中性粒细胞蛋白酶的抑制动力学抑弹性酶蛋白和重组pre-elafin trappin-2 pastoris表示在毕赤酵母
- PMID:15182352
- DOI:10.1111 / j.1432-1033.2004.04156.x
中性粒细胞蛋白酶的抑制动力学抑弹性酶蛋白和重组pre-elafin trappin-2 pastoris表示在毕赤酵母
文摘
弹力素和它的前身trappin-2或pre-elafin特定内源性抑制剂人类中性粒细胞弹性蛋白酶和蛋白酶3而不是组织蛋白酶g两种抑制剂属于,加上分泌白细胞蛋白酶抑制剂,chelonianin家族规范蛋白酶抑制剂的丝氨酸蛋白酶。cDNA编码抑弹性酶蛋白或其前体,trappin-2,融合在坐标系和酵母alpha-factor cDNA表达在毕赤酵母属pastoris酵母表达系统。长篇抑弹性酶蛋白或全身trappin-2被分泌到培养基与高产量,指示正确处理融合蛋白的酵母KEX2信号肽酶。两个重组抑制剂被一步纯化从集中培养基同质性阳离子交换色谱法和以n端氨基酸序列,免疫印迹和动力学研究。重组抑弹性酶蛋白和trappin-2被发现是快速胰弹性蛋白酶抑制剂,中性粒细胞弹性蛋白酶和蛋白酶3 k(屁股)2 - 4 x 10 (6) m的值(1)授予(1),而离解速率常数k(侮辱)被发现在10(4)(1)范围内,表明低可逆性的复合物。平衡离解常数K(我)的交互重组酶抑制剂与他们的目标是直接测量胰弹性蛋白酶或计算从K(屁股)和中性粒细胞弹性蛋白酶和蛋白酶K(侮辱)值3。值K(我)被发现在10(-10)摩尔范围和抑制剂的几乎相同的。基于动力学参数决定,它可能会得出结论,重组弹力素和trappin-2可能作为有效的抗炎分子,可能是治疗各种炎症性肺部疾病的潜在治疗。
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