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文摘
目标虽然高剂量的利福平拥有承诺改善根除肺结核疾病控制的持续的细菌,细菌杀死了持久的最佳剂量的利福平,缩短治疗时间是未知的。
方法康奈尔大学的小鼠模型被用来测试的有效性利福平高剂量结合异烟肼和吡嗪酰胺杀死积极增长和持续的杆菌和复发率。持续的细菌进行评估使用
结核分枝杆菌 文化包含resuscitation-promoting浮在表面的因素。药代动力学参数和剂量依赖性活动可培养的和持续的杆菌测定。 结果增加剂量的利福平与异烟肼和吡嗪酰胺导致更快的细菌间隙存在剂量依赖的相关性。评估在坚实的媒体和文化滤液含有resuscitation-promoting因素,包含一个标准剂量的利福平的方案在10毫克/公斤/ 14周未能实现器官不育。相反,更高剂量的利福平实现器官不育在更短的时间8周。疾病复发,发生在86%的老鼠接受14周的标准方案,完全避免了利福平剂≥ 30毫克/公斤。
结论治疗小鼠肺结核、利福平剂量30毫克/公斤足以根除持久
结核分枝杆菌 没有疾病复发,允许缩短治疗时间。 介绍
结核病仍然是最普遍的和致命的传染病在全球范围内,尽管抗结核药物的出现和全球卫生保健计划,并导致∼每年200万人死亡。
1 尽管当前药物疗法是有效的,6个月的化疗达到治疗是必要的。长时间的治疗会导致病人的依从性差,产生高复发率(7% - -13%)和耐药菌株的出现。 2 因此,缩短化疗期间是重要的临床受益。不幸的是,在当前范式,需要超过6年,带来一种新药从基础研究到临床应用,小说和20多年的药物组合出现。 3 这个问题是放大的结节杆菌可以处于休眠状态和持久,和检测的常规测试。持久细菌是宽容的对当前结核病药物使用剂量水平,很难根除在当前药物疗法。 4 , 5 因此,要缩小差距,迫切需要优化剂量的药物已经用于标准治疗方案最大化其杀菌和消毒活动。 6 介绍了当前的抗结核药物利福平次优的剂量。
6 , 7 利福平展品(杀死积极发展生物)和消毒杀菌活动活动(杀死坚持杆菌负责复发)。 6 , 8 - 10 它可以使用在高剂量没有严重的副作用。 11 - 14号 先前的研究显示,高剂量的利福平治疗35毫克/公斤是人类良好的耐受性 14 - 16 并增加结核病间隙。 15 类似在老鼠身上进行了观察 13 , 17日至19日 最大容许剂量为160毫克/公斤。 19 最近的随机临床试验的结果在南非和坦桑尼亚的灵丹妙药财团表示,利福平在35毫克/公斤是更有效的比标准的利福平剂量方案通过增加文化在液体介质转换时间。 20. 然而,目前还不清楚如果利福平35毫克/公斤可以缩短治疗时间,提供一个较低的复发率。我们已经证明 结核分枝杆菌 形成持久的细菌依赖文化滤液(CF)包含resuscitation-promoting因素(rpf) 21 重新开始的乘法。我们首次证实,据我们所知,大剂量的利福平药物疗法能够杀死CF-dependent持久细菌,使缩短治疗时间在老鼠身上没有疾病复发。 13 然而,在我们之前的研究中,我们只使用一个高剂量的药物(50毫克/公斤)。因此找到利福平的最小剂量大小的关键能力杀死顽固细菌毒性对病人有利。 在此,我们研究了增量的疗效剂量的利福平与异烟肼和吡嗪酰胺在康奈尔大学的小鼠模型。我们测量的速度消除细菌菌落计数和复发率。我们发现和量化持续杆菌菌落count-free器官使用
结核分枝杆菌 文化过滤。 材料和方法
菌株和生长条件
结核分枝杆菌
应变H37Rv mouse-passaged,生长在7 h9培养基补充白蛋白10%葡萄糖复杂(英国Becton和Dickinson)和含0.05%渐变80在37°C没有干扰15天。文化被储存在动物感染−70°C。感染前确定可行的计数,cfu计数之前进行冻结和解冻后再一次。cfu计数是由电镀系列10倍稀释的文化h11 7日与油的白蛋白葡萄糖琼脂培养基补充复杂(英国Becton和Dickinson)。孵化后殖民地被数盘子在37°C的3 - 4周,生存能力表示为日志cfu /毫升。文化是随后在PBS稀释,用于小鼠接种。所有文化媒体进行了选择性的200 U /毫升多粘菌素B, 100 mg / L羧苄青霉素,20 mg / L甲氧苄氨嘧啶和10 mg / L两性霉素B (Selectatab桅杆Diagnostica GmbH)。人类药物利福平(Rifadin胶囊,赛诺菲-安万特),异烟肼(异烟肼片、集中)和吡嗪酰胺(Zinamide平板电脑,属医药)被用于这项研究。 12)。感染组治疗之前与这些药物治疗8周。后两组被给予药物治疗,连续静脉血液样本(20μL)收集时间点1,2,3,4,5,6,8,24小时通过尾巴穿刺post-dose用40μL水和混合。血液样本存储在-80°C,随后在干冰运输葛兰素史克生物分析法三章。血液中的浓度的利福平UPLC-MSMS测定试验。使用non-compartmental PK参数计算分析模型在R软件包版本(3.3.2)。康奈尔大学的小鼠模型
不同剂量的利福平的有效性结合异烟肼和吡嗪酰胺使用康奈尔小鼠模型进行了测试。
22 , 23 该模型使用先前描述的实验设计和程序进行。 24 简而言之,如表所示 1 ,在3周后 结核分枝杆菌 H37Rv感染,治疗给雌性BALB / c小鼠为14周150毫克/公斤吡嗪酰胺+ 25毫克/公斤异烟肼结合10、20、30、40或50毫克/公斤每日口服利福平的每周5天。样品4老鼠被牺牲的治疗和8老鼠牺牲第二,4,6,8日,11日和14日一周的治疗监测cfu计数。6至14周的器官匀浆在选择性基什内尔的液体培养基中培养4周,随后接种到选择性Lowenstein-Jensen斜坡为4周。 表1。。 。 时间 。 治疗组 一个 。 不。的老鼠 b 。 D0 。 D21 。 2 w 。 4 w 。 6 w 。 8 w 。 11 w 。 14 w 。 22 w c 。 控制 8 4 4 R10HZ 71年 8 8 8 8 8 8 23 R20HZ 71年 8 8 8 8 8 8 23 R30HZ 71年 8 8 8 8 8 8 23 R40HZ 71年 8 8 8 8 8 8 23 R50HZ 71年 8 8 8 8 8 8 23 。 。 时间 。 治疗组 一个 。 不。的老鼠 b 。 D0 。 D21 。 2 w 。 4 w 。 6 w 。 8 w 。 11 w 。 14 w 。 22 w c 。 控制 8 4 4 R10HZ 71年 8 8 8 8 8 8 23 R20HZ 71年 8 8 8 8 8 8 23 R30HZ 71年 8 8 8 8 8 8 23 R40HZ 71年 8 8 8 8 8 8 23 R50HZ 71年 8 8 8 8 8 8 23 D,一天;W,一周。
一个在第0天小鼠静脉注射感染。治疗开始后21天感染。为每个药物剂量如下:利福平(R) 10、20、30、40或50毫克/公斤,异烟肼(H) 25毫克/公斤和吡嗪酰胺(Z) 150毫克/公斤。
b老鼠感染总数和治疗,排除自然死亡的老鼠在疗程。
c氢化可的松治疗8周后14周的治疗。
表1。。 。 时间 。 治疗组 一个 。 不。的老鼠 b 。 D0 。 D21 。 2 w 。 4 w 。 6 w 。 8 w 。 11 w 。 14 w 。 22 w c 。 控制 8 4 4 R10HZ 71年 8 8 8 8 8 8 23 R20HZ 71年 8 8 8 8 8 8 23 R30HZ 71年 8 8 8 8 8 8 23 R40HZ 71年 8 8 8 8 8 8 23 R50HZ 71年 8 8 8 8 8 8 23 。 。 时间 。 治疗组 一个 。 不。的老鼠 b 。 D0 。 D21 。 2 w 。 4 w 。 6 w 。 8 w 。 11 w 。 14 w 。 22 w c 。 控制 8 4 4 R10HZ 71年 8 8 8 8 8 8 23 R20HZ 71年 8 8 8 8 8 8 23 R30HZ 71年 8 8 8 8 8 8 23 R40HZ 71年 8 8 8 8 8 8 23 R50HZ 71年 8 8 8 8 8 8 23 D,一天;W,一周。
一个在第0天小鼠静脉注射感染。治疗开始后21天感染。为每个药物剂量如下:利福平(R) 10、20、30、40或50毫克/公斤,异烟肼(H) 25毫克/公斤和吡嗪酰胺(Z) 150毫克/公斤。
b老鼠感染总数和治疗,排除自然死亡的老鼠在疗程。
c氢化可的松治疗8周后14周的治疗。
后立即终止14周的化疗,其余小鼠服用0.5毫克/鼠标每日口服醋酸氢化可的松的8周抑制宿主免疫力,并从肺和脾进行菌落计数来确定疾病复发。
道德
畜牧业和所有动物实验动物科学程序法案,1986年的议会(一种英国1986 c。14)(内政部项目许可证。70/7077)在圣乔治的批准下,伦敦大学伦理委员会。
药物动力学的利福平在BALB / c小鼠
药代动力学(PK)的测定利福平在未感染和感染的老鼠dose-ranging研究方案匹配那些康奈尔小鼠模型中使用的口服药物填喂法。有三个BALB / c小鼠在两条平行的未感染或感染组(总
n = 复苏的结核分枝杆菌鼠肺脏和脾脏
复苏的
结核分枝杆菌 在小鼠器官,培养滤液含有RPF如前所述。 13 , 21 , 24 , 结核分枝杆菌 H37Rv 7 h9培养基生长在15 - 20天直到达成1 - 1.5的光密度。文化是由离心收获,享年3000岁 g 15分钟,消毒用0.2μm过滤器过滤(缝匠肌)的两倍。除了文化滤液进行选择性的200 U /毫升多粘菌素B, 100 mg / L羧苄青霉素,20 mg / L甲氧苄氨嘧啶和10 mg / L两性霉素B (Selectatab桅杆Diagnostica GmbH)。肉汤计数的肺脏和脾脏进行连续10倍稀释一式三份,0.5毫升的组织匀浆加入4.5毫升的滤液文化。每隔十天的2月孵化在37°C,肉汤文化被检查可见浊度变化。积极和消极的模式增长管被用来计算最可能的数量(或然数)的细菌。 25 的增长
结核分枝杆菌 7日证实了在浑浊的管菌落形态h11琼脂板上。缺乏微生物以外的其他分枝杆菌从浑浊的管经镀在血琼脂培养基(Oxoid)和Sabouraud葡萄糖琼脂(Oxoid)。为了评估文化的无菌滤液的自由 结核分枝杆菌 ,包含文化滤液管孵化37°C呆了两个月,以确保没有 结核分枝杆菌 。 统计分析
一个简单的模型,可以使用monoexponential细菌生长和消除。
24 , 26 标准误差参数估计计算使用Landaw和DiStefano概述的方法 27 雅可比矩阵的估计模型参数敏感性使用数值中心差分方法。数据集由多个个体主体动物被视为一个天真池用于数据分析 28 而不是使用在每个计算数据的平均值。模型参数估计的重要性差异在不同疗法与成对进行 Z 测试将Bonferroni调整15(包括比较与50毫克/公斤利福平单药治疗从之前的数据), 13 的 P 值< 0.0033将被认为是重要的。复发率差异的重要性确定成对确切概率测试Bonferroni调整为15日 P 值< 0.0033被认为是重要的。 结果
治疗方案包含不同的剂量大小的利福平康奈尔小鼠模型
我们调查的影响,利福平10、20、30、40和50毫克/公斤组合方案和固定标准剂量的异烟肼和吡嗪酰胺的细菌消灭在康奈尔小鼠模型和复发。如表所示
2 和图 1 (a),利福平的根除率的增加存在剂量依赖的相关性肺部cfu计数。与利福平10和20毫克/公斤方案,肺部细菌消灭的速度缓慢,分别显示99%死于3.5和2.5周。治疗30、40和50毫克/公斤利福平的速度增加根除细菌(99%死于1.8,1.6和1.4周,分别)。检测不到 结核分枝杆菌 小鼠cfu计数是实现肺14周的治疗后10毫克/公斤,11周20毫克/公斤,8周30和40毫克/公斤,6周和50毫克/公斤rifampicin-containing方案(表 2 )。类似的剂量反应趋势观察脾脏除了cfu count-free器官在6周达到40和50毫克/公斤利福平方案(表 2 和图 1 b)。这些活动被证实的估计指数速率常数(以10为底的对数)净细菌消除治疗期间( k net_with_drug )在肺和脾cfu计数资料和时间(表 3 )。消除速率常数变快(即在级)随着剂量增加,在肺脏和脾脏的线性关系(图 1 c和d)。在cfu count-free器官,没有恢复所证实的结节杆菌负面文化选择性基什内尔的器官匀浆介质。没有向外毒性的迹象或异常行为观察小鼠接受任何剂量的利福平rifampicin-containing方案。 表2。。 结核分枝杆菌 加载(cfu /器官) 。 器官/时间 。 控制 。 R10HZ 。 R20HZ 。 R30HZ 。 R40HZ 。 R50HZ 。 肺 一天0 一个 4.36 ±0.26 21天 b 6.93 ±0.07 2周 c 5.58 ±0.43 5.12 ±0.14 4.68 ±0.27 4.35 ±0.29 4.00 ±0.23 4周 4.58 ±0.33 4.12 ±0.06 3.35 ±0.46 2.80 ±0.41 1.99 ±0.02 6周 3.71 ±0.05 3.08 ±0.52 1.88 ±0.70 1.14 ±0.62 0 8周 2.58 ±0.27 1.95 ±0.43 0 0 0 11周 1.01 ±0.43 0 0 0 0 14周 0 0 0 0 0 脾 一天0 一个 5.30 ±0.16 21天 b 7.43 ±0.21 2周 c 6.36 ±0.29 5.73 ±0.96 5.07 ±0.52 4.61 ±0.56 3.94 ±0.46 4周 5.20 ±0.23 4.17 ±0.48 3.24 ±0.13 2.00 ±0.48 1.40 ±0.42 6周 3.65 ±0.45 2.54 ±0.49 1.69 ±0.46 0 0 8周 2.34 ±0.36 1.49 ±0.53 0 0 0 11周 0.92 ±0.46 0 0 0 0 14周 0 0 0 0 0 。 结核分枝杆菌 加载(cfu /器官) 。 器官/时间 。 控制 。 R10HZ 。 R20HZ 。 R30HZ 。 R40HZ 。 R50HZ 。 肺 一天0 一个 4.36 ±0.26 21天 b 6.93 ±0.07 2周 c 5.58 ±0.43 5.12 ±0.14 4.68 ±0.27 4.35 ±0.29 4.00 ±0.23 4周 4.58 ±0.33 4.12 ±0.06 3.35 ±0.46 2.80 ±0.41 1.99 ±0.02 6周 3.71 ±0.05 3.08 ±0.52 1.88 ±0.70 1.14 ±0.62 0 8周 2.58 ±0.27 1.95 ±0.43 0 0 0 11周 1.01 ±0.43 0 0 0 0 14周 0 0 0 0 0 脾 一天0 一个 5.30 ±0.16 21天 b 7.43 ±0.21 2周 c 6.36 ±0.29 5.73 ±0.96 5.07 ±0.52 4.61 ±0.56 3.94 ±0.46 4周 5.20 ±0.23 4.17 ±0.48 3.24 ±0.13 2.00 ±0.48 1.40 ±0.42 6周 3.65 ±0.45 2.54 ±0.49 1.69 ±0.46 0 0 8周 2.34 ±0.36 1.49 ±0.53 0 0 0 11周 0.92 ±0.46 0 0 0 0 14周 0 0 0 0 0 并给出了数据作为控制和4老鼠的意思是8老鼠治疗组与标准差。零cfu计数从每个药物疗法源自三分之一的组织匀浆和检测的极限是3 cfu /器官。为每个药物剂量如下:利福平(R) 10、20、30、40或50毫克/公斤,异烟肼(H) 25毫克/公斤和吡嗪酰胺(Z) 150毫克/公斤。
一个感染后2小时。
b感染后21天。
c星期2后处理。
表2。。 结核分枝杆菌 加载(cfu /器官) 。 器官/时间 。 控制 。 R10HZ 。 R20HZ 。 R30HZ 。 R40HZ 。 R50HZ 。 肺 一天0 一个 4.36 ±0.26 21天 b 6.93 ±0.07 2周 c 5.58 ±0.43 5.12 ±0.14 4.68 ±0.27 4.35 ±0.29 4.00 ±0.23 4周 4.58 ±0.33 4.12 ±0.06 3.35 ±0.46 2.80 ±0.41 1.99 ±0.02 6周 3.71 ±0.05 3.08 ±0.52 1.88 ±0.70 1.14 ±0.62 0 8周 2.58 ±0.27 1.95 ±0.43 0 0 0 11周 1.01 ±0.43 0 0 0 0 14周 0 0 0 0 0 脾 一天0 一个 5.30 ±0.16 21天 b 7.43 ±0.21 2周 c 6.36 ±0.29 5.73 ±0.96 5.07 ±0.52 4.61 ±0.56 3.94 ±0.46 4周 5.20 ±0.23 4.17 ±0.48 3.24 ±0.13 2.00 ±0.48 1.40 ±0.42 6周 3.65 ±0.45 2.54 ±0.49 1.69 ±0.46 0 0 8周 2.34 ±0.36 1.49 ±0.53 0 0 0 11周 0.92 ±0.46 0 0 0 0 14周 0 0 0 0 0 。 结核分枝杆菌 加载(cfu /器官) 。 器官/时间 。 控制 。 R10HZ 。 R20HZ 。 R30HZ 。 R40HZ 。 R50HZ 。 肺 一天0 一个 4.36 ±0.26 21天 b 6.93 ±0.07 2周 c 5.58 ±0.43 5.12 ±0.14 4.68 ±0.27 4.35 ±0.29 4.00 ±0.23 4周 4.58 ±0.33 4.12 ±0.06 3.35 ±0.46 2.80 ±0.41 1.99 ±0.02 6周 3.71 ±0.05 3.08 ±0.52 1.88 ±0.70 1.14 ±0.62 0 8周 2.58 ±0.27 1.95 ±0.43 0 0 0 11周 1.01 ±0.43 0 0 0 0 14周 0 0 0 0 0 脾 一天0 一个 5.30 ±0.16 21天 b 7.43 ±0.21 2周 c 6.36 ±0.29 5.73 ±0.96 5.07 ±0.52 4.61 ±0.56 3.94 ±0.46 4周 5.20 ±0.23 4.17 ±0.48 3.24 ±0.13 2.00 ±0.48 1.40 ±0.42 6周 3.65 ±0.45 2.54 ±0.49 1.69 ±0.46 0 0 8周 2.34 ±0.36 1.49 ±0.53 0 0 0 11周 0.92 ±0.46 0 0 0 0 14周 0 0 0 0 0 并给出了数据作为控制和4老鼠的意思是8老鼠治疗组与标准差。零cfu计数从每个药物疗法源自三分之一的组织匀浆和检测的极限是3 cfu /器官。为每个药物剂量如下:利福平(R) 10、20、30、40或50毫克/公斤,异烟肼(H) 25毫克/公斤和吡嗪酰胺(Z) 150毫克/公斤。
一个感染后2小时。
b感染后21天。
c星期2后处理。
表3。。 消除速率常数(一周 −1 ) 。 。 肺 。 脾 。 治疗组 。 估计 。 %的比例 一个 。 估计 。 %的比例 一个 。 R10HZ −0.52 2.0 −0.56 3.4 R20HZ −0.58 4.9 −0.69 6.3 R30HZ −0.75 8.2 −0.88 5.4 R40HZ −0.84 6.2 −1.32 6.7 R50HZ −1.07 5.2 −1.40 6.9 。 消除速率常数(一周 −1 ) 。 。 肺 。 脾 。 治疗组 。 估计 。 %的比例 一个 。 估计 。 %的比例 一个 。 R10HZ −0.52 2.0 −0.56 3.4 R20HZ −0.58 4.9 −0.69 6.3 R30HZ −0.75 8.2 −0.88 5.4 R40HZ −0.84 6.2 −1.32 6.7 R50HZ −1.07 5.2 −1.40 6.9 为每个药物剂量如下:利福平(R) 10、20、30、40或50毫克/公斤,异烟肼(H) 25毫克/公斤和吡嗪酰胺(Z) 150毫克/公斤。
一个比例相对标准误差。
表3。。 消除速率常数(一周 −1 ) 。 。 肺 。 脾 。 治疗组 。 估计 。 %的比例 一个 。 估计 。 %的比例 一个 。 R10HZ −0.52 2.0 −0.56 3.4 R20HZ −0.58 4.9 −0.69 6.3 R30HZ −0.75 8.2 −0.88 5.4 R40HZ −0.84 6.2 −1.32 6.7 R50HZ −1.07 5.2 −1.40 6.9 。 消除速率常数(一周 −1 ) 。 。 肺 。 脾 。 治疗组 。 估计 。 %的比例 一个 。 估计 。 %的比例 一个 。 R10HZ −0.52 2.0 −0.56 3.4 R20HZ −0.58 4.9 −0.69 6.3 R30HZ −0.75 8.2 −0.88 5.4 R40HZ −0.84 6.2 −1.32 6.7 R50HZ −1.07 5.2 −1.40 6.9 为每个药物剂量如下:利福平(R) 10、20、30、40或50毫克/公斤,异烟肼(H) 25毫克/公斤和吡嗪酰胺(Z) 150毫克/公斤。
一个比例相对标准误差。
利福平与异烟肼和吡嗪酰胺的药物动力学
经过政府的利福平血药浓度rifampicin-containing方案结合异烟肼和吡嗪酰胺进行24小时的在一段时间内
结核分枝杆菌 感染和未感染BALB / c小鼠。如图 2 ,有一个线性的,dose-proportional增加曝光的利福平的最大浓度的利福平( C 马克斯 )(图 2 )和整体药物暴露(AUC)(图 2 b)感染和感染的老鼠。剂量线性剂量的利福平PK在这个范围内进一步支持一块间隙从每个方案(图和剂量 2 c)。间隙(等于剂量/ AUC)被显示大约持续0.04∼L / h /公斤感染和未感染的动物在每个剂量水平。AUC和 C 马克斯 利福平是相似的感染和未感染的动物之间的剂量检查(< 30%的差异,要么测量剂量感染和感染)。 后处理的持续程序康奈尔小鼠模型
为了调查的影响不同的利福平剂量方案的治疗水平持续程序通过RPF-induced复苏,肺和脾周的匀浆处理当cfu计数达到零为每个方案与CF包含rpf孵化。如表所示
4 与利福平14周的治疗后,10毫克/公斤方案,尽管cfu文化负面,RPF-dependent持续程序还高。在11周治疗后,有相当水平的CF-resuscitated杆菌肺脏和脾脏的利福平20毫克/公斤方案,而减少数量的持续程序参加14周的治疗。在治疗8周,有低数量的持续程序目前治疗后30毫克/公斤利福平方案,并完成根除持续程序被认为在11周。没有持久的细菌在8、11和14周40毫克/公斤利福平治疗。方案包含50毫克/公斤利福平,虽然未能明确持续程序在6周,没有显示出CF-resuscitated杆菌在肺部或脾脏8中,(表11和14周的治疗 4 )。 表4。。 或然数计数(文化滤液) 一个
。治疗器官/时间(周) 。 R10HZ 。 R20HZ 。 R30HZ 。 R40HZ 。 R50HZ 。 肺 6 - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - 1 ± 4 8 - - - - - - - - - - - - 9 ± 9 0 0 11 - - - - - - 90年 ± 30 0 0 0 14 245年 ± 28 20 ± 23 0 0 0 脾 6 - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - 3 ± 5 8 - - - - - - - - - - - - 18 ± 10 0 0 11 - - - - - - 122年 ± 83 0 0 0 14 308年 ± 440 58 ± 21 0 0 0 。 或然数计数(文化滤液) 一个
。治疗器官/时间(周) 。 R10HZ 。 R20HZ 。 R30HZ 。 R40HZ 。 R50HZ 。 肺 6 - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - 1 ± 4 8 - - - - - - - - - - - - 9 ± 9 0 0 11 - - - - - - 90年 ± 30 0 0 0 14 245年 ± 28 20 ± 23 0 0 0 脾 6 - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - 3 ± 5 8 - - - - - - - - - - - - 18 ± 10 0 0 11 - - - - - - 122年 ± 83 0 0 0 14 308年 ± 440 58 ± 21 0 0 0 为每个药物剂量如下:利福平(R) 10、20、30、40或50毫克/公斤,异烟肼(H) 25毫克/公斤和吡嗪酰胺(Z) 150毫克/公斤。
一个由稀释器官同构发生的或然数(
n = 8)文化滤液,意思是或然数±SD。肉汤计数来自三分之一的组织匀浆和代表整个器官的或然数计算。检测极限是1或然数/器官。少量显示器官的菌落计数是积极和或然数数量没有执行。 表4。。 或然数计数(文化滤液) 一个
。治疗器官/时间(周) 。 R10HZ 。 R20HZ 。 R30HZ 。 R40HZ 。 R50HZ 。 肺 6 - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - 1 ± 4 8 - - - - - - - - - - - - 9 ± 9 0 0 11 - - - - - - 90年 ± 30 0 0 0 14 245年 ± 28 20 ± 23 0 0 0 脾 6 - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - 3 ± 5 8 - - - - - - - - - - - - 18 ± 10 0 0 11 - - - - - - 122年 ± 83 0 0 0 14 308年 ± 440 58 ± 21 0 0 0 。 或然数计数(文化滤液) 一个
。治疗器官/时间(周) 。 R10HZ 。 R20HZ 。 R30HZ 。 R40HZ 。 R50HZ 。 肺 6 - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - 1 ± 4 8 - - - - - - - - - - - - 9 ± 9 0 0 11 - - - - - - 90年 ± 30 0 0 0 14 245年 ± 28 20 ± 23 0 0 0 脾 6 - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - 3 ± 5 8 - - - - - - - - - - - - 18 ± 10 0 0 11 - - - - - - 122年 ± 83 0 0 0 14 308年 ± 440 58 ± 21 0 0 0 为每个药物剂量如下:利福平(R) 10、20、30、40或50毫克/公斤,异烟肼(H) 25毫克/公斤和吡嗪酰胺(Z) 150毫克/公斤。
一个由稀释器官同构发生的或然数(
n = 8)文化滤液,意思是或然数±SD。肉汤计数来自三分之一的组织匀浆和代表整个器官的或然数计算。检测极限是1或然数/器官。少量显示器官的菌落计数是积极和或然数数量没有执行。 复发率治疗方案含有不同剂量的利福平在康奈尔模型中
表5所示。。 不。小鼠cfu计数检测 。 器官 。 R10HZ ( n = 22) 。 R20HZ ( n = 24) 。 R30HZ ( n = 22) 。 R40HZ ( n = 23) 。 R50HZ ( n = 22) 。 这两个器官 6 1 0 0 0 肺 7 5 0 0 0 脾脏 6 2 0 0 0 消极的器官 3 16 22 23 22 复发(%) 86年 33 0 0 0 。 不。小鼠cfu计数检测 。 器官 。 R10HZ ( n = 22) 。 R20HZ ( n = 24) 。 R30HZ ( n = 22) 。 R40HZ ( n = 23) 。 R50HZ ( n = 22) 。 这两个器官 6 1 0 0 0 肺 7 5 0 0 0 脾脏 6 2 0 0 0 消极的器官 3 16 22 23 22 复发(%) 86年 33 0 0 0 为每个药物剂量如下:利福平(R) 10、20、30、40或50毫克/公斤,异烟肼(H) 25毫克/公斤和吡嗪酰胺(Z) 150毫克/公斤。
表5所示。。 不。小鼠cfu计数检测 。 器官 。 R10HZ ( n = 22) 。 R20HZ ( n = 24) 。 R30HZ ( n = 22) 。 R40HZ ( n = 23) 。 R50HZ ( n = 22) 。 这两个器官 6 1 0 0 0 肺 7 5 0 0 0 脾脏 6 2 0 0 0 消极的器官 3 16 22 23 22 复发(%) 86年 33 0 0 0 。 不。小鼠cfu计数检测 。 器官 。 R10HZ ( n = 22) 。 R20HZ ( n = 24) 。 R30HZ ( n = 22) 。 R40HZ ( n = 23) 。 R50HZ ( n = 22) 。 这两个器官 6 1 0 0 0 肺 7 5 0 0 0 脾脏 6 2 0 0 0 消极的器官 3 16 22 23 22 复发(%) 86年 33 0 0 0 为每个药物剂量如下:利福平(R) 10、20、30、40或50毫克/公斤,异烟肼(H) 25毫克/公斤和吡嗪酰胺(Z) 150毫克/公斤。
讨论
结核病药物疗法能够消除持久性杆菌可能最大的临床价值通过缩短治疗时间,减少复发率。在这项研究中,利福平的疗效标准药物治疗的剂量范围研究和CF-dependent持续程序量化的时间点在cfu count-free器官在康奈尔大学的小鼠模型。我们旨在定义我们是否能够利用CF-dependent持久
结核分枝杆菌 作为评估的结核病治疗的生物标志物的结果。康奈尔大学的模型是一个可靠的代理结核病关注疾病复发,效果超过60年前麦克卡尼 et al。 22 , 23 它被用来评估结核病药物的药效学的过渡方案,并帮助药物从关键的临床前评价临床应用。 29日 我们之前的结果表明,RPF-dependent杆菌构成重大疾病复发池康奈尔模型。 13 它一再表明,标准的利福平剂量(10毫克/公斤)方案无法消除察觉持久的细菌,导致疾病复发。 8 , 13 , 24 高剂量的利福平(50毫克/公斤)疗法,治疗时间缩短从14到6周,没有复发。 13 这是归因于根除CF-responsive持久杆菌从受感染的器官。在这项研究中,我们表明,双重标准剂量的利福平未能消除CF-dependent持续程序11和14周的治疗的复发率为33%(表 5 )。的剂量30毫克/公斤,在8周时达到零cfu计数较低数量的CF-dependent持续程序和进一步治疗期(11周)需要消毒的器官(表 4 )。40 - 50毫克/公斤利福平的方案导致真正的结节杆菌不育(消极cfu计数和CF-resuscitable细菌)在肺脏和脾脏治疗8周。 我们提出明确的证据表明,我们能够预测疾病复发评估CF-dependent持续程序。第一次,据我们所知,我们证明了在老鼠身上的利福平剂量30毫克/公斤(最小阈值)或更高版本能够根除持续的细菌,导致大约21% - -43%的缩短治疗时间,没有疾病复发。在此基础上观察,患者可能会认为> 30毫克/公斤利福平有可能实现cfu count-negative痰更快与很少或根本没有持久的细菌,导致缩短治疗时间。它已被证明在人类35毫克/公斤利福平能够提高时间稳定的文化转换在液体媒体,
20. 虽然治疗的结果是未知的持续时间和复发。我们的数据预测,高剂量的利福平在30 - 50毫克/公斤应该改善当前临床治疗通过缩短治疗时间,减少复发。这种高度承诺概念验证工作开创了一种新的临床方法来识别和量化持久细菌RPF复苏到高剂量的临床有效性评估人类利福平(a . Jindani圣乔治伦敦大学个人通信)。 此外,我们表明,利福平与异烟肼和吡嗪酰胺显示剂量水平和血浆暴露之间的线性关系(
C 马克斯 和AUC)感染和感染的老鼠。我们还表明,利福平的等离子体接触类似的感染和未感染的动物(图 2 )。药物暴露是∼2倍比我们之前和其他小组的报告。 13 , 14 , 17 ,
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最佳剂量的利福平在标准药物疗程缩短结核病治疗的持续时间和减少复发根除持久的细菌
最佳剂量的利福平在标准药物疗程缩短结核病治疗的持续时间和减少复发根除持久的细菌
英俊刘音译,
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英俊刘音译
感染与免疫研究所、圣乔治伦敦大学,克兰麦阶地,英国伦敦SW17矿石
亨利Pertinez
亨利Pertinez
大学分子与临床药理学利物浦,利物浦L69 3女朋友,英国
法蒂玛Ortega-Muro
法蒂玛Ortega-Muro
葛兰素史克研发、疾病的发展中国家,维罗奥乔亚2,28760三章(马德里),西班牙
劳拉Alameda-Martin
劳拉Alameda-Martin
葛兰素史克研发、疾病的发展中国家,维罗奥乔亚2,28760三章(马德里),西班牙
托马斯•哈里森
托马斯•哈里森
感染与免疫研究所、圣乔治伦敦大学,克兰麦阶地,英国伦敦SW17矿石
杰伦特戴维斯
杰伦特戴维斯
大学分子与临床药理学利物浦,利物浦L69 3女朋友,英国
安东尼·科茨