肺癌患者,癌症本身的存在可能影响MAPK激活。目前作者试图避免这种偏见,只考虑组织学正常的地区,特点是免费的肿瘤和远离受灾地区。此外,由于肺癌也同样出现在轻度或中度慢性阻塞性肺病,吸烟和不吸烟的控制,很可能发现增加磷酸化p38的COPD是有效的。最后,目前的结果进一步验证p38激活也观察到病人不受癌症影响(gydF4y2Ba即。gydF4y2Ba那些有严重肺气肿发生LVRS)。应该承认,在理想情况下,一个真正的对照组的不吸烟者没有伴随的肺癌等研究目前需要;然而,极难获得手术标本健康的人在一个完整的临床和功能描述已经完成。gydF4y2Ba
总之,目前的研究表明激活p38的表达增加增殖蛋白激酶在肺泡空间和肺泡壁与慢性阻塞性肺疾病的吸烟者,这表明p38增殖作用的激活蛋白激酶通路是一个疾病的发病机理的关键一步。这些发现支持的相关性p38增殖蛋白激酶作为一个合适的分子目标的发展新的和更有效的治疗慢性阻塞性肺疾病的策略。gydF4y2Ba
确认gydF4y2Ba
作者感谢c.a Drace(部门的心脏,胸和血管,帕多瓦大学帕多瓦,意大利)协助编辑目前的手稿。gydF4y2Ba
- 收到了gydF4y2Ba2007年3月27日。gydF4y2Ba
- 接受gydF4y2Ba2007年10月16日。gydF4y2Ba
- ©人期刊有限公司gydF4y2Ba
引用gydF4y2Ba
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