文摘
达沙替尼在2006年被批准用于治疗imatinib-resistant慢性粒细胞性白血病和功能主要通过抑制bcr - abl和Src激酶。达沙替尼被CYP3A4人类广泛代谢。在这项研究中,我们报告的bioactivation达沙替尼通过CYP3A4收益导致CYP3A4活性中间失活K我= 6.3μM和k非活性的= 0.034分钟1。失活的主要机制通过羟基化的收益帕拉-安置的2-chloro-6-methylphenyl戒指紧随其后进一步氧化,形成活性quinone-imine,类似于活性中间体形成的对乙酰氨基酚和双氯芬酸。形成活性imine-methide也发现但似乎是一个小通道。当添加谷胱甘肽是为了人类肝脏微粒体孵化项目,dasatinib-glutathione加合物被检测到。无数的达沙替尼类似物合成,以了解修改将阻止活性中间体的形成在达沙替尼的新陈代谢。有趣的是,阻断与甲基羟基化的网站并不有效,因为被动imine-methide成立,也不是屏蔽该网站删除了氟因为氟通过氧化脱氟作用机制和反应quinone-imine仍成立。提出了大量的类似物,有效阻止谷胱甘肽的形成加合物,防止CYP3A4的失活。
慢性粒细胞白血病(CML)与cytogenic异常称为费城染色体易位的c -abl致癌基因从9号染色体断点集群区域(bcr) 22号染色体上(德·克莱因et al ., 1982;Shtivelman et al ., 1985)。这导致的生成bcr - abl融合基因,当翻译收益率持续abl激酶的活性形式称为bcr - abl,导致增加骨髓祖细胞的增殖和生存(Calabretta Perrotti, 2004)。伊马替尼,一个针对bcr - abl激酶抑制剂,在第一阶段试验中首次引入1998年中期突破治疗CML,大大增加患者的预期寿命(Druker et al ., 2001)。尽管伊马替尼治疗的令人印象深刻的结果,约30%的患者接受伊马替尼作为一线治疗5年将停止治疗,因为抗病性或药物毒性(Druker et al ., 2006)。伊马替尼耐药的主要驱动力是bcr - abl基因点突变(Deininger et al ., 2005),减少或消除伊马替尼疗效。
达沙替尼是美国食品和药物管理局批准的2006年6月;治疗imatinib-resistant急性髓系白血病(aml)。由于缺乏一个有效的替代治疗imatinib-resistant CML,达沙替尼获得了加速审批之前完成III期临床试验。从伊马替尼,达沙替尼在结构上不同高度的有效抑制剂bcr - abl生化能力介于0.1和3 nM bcr - abl和最常见的bcr - abl基因突变(Gambacorti-Passerini et al ., 2005;O ' hare et al ., 2005)。
达沙替尼有五个主要阶段我代谢物。三个被CYP3A4催化:羟基化的帕拉-安置chloromethylphenyl环(主要代谢物)、羟基化的C5-methyl chloromethylphenyl戒指,和N羟乙基一半的脱烷基化作用。Flavin-containing单氧酶可以催化的形成N氧化哌嗪环,一位身份不明的胞质氧化还原酶把羟乙基转换为酸。额外的次生代谢物检测二期代谢物由于硫酸盐化作用或glucuronidation (Christopher et al .,2008年,一个,b;Kamath et al ., 2008;王et al ., 2008)。
达沙替尼指出,肝毒性的产品信息表是一个可能的副作用的治疗,达沙替尼是一个可能的机理CYP3A4的钝化剂;然而,没有给出细节,没有在文献中允许定量的风险。案情dasatinib-induced急性肝炎发表在2008年7月(Bonvin et al ., 2008)类似于免疫介导性特质肝毒性的报道与相似官能团化合物如双氯芬酸(Schapira et al ., 1986)。额外的报告dasatinib-induced狼疮报道2008年8月,结论是免疫介导的(意图et al ., 2008)。评价结构的达沙替尼和已知CYP3A4-catalyzed氧化的昊图公司甲基和帕拉-安置chloromethylphenyl环会使反应quinone-imine和imine-methide中间体的形成可能。Quinone-imine和imine-methides亲电试剂反应,可能加合物半胱氨酸和赖氨酸残基的蛋白质可以作为半抗原和启动免疫反应(Pirmohamed et al ., 2002)。
时间和浓度失活CYP3A4的达沙替尼。六个浓度的达沙替尼(0、2.5、5、10、20和40μM)与人类肝微粒体孵化。整除被移除和化验剩余的CYP3A4活性在不同的时间点。每个点代表的意思是三个独立的复制,相差不超过10%。剩下的活动与培养时间策划,个人达沙替尼的斜坡浓度适合Kitz-Wilson阴谋(插图)。计算K我和k非活性的对CYP3A4失活μM 6.3和0.034分钟1,分别。
材料和方法
化学品使用。咪达唑仑、卡马西平、酮康唑,谷胱甘肽从Sigma-Aldrich购买(圣路易斯,密苏里州)。佛罗里达斯克里普斯达沙替尼及其结构类似物的合成。所有溶剂用于LC-mass光谱法是色谱级。高级别(池)从XenoTech购买,LLC (Lenexa, KS)。所有的解决方案都是由电阻率≥17.8 MΩMilli-Q-treated水。
达沙替尼的合成类似物。达沙替尼合成使用的发布方法Lombardo et al。(2004年)5个线性步骤开始凝结的锂离子2-chlorothiazole 2-chloro-6-methylphenyl异氰酸酯。修改后的方法用于达沙替尼的合成类似物。模拟轴承(羟乙基)哌嗪组在两个线性合成步骤开始2-bromothiazole-5-carboxylic酸和相应的苯胺类的耦合,后跟一个Buchwald-Hartwig氨基化反应与2 - (4 - (6-amino-2-methylpyrimidin-4-yl) piperazin-1-yl)乙醇。984年类似物,1920年和1235年都使用类似的方法合成。
人类的肝脏微粒体孵化项目:CYP3A4失活。高孵化项目的CYP3A4活性评估使用选择性标记反应,氧化咪达唑仑1′-hydroxymidazolam。按时间的抑制是评估使用一个两步过程。初级孵化项目(NADPH 250μl,包含2毫米,0.5毫克/毫升高级别,以及各种浓度的达沙替尼或其类似物在0.1 M磷酸钾缓冲,pH值7.4)与人类肝微粒体孵化。在不同的时间点,例如,0,4、8、15、22日和30分钟,10μl的主要反应是删除并添加到一个包含咪达唑仑的副反应,NADPH和缓冲。最终的反应体积和浓度在二级反应200μl 20μM咪达唑仑,NADPH 1毫米,0.05毫克/毫升高级别,和0.1磷酸钾缓冲,pH值7.4。两种反应在96孔板进行震动孵化器维持在37°C。二次孵化后停止5分钟通过添加乙腈比例在1:1 (v / v)包含0.2μM卡马西平作为内部标准。在试验结束后,孵化项目离心机,通过微孔多屏幕Solvinter 0.45 -μm弱耦合聚(四氟乙烯)亲水性滤板和分析质/女士的形成1′-hydroxymidazolam使用API 4000质谱仪(应用生物系统公司,培育城市,CA)界面的安捷伦1200高效液相色谱仪(安捷伦科技,帕洛阿尔托,CA)。色谱分离是通过使用一个Phenomenex Synergi Fusion-RP C18柱(2.0×50毫米,4μm)。移动阶段由0.1%含水甲酸(溶剂)和乙腈0.1%甲酸(溶剂B)运行在恒定流量0.375毫升/分钟。 A 2.5-min HPLC method was used with percent B equal to 2% att= 0分钟,80%t= 1.35到1.6分钟,2%t-2.5 = 1.61分钟(梯度都是线性)。1′-Hydroxymidazolam检测使用的过渡米/z342.2米/z203.1、DP = 90和CE = 38。所有抑制研究进行了一式三份。
对谷胱甘肽高孵化项目加合物识别。孵化项目检测谷胱甘肽的形成加合物包含40μM达沙替尼或模拟(从股票导致0.2%二甲亚砜、二甲亚砜v: v),和1毫克/毫升高在0.1米磷酸钾缓冲,pH值7.4,存在与否的NADPH(1毫米),减少谷胱甘肽(5毫米)。每个样本的孵化总额为0.5毫升。3分钟后在37°C预孵化,孵化项目是由添加NADPH。孵化项目后被扑灭1 h和1毫升的冰冷的乙腈和涡1分钟。这些混合物在14000转离心10分钟,和上层清液转移到清洁1.5毫升微型离心机管和干25°C温控SpeedVac 4 h。一旦干燥,提取100年重组μl 30%的乙腈溶液和转移到液相色谱autosampler瓶进行分析。实验显示的时间生产dasatinib-glutathione加合物和评估CYP3A4抑制剂酮康唑的影响都是使用类似的过程,达沙替尼是降低到20μM除外。酮康唑(1μM)的抑制剂P450 3 a4,来自一个甲醇股票,导致0.1% (v: v)甲醇在最后的反应。
质/ MS设置检测谷胱甘肽的加合物。质/ MS分析在一个API4000 Q-Trap质谱仪(应用生物系统公司)界面的安捷伦1200高效液相色谱仪(安捷伦科技)。色谱分离是通过使用一个ZORBAX RX-C18列(2.1×150毫米,5μm;安捷伦科技)。移动阶段由0.1%含水甲酸(溶剂)和乙腈0.1%甲酸(溶剂B)运行在恒定流量0.4毫升/分钟。第35分钟高效液相色谱方法使用% B等于5%t= 0 - 3分钟,10%t= 3.5分钟,50%t= 23分钟,80%t= 28分钟,5%t= 29.5 -35分钟(梯度都是线性)。
MS / MS分析合并极性切换,使用条件类似报道Bo温家宝和他的同事们最近的出版物(温家宝和惠誉,2009;温家宝等。,2008年,一个,b)。极性切换方法使用改进的特异性和低背景的负离子前体扫描检测谷胱甘肽的加合物,然后获得更丰富的正离子分裂模式在一个单一的注入。总之,负离子前体离子扫描(前体=米/z272年,DP = -75, CE = -30)是一个范围从使用米/z350年到米/z900紧随其后的是一个带正电的离子增强分辨率扫描和information-dependent acquisition-triggered正离子增强产品离子光谱米/z80年至900年(DP = 75, CE = 40)。700 ms的沉淀时间是需要适应的开关极性和总周期时间是4.6秒。
结果
最初的孵化项目的达沙替尼与人类肝微粒体证实氧化chloromethylphenyl环产生了两个主要的羟化代谢产物和酮康唑的加入抑制了它们的形成(王et al ., 2008)。预孵化项目使用10μM达沙替尼还决定,达沙替尼NADPH -和时间引起的失活的CYP3A4(数据没有显示)。基于这些结果,更详细的实验被用来确定CYP3A4的动力学常数dasatinib-mediated损失的活动。
Dasatinib-Mediated时间CYP3A4的失活。一系列样品的浓度达沙替尼被允许孵化与高级别和NADPH。在不同时间点,剩下的CYP3A4活性是由咪达唑仑的标记反应转换为1′-hydroxymidazolam。适当的控制,缺乏达沙替尼,包括确保活动的损失不是由于热失活。数据的图形表示图1。观察到的一阶速率常数(k奥林匹克广播服务公司)失活个人CYP3A4的达沙替尼的浓度从各条线的斜率。这些斜坡是适合Kitz-Wilson阴谋的插图所示图1。计算K我6.3μM和k非活性的是0.034分钟1。增加2毫米减少谷胱甘肽的反应没有保护酶,和计算K我和k非活性的值几乎相同,这表明bioactivated达沙替尼可灭活前CYP3A4活性部位释放到大部分的解决方案。达沙替尼的孵化项目重组CYP3A4还显示时间抑制(K我= 21μM和k非活性的= 0.095分钟1)。
删除或修改的哌嗪或methylpyrimidine环达沙替尼并没有消除时间失活特性的分子。动力学常数的三达沙替尼类似物所示表1。额外的类似物是用修改chloromethylphenyl环达沙替尼。发现时间CYP3A4失活了六个模拟测试。没有显示的一种化合物CYP3A4失活有甲基和删除帕拉-安置chloromethylphenyl戒指的阻塞与氯(表2)。
Dasatinib-Glutathione加合物的形成。谷胱甘肽有一个免费的sulfhydral集团亲核,可以自发与亲电试剂反应。谷胱甘肽的添加微粒体孵化项目包含达沙替尼和NADPH导致dasatinib-glutathione加合物的检测。六个不同的加合物观察(图2):两个dasatinib-glutathione加合物(D-GSH (a)和(b)],两个hydroxy-dasatinib-GSH加合物(D-OH-GSH (a)和D-OH-GSH (b)),和两个dihydroxy-dasatinib-GSH加合物(D-2OH-GSH (a)和D-2OH-GSH (b))。D-OH-GSH(一)加合物似乎是主要的加合物。如果我们假设所有的谷胱甘肽加合物有类似的电离效率,然后D-2OH-GSH的相对浓度/ D-OH-GSH D-GSH 25%: 67%: 8%。添加1μM酮康唑孵化项目抑制所有的加合物的形成(图2 b),这意味着所有的谷胱甘肽的形成加合物被CYP3A4催化为主。这个结果进一步验证检测D-2OH-GSH, D-OH-GSH, D-GSH孵化项目使用重组CYP3A4(数据没有显示)。重复孵化与老鼠和老鼠微粒体给了相同的概要文件的谷胱甘肽加合物只有轻微改变的相对浓度(数据没有显示)。没有观察到任何加合物微粒体孵化项目如果消除了谷胱甘肽或NADPH的反应。
色谱分离dasatinib-glutathione加合物生成的孵化项目问题与谷胱甘肽。孵化40μM达沙替尼,NADPH 1毫米,5毫米谷胱甘肽,和1毫克/毫升人类肝脏微粒体(A);1μM酮康唑,添加到孵化D-2OH-GSH (米/z825.2→347.2)对应一个二羟dasatinib-glutathione加合物。D-OH-GSH (米/z809.2→347.2)对应于一个羟化dasatinib-glutathione加合物。D-GSH (米/z793.2→347.2)对应于一个dasatinib-glutathione加合物。内部标准(是)是100海里卡马西平(米/z237.0→194.0)。
达沙替尼的产品离子光谱特征碎片离子米/z319年和347年,相应的损失chloromethylphenyl通过分裂环两边的羧基的酰胺键(图3)。达沙替尼含有氯,因为35Cl和37氯同位素是有用片段模式评价达沙替尼和谷胱甘肽的加合物(数据没有显示)。所有的检测dasatinib-glutathione加合物特征米/z319年和347年的片段,这表明谷胱甘肽不是绑定到的分子和部分加合物都位于chloromethylphenyl戒指。
MS / MS谱和提议的碎片D-OH-GSH和D-2OH-GSH所示图3。只有最强烈的光谱D-OH-GSH (a)和D-2OH-GSH (a)加合物因为质量和碎片是相同的显示相应的低丰度羟化加合物。我们绘制了结构与谷胱甘肽加合物在第三位,因为我们相信这是主要站点的内收帕拉-quinone-imine由于吸电子效应的氯和电子基甲基的属性。的MS / MS谱显示D-GSH的加合物(图4),因为两人不同的分裂模式。D-GSH (a)是为谷胱甘肽结合C5的位置,有一个片段米/z520年相应的达沙替尼+硫引起的谷胱甘肽硫醚键的碎片。绑定的硫芳环会导致更强的债券比通过甲基内收。D-GSH (b)有一个片段在486对应的碎片的达沙替尼一边硫醚键,并指定为谷胱甘肽直接绑定到苄基的甲基。拟议的结构是基于预期的网站内收的昊图公司-imine-methide中间。
![图3所示。](https://dmd.aspetjournals.org/content/dmd/37/6/1242/F3.medium.gif)
分裂的达沙替尼和hydroxylated-glutathione加合物。Dasatinib-glutathione加合物生成的孵化混合物40μM达沙替尼,1毫米NADPH, 5毫米谷胱甘肽,1毫克/毫升人类肝脏微粒体。增强产品离子扫描显示达沙替尼(A), D-OH-GSH (B),和D-2OH-GSH (C),描述结构代表一个可能的regioisomer。Rel。Int,相对强度;阿姆河,相对原子质量单位。
Bioactivation达沙替尼类似物。两个质谱学方法被用来检测谷胱甘肽的加合物微粒体孵化项目包含达沙替尼类似物。极性转换,描述下材料和方法谷胱甘肽片段,使用一个诊断,适用于检测谷胱甘肽分子的任何部分。第二个增强产品使用特征离子扫描米/z347离子尤为敏感,因为优秀的信号强度,降低背景,收购和短周期时间而不需要切换从消极到积极的离子模式在每个扫描。第二个方法是有限的检测谷胱甘肽的加合物绑定到chloromethylphenyl环。虽然我们没有使用的共同方法扫描pyroglutamate集团的损失(中性损失129),所有检测到的加合物包含特征损失(表3)。
![图4所示。](https://dmd.aspetjournals.org/content/dmd/37/6/1242/F4.medium.gif)
的分裂模式dasatinib-glutathione加合物(A)和(B)。dasatinib-glutathione加合物生成在一个孵化混合物40μM达沙替尼,1毫米NADPH, 5毫米谷胱甘肽,1毫克/毫升人类肝脏微粒体。增强产品离子扫描显示D-GSH (A)和D-GSH (B),提出了描述加合物的结构。Rel。Int,相对强度;阿姆河,相对原子质量单位。
十二个达沙替尼chloromethylphenyl环结构类似物进行评估的潜在形成加合物与谷胱甘肽(表3)。研究了甲基取代的作用与氟甲基(1698),和1698保留灭活CYP3A4的能力(表2)。正如所料,氟没有预防的羟基化帕拉-安置,1698 -哦-谷胱甘肽和1698 - 2 -哦-谷胱甘肽加合物被检测到,而1698 -谷胱甘肽加合物。+谷胱甘肽(nonhydroxylated)加合物生成假设通过甲基的氧化形成imine-methide,然后进行亲核攻击甲基和相邻C5碳(图5)。当测试,所有五个类似物,保留了甲基可检测+谷胱甘肽加合物。相反,+谷胱甘肽加合物并没有观察到任何缺乏甲基的六个类似物。
一些类似物,阻止了帕拉-安置methylchlorophenyl环的准备。当一个甲基被添加到帕拉-安置(1660),未发现羟化谷胱甘肽加合物。然而,额外的网站提供的额外的甲基活性imine-methide的形成,与谷胱甘肽和1660年孵化项目导致一个+谷胱甘肽加合物的形成。的k非活性的1660年最高的模拟测试。
两个类似物合成的氟帕拉-安置。我们预期这一修改,以防止羟化谷胱甘肽的形成加合物,因此只有+谷胱甘肽氧化引起的加合物的甲基imine-methide将检测到。5826年不同于达沙替尼只在对位氟的存在。1701年的额外修改替换氯甲基。预期+谷胱甘肽加合物中检测出类似物。我们惊奇地发现,化合物都是羟化的主要加合物检测谷胱甘肽加合物,和氟组似乎被删除。羟化谷胱甘肽加合物质量,分裂模式和色谱保留时间相同的达沙替尼和1695(数据未显示)。准确质量MS / MS确认被困加合物不含有氟。纯度测试显示,5826年和1701年纯,和没有可检测达沙替尼或1695。
中氯的存在帕拉-安置(6704)给了相似的结果。主要的谷胱甘肽加合物似乎是由于羟基化和氯的损失。独特的氯同位素模式与所有的含氯分子会缺席。没有发现有四个化合物加合物。每一个有甲基,包含两个或两个以上的卤素删除。
讨论
这不是我们有意暗示达沙替尼是一种特别危险的药物。达沙替尼填补一个重要的利基在CML治疗,和几个正在进行的临床试验可能证明达沙替尼是有效治疗其他癌症。然而,最近的报告dasatinib-induced急性肝炎(Bonvin et al ., 2008)和dasatinib-induced红斑狼疮(意图et al ., 2008),进一步研究代谢达沙替尼的命运是必要的,以便更好地理解之间的关系达沙替尼的新陈代谢和不利影响。此外,因为很多药物应用于临床,今天有共同的结构还是半个直接模拟现有的化合物,重要的是辨别什么可以修改增加药品安全。
发现达沙替尼是一个系统,即CYP3A4的抑制剂,它是bioactivated CYP3A4活性亲电试剂的病人有较大影响。这些结果暗示达沙替尼的时候可能有药代动力学的药物之间的相互反应coadministered CYP3A4基质与药物。此外,一小部分人,免疫介导的肝毒性可能观察到的达沙替尼加合物细胞蛋白质的方式类似于双氯芬酸(Schapira et al ., 1986)、卡马西平(摩尔et al ., 1985;吴et al ., 2006)、替尼酸(Homberg et al ., 1984),或者dihydralazine (博纳et al ., 1996;Masubuchi崛江,2007年)。
通常是由于一种药物药代动力学的药物之间的相互反应改变新陈代谢或消除另一个。达沙替尼的处方信息(Sprycel)指出临床药物之间相互作用研究,达沙替尼与辛伐他汀codosed。单剂管理与辛伐他汀100毫克的达沙替尼在54个健康受试者导致意味着辛伐他汀C马克斯分别和增加AUC的37个和20%。详细的实验条件不发表,也没有额外的研究,达沙替尼是初始剂量,因此不可能近似的百分比观察辛伐他汀暴露是由于不可逆系统,抑制CYP3A4或观察到的交互是否会增加重复给药。也不清楚辛伐他汀羟基酸代谢物是占,作为它的形成不是由CYP3A4催化。
与药代动力学的药物之间的相互反应达沙替尼无疑是高效能的最小化达沙替尼。达沙替尼生化数据抑制bcr - abl和已知bcr - abl突变体显示集成电路50值0.1至3 nM和细胞值0.6至11 nM (O ' hare et al ., 2005)。等离子体单一剂量100毫克口服后达沙替尼水平了C马克斯215海里(105 ng / ml) (克里斯托弗et al ., 2008 b)。虽然等离子体C马克斯显著低于K我在这项研究中,确定系统的不可逆性质抑制剂会导致更大的药物之间的相互作用比在一个典型的竞争性抑制剂。与可逆抑制,系统抑制剂可能异常强烈,因为失活是累积和酶活性新创蛋白质合成后才能恢复。此外,肝脏积累达沙替尼或高的吸收肠道和肝脏暴露在可能导致利率高于预期的CYP3A4失活。
达沙替尼的提议方案CYP3A4-mediated代谢活化。达沙替尼羟基化导致化学反应的形成帕拉-quinoneimine中间(主要途径)或抽象的甲基氢导致的昊图公司-imine-methide中间(次要途径)。这些活性中间体与谷胱甘肽反应形成相应的谷胱甘肽加合物或与CYP3A4和反应可能导致酶失活。谷胱甘肽的*,提出网站内收。
发现在当前的研究中,达沙替尼通过形成bioactivated quinone-imine和imine-methide活性中间体表明,达沙替尼可能会在肝脏蛋白加合物形式除了内收谷胱甘肽在体外显示。Quinone-imines已知细胞蛋白质和共价修改涉及许多与毒品有关的不良反应(Guengerich麦克唐纳,2007;唐,2007)。共价改性蛋白导致的肝毒性的潜力,有时被称为免疫介导性特质肝毒性或药物引起的肝炎。的反应是罕见的,发生在少数患者(通常在1%和0.01之间)和不遵循一个严格的剂量反应。基于半抗原的假设,由药物毒性的药物加合物的形成(Griem et al ., 1998),受伤的细胞内化吞噬细胞,如枯氏细胞和树突细胞,他们处理,提出了加合物肽的主要组织相容性复合体II级辅助T细胞。B细胞产生自身抗体或抗体haptenized蛋白质调节锁定毒性(瓦尔格伦et al ., 2005;Masubuchi崛江,2007年)。
人们普遍认识到,需要额外的信号来启动免疫反应,导致“危险的假设。“危险的假设表明,主要histocompatability复杂二肽表达的抗原呈递细胞就不会引起生理t细胞反应(Matzinger 1998)。因此,它不是对一个复合的外来而是触发“报警”信号的能力决定了是否会引起免疫反应。肝毒素的药物可以作为抗原的来源,并提供报警通过破坏细胞,导致坏死细胞死亡(克钦格et al ., 1999)。
因为达沙替尼能够bioactivated通过羟基化和氧化形成quinone-imine甲基氧化形成一个imine-methide中间,单修改分子没有成功地消除bioactivation或抑制机理。Imine-methide形成需要一个甲基的存在昊图公司或者帕拉-安置。删除这些职位成功地消除了谷胱甘肽的甲基加合物造成imine-methide形成。quinone-imine中间体的形成需要达沙替尼羟基化。理论上,quinone-imine中间体羟基形成的可能的昊图公司或者帕拉-安置。然而,在我们生成的类似物,谷胱甘肽加合物出现继续通过羟基化帕拉-安置所看到的没有可检测谷胱甘肽化合物,如1250年和1260年的加合物。也许羟基化的昊图公司-安置是位阻。有趣的是,挡住了帕拉与氟、氯-安置并没有阻止quinone-imine形成。类似物含氟和氯帕拉-安置被发现dehalogenated和导致相同的谷胱甘肽加合物nonfluorinated同行。事实上,失活率和几乎相同K我氟化模拟值较低,这意味着他们可能会更有效地bioactivated。我们提出一种氧化机制进行通过环氧化物的形成。
总之,我们已经表明,达沙替尼是一个系统,即钝化剂的CYP3A4代谢生成活性quinone-imine和imine-methide自发与谷胱甘肽反应的中间体。此外,我们表明,达沙替尼bioactivation可以被适当的修改chloromethylphenyl戒指。
确认
我们感谢托马斯Vojkovsky合成化学原料。
脚注
文章、出版日期和引文信息可以发现http://dmd.aspetjournals.org。
doi: 10.1124 / dmd.108.025932。
缩写:慢性粒细胞性白血病、慢性粒细胞性白血病;LC,液相色谱;高,人类肝脏微粒体;MS / MS,串联质谱;DP declustering潜力;CE、碰撞能量;谷胱甘肽,谷胱甘肽。
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- 收到了2008年12月1日。
- 接受2009年3月11日。
- 美国社会的药理学和实验性疗法