骨髓细胞招聘到大脑没有辐照或异种共生的偏见
从属关系
- PMID:23526995
- PMCID:PMC3592806
- DOI:10.1371 / journal.pone.0058544
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骨髓细胞招聘到大脑没有辐照或异种共生的偏见
《公共科学图书馆•综合》。
2013年。
免费的PMC的文章
文摘
骨移植的骨髓来源的细胞被描述不仅在中枢神经系统(CNS)疾病还在健康的条件下。然而,先前的研究指向一个充足的骨髓细胞移植使用irradiation-induced骨髓嵌合体,诱发严重的中枢神经系统改变micromilieu包括血脑屏障(BBB)的干扰,内皮细胞的损伤和当地的促炎细胞因子的诱导。另一方面,异种共生实验通常使用暂时加入循环系统产生了低水平的骨髓细胞嵌合现象从而可能低估了骨髓细胞营业额与中枢神经系统。为了避免这些缺点,我们建立了一个协议使用烷化剂白消安前外源的骨髓移植从CX3CR1 (GFP / +)捐助者。这个方案导致稳定和高外围骨髓嵌合现象,显著降低细胞因子诱导和BBB保存完整。重要的是,骨髓细胞招聘中枢神经系统强烈减少在这些条件下,只有弱增强在当地神经退化引起的面部神经轴索显微外科术。这些结果强调的要求当地的中枢神经系统调节有效招聘的骨髓细胞,建立白消安作为替代治疗研究骨髓嵌合体,建议早期嵌合研究涉及的关键重新评估辐照或异种共生方案。
利益冲突声明
数据
一)强烈减少诱导的促炎细胞因子和趋化因子busulfan-treated嵌合体与辐照协议。定量实时PCR分析大脑的细胞因子和趋化因子诱导busulfan-treated(灰色列)和全身辐照(白列)嵌合体(h) 24小时,7天(d), 14 d和16周(w)治疗后。信使rna表达规范化GAPDH和未经处理的小鼠相比,灰线所示。数据显示为±SEM。的两个实验显示每组三到六的动物。统计学意义是标有星号(p < 0.05 = *;p < 0.01 = * *;p < 0.001 = * * *)。B)很大程度上保护血脑屏障(BBB)完整性后白消安的挑战。直接荧光显微可视化描述CD31+内皮细胞(绿色),extravasal白蛋白(红色)和原子核(DAPI,蓝色)。箭头指向,白蛋白。代表皮质显示的图片。酒吧= 100µm规模。C)白蛋白着色的CNS parenchym显示治疗组(h) 24小时,7天(d)和14 d后治疗。箭头指向,白蛋白在表面和更深的大脑区域。代表性的图片所示。酒吧= 400µm规模。插入:白蛋白着色的未经处理的动物。酒吧= 400µm规模。
一)代表流式细胞仪点情节展示GFP的表达在血液粒细胞,单核细胞,B细胞和T细胞busulfan-treated和辐照残雪3CR1GFP / +→残雪3CR1+ / +嵌合体和未经处理的小鼠骨髓移植后4周。各自的细胞群的百分比表示。残雪3CR1+ / +小鼠作为未经处理的控制。B)绿色荧光蛋白的定量评估+总体单核细胞(SSC表达式罗CD11b+)和两个单核细胞SSC子集罗CD11b+Ly6C嗨和SSC罗CD11b+Ly6C罗所有SSC罗CD11b+细胞。数据描述重构效率高,两组可比嵌合现象。一个符号代表一个鼠标(Busulfan-treated:实心圆;辐照:满广场)。均值±SEM所示。6到7个动物每组进行分析。C)照片显示改变皮毛颜色16周后治疗。辐照导致损失的皮毛颜色,而busulfan-treated动物不受影响。上图:未经处理的动物,中间:全身辐照动物,底部:busulfan-treated鼠标。
道GFP的数量+Iba-1+donor-derived吞噬细胞强烈降低辐照小鼠相比busulfan-treated动物。一)免疫组织化学嵌合的大脑显示绿色荧光蛋白+Iba-1+细胞皮质、海马、丘脑和busulfan-treated脉络丛和辐照嵌合小鼠16周后调整。箭头指示代表分歧的GFP+(绿色)和Iba-1+(红色)供体来源的细胞在中枢神经系统。核与DAPI复染色(蓝色)。酒吧= 200µm。B)donor-derived GFP高放大图像+Iba1+揭示分歧的道两组细胞的形态。部分是Iba-1彩色(红色),残雪3CR1 (GFP)和DAPI(蓝色)。酒吧= 50µm规模。C)量化的分歧的绿色荧光蛋白+Iba-1+细胞皮质、海马、丘脑和脉络丛。每个符号代表一个鼠标。数据显示显著差异道GFP的数量+Iba-1+donor-derived细胞之间的所有调查大脑区域busulfan-treated(实心圆)和辐照(满广场)动物骨髓细胞转移后16周。星号显示统计学意义(p < 0.05 = *;p < 0.01 = * *;p < 0.001 = * * *)。所有的图表显示意味着±SEM。
面部神经轴索显微外科术之后,GFP的招聘+Iba-1+donor-derived骨髓细胞的面神经损伤n强烈减少busulfan-treated老鼠相比,辐照动物。一)代表流式细胞仪点阴谋的外周血SSC罗CD11b+单核细胞在未经处理的隔间,busulfan-treated和辐照小鼠。B)量化的外周血嵌合现象显示了足够的和类似的调整水平busulfan-treated(圆圈)和辐照小鼠(满广场)。一个符号代表一个鼠标。调整后嵌合现象分析了九个星期。六个动物每组进行分析。所有的图表显示意味着±SEM。C)招募了绿色荧光蛋白的免疫组织化学+Iba-1+吞噬细胞在损伤面部核轴索显微外科术之后两周。高数量的分歧的donor-derived GFP+在退化的神经元细胞被发现辐照CX (NeuN,红色)3CR1GFP / +→残雪3CR1+ / +老鼠busulfan-treated CX相比3CR1GFP / +→残雪3CR1+ / +动物。绿色荧光蛋白+细胞接近NeuN-immunoreactive面部核的神经元。没有发现GFP表达细胞在控制现场busulfan-treated老鼠,在辐照小鼠相比几GFP+细胞可以被发现。规模的酒吧:= 200µm概述;= 50µm细节。核与DAPI染色(蓝色)。D)道GFP的量化+Iba-1+细胞轴索显微外科术后14天。一个健壮的donor-derived GFP的移植+细胞被发现在辐照嵌合小鼠(满广场),而只有少数GFP+细胞中检测到busulfan-treated嵌合小鼠(实心圆)。符号表示个人的老鼠。数据表示为±SEM。星号表示统计学差异(p < 0.001 = * * *)。
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引用
-
- 英国Hanisch Kettenmann H(2007)小胶质细胞:活跃的传感器和多功能效应细胞在正常和病理的大脑。Nat > 10: 1387 - 1394。- - - - - -PubMed
-
- Kettenmann H, Hanisch英国,野田佳彦M, Verkhratsky小胶质细胞的生理学》(2011)。杂志91年牧师:461 - 553。- - - - - -PubMed
-
- 凯蒂RM,佩里VH(2009)小胶质生理学:独特的刺激,专门的反应。为Immunol 27日:119 - 145。- - - - - -PubMed
-
- 凯蒂RM,卡多纳·AE(2010)中枢神经系统的髓细胞薄壁组织。自然468:253 - 262。- - - - - -PubMed
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