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2002年6月,83(3):111 - 9。
doi: 10.1046 / j.1365-2613.2002.00220.x。

博莱霉素致肺纤维化的时间过程

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博莱霉素致肺纤维化的时间过程

G Izbickiet al。 Int J Exp Pathol 2002年6月
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摘要

博莱霉素气管内灌注(IT)是一种广泛应用的肺纤维化实验模式。在这项研究中,我们用计算机辅助形态测定法描述了博莱霉素诱导小鼠肺纤维化的时间过程。C57Bl/6J小鼠分别用单剂量博莱霉素或对照生理盐水治疗。动物在术后3、6、14和21天被杀死。通过分析支气管肺泡灌洗液(BAL)、肺中羟脯氨酸浓度、常规光镜检查肺损伤半定量形态学指数(SMI)和在optimas图像分析软件辅助下的定量形态学测量(纤维化分数和肺泡壁面积分数)评价肺损伤。博莱霉素治疗引起的BAL液变化包括细胞总数增加(第14和21天),中性粒细胞百分比增加(第3和6天),随后淋巴细胞持续增加(第6、14和21天)。在第14和21天,博莱霉素治疗的小鼠羟脯氨酸水平增加。SMI中位评分在第3、14和21天显著升高。计算机辅助形态测量显示,在第14天,博莱霉素治疗小鼠的纤维化分数增加了3倍,壁面积分数增加了1.3倍,第21天没有进一步增加。这些数据还表明,在该模型中评估肺纤维化最合适的时间点是在IT灌注博莱霉素后的14天,根据观察,在14天,动物出现广泛的纤维化,但纤维化反应的变动性较低,死亡率低于21天后。 Computer-assisted morphometry provides objective and quantitative measurements that are a useful tool for the evaluation of bleomycin-induced lung injury.

数据

图1
图1
经气管内灌注Bleo(圆)或Sal(孵化线)及不同时间处死的小鼠BAL液中总细胞数及分化细胞数。数值为平均值±SE;n在第3、6、14和21天,盐水处理的动物分别为20,博莱霉素处理的动物为5、5、10和11。*P与Sal相比< 0.05。
图2
图2
不同时间点Bleo和sal处理小鼠的羟脯氨酸水平。数据以平均值±标准差表示,n在第3、6、14和21天,盐水处理的动物分别为20,博莱霉素处理的动物为5、5、10和11。*P与Sal相比< 0.05。
图3
图3
气管内博莱霉素和盐处理动物的代表性显微照片。(a)在博莱霉素灌注后3天,血管周围和支气管周围淋巴细胞数量增加。(b)在第6天,这些变化伴随着局灶性包膜下纤维化。(c)第14天肺泡巨噬细胞增多,肺泡间隔增厚,密集纤维化灶。(d) 21天时,病变的严重程度差别很大,部分区域表现为密集纤维化,相邻肺正常。(e)所有时间点经盐处理的动物肺结构正常。(石蜡块,苏木精-伊红,原始放大倍数:100×)。
图4
图4
不同时间点博莱霉素和盐处理小鼠的半定量形态指数(SMI)。每个点代表单个鼠标的SMI。中值用直线表示。SMI的详细信息在方法部分中指定。*P与Sal相比< 0.05。
图5
图5
(a)纤维化分数和(b)肺泡壁面积分数在不同时间点通过定量图像分析测量 最适条件图像分析程序。数据以平均值±标准差表示,n在第3、6、14和21天,盐水处理的动物分别为20,博莱霉素处理的动物为5、5、10和11。*P与Sal相比< 0.05。

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