不同HLA-DRB1等位基因分布在不同的结节病临床亚组患者

背景

强大的MHC基因影响的二类地区据报道在结节病,然而在很多研究中得到不同的结果。这可能是由于实际不同民族之间的差异,小样本大小,或由于缺乏准确的临床亚组。

对象和方法

在这项研究中我们HLA输入大量的病人人口(n = 754)招募了从一个单一的中心。患者又分成洛夫格伦综合征(LS) (n = 302)和那些没有(non-Lofgren) (n = 452)、和他们中的大多数是临床上分为那些在两年内恢复(解决)和疾病两年多来的迹象(non-resolving)。PCR用于测定HLA-DRB1等位基因。瑞典健康献血者(n = 1366)作为控制。

结果

有一个戏剧性的差异在LS HLA等位基因的分布与构造患者(p = 4×10^-36年)。最值得注意的是,DRB1 * 01, DRB1 * 03和DRB1 * 14,显然在LS和构造不同的病人。与疾病,DRB1 * 07, DRB1 * 14和DRB1 * 15一般相关,而DRB1 * 01和DRB1 * 03防止,non-resolving疾病。有趣的是,临床的影响DRB1 * 03(预后良好)主导的DRB1 * 15(不好)。

结论

我们发现几个LS和构造病人之间的显著差异,因此我们建议在结节病遗传关联研究应该包括一个仔细的临床描述和亚群体的病人,为了揭示真实的遗传关联。这可能是特别准确的异构构造组的患者。

结节病是一种原因不明的炎性疾病。遗传的影响已经被报告显示建议和临床表现不同民族之间不同的易感性1]。除了遗传连锁分析指出一个重要联系的主要组织相容性复合体(MHC)地区(2),但也有小山峰其他染色体的特定区域(3]。最近出版的全基因组协会的一项研究描述了一个与膜联蛋白A11基因编码的蛋白质与几个重要的功能,包括细胞凋亡(4]。

结节病因此受到众多的基因,然而最强协会型人类白血球抗原区域内的描述。显然一些特定HLA等位基因与疾病风险,在少数情况下也与疾病表型关联如葡萄膜炎(5)已被描述。HLA-DRB1 * 03 / DQB1 * 02单体型一再伴随着洛夫格伦综合征(6- - - - - -12)即一种截然不同的结节病的特点是急性发作与双侧肺门淋巴结病(BHL)和在某些情况下实质浸润,结节性红斑(EN)和/或双边踝关节炎或不同periarticular炎症,通常热(13]。我们自己的集团最近公布强劲DRB1 * 03等位基因影响的疾病洛夫格伦综合征患者,与完全恢复在两年内在几乎所有DRB1 * 03阳性患者,但只在大约一半的DRB1 * 03 -患者(14]。洛夫格伦综合征患者可能构成自身的疾病实体,和最近的一份报告在特定的协会之间CCR2单体型和洛夫格伦综合征支持这一假设15]。

然而,由于遗传差异,它可能很难比较的重要性具体HLA-DR等位基因不同民族之间的疾病。HLA-DRB1 * 03等位基因例如是相当常见的例如斯堪的纳维亚在日本人,但非常罕见,常见的协会之间的白种人DRB1 * 03和急性疾病是罕见的在日本16]。大多数以前的研究并没有报道不同的病人临床亚群体,但在我们的地区,例如洛夫格伦综合征患者占所有患者的35 - 40%,他们会因此大大有助于任何遗传协会。因此在本研究中,我们又我们的病人到那些洛夫格伦综合征(LS),和那些没有洛夫格伦综合征(构造),并分析了不同HLA-DRB1等位基因之间的相关性和疾病以及疾病的风险。我们研究了一大群结节病病人从一个单一的中心(在瑞典首都斯德哥尔摩的卡罗林斯卡大学医院)。

研究对象

共754名患者包括在这项研究中,452年列为non-Lofgren综合征(构造)和302年洛夫格伦综合征(LS)患者(se表1人口统计)。

所有患者指我们通过我们的检查和调查,做出初步诊断,进一步管理根据我们的例程在门诊肺部门卡罗林斯卡大学医院,瑞典索尔纳。绝大多数患者被报告的作者之一(乙醯),实际上从1994年开始,只有在少数情况下通过记录数据收集。胸部放射学评估报告的作者之一(kc),谁是subspecialized胸部放射学与间质性肺疾病的长期经验。患者被诊断为结节病通过典型的临床表现,发现在支气管镜检查和支气管肺泡灌洗(BAL)包括一个落下帷幕细胞CD4 / CD8比值升高,和积极的活组织检查,使用标准概述世界结节病和其他协会的肉芽肿性疾病(WASOG) [17]。

通过临床描述,患者分为那些洛夫格伦综合征,即与双侧肺门淋巴结病急性发作(BHL)和在某些情况下实质浸润,结节性红斑(EN)和/或双边踝关节炎或不同periarticular炎症,通常热(n = 302) (18]。其余组患者分为“non-Lofgren”(n = 452)。此外,724年的病人随访至少两年,分为那些解决或non-resolving疾病。解决疾病在患者分类正常化射线照相法和肺肺功能,没有症状,和正常的生化参数。non-resolved疾病患者定义持久性或进展的迹象胸部影像学变化或恶化的肺功能测试,与临床疾病活动的迹象和症状(通常极度疲劳,咳嗽,呼吸困难,或罹患肺外恶性器官而造成患者出现症状的结节病所致)。因此许多参数进行评估,以正确分类的病人。non-resolving集团可能包括患者慢慢解决,长期稳定,或慢性进行性疾病。整个集团的重视和进一步的亚群体纳入未来的研究。

对照组由1.366连续收集斯堪的纳维亚献血者,815名女性和551男性,斯德哥尔摩的所有居民。

包括所有科目给他们的知情同意参与这项研究,这是当地伦理委员会批准的卡罗琳斯卡大学医院。

制备DNA和HLA打字

所有患者HLA-typed。样品从全血中提取基因组DNA, HLA-DRB1等位基因被确定在每个病人使用PCR-SSP技术[19]

统计分析

每个等位基因运输的影响在每个分组人口评估逻辑回归。DRB1 * 13被用作基线比较器因为这等位基因在所有亚种群的情况下大约相同的频率和控制(见表1)。最常见的等位基因被加入到一个X,因此包括DRB1 * 09、DRB1 * 10, DRB1 * 12和DRB1 * 16。应该注意的是,在逻辑回归框架调整优势比获得的其他等位基因包括在模型中。修正多个测试执行所有的测试simulaneously使用错误发现率(罗斯福)的限制,在罗斯福不到5%被认为是可接受的20.]。

运输等位基因分布的差异在不同的群体评估Χ²测试。非参数曼惠特尼测试是用来比较年龄患者亚组。

HLA-DRB1等位基因分布频率被发现明显不同患者的LS与构造患者(p = 4×10^-36年)。因此,我们分析了DRB1等位基因用于在整个群结节病的病人,还分别在LS和构造的病人。在这些患者团体,我们另外分类患者解决,没有疾病在发病后两年的迹象,或non-resolving,两年疾病的迹象。我们的数据与一大群瑞典健康对照组(n = 1366)。

所有病人的等位基因载波频率和控制如表所示2。可以看到,DRB1 * 13相当恒定的频率在所有病人群体,因此选择作为基准比较器。我们的大多数重要的发现来自DRB1等位基因,经常发生。因此DRB1 * 01, DRB1 * 03和DRB1 * 15通常在22日24和健康对照组的30%,分别,因此大量的病人组不同频率将大量个人的重要性。

所有的病人(n = 754)

在完整的组患者,最强的协会发现HLA-DRB1 * 03, OR为1.91,p = 1×10⁶。还DRB1 * 14(或1.79,p = 0.017)与疾病有关,与类似的趋势DRB1 * 15(或1.32,p = 0.067)。相比之下,DRB1 * 01防止疾病(或0.61,p = 0.003),与类似的趋势DRB1 * 04(或0.77,p = 0.086)(表3)。

解决和非解决疾病之间等位基因的分布明显不同(p = 3×10^-39年),因此这两个组分别进行了分析。non-resolving患者(n = 399),最强大的协会发现DRB1 * 01和DRB1 * 03,明确防止non-resolving疾病(或0.41,p = 3×10⁵和0.45,p = 1×10⁴分别)。强阳性协会在这里发现DRB1 * 14(或2.14,p = 0.005)和DRB1 * 15(或1.55,p = 0.011)。

解决疾病患者中,我们注意到一个极强的正相关与DRB1 * 03(或5.42,p = 3×10^-22年),符合我们的最近的一项研究[14]。相比之下,我们发现DRB1 * 07防止解决疾病在所有患者(或0.44,p = 0.009)。

Non-Lofgren的病人(n = 452)

在这组患者中,HLA-DRB1 * 14(或1.87,p = 0.021)与疾病有关,与类似的趋势DRB1 * 11(或1.48,p = 0.067)和DRB1 * 15(或1.35,p = 0.086)(表4)。相比之下,HLA-DRB1 * 01(或0.39,p = 5×10⁶)和DRB1 * 03(或0.63,p = 0.017)防止疾病(表3)。特别是,HLA-DRB1 * 01(或0.34,p = 5×10⁶)和HLA-DRB1 * 03(或0.47,p = 6×10⁴)防止non-resolving疾病,包括non-Lofgrens病人的78%。HLA-DRB1 * 14(或2.08,p = 0.010)相反non-resolving疾病的危险因素,具有相似的趋势HLA-DRB1 * 11(或1.51,p = 0.085)和HLA-DRB1 * 15(或1.42,p = 0.067)。这些分层组关于等位基因分布明显不同(p = 0.002)。

洛夫格伦综合征患者(n = 302)

HLA-DRB1 * 03与洛夫格伦综合征密切相关(或6.71,p = 2×10^-24年),特别是在解决形式的疾病(或11.42,p = 8×10^-27年)(表5)。DRB1 * 03也倾向于防止一种non-resolving洛夫格伦综合征(或0.20,p = 0.086)。DRB1 * 15是一个风险因素non-resolving洛夫格伦综合征患者的疾病(或3.02,p = 0.016)。与这些不同的关联类比,等位基因分布在两个分层组明显不同(p = 3.8×10^-10年)。

与大多数以前的研究,为了更好地揭示基因与结节病协会,我们这里又病人到那些LS,与不同的临床表现,和那些没有这种综合症。我们发现这两个病人群体的等位基因频率载波显然是相当不同的。未来的研究在结节病基因协会应该相应地考虑LS患者在研究小组的数量,并且最好LS病人组分别进行调查。所有患者在当前对象代表一个大同质性结节病病人来自一个单一的中心在斯德哥尔摩,瑞典。绝大多数情况下被认为和临床评估报告的作者之一。本研究中一个重要的观察是,超过半数的病人non-resolving疾病发展。在这组患者中,许多将开发一种慢性炎症疾病有时终身需要注意的卫生保健系统。虽然我们不能排除这样一种可能性,即病人队列从我们临床中心有些偏见,可能包括异常大量的患者更严重的疾病,在这项研究中人口结节病似乎是一种疾病,比此前认为的更加深刻的负面健康影响。在其他民族这可能更加明显。

在整个病人组,尤其是DRB1 * 03,而且DRB1 * 14在某种程度上DRB1 * 15风险因素在某种程度上,而DRB1 * 01和DRB1 * 04而防止疾病。有趣的是,HLA-DRB1等位基因和疾病之间的联系是在一些情况下明显不同的两个病人群体;而DRB1 * 01强烈non-Lofgren防止疾病的患者中,我们没有发现影响洛夫格伦综合征。non-Lofgren DRB1 * 03明显防止疾病,但相比之下强烈洛夫格伦综合征的风险增加。DRB1 * 11倾向于增加non-Lofgren病的风险,但没有对洛夫格伦综合征等的影响。结节病的风险增加相关的DRB1 * 14或DRB1 * 15似乎也限于non-Lofgren病。总的说来,这些研究结果清楚地表明患者表现型的重要性,以揭示真实的基因对结节病。比较的数据研究HLA-associations已经进行患者群体包括各种混合患者表型可能给出错误的结果。需要考虑到患者表型可能部分解释之前的异构结果HLA-associations结节病,也可能过于小样本大小。

对面的有差异的,在某些情况下基因协会这里描述的一些DRB1等位基因与构造和LS病人符合LS是一种截然不同的疾病实体的概念,进一步找到支持的一个变种的CCR2最近描述与LS病人独立DRB1 * 03 (15]然而也有一些相似之处构造和LS病人,特别是有关的DRB1等位基因的影响疾病过程。DRB1 * 03防止non-resolving疾病而DRB1 * 07弱non-resolving疾病的风险增加两个病人群体。DB1和DRB1 * 14 * 15倾向于增加non-resolving疾病的风险在两个子组,尽管有更明显的影响DRB1 * 14构造和DRB1 * 15 LS病人。类似联想可能反映了当前特定抗原的能力,都与一个更长期的疾病,或者他们可能反映了联系其他基因重要免疫反应和典型non-caseating肉芽肿的形成,并持续存在这样的肉芽肿,这反过来又可能导致更长的疾病。

我们的研究结果证实了一些以前的观测数量较小的患者。研究三群结节病病人从英国,波兰,捷克共和国,DRB1 * 01一直发现防止结节病(21]。此外,DRB1 * 04在英国被发现保护病人,从瑞典是与之前的报道相一致9),日本(22)和意大利(8]。DRB1 * 01的保护特性和DRB1 * 04被认为是造成这些DRB1等位基因的存在小疏水残基位置11日的内口袋antigen-binding槽(口袋6)和影响抗原肽的绑定21]。因此我们目前的研究证实的保护作用在结节病尤其DRB1 * 01,然而只有在non-Lofgren综合征患者。有趣的是,DRB1 * 01也已被证明能够防止多发性硬化症(MS),即另一种免疫介导的炎症性疾病(23]。

其他几个HLA DRB1等位基因已被证明是风险因素。在先前发表的最大HLA-survey,从“结节病病例控制病原学的研究”(访问)研究包括474名HLA-typed患者,据报道,尤其是DRB1 * 11,但也DRB1 * 12和DRB1 * 15是结节病的危险因素24]。我们也和其他人之前报道结节病的风险增加相关的DRB1 * 03, DRB1 * 14和DRB1 * 15 (9,21,25]。因此,通过大型HLA关联与结节病的模式出现。

此外,特定HLA等位基因也可以联想到疾病。先前的报告显示特别强烈HLA-DRB1 * 03和洛夫格伦综合征之间的联系,和良好的预后(6- - - - - -12,14]。还HLA-DRB1 * 1501(强烈与DQB1 * 0602)曾被关联到一个慢性结节病和严重的肺结节病(9,11,12,26]。

HLA二类与疾病关联的原因还不清楚,但可能由于他们安装特定的免疫反应的关键作用呈现为T细胞抗原肽,在肺结节病导致积累和活化的CD4 + T细胞,肉芽肿形成和在某些情况下慢性炎症和纤维化。DRB1等位基因特异抗原肽结合的最重要的是结节病的发现支持特定HLA类II抗原表位的氨基酸,特别是在口袋里4 DRB1分子,与疾病相关。有趣的是,Arg74 DRB1口袋里4独立与影像学发现阶段我27]。这个特殊的DRB1口袋4生成积累也很重要的T细胞表达AV2S3 T细胞(28),符合一个特定的T细胞介导免疫反应针对特定抗原肽的肺结节病病人。使用生物信息学工具,最近Saltini等建议HLA-DRB1等位基因的LS患者可以识别显著高于细菌抗原的抗原表位,尤其是那些来自分枝杆菌(29日]。

然而,强烈的连锁不平衡(LD)在这一地区复杂的解释HLA关联。它可能是特定HLA等位基因和疾病之间的关系,而不是反映协会与其他密切相关基因免疫反应的重要性,如肿瘤坏死因子(TNF)和淋巴毒素(LT)。

例如,DRB1 * 03“8.1祖先的单体型”的一部分,这是与其他自身免疫性疾病有关,如重症肌无力和系统性红斑狼疮。这个单体型包括大量的基因变异,可能是重要的免疫反应,如缺陷补4 (C4),这可能导致消除免疫复合物的能力下降的可能发展的重要性免疫复合物的沉积造成的结节性红斑30.,31日]。

总之,这项研究揭示了亚群体的重要性结节病病人在计算遗传危险因素,因为我们这里发现了几个不同的患者亚组之间的差异和描述新的特定HLA-DRB1等位基因之间的关联和结节病。在未来的研究中,我们继续和收集更多的病人数据,这将是有趣的研究分别子组患者特定的临床表现和特定的器官活动。

作者要感谢贝妮塔Dahlberg,夏洛Pousette, Margita达尔,船舷上缘德森林,海琳Blomquist和Karlsson Eva-Marie援助。

这项研究得到了瑞典心肺基础,国王奥斯卡二世禧基金会,瑞典医学研究理事会Torsten Ragnar soderberg基金会,卡罗林斯卡医学院,通过区域医疗培训和临床研究协议(ALF)斯德哥尔摩郡议会和卡罗林斯卡研究所之间。所有的资金来源有任何影响生产的手稿。

从属关系

1. 医学系的呼吸医学部门,瑞典卡罗琳斯卡大学医院桑纳,

   约翰Grunewald,马格努斯Nisell &安德斯·埃克伦

2. 临床神经科学、神经学、分工卡罗林斯卡大学医院桑纳,瑞典

   伯Brynedal & Jan Hillert

3. 医学系,Sodersjukhuset(斯德哥尔摩南部综合医院),瑞典

   佩妮达灵顿

4. 部门的临床科学、干预和技术(CLINTEC),放射学,瑞典卡罗琳斯卡大学医院Huddinge

   Kerstin Cederlund

5. 都来自卡罗林斯卡医学院,斯德哥尔摩,瑞典

   约翰Grunewald,伯尔Brynedal,佩妮达灵顿,马格努斯Nisell Kerstin Cederlund Jan Hillert &安德斯·埃克伦

相应的作者

对应到约翰Grunewald。

相互竞争的利益

作者宣称没有利益冲突。

作者的贡献

詹设计和协调研究,招募患者特点,总结数据,起草了手稿。BB执行计算,intrepreted数据和写的部分手稿。锰、PD和KC帮助描述病人和临床信息进行分类。临床信息和HLA-data JH解释。AE联合设计研究中,招募和病人,intrepreted数据,帮助写作手稿。所有作者阅读和批准最终的手稿。

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