“SV40病毒DNA和病毒抗原检测在恶性胸膜间皮瘤。“m . Ramael j·内格尔,h .个s . De Schepper j . Paulussen m . De Maeyer和c·范Haesendonck。欧元和J 1999;14:1381 - 1386。
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我们报道在之前的论文可能协会猿猴空泡病毒40 (SV40)——使用启动DNA和蛋白质在恶性间皮瘤原位标签(王子)方法和SVrev SV2for,一般多瘤病毒底漆PYVrev以及免疫组织化学使用抗体PAb280 [1]。提出了一些问题关于方法的特异性,我们觉得有必要提供一个解释澄清,包括一些新数据。
我们使用原始实验几个SV40特定的引物,包括SVrev和SV2for,以及一个通用的多瘤病毒底漆PYVrev,为了排除非特异性的绑定的潜在陷阱的DNA寡核苷酸引物(图1)。王子只在肿瘤间皮瘤细胞中观察到的信号。没有观察到普林斯信号在基质细胞(1]。积极控制反应所示恶性上皮间皮瘤pan-chromosome底漆在普林斯反应(图1插入)。
没有一个消极的控制,包括胎盘组织,也不消极间皮瘤控制底漆是省略的地方,显示任何反应,证实的特异性反应(图2)。此外,30胸膜转移癌标本的支气管癌和30标本的反应性间皮没有显示任何核或细胞质普林斯信号SV40引物(1]。
王子被用于临床医学遗传学2),以及检测单拷贝基因(3和病毒序列4,5),证明一个可靠的技术。我们使用的技术检测人乳头状瘤病毒等病毒在石蜡包埋formalin-fixed组织和发现它一个高度可靠的技术5]。
我们的发现对比利时SV40或SV40-like DNA的存在恶性间皮瘤病例的发现证实了Dhaeneet al。(6]。他们SV40 DNA描述或SV40-like DNA与经典PCR技术(SVfor3和SVrev底漆),发现SV40 PCR扩增子的13 28(46%)比利时间皮瘤。核,细胞质,但没有免疫反应性染色发现这些研究的13例10 Dhaeneet al。(6),使用PAb419和PAb101 SV40 LTag抗体(6]。非常奇怪的是,只有2年后,这个研究是受到Hubner和V一个米arck(7),只调查了12间皮瘤病例和没有发现SV40或SV40-like DNA的12间皮瘤案件调查。
我们在研究中使用单克隆抗体PAb280,它是针对特定的抗原决定基SV40 t抗原。D艾蒙和J在(8)描述大使用单克隆抗体与细胞蛋白质BAP37 prohibitin PAb419 PAb210,这是针对一个特定于SV40大t抗原表位。他们补充说,其他anti-SV40 t抗原单克隆抗体不显示这一特性。我们使用单克隆抗体PAb280,完全不同于上述使用的单克隆抗体PAb419和PAb210 D艾蒙和J在(8]。我们使用的单克隆抗体是针对另一个在另一个SV40蛋白抗原决定基(小t抗原)9]。D的结论艾蒙和J在(8)可能不是简单地延伸到PAb280抗体用于我们的学习。
没有负面的控制包括胎盘组织,也不消极间皮瘤控制在anti-SV40 PAb280被省略了,取而代之的是另一个在同一浓度下抗体和相同的同形像,显示任何免疫反应性,证实了反应的特异性。此外,30胸膜转移癌标本的支气管癌和30标本的反应性间皮没有显示任何核或胞质与PAb280单克隆抗体的免疫反应性。
核和胞质免疫反应性的观察PAb280单克隆抗体用于我们的研究已经清楚地讨论和解决我们的论文。固定时间超过60 - 120分钟似乎影响核蛋白质的亚细胞定位,如原癌基因蛋白质,导致核和胞质免疫反应性(10]。如果观察到的免疫反应性只是一个与细胞蛋白交叉反应,如BAP37和prohibitins细胞质(局部),只有一个希望细胞质核免疫反应性免疫反应性,而不是在我们的研究中观测到的。固定时间不同在我们的研究从6到24 h,在经典大多数组织病理学实验室接受福尔马林固定时间组织6 h 72 h。
也因此,我们必须考虑到我们在研究石蜡包埋formalin-fixed组织而不是新鲜SV40病毒感染细胞线。受感染的细胞行在体外不完全可比他们显示裂解性感染,在对比在活的有机体内肿瘤间皮瘤细胞formalin-fixed石蜡包埋组织肿瘤间皮瘤,没有丝毫裂解特征(8]。
之间可能的联系的存在SV40病毒DNA或SV40病毒样DNA与人类肿瘤仍然是一个有趣的和有争议的问题令人兴奋,有时情感之间的讨论“信徒”和“非信徒”。进一步的研究将希望澄清这个谜。
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