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研究文章

维生素D对系统性红斑狼疮患者树突状细胞功能的影响

  • 伊兰Ben-Zvi,

    联系美利坚合众国纽约曼哈塞特范斯坦医学研究所自身免疫和肌肉骨骼疾病科

    ⨯
  • 辛西娅·Aranow

    联系美利坚合众国纽约曼哈塞特范斯坦医学研究所自身免疫和肌肉骨骼疾病科

    ⨯
  • Meggan麦凯,

    联系美利坚合众国纽约曼哈塞特范斯坦医学研究所自身免疫和肌肉骨骼疾病科

    ⨯
  • Anfisa Stanevsky,

    联系美利坚合众国纽约曼哈塞特范斯坦医学研究所自身免疫和肌肉骨骼疾病科

    ⨯
  • 戴安·l·卡门，

    联系美国南卡罗来纳查尔斯顿南卡罗来纳医科大学风湿病科

    ⨯
  • 曼努埃拉·马里内斯库，

    联系美国纽约州布朗克斯阿尔伯特·爱因斯坦医学院医学系

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  • 克里斯托弗·e·柯林斯，

    联系美利坚合众国南卡罗来纳州查尔斯顿拉尔夫·约翰逊退伍军人管理局医疗中心医学部

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  • 加里·s·吉尔克森，

    从属关系美利坚合众国南卡罗来纳查尔斯顿市南卡罗来纳医科大学风湿学系，美利坚合众国南卡罗来纳查尔斯顿市拉尔夫·h·约翰逊退伍军人管理局医疗中心医学系

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  • 贝蒂钻石,

    联系美利坚合众国纽约曼哈塞特范斯坦医学研究所自身免疫和肌肉骨骼疾病科

    ⨯
  • 约翰·a·哈丁

    johnhardin@arthritis.org

    从属关系美利坚合众国纽约布朗克斯区阿尔伯特·爱因斯坦医学院医学系，美利坚合众国华盛顿特区国立卫生研究院国家过敏和传染病研究所

    ⨯

摘要

背景

树突状细胞(DCs)的过度活性被认为是系统性红斑狼疮(SLE)的中心疾病机制。已知维生素D可降低健康供体dc对I型IFN刺激作用的反应性。由于维生素D缺乏在SLE中很常见，我们假设维生素D可能在SLE中IFNα扩增环中起调节作用。我们的目标是研究维生素D水平与SLE患者疾病活动性之间的关系，并研究维生素D在体外对DC激活和ifn α调控基因表达的影响。

方法/主要结果

在这项研究中，连续招募198名SLE患者，测量了25-OH维生素D (25-D)水平。29.3%的非洲裔和11.8%的西班牙裔SLE患者25-D水平<10 ng/ml。维生素D缺乏程度与疾病活动度呈负相关;r =−。234, p = .002。在19例按25-D水平分层的SLE患者中，循环DC数和表型之间没有差异。在体外实验中，SLE患者的单核细胞来源的DCs (MDDCs)通常对维生素D的调节作用有反应，这可以从1,25-D存在时LPS刺激的激活降低得到证明。此外，维生素D调节降低了健康供体和SLE MDDCs中ifn α调控基因的表达，以响应激活SLE血浆的因素。

结论/意义

我们报告了严重的25-D缺乏症在相当比例的SLE患者的测试，并证明与疾病活动成负相关。我们的结果表明，补充维生素D通过抑制DC成熟和激活，有助于恢复SLE患者的免疫稳态。我们被鼓励支持充足的维生素D补充的重要性，以及临床试验的必要性，以评估维生素D补充是否会影响体内IFNα活性，最重要的是，改善临床结果。

引用:Ben-Zvi I, Aranow C, Mackay M, Stanevsky A, Kamen DL, Marinescu LM，等(2010)维生素D对系统性红斑狼疮患者树突状细胞功能的影响。PLoS ONE 5(2): e9193。https://doi.org/10.1371/journal.pone.0009193

编辑器:Derya Unutmaz，纽约大学，美利坚合众国

收到:2009年8月17日;接受:2009年12月18日;发表:2010年2月16日

版权:©2010 Ben-Zvi等人。这是一篇开放获取的文章，根据创作共用署名许可的条款发布，允许在任何媒介上不受限制地使用、分发和复制，前提是要注明原作者和来源。

资助:这项工作得到了美国国立卫生研究院对GSG (P60 AR049459)和DLK(普通临床研究中心拨款#RR01070)的资助;由美国国立卫生研究院(国家过敏和传染病研究所)和自身免疫卓越中心授予BD、MM、CA和JAH;由美国风湿病研究和教育基金会授予DLK;并由狼疮研究联盟向JAH提供资助。NIAMS: NIH K23 AR052364对DLK: K23奖的额外支持。资助者在研究设计、数据收集和分析、发表决定或手稿准备中没有任何作用。

利益冲突:作者宣称不存在竞争利益。

简介

虽然系统性红斑狼疮(SLE)患者表现出不同的临床和血清学表现，但他们都有共同的免疫异常，导致耐受性丧失、自身反应性、炎症后遗症和器官功能障碍。无毒的免疫调节方式将是目前用于管理自身免疫性疾病的药物的一个受欢迎的补充。干扰素α (IFNα)对自身反应细胞具有多种促炎和允许作用，并已成为自身免疫进展和维持的核心参与者。它由活化的浆细胞样树突状细胞(pDCs)大量产生。因此，针对IFNα和pDCs的治疗目前正在开发中，用于治疗SLE。我们和其他人对维生素D缺乏在系统性红斑狼疮的发展和持续中所起的潜在作用很感兴趣。除了钙平衡和骨代谢的调节作用外，维生素D还具有免疫调节作用，有助于维持免疫稳态。我们对狼疮pDCs对维生素D免疫调节的潜在易感性特别感兴趣。

维生素D是一种类固醇激素，被认为是骨骼和矿物质稳态所必需的。虽然正常饮食中提供少量的维生素D，但大部分是通过皮肤中的紫外线B辐射作用产生的，导致胆钙化醇的产生，这是惰性维生素D前体(维生素D3)。在肝脏中，非必需的线粒体酶(CYP27A1)和必需的微粒体酶(CYP 2R1)将维生素D3转化为25-羟基维生素D (25-D)。在肾小管细胞中，25-D被1- α维生素D羟化酶(CYP27B1)转化为活性1,25-二羟基维生素D (1,25-D)代谢物，骨化三醇。循环中的1,25-D水平通过涉及甲状旁腺激素、钙和磷酸盐浓度的复杂机制控制，并通过自我调节来防止维生素D毒性。1,25 -D的大多数生物学效应是通过它与维生素D受体(VDR)的相互作用介导的。除了肠道和骨骼中的细胞外，VDR还存在于包括免疫系统在内的多种细胞类型中。它作为一种激动剂激活的转录因子，与许多基因启动子中的维生素D反应元件结合[1]．

免疫系统拥有利用维生素D作为自分泌和旁分泌信号系统所需的所有成分。VDR在T淋巴细胞和B淋巴细胞中表达[２]以及单核细胞分化为树突状细胞(DCs)[3]．成熟的dc同时表达CYP27A1和cyp27b1，因此能够从维生素D3中局部产生活性1,25 - d激素[4]．事实上,在体外在健康供体dc的培养中，将维生素D3转化为1,25 - d的水平，大大高于在人血清中通常测量到的水平，这进一步支持了在免疫反应位点局部生成1,25 - d可能是调节免疫系统的潜在机制。激素活性维生素D抑制免疫系统的几个组成部分[4]，［5］包括DC分化和成熟[6]， B细胞分化[7]， T细胞增殖响应于T细胞受体(TCR)的刺激[２]以及IL-12和TNFα的分泌，而IL-10的产生保持不变[8]．与这些发现一致，激素促进Th-2型T细胞的反应[9]并可能促进调节性T细胞的产生[10]．

许多研究表明，在包括狼疮在内的自身免疫性疾病动物模型中，给药维生素D可以改善炎症[11]，[12]，[13]，多发性硬化症[14]，[15]以及炎症性肠病[16]．维生素D还可以抑制多种器官移植模型中的移植物排斥反应(17)。这些动物研究得到了人类流行病学研究的补充，证明维生素D摄入量与多发性硬化症风险呈负相关[17]， 1型糖尿病［18］以及类风湿性关节炎[19]．虽然使用维生素D治疗自身免疫性疾病的介入研究有限，但短期开放标签试验在多发性硬化症方面提供了有希望的结果[20]、牛皮癣[21]以及类风湿性关节炎［22］．

1,25 - d对健康供体单核细胞有抑制作用，并抑制ifn α介导的单核细胞向dc分化。维生素D对自身免疫性患者(如SLE)单核细胞的影响尚不清楚。树突状细胞是先天免疫反应和适应性免疫反应之间的重要联系，并可使自身炎症反应持续。含有凋亡或坏死细胞核酸的免疫复合物触发IFNα的产生。随着fc γ r介导的内吞作用和toll样受体(TLR) 7和9的激活，pDCs被刺激释放IFNα，进而促进单核细胞进一步分化为dc[23]，[24]．激活的DCs随后可以通过表达共刺激分子和分泌包括IL-12、IL-10或IL-23在内的细胞因子来启动和极化naïve T细胞。激活的dc还会促进自身反应性T和B细胞的激活和扩张，从而维持自身抗体的产生和IFNα的持续释放[25]，[26]．IFNα在SLE中的核心作用得到了临床观察的支持，使用IFNα治疗经常会导致自身免疫效应，在某些情况下，还会导致狼疮样疾病。同样清楚的是，IFN诱导基因在SLE患者外周血单个核细胞(pmcs)中过度表达[27]，[28]，[29]，[30]，[31]．这种“IFN特征”与疾病活动性和严重程度相关[32]提示该细胞因子的过度产生可能是SLE发病的驱动力。

据报道，系统性红斑狼疮患者中存在维生素D缺乏[33]并且已知1,25 - d降低了健康供体DC对I型IFN成熟信号的反应在体外[6]．我们假设维生素D在SLE患者IFNα扩增环中起调节作用。我们的目标是研究维生素D水平与SLE患者疾病活动性之间的关系，并研究维生素D是否可以调节SLE患者单核细胞来源的DC (MDDC)中IFN信号的成熟和诱导。我们描述了一系列实验，这些实验表明补充维生素D可能有助于恢复SLE患者的免疫稳态。

方法

参与者

连续遇到的符合ACR SLE分类标准的患者被确定在三个医疗中心:南卡罗来纳医科大学(查尔斯顿，SC)， NIH临床中心(贝塞斯达，MD)和Montefiore医疗中心(布朗克斯区，NY)。排除血清肌酐大于2.0 mg/dl的患者。招募了198名受试者进行25-D水平和疾病活动性分析。血清25-D水平由各临床中心实验室检测。还收集了使用系统性红斑狼疮疾病活动指数(SLEDAI)测量的疾病活动度、患者人口统计数据和药物使用情况(表1)．144名受试者使用强的松剂量。以下研究的血液样本来自哥伦比亚大学医学中心(纽约，纽约)和雅可比医学中心(布朗克斯，纽约)的其他SLE患者和健康对照。所有dc的表型分析:从19例疾病活动稳定且有治疗方案的SLE患者中采集肝化血(30 ml)。通过Ficoll-Hypaque分离单个核细胞，回收的细胞用CD11c、CD40、CD86和HLA-DR荧光偶联抗体染色，并在CD11c门控后用流式细胞仪分析+细胞。

缩略图
下载:
表1。患者的人口学和临床特征。

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0009193.t001

单核细胞来源DC (MDDC)的生成

根据制造商的协议，使用RosetteSep Human Monocyte Enrichment Cocktail (StemCellTechnologies, Vancouver, Canada)从PBMC中分离SLE受试者和健康捐赠者的单核细胞。然后用0.1µg/ml IL-4 (Peprotech, Rocky Hill, NJ)和0.27µg/ml GM-CSF (Peprotech)培养5-7天。流式细胞术显示CD11c占细胞总数的90%+细胞。

MDDC激活响应:为了研究维生素D对MDDC激活的影响，我们分别用10 nM浓度的1,25-D培养和不培养3例SLE患者的MDDC，并用50 ng/ml浓度的脂多糖(LPS, Sigma)刺激2天。流式细胞术检测表面活化标志物CD40、CD86、HLA-DR。

IFN诱导基因

将两名健康对照组和两名SLE受试者的暴露于1,25 - d或未暴露于1,25 - d的MDDC与“激活血浆”、已知可转移IFN特征的SLE血浆或健康对照组血浆(20%)在37℃下孵制4小时。孵育在96孔平底板(Falcon, Franklin Lakes, NJ)中进行，使用5×105细胞/100 μ l /孔在Eagles最小必要培养基(EMEM)中修饰，以含有Earl的平衡盐溶液，非必需氨基酸，2 mM l -谷氨酰胺，1 mM丙酮酸钠和1500 mg/l碳酸氢钠，补充10%胎牛血清和1%青霉素G 10,000单位/ml和链霉素10,000单位/ml。在与激活的SLE血浆或健康对照血浆孵育后，使用Picopure RNA分离试剂盒(Arcturus Bioscience, Mountain)从1,25 - d暴露和未暴露的MDDC中提取RNA。View, CA)，然后逆转录，使用iScript cDNA合成试剂盒(BioRad, Hercules, CA)在20µl反应中生成互补DNA (cDNA)。cDNA进一步在Bio-Rad Myiq循环仪上进行定量PCR。将cDNA三重复样品稀释1∶10，用2X TaqMan Universal PCR Master mix (Applied Biosystems, Foster City, CA)和20X TaqMan基因表达检测mix在21µl反应混合液中扩增7µl。3个ifn α调控基因被鉴定为靶基因:Ifit1(干扰素诱导蛋白与四肽重复序列1;Hs01675197 m1)， Mx1(黏液病毒抗性1;Hs00182073 m1)和Ifi44(干扰素诱导蛋白44;Hs00197427m1)。这些基因已被鉴定为由IFNα高度特异性诱导[34]．HPRT1(次黄嘌呤磷酸核糖转移酶1)作为管家基因进行表达监测。用比较阈值循环法计算靶基因的相对表达量。

道德

本研究的个体参与者在任何研究过程之前都给予了书面同意。这项研究获得了美国国家健康科学研究所机构审查委员会、阿尔伯特·爱因斯坦医学院临床调查委员会和南卡罗来纳医科大学人类研究机构审查委员会的批准。由于许多转化研究是在范斯坦医学研究所进行的，因此还获得了北岸长岛犹太IRB的额外批准。

统计分析

对区间数据采用Pearson积矩相关，对不服从正态分布的序列数据或区间数据采用Spearman秩序相关。标称数据采用列联表卡方分析。非参数Mann-Whitney检验用于DC表型表面标记的组间比较。

结果

维生素D缺乏在SLE患者中普遍存在，并与疾病活动增加有关

我们获得了连续198例符合ACR SLE分类标准的患者的临床和实验室数据。大多数是非裔美国人(71%)或西班牙裔(21%)，白人和亚洲人数量相对较少。四个种族的性别、年龄、肾功能、SLE疾病活动评分(SLEDAI)、血清学结果和皮质类固醇剂量(表1)．

非标准化中位25-D水平在非洲裔美国人(14.2 ng/ml, IQR 9.1-19)和西班牙裔美国人(20.5 ng/ml, IQR 13-30)中最低，在亚洲人中最高(22ng/ml, IQR 11.5-29.5)和白种人(29 ng/ml, IQR 14.5-34) (图1一个)．非裔美国人和西班牙裔系统性红斑狼疮患者严重缺乏维生素D的患病率是惊人的;25-D水平< 10 ng/ml的分别占29.3%和11.8%。在亚洲人和白种人中没有观察到这种水平的缺乏(图1 b)．维生素D水平与SLEDAI测量的疾病活动性呈负相关(r =−。243, p = .002)，即使在控制种族和强的松剂量后(图1 c)．南卡罗来纳州的非裔美国人和布朗克斯区的非裔美国人的25-D血液水平没有显著差异(数据未显示)。

缩略图
下载:
图1所示。SLE患者25-D水平的评估。

每个种族25-D(+/−1 SD)的分布和中位数血液水平(A)。严重维生素D缺乏(定义为血液25-D水平低于10 ng/ml)在非洲裔美国人和西班牙裔美国人中最为普遍(B)。疾病活动评分(SLEDAI)与25-D水平呈负相关(C)。

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0009193.g001

SLE患者循环pDC和mDC数量及表型不受维生素D水平的影响

先前对SLE患者的研究表明，与正常对照组相比，循环浆细胞样dc (pDCs)和髓细胞样dc (mDCs)均有相当一致的下降[35]．此外，据报道，来自SLE患者的mddc在功能上与正常dc不同[36]，[37]．因此，我们最初试图确定维生素D缺乏是否与DC表型的任何重大变化相关。采用FACS分离19例SLE患者外周血中mDCs和pDCs，比较25-D水平<20 ng/ml组(n = 13)和>水平< 30 ng/ml组(n = 6)中这些循环pDCs和mDCs上激活标志物的表达。所有患者均采用稳定的SLE治疗方案，两组患者的疾病活动性水平相当。两组间循环mDCs或pDCs数量无显著差异，激活标记HLA-DR、CD-40或CD-86的表达无显著差异(数据未显示)。

LPS对SLE MDDC的激活由1,25- d调节

此前有报道称，1,25 - oh D3添加到培养的健康供体单核细胞中在体外I型IFN和GM-CSF对MDDC的成熟、分化和激活具有抑制作用，导致LPS诱导的Th-1极化细胞因子的产生受损(5,6)。为了确定SLE患者的单核细胞- dc轴是否正常对维生素D有反应，我们在存在或不存在10 nm 1,25 -D的情况下制备了3名非洲裔美国SLE患者的MDDC，然后进行LPS刺激。这些患者的疾病活动度最低(SLEDAI≤4)，均使用低剂量强的松(≤10mg /天)，2例使用免疫抑制药物(赛西普和硫唑嘌呤)。其中2例血清25-D水平低于30 ng/ml。流式细胞术检测激活标志物HLA-DRII、CD40、CD86的表达。结果显示在图2一个；某受试者的代表性流式细胞术数据见图2 b．在研究的3例狼疮患者中，MDDCs对LPS刺激有反应，HLA-DRII、CD40和CD86的表达增加。这种成熟反应被1,25 - d有效阻断，如先前报道的非自身免疫个体的dc［5］．因此，来自SLE患者的MDDCs与健康供体的MDDCs表现相似，并且对维生素D对成熟的限制有反应。

缩略图
下载:
图2。狼疮患者的mddc对维生素D的抑制作用有反应。

从3名非洲裔美国SLE患者(C8、C25和C26)的单核细胞中制备dc，在存在或不存在10 nM浓度的1,25 - d的情况下，并将其暴露于LPS作为成熟刺激。流式细胞术检测细胞HLA-DR II、CD40和CD86的表达。复合结果显示为与未暴露于维生素D或LPS的细胞相比的平均荧光指数的相对值(A)。一个代表性患者的直方图数据显示为(B)。C8服用细胞西普3gm /day和强的松5mg /day, C25服用硫唑嘌啉150mg /day和强的松5mg /day, C26服用甲基强的松8mg /day。C8和C25的SLEDAI得分为0,C26的SLEDAI得分为4。

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0009193.g002

维生素D抑制IFN信号向健康供体和SLE MDDC的转移

I型干扰素诱导单核细胞分化为dc[6]．某些狼疮血清/血浆诱导DC分化的能力至少部分归因于SLE血清中IFNα和/或免疫复合物的存在，这些复合物可能触发细胞内toll样受体(TLRs)并刺激IFNα表达增加[38]．我们评估了维生素D对健康供体或SLE mddc中SLE激活血浆诱导的IFN调控基因(Mx1, Ifit1, Ifi44)表达的影响。两名健康供体和两名SLE受试者(暴露于或未暴露于1,25 D)的mddc与激活的SLE血浆或对照血浆一起培养4小时。其中1例SLE患者有活动性肾脏疾病(SLEDAI评分为10)，另1例患者临床上无症状，SLEDAI评分为0,2例患者血清25-D水平均较低(24和19 ng/ml)。正如预期的那样，与健康供体血浆相比，健康供体MDDC与SLE激活血浆一起孵育时，IFNα诱导基因的表达增加(图3一)．在DC暴露于1,25 - d时，这种对SLE血浆刺激效应的响应性在很大程度上被逆转(图3一)．来自SLE患者的MDDCs基因表达，一个是活动性的，一个是非活动性的，对SLE激活血浆的刺激和1,25 - d的调节有相似的反应(图3 b)．在健康供体和SLE MDDCs中，添加1,25 -D调节的基因表达的整体百分比分别为62%、60%和34%，Ifit1、Mx1和Ifi44，进一步证明SLE患者的MDDCs对维生素D的抑制作用有反应。

缩略图
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图3。维生素D抑制暴露于激活SLE血浆的mddc中IFN信号的诱导。

与管理基因HPRT1相比，三个IFN诱导基因的相对表达在2个健康供体的MDDC中显示，在有或没有1,25 - d(浓度为10 nM)的情况下培养，然后暴露于激活的SLE血浆或健康供体血浆(图3一)．2例SLE患者的MDDC经历了相同的事件序列(图3 b)．其中一名患者是非裔美国女性，患有活动性肾病，SLEDAI为10，血清25-D水平为24。另一位是西班牙裔女性，SLEDAI评分为0，血清25-D水平为19。虽然3个IFNα靶向基因的表达在健康MDDC和SLE MDDC之间存在差异，但在MDDC培养期间，随着维生素D生理水平的增加，总体表达降低。

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0009193.g003

讨论

众所周知，维生素D对骨矿化和体内平衡很重要。越来越多的证据表明，这种维生素对健康的许多其他方面都很重要，包括免疫调节。然而，关于补充维生素D对自身免疫性疾病患者临床状态的影响的数据很少。本研究为补充维生素D可能有助于SLE患者免疫异常的正常化提供了支持，并为维生素D的免疫调节机制提供了见解。

我们关于SLE中维生素D缺乏的观察结果与先前关于SLE中维生素D缺乏的高患病率的报道一致，特别是在非裔美国人中[33]，[39]，[40]，[41]，[42]，[43]．我们发现，来自三个中心的29%的SLE非洲裔美国人血液25-D水平低于10 ng/ml，而在NHANES III对健康育龄妇女的调查中，同一种族的患病率为12.1%[44]．众所周知，黑色素与内源性维生素D的产生和血清25-D水平的降低呈负相关[45]．非裔美国SLE患者严重低维生素D的显著流行可能反映了其他未确定的疾病相关因素，这些因素进一步损害了体内维生素D的储存[45]．在我们的患者队列中，生活在不同纬度的患者所经历的阳光照射对血液中的25-D水平没有明显的影响，尽管该研究不是为了评估这一问题而设计的，而且通常建议狼疮患者避免紫外线辐射。

其他研究调查了SLE中维生素D缺乏的患病率，并观察了维生素D水平与疾病活动性的潜在相关性。大多数(但不是全部)研究报告了疾病活动与维生素D水平之间的负相关关系[40]，[46]，[47]，[48]．我们的数据证实了25-D与疾病活动之间的负相关。我们已经证明，维生素D缺乏可能是SLE疾病活动性增加的许可条件，因为它对调节DC分化和成熟的IFNα轴有影响。然而，观察到的低维生素D水平可能反映了持续的炎症过程。炎症本身可能促进维生素D分解代谢[49]抗维生素D抗体在SLE患者中也有报道[50]．活动性较强的SLE患者可能接受较高的皮质类固醇剂量。我们的研究没有显示皮质类固醇的使用与血清维生素1,25 - d水平相关。疾病活动量较大的患者可能在阳光照射的环境中待的时间较少。我们的数据并没有解决这个问题，只是证明了不同纬度的患者血清1,25 - d水平没有差异。

鉴于IFNα在疾病发病机制中起着重要作用的有力证据，我们研究了维生素D对dc的影响，特别是对MDDC成熟和激活以及IFNα活性的影响在体外．在研究IFNα对mddc的潜在影响之前，我们确定了循环DC数和表型在活的有机体内不受血清维生素d水平的影响。两组SLE受试者按25-D水平分层，药物剂量和疾病活动性相当，mDCs和pDCs的数量和表面表达标记物不明确。我们其余研究的重点是维生素D对mddc的影响。我们报道狼疮MDDCS表现与正常MDDCS相似，对维生素D的作用有反应体外。维生素D暴露促进不成熟，耐受性DC表型。维生素D还能抑制INF诱导基因的过表达。这些调查显然受到所研究样本数量较少的限制。然而，狼疮和正常对照组数据的一致性强烈表明我们的分析不是偶然发现。

IFNα是一种多效型I型干扰素，与SLE发病机制有关。如前所述，用重组干扰素α治疗恶性肿瘤和慢性肝炎会导致自身抗体产生增加，偶尔也会出现提示SLE的临床特征，这些症状在停止治疗后消失[51]．我们也知道，IFNα有能力在吞噬凋亡自碎屑后调节DC分化，导致耐受中断[38]．含有免疫复合物的核酸也能够通过TLR激活刺激dc，并导致IFNα的产生增加。然后IFNα以一种自分泌的方式驱动mDCs的分化和成熟，从而刺激自身反应性T和B细胞，并进一步形成免疫复合物[52]．许多SLE患者有IFNα活性增加的证据，其表现为IFNα调控基因的过表达(IFN签名)。[28]或血清IFNα水平升高。高IFNα血清水平的家族性聚集以及SLE患者及其家族中IFNα特征的存在提示与IFNα相关的遗传危险因素[53]．最近发现的几个SLE易感基因，包括IRF5、STAT4和PTPN22，与血清IFNα活性的增加有关，而血清IFNα活性与IFNα的产生和下游对IFNα的敏感性有关[54]，[55]，[56]．

维生素D可能通过几种机制调节mddc，包括对核因子-的影响kB (NF -kB)转录因子，RelB。RelB启动子区域包含一个VDR结合位点;VDR在这个位点的结扎减少了RelB的转录[57]．RelB是DC分化和成熟的必要元素，已知可以调节MDDC亚群的发育[58]，[59]，[60]．维生素D还能增加I的细胞水平kBα，可能降低细胞对依赖于NF-的配体的敏感性kB信号通路[61]．此外，维生素D调节TLRs的表达，其信号与IFNα反应协同作用[62]并下调1型白细胞介素-1受体[63]在TLR级联中起刺激作用[64]．最后，维生素D降低许多基因的表达，这些基因对免疫反应的扩增很重要，包括IL-2、IFNα和CD40。

补充维生素D对自身免疫患者有益的机制是基于树突状细胞和免疫系统的其他细胞从惰性底物胆钙化醇和25-D局部产生激素活性1,25 -D的能力。通过上调1α- ohase, dc在培养物中产生1,25 - d浓度，接近用于抑制MDDC成熟和炎症细胞因子分泌的药物浓度[65]，[66]增加1,25 - d的局部DC产生被认为是控制炎症部位自身免疫反应的潜在机制。

这些研究表明，SLE患者的mddc对维生素D表现出正常的反应，导致激活降低。这些研究还表明，维生素D可以抑制暴露于激活血浆的正常和SLE衍生mddc中IFN调控基因的过表达。目前尚不清楚维生素D不足是否增加了基因易感个体发展为完全自身免疫性疾病的可能性，或者维生素D不足是否允许增加免疫激活和疾病活动或两者兼有。卡门等人，研究了不同的患者队列[47]最近诊断的SLE患者血清25-D水平较低，提示维生素D缺乏可能是SLE发展的危险因素。我们目前的研究和其他研究表明，在已确诊的SLE患者中，维生素D水平与疾病活动度呈反比关系。因此，有可能询问血清维生素D水平的增加是否会导致免疫和随后的临床改善，从而最终证明维生素D水平是否有助于疾病活动。然而，很难预测需要补充多少维生素D才能将25-D水平恢复到理想的范围。通过将血清25-D水平与骨折、跌倒和肿瘤疾病相关的荟萃分析，提出了维生素D的新标准。这些研究表明，25-D的最佳水平应高于30 ng/ml，然而，免疫稳态所需的理想水平与最佳骨骼健康所需的水平是否相同尚不清楚。在SLE PBMC中取消IFN签名提供了可测量的维生素D补充反应。正在进行的研究3剂维生素D在SLE中的安全性的I期试验的结果(ClinicalTrials.gov标识符:NCT00710021)和研究维生素D补充对IFN特征影响的II期试验的结果正在等待中。

总之，补充维生素D可能为改善SLE患者的免疫调节提供了一种无毒的方法。我们的研究为SLE中维生素D缺乏的患病率及其与疾病活动性的关系提供了信息。这是第一个证明1,25 - d对SLE MDDC激活和IFN签名转移的抑制作用的研究在体外并表明来自SLE患者的mddc对1,25 - d浓度的变化有反应。这项研究受到实验中样本量小的限制。需要充分有力的研究来确定如何最好地补充SLE患者体内的维生素D储备，并确定这种补充是否与该疾病患者IFNα活性和疾病活性的降低有关。

作者的贡献

设计实验:CA BD JH。执行实验:IBZ AS JH。分析数据:IBZ CA MM AS LMM GSG BD JH。贡献的试剂/材料/分析工具:IBZ CA MM DLK LMM CEC GSG。撰写论文:IBZ CA MM BD JH。

参考文献

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