跳到主页内容
访问键 NCBI主页 myncbi主页 主要内容 主要导航
。 2004年6月11日（6）：567-73。
doi: 10.1038 / nsmb769。 EPUB 2004 5月2日。

在病毒进入期间，各个流感病毒周围的内吞机械组装

Michael J Rust.1那 Melike Lakadamyali.那 冯张那 萧伟庄
隶属关系
免费PMC文章

在病毒进入期间，各个流感病毒周围的内吞机械组装

Michael J Rust.等等。 NAT STRUCT MOL BIOL。 2004年6月。
免费PMC文章

摘要

大多数病毒通过受体介导的内吞作用进入细胞。然而，其中许多国家使用的进入机制仍不清楚。同样不为人知的是，病毒是如何被细胞内吞机制所攻击的。我们利用荧光显微镜实时跟踪单个病毒与细胞内吞结构的相互作用，研究了流感病毒的进入机制。我们的研究结果表明，流感病毒可以同时利用网格蛋白介导的以及网格蛋白和小窝蛋白独立的内吞通路，这两种通路导致病毒融合的效率相似。值得注意的是，通过网格蛋白介导的途径，病毒通过在病毒结合位点重新形成网格蛋白包被凹坑(CCPs)进入细胞。在这些部位形成CCP比在细胞表面其他部位形成CCP要快得多，这表明病毒诱导CCP形成的机制可能是许多其他类型的病毒共同利用的。

数据

图1
图1
表达EyFP-Clathrin的BS-C-1细胞中克拉棘涂层结构的荧光图像。对于离散荧光斑的更清晰的可视化，从图像中减去了由于细胞质EyFP-Clathrin引起的低空间频率背景。秤杆：3μm（一个）用EyFP-Clathrin瞬时转染的细胞中克拉棘涂层结构的免疫荧光图像。（B.)同一细胞内网格蛋白涂层结构的EYFP荧光图像。（C)免疫荧光信号(红色)覆盖EYFP信号(绿色)。同时带有红色和绿色信号的像素显示为黄色。多个细胞的计数斑点显示，免疫荧光图像中出现的网格蛋白涂层结构中超过97%与EYFP图像中的结构共定位。图像右上角的红点属于相邻的未转染eyfp网格蛋白的细胞。（D.）覆盖稳定表达EyFP-Clathrin的细胞的转移素图像（红色）和EyFP图像（绿色）。Alexa Fluor 647标记的转移素（分子探针）在4℃下与细胞结合15分钟。除去未结合的转移素后，将细胞在室温下成像。显示了前5秒的图像。超过96％的转移素斑点与克拉林涂层结构结合并出现黄色。
图2.
图2.
通过多种途径的流感病毒的内化。（一个）通过CCP内化的病毒的快照。此病毒的直播电影可用补充视频3.。秤栏：10μm。t = 0 s：病毒（红色）与细胞绑定。T = 50秒：病毒正在进行I阶段。T = 115 S：用EyFP（绿色）标记的CCP开始在病毒部位形成。T = 150 s，Clathrin涂层达到其峰值荧光强度。T = 175秒：克拉辛涂层迅速拆卸。T = 181秒：病毒朝向微管（阶段II运动）朝向核。T = 202 S：病毒进入III阶段运输，涉及在微管中的加密和减去终点的动力。T = 235 S：病毒继续阶段III运动。 (B.）病毒的时间轨迹通过内化德诺维中国共产党的形成黑色符号是病毒的速度-时间轨迹。II期运动被确定为从细胞外周到核周区的快速单向易位(红色箭头)。绿色符号为与病毒相关的eyfp -网格蛋白的综合荧光强度。（C）内化的病毒的时间轨迹无关与克拉林涂层结构相关联。符号如定义B.。两种病毒的直播电影B.和C也可用（补充视频4、5）。
图3.
图3.
形成CCP和CCV的动态德诺维在病毒结合位点。（一个)从病毒结合到CCP形成起始时间的直方图。（B.)从CCP形成到CCV脱膜的时间直方图。插图:与病毒相关的eyfp -网格蛋白强度的60条平均时间轨迹曲线显示了ccp的生命周期。每个eyfp -网格蛋白轨迹被归一化为峰值高度，并随时间缩放，因此CCP形成发生在t = 0秒，网格蛋白峰值强度发生在t = 69秒，这是网格蛋白积累阶段的平均持续时间。（C）第一CCV未涂覆事件与阶段II病毒运动开始之间的时间的直方图。
图4.
图4.
神经氨酸（NA）抑制剂对流感病毒内吞作用的影响。灰色柱显示在没有神经氨酰胺酶抑制剂的情况下，病毒结合与阶段II运动的开始的直方图。红色列在1μmrwj270201的存在下显示直方图。存在1μmoSeltamivir存在的直方图是相似的（数据未示出）。
图5.
图5.
在内吞作用后成功融合的病毒的时间轨迹。（一个）通过CCP内化的病毒的一个例子。（B.)一个没有与CCP联系的内在化的例子。有关这两种病毒的实况影片可供下载(辅助视频6、7）。黑色符号是病毒的速度时间轨迹。红色符号是病毒的荧光强度。病毒融合可以被识别为确实信号的显着增加。绿色符号是与病毒相关的EYFP-Clathrin的集成荧光强度。
请参阅PMC中的图片和版权信息

类似的文章

查看所有类似的文章

被引用177.文章

  • 哺乳动物和禽宿主细胞流感限制因素。
    McKellar J，Rebendenne A，Wencker M，MoncorgéO，Goujon C. mckellar j等。 病毒。2021年3月22日;13(3):522。doi: 10.3390 / v13030522。 2021年病毒。。 PMID:33810083 免费PMC文章。 审查。
  • 膜筏：用于病毒进入的门户。
    瑞帕I，安德鲁S, López-Guerrero JA，贝洛-莫拉莱斯R。 RIPA I等人。 前线微生物，2021年2月4日;12:631274。doi: 10.3389 / fmicb.2021.631274。eCollection 2021。 前微生物。2021。 PMID:33613502 免费PMC文章。 审查。
  • 流感病毒：利用M2离子通道和神经氨酸酶对抑制剂设计的关键作用。
    MTAMBO SE，Amoako DG，Somboro Am，Agoni C，律师MM，Gumede NS，Khan RB，Kumalo HM。 Mtambo SE，等。 分子。2021 2月7日; 26（4）：880。DOI：10.3390 /分子26040880。 分子。2021。 PMID:33562349. 免费PMC文章。 审查。
  • 脱毛病毒融合中的中间步骤的鉴定。
    杜邦A，GlückIM，Ponti D，Stirnnagel K，Hütters，Perrotton F，Stanke N，Richter S，Lindemann D，Lamb DC。 杜邦A等人。 病毒。2020年12月21日; 12（12）：1472。DOI：10.3390 / v12121472。 病毒。2020。 PMID:33371254 免费PMC文章。
  • 过去四十年的病毒流行病：病理生理学，健康影响和观点。
    Roychoudhury S，Das A，Sengupta P，Dutta S，Roychoudhury S，Choudhury AP，Ahmed ABF，Bhattacharjee S，Slama P. Roychoudhury s等人。 环境科学学报。2020年12月15日;17(24):9411。doi: 10.3390 / ijerph17249411。 INT J Environ Res公共卫生。2020。 PMID:33333995. 免费PMC文章。 审查。
查看所有“引用”文章

出版类型

网格术语