早产儿慢性肺病患儿支气管肺泡灌洗液中白细胞介素(IL)-1β和IL-6的升高gydF4y2Ba

早产儿慢性肺疾病(CLD)与肺中性粒细胞最初增加伴肺纤维化有关。我们测定了9名发生CLD的婴儿(中位妊娠25周，出生体重820 g)、7名呼吸窘迫综合征(RDS)恢复的婴儿(28周，1110 g)和4名对照组婴儿(38周，2690 g)的支气管肺泡灌洗液中促炎细胞因子IL-1β和IL-6是否升高。与RDS组和对照组相比，CLD组支气管肺泡灌洗液中IL-1β和IL-6蛋白均升高。这两种细胞因子的差异在第10天最显著，当比较患有和没有患有CLD的婴儿的结果时(IL-1β， 4.6gydF4y2Ba与gydF4y2Ba1.1 ng / mL,gydF4y2BapgydF4y2Ba< 0.05;IL-6为9.5gydF4y2Ba与gydF4y2Ba1.5 ng / mL,gydF4y2BapgydF4y2Ba< 0.05)。灌洗细胞中IL-1β、IL-6和IL-8蛋白的免疫细胞化学结果显示，肺泡巨噬细胞包含所有这三种细胞因子，中性粒细胞和偶尔通过灌洗获得的上皮细胞染色较弱。通过对灌洗细胞提取的RNA进行半定量逆转录-聚合酶链反应，确定肺泡巨噬细胞和腔内细胞对IL-6和IL-1升高的贡献。与RDS组相比，CLD患儿灌洗细胞中IL-6 mRNA表达增加。IL-1β和IL-8 mRNA在两组中表达相似。这些结果表明，IL-1β、IL-6和IL-8可能参与了CLD的发病机制，在CLD中，IL-6可能是由空气空间内的细胞产生的。gydF4y2Ba

虽然导致早产儿CLD的确切机制尚不清楚，但越来越多的证据表明肺部炎症是其发病机制的一部分gydF4y2Ba^{（1gydF4y2Ba，gydF4y2Ba2）gydF4y2Ba}．支气管肺泡灌洗液中炎症细胞的积聚和中性粒细胞的持续存在与慢性阻塞性肺疾病的发生有关gydF4y2Ba^{（1gydF4y2Ba，gydF4y2Ba3.gydF4y2Ba，gydF4y2Ba4）gydF4y2Ba}．我们之前的研究发现，从患有CLD的婴儿获得的支气管肺泡灌洗液中，炎症介质IL-8和sICAM增加gydF4y2Ba^{(1）gydF4y2Ba}．其他急性炎症介质，包括血小板激活因子gydF4y2Ba^{（5）gydF4y2Ba}，补体成分gydF4y2Ba^{（2gydF4y2Ba，gydF4y2Ba6)gydF4y2Ba}、混凝产物gydF4y2Ba^{(7）gydF4y2Ba}，也显示出在CLD中增加。gydF4y2Ba

前炎症细胞因子IL-1和IL-6可能在启动CLD中的炎症反应中起作用gydF4y2Ba^{（1gydF4y2Ba，gydF4y2Ba3.gydF4y2Ba，gydF4y2Ba4）gydF4y2Ba}．IL-1和IL-6均与成人急性肺损伤有关gydF4y2Ba^{(8gydF4y2Ba，gydF4y2Ba9）gydF4y2Ba}以及肺损伤的动物模型gydF4y2Ba^{（10gydF4y2Ba，gydF4y2Ba11）gydF4y2Ba}．尽管这两种细胞因子都有促炎活性gydF4y2Ba^{（12gydF4y2Ba，gydF4y2Ba13）gydF4y2Ba}在一些急性肺损伤的动物模型中，它们的存在可能会减轻肺损伤gydF4y2Ba^{(14gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba17）gydF4y2Ba}．gydF4y2Ba

肺中的许多细胞都是IL-1的潜在来源，包括肺泡巨噬细胞、中性粒细胞、上皮细胞和内皮细胞以及成纤维细胞gydF4y2Ba^{（12）gydF4y2Ba}．IL-1由α和β两种多肽组成，其中IL-1β是巨噬细胞的主要产物gydF4y2Ba^{（18)gydF4y2Ba}．IL-1β可能在肺损伤中发挥作用，其广泛的生物活性包括诱导急性期反应、启动中性粒细胞、增加粘附分子的表达、激活内皮细胞和激活淋巴细胞gydF4y2Ba^{（12）gydF4y2Ba}．gydF4y2Ba

与IL-1一样，IL-6具有广泛的促炎活性，包括诱导急性期反应，激活淋巴细胞，特别是B细胞，随后合成Ig，并与IL-1一起导致IL-2的合成和释放(在gydF4y2Ba^{Ref。13gydF4y2Ba})．它作为一种21-28 kD的糖蛋白被多种细胞释放，包括肺泡巨噬细胞、中性粒细胞、上皮细胞和内皮细胞以及成纤维细胞。gydF4y2Ba

除了IL-1和IL-6外，IL-8可能通过刺激中性粒细胞迁移到肺中参与了CLD的发病机制。我们之前的观察表明，与没有CLD的婴儿相比，患有CLD的婴儿的支气管肺泡灌洗液中IL-8增加gydF4y2Ba^{(1）gydF4y2Ba}．gydF4y2Ba

本研究验证了患CLD婴儿的支气管肺泡灌洗液中IL-1β和IL-6蛋白与未患CLD婴儿相比增加的假设。此外，我们还确定了通过支气管肺泡灌洗获得的哪些细胞可以合成IL-1β、IL-6和IL-8，以及在CLD和RDS患儿中，通过灌洗获得的细胞对IL-1β、IL-6和IL-8的产生的贡献是否不同。gydF4y2Ba

病人组gydF4y2Ba．该研究招募了哈默史密斯医院新生儿重症监护室收治的通气婴儿。研究人员研究了三组婴儿:gydF4y2Ba1gydF4y2Ba) CLD组，接受机械通气后28 d时氧依赖的婴儿gydF4y2Ba^{(19)gydF4y2Ba}；gydF4y2Ba2gydF4y2BaRDS组采用机械通气后空气喂养至28 d;而且gydF4y2Ba3.gydF4y2Ba)对照组，因非呼吸原因(包括手术和肌肉疾病)接受机械通气并在28 d龄前在空气中喂养的婴儿。母亲感染或长时间胎膜破裂(超过48小时)的婴儿被排除在外，出生时血培养阳性的败血症婴儿也被排除在外。获得父母的知情同意，研究得到医院伦理委员会的批准。gydF4y2Ba

支气管肺泡灌洗gydF4y2Ba．支气管肺泡灌洗在临床指征的气管抽吸时进行，方法如上所述gydF4y2Ba^{(1）gydF4y2Ba}．简单地说，婴儿仰卧，头转向左侧，FG 5导管通过气管内管的末端舷窗推进，直到感觉到阻力，从而允许婴儿部分通气。两等份的1ml /kg(最大2ml)生理盐水被灌注，在2 - 3个呼吸机循环后，对导管施加50mmhg的吸入压力，返回的支气管肺泡灌洗液(以下也称为灌洗液)收集在吸入“陷阱”中。补充氧气以维持氧饱和度，氧饱和度由血氧计测量在90-95%。婴儿每周洗两次，持续3周或直到拔管，以较早发生者为准。用离心(500 × 500)分离回灌洗液中的上清gydF4y2BaggydF4y2Ba保存在-70°C，直到进一步使用。在含有4 M异硫氰酸胍(BDH Ltd.， Poole, UK)、25 mM柠檬酸钠(pH值7)、17 mM钠的异硫氰酸胍溶液中溶解生成的颗粒中的细胞，并通过悬浮抑制RNasegydF4y2BaNgydF4y2Ba-月桂肌氨酸，0.14 M -巯基乙醇(西格玛化学公司，圣路易斯，密苏里州)，并储存在-70°C，直到总RNA提取。gydF4y2Ba

IL-1和IL-6的估计gydF4y2Ba．IL-1β和IL-6浓度由市售ELISA试剂盒(目录号DLB50和D6050, R & D Systems, Minneapolis, MN)估计。制造商报告的两种ELISA试剂盒的灵敏度为3 pg/mL。测定一式两份，测定者(S.K.)不知道样品的来源。样品间和样品内的检测结果均在5%以内。gydF4y2Ba

上皮衬液的估计gydF4y2Ba．在Technicon RA-XT任意分析仪(Technicon Instruments Corp.， Basingstoke, UK)中使用脲酶法测定血清尿素浓度。在相同的分析仪上以更高的灵敏度测量灌洗液中的尿素浓度，其线性动态范围达到0.04-6.0 mmol/L。用尿素稀释法估计上皮内膜液:上皮内膜液体积(每mL灌洗液)=灌洗液尿素/血清尿素gydF4y2Ba^{(1）gydF4y2Ba}．gydF4y2Ba

免疫细胞化学gydF4y2Ba．使用一些支气管肺泡灌洗液样本，通过400 rpm、3 min离心(山东3公司，山东产品有限公司，柴郡，英国)，并固定在甲醇中，产生几个细胞旋。用3%双氧水在甲醇中淬灭内源过氧化物酶活性。用PBS (pH值7.4)洗涤后，用PBS稀释的1:10正常猪血清(用于IL-1β)或兔血清(用于IL-6和IL-8) (Dako Ltd.， Bucks, UK)阻断非特异性蛋白结合。所使用的一抗为兔抗人IL-1β (Genzyme Ltd.)、山羊抗人IL-6(研发系统公司)和山羊抗人IL-8(研发系统公司)。将细胞旋在最佳抗体浓度(IL-1β稀释1:100,IL-6稀释1:100,IL-8稀释1:50)的室温下孵育1小时(IL-1β)，过夜16小时(IL-6和IL-8)。抗体用1:20的猪血清:PBS (IL-1β)或兔血清:PBS (IL-6和IL-8)稀释。用PBS洗涤后，细胞旋用生物素化的山羊抗兔(用于IL-1β)或兔子抗山羊(用于IL-6和IL-8)抗体(Dako Ltd.)孵育30分钟，用PBS洗涤10分钟，并用链孢菌素生物素/山葵过氧化物酶复合物(Dako Ltd.)孵育。PBS进一步洗涤后，细胞旋暴露于3,3 ' -二氨基联苯胺(Dako Ltd.)，用Mayer's苏木精(Sigma Chemical Co.)反染色后观察细胞因子。在对照组中，通过省略一抗或使用纯化的正常兔或猪血清(Dako Ltd.)来确定特异性。gydF4y2Ba

总RNA和RT的分离gydF4y2Ba．如前所述，使用Chomczynski和Sacchi的酸- gtc -苯酚-氯仿方法的改良提取总RNAgydF4y2Ba^{（20gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba22）gydF4y2Ba}，立即用于第一链cDNA合成，最终反应体积为20 μL，包括5 ×第一链缓冲液(50 mM Tris-HCl, pH 8.3, 75 mM KCl, 3 mM MgCl)gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba)， 10 mM DTT, 0.1 mM随机六核苷酸引物，1 mM脱氧核糖核苷(dATP, dCTP, dGTP, dTTP)， 25 U RNasin(RNase inhibitor)，和200 U Superscript Plus逆转录酶(Life Technologies, Inc.， Paisley, Scotland)。反应在37°C下进行90分钟，加热到95°C 3分钟并在冰上快速冷却。样品用不含rnase的水1:10稀释，4°C保存，待进一步使用。gydF4y2Ba

聚合酶链反应gydF4y2Ba．对合成的与管家基因β-actin相关的IL-1β、IL-6和IL-8的cDNA进行半定量PCRgydF4y2Ba^{(23）gydF4y2Ba}．所使用的寡核苷酸引物见gydF4y2Ba表1gydF4y2Ba．每个引物都设计为跨外显子，以防止基因组DNA扩增gydF4y2Ba^{(23gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba25)gydF4y2Ba}．反应混合物为10 × PCR缓冲液(100 mM Tris-HCl, pH 8.3, 500 mM KCl, 0.01%明胶)，上下游各0.7 μM的寡核苷酸引物(见gydF4y2Ba表1gydF4y2Ba)， 1 mM MgClgydF4y2Ba_2gydF4y2Ba， 250 μM脱氧核糖核苷(dATP, dCTP, dGTP, dTTP)， 1.5 U ofgydF4y2Ba水生栖热菌gydF4y2BaDNA聚合酶I, 10 μCi/mL of 3000 Ci/mmolα-[gydF4y2Ba^32gydF4y2BaP]dCTP, cDNA (5 μL稀释样品中IL-1β和IL-6;2.5 μL (IL-8和β-actin)和RNase-free过滤蒸馏水，最终体积为100 μL。反应混合物被矿物油覆盖(Sigma Chemical Co.)，并在帕金-埃尔默DNA热循环仪上进行PCR。确定实现扩增所需的最佳循环数的初始实验表明，需要33个循环(数据未显示)。对于支气管肺泡灌洗样品，每个样品进行33个循环，PCR序列为94℃变性1 min，引物55℃退火2 min, 72℃延伸2 min。最后步骤为72℃延伸10 min，冷却至4℃终止反应。gydF4y2Ba

PCR完成后，加入100 μL氯仿，旋流，短暂离心，反转水层和有机层。取40微升水相，用240 μL 5 M乙酸铵和740 μL无水乙醇(<-20℃1 h)沉淀，涡旋，14000 ×离心gydF4y2BaggydF4y2Ba20分钟以去除未结合的α-[gydF4y2Ba^32gydF4y2BaP] dCTP。在20 μL无rnase水中重悬，用含1.5 μg/mL溴化乙锭的2%低熔点琼脂糖凝胶在1× tris -硼酸- edta缓冲液中电泳分离扩增产物。对凝胶进行拍照，并根据1kb的阶梯估计放大产物的大小。将扩增产物从凝胶中切割出来，转移到闪烁瓶中，并加入0.8 mL水。产物在65°C下加热15 min，然后加入Ecoscint，随后计数gydF4y2Ba^32gydF4y2Ba闪烁计数器中的P活性。IL-1β、IL-6和IL-8的计数与β-肌动蛋白的计数相关，而β-肌动蛋白总是在每个样品中同时扩增。gydF4y2Ba

统计数据gydF4y2Ba．IL-1β和IL-6的表达以纳克/mL上皮衬液为单位。RT-PCR结果以闪烁计数的比值表示gydF4y2Ba^32gydF4y2BaP表示感兴趣的细胞因子，P表示β-肌动蛋白gydF4y2Ba^{(23）gydF4y2Ba}．所有值均以中位数和非参数Mann Whitney表示gydF4y2BaUgydF4y2Ba试验用于比较患有和不患有CLD的婴儿。结果被认为是显著的如果gydF4y2BapgydF4y2Ba≤0.05。gydF4y2Ba

病人的特点gydF4y2Ba．20名需要机械通气的婴儿被纳入研究。在16名有呼吸衰竭的婴儿中，9名(5男，4女)后来发展为慢性呼吸衰竭，7名(2男，5女)由呼吸道呼吸衰竭痊愈(gydF4y2Ba表2gydF4y2Ba)．4名对照组婴儿(2男2女)因非呼吸原因接受机械通气，包括1例磁共振成像，2例先天性肌肉营养不良，1例围手术期胃分裂。在产前接受地塞米松治疗的母亲中，CLD组9人中有6人，RDS组7人中有3人，对照组4人中有1人。当比较两组之间的胎龄和出生体重时，观察到CLD组和RDS组之间的差异gydF4y2BapgydF4y2Ba< 0.01，出生体重gydF4y2BapgydF4y2BaCLD组与对照组(妊娠期)差异< 0.05)gydF4y2BapgydF4y2Ba< 0.01，出生体重gydF4y2BapgydF4y2BaRDS组与对照组(妊娠期)比较差异< 0.01)gydF4y2BapgydF4y2Ba< 0.05，出生体重gydF4y2BapgydF4y2Ba< 0.05)。这些患者的IL-8、sICAM、中性粒细胞和弹性蛋白酶数据之前已经报道过gydF4y2Ba^{(1）gydF4y2Ba}．gydF4y2Ba

il - 1gydF4y2BaβgydF4y2Ba灌洗液中IL-6蛋白浓度gydF4y2Ba．CLD组大鼠第1天时灌洗液中IL-1β浓度未检测到，但第10天时IL-1β浓度最高可达4.6 ng/mLgydF4y2Ba(图1)gydF4y2Ba．在d 21时，IL-1β浓度下降至无法检测的浓度。RDS组在出生后10 d支气管肺泡灌洗液中IL-1β含量低于0.2 ng/mL。在对照组婴儿中，IL-1β在第1天为0.2 ng/mL，在第10天增加到1.1 ng/mL，然后在第17天下降到无法检测到的浓度。gydF4y2Ba

CLD组灌洗液中IL-6浓度从第1天的2.2 ng/mL增加到第10天的9.5 ng/mL，到第21天下降到2.3 ng/mLgydF4y2Ba(图1 b)gydF4y2Ba．在RDS婴儿中，IL-6在第1天的初始浓度为2.8 ng/mL，第4天增加到5.1 ng/mL，到第10天下降到1.5 ng/mL。相比之下，对照组婴儿第1天灌洗液IL-6为4.7 ng/mL，但此后直到17 d都低于2.5 ng/mL。gydF4y2Ba

由于个体间反应的时间过程不同，因此在发生CLD的婴儿与未发生CLD的婴儿10 d时比较了支气管肺泡灌洗液中IL-1β和IL-6的浓度(gydF4y2Ba即。gydF4y2BaRDS和对照组婴儿)。第10天，IL-1β (gydF4y2BapgydF4y2Ba< 0.01)和IL-6(gydF4y2BapgydF4y2Ba与未患慢性阻塞性睡眠障碍的婴儿相比，患有慢性阻塞性睡眠障碍的婴儿的灌洗液含量< 0.01)gydF4y2Ba(图2)gydF4y2Ba．在所有患者组中，IL-1β或IL-6的结果与产前给予母亲地塞米松有关。gydF4y2Ba

IL-1的检测gydF4y2BaβgydF4y2BaIL-6和IL-8gydF4y2Ba．采用免疫细胞化学方法检测通气早产儿支气管肺泡灌洗液细胞中IL-1β、IL-6、IL-8的含量gydF4y2Ba(图3)gydF4y2Ba．所有三种细胞因子的染色在肺泡巨噬细胞中最为强烈，但在中性粒细胞和偶尔在灌洗过程中获得的脱落上皮细胞中染色程度较低。在忽略了相关细胞因子的一抗的细胞中，没有看到这种染色gydF4y2Ba(图3 d)gydF4y2Ba．从对照组婴儿获得的IL-1β、IL-6或IL-8细胞染色明显减少，在未受刺激的外周血单核细胞中未观察到染色(数据未显示)。gydF4y2Ba

RT-PCR检测IL-1、IL-6、IL-8 mRNA表达gydF4y2Ba．RT-PCR检测CLD患者支气管肺泡灌洗液细胞中β-actin、IL-1β、IL-6、IL-8 mRNA的表达gydF4y2Ba(图4)gydF4y2Ba．扩增产物的适当波段大小分别为315、541、610和255 bp。gydF4y2Ba

由于对照组婴儿通过支气管肺泡灌洗获得的细胞非常少，RT-PCR仅适用于出生后14 d的CLD和RDS组。CLD患儿支气管肺泡灌洗获得的细胞经PCR扩增后IL-1β/β-actin的比值在第1天为0.6,RDS组为0.2gydF4y2Ba(图5)gydF4y2Ba．此后，两组的比值相似，约为0.4。gydF4y2Ba

相比之下，对于IL-6 mRNA，通过RT-PCR扩增后，CLD组IL-6/β-actin比值在第1天为0.17，在第10天上升到0.65，在第14天下降到0.28gydF4y2Ba(图5)gydF4y2Ba．在RDS婴儿中，这一比例在出生后10天内小于0.2。gydF4y2Ba

因为先前研究表明，与未患CLD的婴儿相比，患有CLD的婴儿的支气管肺泡灌洗液中IL-8蛋白增加gydF4y2Ba^{(1）gydF4y2Ba}， RT-PCR检测灌洗细胞中IL-8 mRNA的表达。在CLD组和RDS组中观察到IL-8与β-actin的比例相似gydF4y2Ba(图5)gydF4y2Ba．在CLD组，IL-8/β-actin比值从第1天的0.68上升到第4天的1.84，然后在第14天下降到0.77。在RDS婴儿中观察到一个平行的模式，IL-8/β-肌动蛋白的比值在第1天为0.81，在第4天增加到1.67，然后在第10天下降到0.93。gydF4y2Ba

结果还表示为gydF4y2Ba^32gydF4y2Ba每百万灌洗细胞RT-PCR扩增后的P闪烁计数反映IL-1β、IL-6和IL-8 mRNA的表达。结果与图中所示的结果非常相似gydF4y2Ba图5gydF4y2Ba(数据未显示)。gydF4y2Ba

本研究发现，与未患CLD的婴儿相比，患有CLD的婴儿支气管肺泡灌洗液中IL-1β和IL-6的浓度增加。IL-1β和IL-6的这种差异在发生CLD的婴儿与未发展为CLD的婴儿进行比较时，在10 d时最为明显。此外，通过支气管肺泡灌洗获得的细胞，特别是肺泡巨噬细胞，被发现含有IL-1β， IL-6和IL-8。然而，通过半定量RT-PCR，从CLD患儿支气管肺泡灌洗获得的细胞中，IL-6 mRNA的丰度高于RDS患儿细胞，而IL-1β和IL-8 mRNA的丰度在CLD组和RDS组中相似。这表明在慢性阻塞性肺疾病中，IL-6的增加可能来源于气道腔内和肺泡细胞，而IL-1β和IL-8的增加则是由于支气管肺泡灌洗未获得或恢复的细胞过度分泌所致。免疫细胞化学通过证明上皮细胞中所有三种细胞因子的存在，偶尔通过支气管肺泡灌洗获得，支持了这一假设，即非腔内细胞可能有助于在灌洗液中检测到细胞因子。虽然我们的小组之前已经证明了IL-6在来自长时间胎膜破裂母亲所生婴儿的支气管肺泡灌洗液中增加gydF4y2Ba^{（26)gydF4y2Ba}但在本研究中并非如此，因为在出生时怀疑或确诊感染的婴儿或其母亲被排除在外。因此，目前的研究表明，感染以外的因素导致CLD婴儿IL-6的产生增加。gydF4y2Ba

灌洗液中IL-1β的升高与IL-6相似。CLD婴儿的这种增加在10 d龄时也是最大的。已知多种支气管肺泡灌洗未采样的细胞可合成和释放IL-1β，例如，上皮细胞可能有助于CLD婴儿灌洗液中检测到的IL-1β的整体释放gydF4y2Ba^{(27）gydF4y2Ba}．gydF4y2Ba

我们之前报道了从患有CLD的婴儿获得的支气管肺泡灌洗液中IL-8的增加gydF4y2Ba^{(1）gydF4y2Ba}．然而，与IL-1β一样，IL-8在灌洗获得的细胞中检测到的程度在CLD和RDS患者中相似。这再次表明，CLD患儿灌洗液中IL-8蛋白含量增加gydF4y2Ba^{(1）gydF4y2Ba}来源于未通过灌洗获得的细胞。可以推测，上皮细胞有助于灌洗液中检测到的IL-8的整体释放。IL-1β、高氧和细菌内毒素都是IL-8的有效诱导物gydF4y2Ba^{（28gydF4y2Ba，gydF4y2Ba29)gydF4y2Ba}，并且每种都可能在诱导灌洗液中检测到的IL-8的合成和释放中起作用。gydF4y2Ba

目前的观察结果与我们之前的观察结果相结合，表明从患有CLD的婴儿中获得的灌洗液中IL-8、sICAM和中性粒细胞增加，这表明已知的CLD危险因素中的一个或组合导致炎症反应的启动。我们可以推测，这些危险因素提供的触发因素导致IL-1和IL-8由非气道肺细胞(可能是上皮细胞)合成和释放，IL-6由肺泡或气道细胞，特别是肺泡巨噬细胞产生。IL-1也是自身以及IL-6和IL-8的有效诱导剂，导致所有三种细胞因子的进一步增加。此外，已知IL-1可以激活内皮细胞并增加粘附分子的表达，如ICAM，我们之前发现ICAM的可溶性形式在患有CLD的婴儿的灌洗液中增加gydF4y2Ba^{(1）gydF4y2Ba}．IL-8是一种强有力的中性粒细胞趋化因子，可能有助于中性粒细胞流入肺gydF4y2Ba^{(28)gydF4y2Ba}．肺结构的损伤可以通过这些中性粒细胞释放蛋白水解酶(包括弹性蛋白酶)和氧自由基来解释。10 ~ 21日龄时，支气管肺泡灌洗液中IL-1β和IL-6均迅速有效降低gydF4y2Ba(图1)gydF4y2Ba．导致肺部炎症快速“消退”的机制目前尚不清楚，但可能包括我们小组之前在新生儿肺部观察到的细胞凋亡gydF4y2Ba^{(30）gydF4y2Ba}．这是可能的，尽管推测，肺纤维化紧随肺部炎症的解决。最近的临床研究支持了这一假设的临床意义，即如果在出生后早期进行治疗，减少炎症的干预更有可能预防长期损害gydF4y2Ba^{(31)gydF4y2Ba}．gydF4y2Ba

像目前这样的研究都与技术困难有关。对照组和RDS婴儿不可避免地比CLD婴儿更成熟，病情好转的婴儿拔管并离开研究，极少数早产儿因非呼吸原因进行通气作为对照组。研究10 d以上未发展为CLD的婴儿将是有用的。然而，支气管肺泡灌洗最近拔管和其他不通气的婴儿是不道德的和潜在的危险。由于每个婴儿有自己的介质表达的时间过程，这些炎症介质的浓度有很大的差异。因此，我们将重点放在10 d的婴儿身上，以确定患有和未患有慢性肝病的婴儿之间是否存在差异。此外，对于表达结果的合适分母也存在争议。尽管存在这些困难，但这项研究提供了证据，证明炎症介质，即IL-1β和IL-6在患有CLD的婴儿中增加。这支持了肺部炎症在CLD发病机制中起重要作用的观点。gydF4y2Ba

CLD:gydF4y2Ba

早产儿慢性肺病gydF4y2Ba

聚合酶链反应:gydF4y2Ba

聚合酶链反应gydF4y2Ba

RDS:gydF4y2Ba

呼吸窘迫综合征gydF4y2Ba

RT:gydF4y2Ba

反转录gydF4y2Ba

ICAM:gydF4y2Ba

细胞间粘附分子-1gydF4y2Ba

描述:gydF4y2Ba

可溶性ICAMgydF4y2Ba

作者感谢汉默史密斯医院新生儿病房的家长和护士以及化学病理科的Jeremy Beecham对支气管肺泡灌洗液中尿素的测量。gydF4y2Ba

作者指出gydF4y2Ba

1. S Kotecha:由医学研究委员会的培训奖学金支持。gydF4y2Ba

从属关系gydF4y2Ba

1. 英国皇家研究生医学院儿科系，伦敦W12 0NNgydF4y2Ba

   S Kotecha, A Wangoo & M SilvermangydF4y2Ba

2. 圣玛丽医院医学院呼吸内科，伦敦，W2 1PG，英国gydF4y2Ba

   S Kotecha, L Wilson & R J ShawgydF4y2Ba

转载及权限gydF4y2Ba