% 0期刊文章%达尼做奠基石李% Daniela Cardinale % Ersilia Nigro Andrew Rutman %科林·R·巴特勒% %马哈茂德·R·Fassad %一个罗伯特·赫斯特%戴尔造型%亚历山大Agrotis %一个伊丽莎白活力四射%丹尼尔Peckham %艾维-罗布森%克莱尔·m·史密斯% Satyanarayana Somavarapu %一个斯蒂芬·l·哈特菲利普·l·比尔% %一个汉娜萨姆·m·琼斯% m . Mitchison %一个罗伯特·e·Hynds罗宾Ketteler % %克里斯托弗·奥卡拉汉% T更高的吞吐量为罕见的呼吸道疾病药物筛选:readthrough治疗原发性纤毛运动障碍2021% % D J R 10.1183/13993003.00455 -2020%欧洲呼吸杂志% P 2000455 % V 58% N 4% X背景发展难得的呼吸道疾病的治疗方法受到缺乏系统允许medium-to-high-throughput筛查完全有区别的呼吸道上皮细胞从病人的影响。这是一个特殊的问题为原发性纤毛运动障碍(PCD)引起的一种罕见的基因疾病的突变基因影响纤毛运动,因此黏膜纤毛的运输。的主要细胞培养基底上皮细胞从鼻纤毛分化刷活检后的气液界面(ALI)已被证明是一个有用的工具中诊断但技术更广泛的实用工具,包括金刚石研究临床前,一直受到基底细胞的数量有限,可以扩展从这样的活检。方法我们描述一个免疫荧光检测的方法,通过广泛的扩张金刚石病人和基底细胞的定向分化细胞纤毛上皮在小型96 - transwell格式阿里的文化。作为原理验证阶段,我们进行了个性化调查患者一种罕见的和严重的PCD(减少代能动的纤毛),在这种情况下引起的纯合子MCIDAS无义突变的基因。最初的纤毛超微结构分析结果,击败模式和拍频在96 - transwell格式阿里文化表明,一系列不同的PCD缺陷可以保留这些文化。筛选体系proof-of-principal调查允许药物诱导转化readthrough评估单独或结合nonsense-mediated腐蚀抑制剂。我们观察到修复基体形成的而不是一代的纤毛在病人的鼻上皮细胞体外。结论我们的研究为更高的吞吐量分析气道上皮细胞提供了一个平台,适用于各种设置和显示药物评价的新途径和发展中由无意义突变引起的。鼻上皮细胞的主要细胞培养(包括multiciliated分化细胞)原发性纤毛运动障碍患者启用immunofluorescence-based筛查在小型气液界面培养https://bit。ly / 3 rjoxbf % U //www.qdcxjkg.com/content/erj/58/4/2000455.full.pdf